小鼠腺病毒单克隆抗体的研制及初步应用

应用杂交瘤技术获得４株分泌抗小鼠腺病毒（ＭｕｒｉｎｅＡｄｅｎｏｖｉｒｕｓＭＡｄ）单克隆抗体细胞株,并对其特性进行分析。经鉴定,它们所分泌的抗体类型均为ＩｇＭ,腹水效价为１０－３～１０－６。相对亲和力分别为０．１μｇ／ｍｌ（Ａ９）、０．６５μｇ／ｍｌ（Ｂｌ）、１２．５μｇ／ｍｌ（Ｇ４）和２３μｇ／ｍｌ（Ｄ４）。与其他１０种鼠源性病毒均无交叉反应,表明ＭｃＡｂ具有良好的特异性。单抗标记ＦＩＴＣ后用于人用鼠源性单抗制品及各种传代细胞和原代细胞中ＭＡｄ检测,获得良好的实验结果。     

含硫多肽类抗生素那西肽的菌种诱变及产量提高

那西肽（Ｎｏｓｉｈｅｐｔｉｄｅ）产生菌Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｃｔｕｏｓｕｓ Ｚ１１,经ＮＴＧ处理和对Ｃｕ＾２＋,Ｍｎ＾２＋耐受选育,获得突变株Ｚ１５,其可耐受Ｃｕ＾２＋为３００μｇ／ｍｌ,耐Ｍｎ＾２＋１０００μｇ／ｍｌ,产生那西肽可达１５００μｇ／ｍｌ是Ｚ１１活力的１．６倍。     

鼻咽癌细胞对HA的粘附作用及微丝的共聚焦显微镜观察

本文研究了人鼻咽癌上皮细胞系ＣＮＥ－２Ｚ对透明质酸（ＨＡ）的粘附作用及其粘附后微丝的改变,结果表明,鼻咽癌细胞粘附的ＯＤ值随ＨＡ浓度的升高而升高,３００μｇ／ｍｌ、１２５０μｇ／ｍｌ组与对照组比较有极显著性意义,Ｐ＜０．０１;癌细胞粘附的ＯＤ值随培养时间延长而升高,２４０ｍｉｎ组及１２０ｍｉｎ组与６０ｍｉｎ组比较有极显著性意义,Ｐ＜０．０１。ＬＳＭ观察ＨＡ浓度为３００μｇ／ｍｌ时培养４ｈ和２４ｈ的癌细胞微丝的分布明显不同,培养４ｈ的癌细胞呈圆形,微丝均匀地分布于胞浆内;培养２４ｈ的癌细胞呈不规则形,微丝主要分布于与ＨＡ的粘附面上。上述结果提示ＨＡ可促进鼻咽癌细胞粘附,癌细胞与ＨＡ结合后可诱导ＭＦ重组     

黄花蒿培养细胞中青蒿素合成代谢的体外调节

黄花蒿培养细胞通过两步培养积累青蒿素．第１步在含有０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）和３～４ｍｇ／Ｌ吲哚乙酸（ＩＡＡ）的Ｎ６培养基中进行细胞的增殖培养,第２步将培养好的细胞转入含０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．２～０．４ｍｇ／ＬＩＡＡ的改良Ｎ６培养基中进行青蒿素的合成．青蒿素的合成量为１９０μｇ／ｇ干细胞左右．当在第２步培养中加入青蒿素合成前体青蒿酸,青蒿素合成量比仅靠激素诱导提高了３倍多．青蒿素的合成途径是植物固醇合成途径的分支途径,当在青蒿素合成过程即第２步培养中加入固醇生物合成抑制剂双氯苯咪唑和氯化氯胆碱处理,可使代谢向合成青蒿素的方向移动,青蒿素合成量明显提高．经２００ｍｇ／Ｌ氯化氯胆碱处理２ｄ,黄花蒿细胞合成青蒿素量为３７２μｇ／ｇ干细胞;经２０ｍｇ／Ｌ双氯苯咪唑处理４ｄ,黄花蒿细胞合成青蒿素量为１５４０μｇ／ｇ干细胞,比靠激素诱导提高了８倍多,与诱导脱分化细胞的黄花蒿叶中所含的青蒿素（３０００μｇ／ｇ干细胞）处于同一个数量级．以上结果表明：在通过植物激素调节可以合成青蒿素的黄花蒿培养细胞中,缺乏青蒿素合成前体是青蒿素合成量低的重要原因．因此,在青蒿素合成的过程中通过体外调节,     

