聚磷茵JPA1菌株的生长特性和聚磷条件的优化

以YG培养基为基础,考察不同条件对聚磷菌JPA1菌株生长及聚磷效率的影响。结果表明：JPA1菌株生长的对数期为3-9h,9h后进入稳定期,12h到达衰亡期。在单因素试验中,麦芽糖为JPA1菌株最适生长和聚磷的C源,最适生长温度为30-35℃,pH为8,Na＋、Ca2＋、Mg2＋、Mn2＋和K＋等离子有利于JPA1菌株的生长;最适聚磷温度为30-35℃,pH为7,Fe2＋、Na2＋、Mg2＋、Mn“和K＋等离子有利于JPA1菌株的聚磷。正交试验结果表明：JPA1菌株去磷培养基的最优组合为麦芽糖1．5g／L,温度37℃,pH6．5,装液量50mL（300mL摇瓶）;菌株最适扩增培养基为麦芽糖1．5g/L,温度37℃,pH6．5或7．5,装液量150mL（300mL摇瓶）。     

聚磷菌的诱变选育及其生长特性

方法:采用氮离子注入技术对巢湖底泥中筛选出的一株细菌进行辐照诱变处理,选育出2株高效聚磷菌,并对这两株菌的生长特性进行了研究,根据生理生化及生长试验,并参照《伯杰氏细菌手册》进行菌种分类鉴定,这两株菌被鉴定为假单胞菌属细菌(Pseudomonas sp),并研究了菌量、温度、pH、氧、碳源对两株假单胞菌(Pseudomonas sp)的生长特性及聚磷代谢的影响。结果:试验表明,诱变后的聚磷率明显高于试验出发菌,为出发菌的1.43~3.89倍。两株菌的最适生长温度为30℃,最适pH和菌量分别为6、8和OD=0.6、0.4。最适菌量在厌氧条件下出现放磷现象,好氧条件下过量摄磷现象,经过先厌氧条件的培养其去磷率明显高于直接好氧培养条件下的去磷率,以乙酸钠为碳源时其聚磷率高于乳糖、甲醇、乙醇为碳源时的摄磷量。     

聚磷菌和聚糖菌的竞争影响因素研究进展

目前, 强化生物除磷工艺(EBPR)以其经济有效而得到广泛的应用, 该工艺关键在于聚磷菌的富集。然而已经发现, 有一类细菌—聚糖菌(GAOs)能够和聚磷菌(PAOs)竞争, 导致除磷效果恶化。关于PAOs-GAOs的竞争, 研究已经很多, 但是其结论有趋同也有矛盾, 有必要对此进行分析讨论。根据近年来国内外的相关报道, 阐述了聚磷菌与聚糖菌的竞争影响因素, 其中碳磷比、碳源种类、温度、pH值是关键因素, 而污泥龄、溶解氧以及水力停留时间等因素对于PAOs和GAOs的竞争也起一定的作用。此外, 在EBPR系统中, 缺氧条件下, 存在反硝化聚磷菌(DPB)和反硝化聚糖菌(DGAO)也会对聚磷菌富集和系统除磷产生影响。最后对EBPR系统未来的发展方向进行了展望。     

DFM菌株生理特性的测试以及摇床发酵条件的优化

以研究适合工业化生产的直接饲用微生物 (DirectFeedMicrobials,DFM )为目的 ,通过对 5株细菌的生理特性的测定结果 ,显示出这几株菌具有良好的性状 ,有助于改善目前饲料添加剂领域存在的问题。实验还对菌种的摇床发酵条件进行了正交优化 ,证明了 3株菌可以利用廉价的培养基实现高密度发酵[1] 。另外菌株利用玉米秸秆和麦秸秆的实验为进一步降低发酵的成本开辟了方向。     

大伏革菌产纤维素酶条件优化及高效菌株筛选

真菌胞外纤维素酶活可作为高效生防菌株筛选的指标之一,通过测定野生大伏革菌(Phlebiopsis gigantea)菌株在最优条件下所产生纤维素酶活力高低来达到筛选防治针叶树根腐病高效菌株的目的。以大伏革菌菌株液体培养过程中纤维素酶活力为指标,通过单因素和正交试验结合的方法,筛选出大伏革菌最适产纤维素酶条件为(g/L):葡萄糖30.00,蛋白胨5.00,磷酸二氢钾3.00,硫酸镁1.50,装液量120 mL/250 mL,接种量5%(V/V),初始pH为4.0。测定野生大伏革菌菌株纤维素酶活力的大小显示:08077号菌株纤维素酶活力最大,13025号菌株最小。研究得出08077号菌株比芬兰商业化生物制剂Rotstop-F具有更好的防治中国小孔异担子菌的潜能。     

交替假单胞菌LP621菌株产右旋糖苷酶的培养条件优化

从江苏连云港海域分离和筛选到1株产右旋糖苷酶的海洋细菌交替假单胞菌Pseudoalteromonas tetraodonis LP621,通过单因素试验和正交试验对该菌株产右旋糖苷酶培养条件进行优化。单因素试验结果表明,最佳培养时间为24 h,最适产酶温度为25℃;产酶pH范围为5.0~11.0,最适产酶pH为6.0;产酶NaCl浓度范围为1%~10%,NaCl浓度为4%时产酶较高;装液量在25%。麦芽糖、胰蛋白胨和酵母膏促进产酶。利用响应面方法对LP621产右旋糖苷酶的发酵条件进行优化。选择培养基pH、时间、麦芽糖浓度和装液量4因素进行优化,结果为pH 7.07,发酵时间21.94 h,麦芽糖浓度0.42%,装液量为21.88%,酶活为270.1U/mL。     

一株高产黑色素香灰菌菌株的鉴定、筛选及培养条件的优化

为筛选一株产黑色素能力强的菌株并优化其培养条件。通过ITS测序鉴定11株供试菌株,以菌丝生长速度、平板L值等指标筛选出一株产黑能力强的香灰菌,并对其生长所需碳源、氮源、pH等培养条件进行优化。研究表明,11株供试菌株均为香灰菌（Hypoxylon sp.）,其中Hp.sp0006菌丝生长速度较快、菌球大且均匀、L值最低,并且发酵液黑色素含量最高。该菌株最优培养条件是,以葡萄糖为碳源、牛肉浸膏为氮源、碳氮比20∶1并添加10 mg维生素B₁,黑色素含量可达（1.21±0.17）g/L。香灰菌Hp.sp0006是一株产黑色素较高的菌株,优化后的培养基更有利于黑色素的合成,为香灰菌黑色素的开发利用奠定基础。     

金龟子绿僵菌菌株生长环境变量的优化

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae var.anisopliae)是一种广谱的昆虫病原真菌,提高菌株的生长速率及产孢量具有重要的意义.分别对2株金龟子绿僵菌菌株MA4与MAlml的菌丝生长及次代产孢具有影响的培养温度、培养基初始pH、装液比、光照及微量元素等环境因素进行了测定.经过优化得到2菌株最佳培养条件分别为:MA4菌株在28℃、pH 7、装液比为75ml/250ml、加入微量元素Mn全光照培养时生长最好、次代产孢量最高;MAlml菌株在28℃、pH9、装液比为75ml/250ml、加入微量元素Cu、黑暗培养时生长最好、次代产孢量最高.     

产壳聚糖酶菌株的发酵条件优化

方法:通过单因子实验,对保存的1株产壳聚糖酶的菌株C001进行发酵产酶条件优化,确定了最适产酶培养基组分.结果:温度30℃,发