黄芪多糖和白细胞介素2对LAK细胞毒活性的调节作用

采用扶正中药黄芪的有效成分黄芪多糖（ＡＰＳ）和不同来源的白细胞介素２的伍用,探讨其对ＬＡＫ细胞毒性的调节作用,乳酸脱氢酶释放法（ＬＤＨ）测定ＬＡＫ细胞毒性的实验结果表明：ＡＰＳ自身具有增强ＬＡＫ细胞毒性的作用,有效剂量范围为１μｇ／ｍｌ￣１００μｇ／ｍｌ;ＬＡＫ细胞发挥细胞毒活性伍用一定剂量的白细胞介素２;ＡＰＳ（１０μｇ／ｍｌ）和ＩＬ－２（５００μ／ｍｌ）对ＬＡＫ细胞毒性具有非常显著的协同增强作     

表皮生长因子对恒河猴创伤眼角膜的促恢复作用

本实验用５只恒河猴人工造成眼角膜创伤,基本一致地除去双眼角膜上皮细胞层,仅边缘部分残留有少量的角膜细胞,均以猴的右眼作实验处理,每日滴３次表皮生长因子溶液（生理盐水配制,浓度１３０μｇ／ｍｌ）;均原左眼作对照,每日仅滴３次生理盐水。每日用荧光素钠溶液滴眼,检查眼角膜创面的恢复进展情况,结果实验眼的创面在第３－４天完全恢复,对照眼则在第５－６天恢复,实验眼比对照眼约提前２－３天恢复,表明表皮生长因子     

细菌转化黑色素的抗流感病毒作用

采用敏感的ＭＴＴ法测定了嗜麦芽假单胞菌转化黑色素的抗流感病毒作用。测定结果表明：纯化的黑色素毒性极低,对ＭＤＣＫ细胞的无毒界限为０．２ｍｇ／ｍｌ,远高于其有效的作用浓度;１０～２０μｇ／ｍｌ的黑色素能有效抑制流感病毒（血凝效价１∶３２）致细胞病变。病毒感染７２ｈ后用ＭＴＴ法测定,其宿主ＭＤＣＫ细胞保护百分率达９５％以上;此外,加黑色素后的ＭＤＣＫ细胞,抗流感病毒感染的能力优于目前抗病毒的有效药物病毒唑,前者的最佳作用浓度（２０μｇ／ｍｌ）比后者（１００μｇ／ｍｌ）低５倍。可以认为嗜麦芽假单胞菌转化黑色素具有毒性低、抗流感病毒能力强的特点     

HPLC法检测红豆杉细胞培养物中的紫杉醇

在对紫杉醇和干扰紫杉醇测定的６种常见紫杉烷进行色谱化分离的基础上,建立了红豆杉细胞培养物中紫杉醇的高效相色谱检测方法。样品经提取后,在Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ１８柱上以乙腈：水为流动相进行梯度洗脱,于２２７ｎｍ处进行检测。紫杉醇在０．２μｇ／ｍｌ－２０μｇ／ｍｌ浓度范围内线性关系良好,经测定检测限为０．１μｇ／ｍｌ,检测精密度为３．４％,回收率为８８．４％。     

重组人IL6／2融合蛋白对6.5Gy照射小鼠造血功能恢复的影响

观察了ｈＦＰＩＬ６／２对６．５Ｇｙγ线照射ＮＩＨ小鼠第１０天造血功能恢复的影响。结果表明：照射小鼠连续４ｄ给予ｈＦＰＩＬ６／２２５０μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１,其脾重、ＣＦＵ－８、骨髓有核细胞数及ＣＭ－ＣＦＵ分别比对照组增加５９．０％、２７８．５％、５７．９％和１３８．２％,统计学处理均有显著差异;对此四项指标的改善也明显优于２５μｇ组。另外,２５０μｇ剂量组小鼠外周血象３０ｄ的动态观察结果表明,ｈＦＰＩＬ６／２不但能明显提高红细胞和血红蛋白的最低值,而且能使血小板的恢复提前。提示ｈＦＰＩＬ６／２在促进血小板生成和促进红系造血方面可能具有良好的应用前景。     

多管藻R-藻红蛋白的激光光敏作用对体外培养的肿瘤细胞生存率的影响

用１００μｇ／ｍｌ藻红蛋白联合激光处理８１１３人口腔上皮癌细胞,ＭＴＴ比色法测定癌细胞存活率。实验表明,先用藻红蛋白处理再经波长为４８８ｎｍ,２５．６Ｊ／ｃｍ２氩离子激光辐照,细胞存活率为２５％;而单用藻红蛋白,单用激光组分别为４３％和１０７％。结果证明,藻红蛋白的光敏作用对体外培养的肿瘤细胞具有较强的杀伤作用。     

天竺葵花清除自由基作用的研究

用化学发光法研究了天竺葵花粗担液对超氧阴离子自由基（Ｏ２）＾＝和羟自由基（ＯＨ）的清除作用,用分光不镀法研究了它对１,１－二苯基－２－苦肼基自由基（ＤＰＰＨ０的清除作用。结果表明,天竺葵花具有很强的清除自由基活性。其粗提物清除Ｏ２＾－分别为３．５μｇ／ｍｌ（红花）,３．０μｇ／ｍｌ（粉花）,１．６μｇ／ｍｌ（浅粉花）,与茶多酚（ＩＣ５０＝１．１μｇ／ｍｌ）相近,清除ＯＨ的ＩＣ５０分别为５．７μｇ／     

多管藻R—藻红蛋白的激光光敏作用对体外培养的肿瘤细胞生存…

用１００μｇ／ｍｌ藻红蛋白联合激光处理８１１３人口腔上皮癌细胞,ＭＴＴ比色法测定癌细胞存活率。实验表明,先用藻红蛋白处理再经波长为４８８ｎｍ,２５．６Ｊ／ｃｍ＾２氩离子激光辐照,细胞存活率为２５％;而单用藻红蛋白,单用激光组分别为４３％和１０７％。结果证明,藻红蛋白的光敏作用对体外培养的肿瘤细胞具有较强的杀伤作用。     

创伤后巨噬细胞对T细胞白介素2及白介素2受体α基因表达的直…

以２５μｇ／ｍｌ的丝裂霉素Ｃ处理巨噬细胞３０ｍｉｎ,可阻断巨噬细胞白介素１（ＩＬ－１）、白介素６（ＩＬ－６）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）及前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的合成与分泌。创伤小鼠巨噬细胞经丝裂霉素Ｃ处理后,可明显抑制正常Ｔ细胞白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ及ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）α ｍＲＮＡ水平,并增强Ｔｓ细胞的抑制活性。去除Ｔ细胞中Ｔｓ细胞可使巨噬细胞的抑制作用消失。表明创伤后巨噬细胞可通过     

酪氨酸-铜体系电化学氧化行为的研究

在ｐＨ值３．９４的Ｂ－Ｒ缓冲溶液中,酪氨酸－铜络合物在玻碳电极出现氧化峰。用新极谱法测定,酪氨酸浓度在０．３μｇ／ｍｌ－３μｇ／ｍｌ范围内与氧化峰的２．５次微分值呈线性,检测下限０．２μｇ／ｍｌ。直接用于氨基酸药物样品的测定结果满意,并对酪氨酸－铜络合物的电化学氧化行为进行了研究。     

内毒素直接损伤血管内皮细胞的细胞生物力学机理

应用微管吸吮系统和激光共聚焦显微镜、标准固体粘弹性模型, 研究内毒素直接作用对于皮细胞弹性模量Ｋ１ 、Ｋ２ 和粘性系数μ的影响。实验结果表明： 随着内毒素浓度的增加（ ０ ．３１２５μｇ／ｍｌ～１０μｇ／ ｍｌ） , 弹性模量Ｋ１ 、Ｋ２ 均下降（ 其中Ｋ１ 比Ｋ２ 更为显著） , 粘性系数μ随着内毒素浓度的增加而增加; Ｋ１ 、Ｋ２ 、μ随着内毒素（０．６２５μｇ／ ｍｌ） 作用时间的延长而降低;内毒素直接损伤血管内皮细胞后的共聚焦图像表明： 内皮细胞的微丝、微管发生重排; 细胞核位移、脱核, 内毒素与细胞膜呈全面浸润状态。研究结果从细胞生物力学的角度, 给出内毒素直接损伤血管内皮细胞的证据。     

喹诺酮类药物抗乙型肝炎病毒体外实验研究

本文以２．２．１５细胞株为模型,以ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ、细胞存活率为观察指标,综合评价了喹诺酮类药物吡哌酸（ＰｉｐｅｍｉｄｉｃＡｃｉｄ）、氟哌酸（Ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ）、环丙氟哌酸（Ｃｉｐｒｏｆｌｏｓｘａｃｉｎ）、氟嗪酸（Ｏｆｌｏｘａｃｉｎ）体外抗ＨＢＶ效果。结果表明：吡哌酸、氟哌酸、环丙氟哌酸、氟嗪酸对ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ５０％抑制浓度（ＩＤ＿（５０））分别为１１μｇ／ｍｌ、６４μｇ／ｍｌ、９３μｇ／ｍｌ、１０５μｇ／ｍｌ和１９９μｇ／ｍｌ、１１１μｇ／ｍｌ、２４μｇ／ｍｌ、２１７μｇ／ｍｌ,细胞存活率为５０％时的药物浓度（ＣＤ＿（５０））分别为２１９μｇ／ｍｌ、９０μｇ／ｍｌ、１８１μｇ／ｍｌ、１６９μｇ／ｍｌ,在所选定的用药浓度范围内不同程度抑制培养上清液及细胞内ＨＢＶＤＮＡ及其复制中间体的产生。尤其对超螺旋结构ＤＮＡ（ｓｃＤＮＡ）有不完全抑制作用。     

中麻黄悬浮培养体系的建立

本文用中麻黄无菌苗为外植体,其切段培养在附加２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ　６　ＢＡ的ＭＳ培养基上,全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋４％蔗糖的培养某上。以继代培养愈伤组织为材料进行悬浮培养,培养基为附加０．２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．１ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２％蔗糖的ＭＳ液体培养基,得到分散性好,细胞形状接近圆形,细胞大小均一,细胞团多由２－３０个细胞组成的悬浮培养体系。第三代悬浮培养细胞增长率为０．３５ｇ·ｆｗ／２０ｍｌ·ｄ,细胞有丝分裂指数为１１．２％。条件培养和高密度接种可缩短延迟期,条件培养不能提高分裂指数,１ｇ／１０ｍｌ接种密度可使分裂指数提高至２１．２％。     

亚硒酸钠对四氯化碳损伤草鱼肝原代细胞与肝组织的保护作用

不同浓度四氯化碳（ＣＣｌ４）对草鱼肝原代细胞的损伤实验中,ＣＣｌ４浓度为１０μｌ／ｍｌ可引起细胞血清中丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）、天门冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）逸出量与细胞破损率显著增高,培养液中添加亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）０．２μｇ／ｍｌ,则可降低ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ的逸出量,减轻细胞破损程度。Ｎａ２ＳｅＯ３保护实验中,Ｎａ２ＳｅＯ２＋ＣＣｌ４组预先腹腔注射（ｉｐ）０．１ｍｇ／ｋｇ．ｂｗ连续三日,末次ｉｐＣＣｌ４混合液１ｍｌ／ｋｇ．ｂｗ,２４ｈ内肝组织超氧物歧化酶（ＳＯＤ）相对活性比ＣＣｌ４组提高达９１．５％,第七日仍提高达５４．５％,与对照组的水平基本接近;血清中丙氨酸氨基转氨酶（ＡＬＴ）水平逐渐降低。本实验还观察到Ｎａ２ＳｅＯ３可引起肝脂质过氧化物显著降低,肝微粒体蛋白含量与细胞色素Ｐ—４５０活性升高;组织切片观察显示肝组织损伤程度减轻,７２ｈ后细胞核增多。表明Ｎａ２ＳｅＯ３可提高草鱼肝清除自由基能力,增强肝脏解毒功能。     

水稻对硒吸收,分布及硒与硅共施效应

水稻幼苗根吸收的＾７５Ｓｅ在顶叶分布较多,以下各叶依次减少,但根内积累更多,当Ｙｏｓｈｉｄａ营养液加入０．１和０．３μｇ／ｍｌ亚硒酸钠,根吸收＾３２Ｐ,幼苗长高并生根;但经０．６μｇ／ｍｌ处理后幼苗生长受抑制,叶片失绿。     

辣椒转基因植株再生

用改建的农杆菌转化辣椒,已建立有效的转化两再生系统。辣椒无菌苗（１２天苗龄）子叶在再生培养基（ＭＳ＋３ｍｇ／Ｌ ＢＡ）上预培养２天,再用农杆菌感染,共培养２天,再转入含Ｋｍ（１００μｇ／ｍｌ）的再生培养基中培养２－３周后,子叶基部有多丛芽形成。分切多丛芽,将芽转选择性的芽伸长培养基（ＭＳ基本成分＋Ｂ５维生素类＋２ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋７５μｇ／ｍｌ）上,待芽长至２－３ｃｍ后,切下并转入生根培养基（ＭＳ＋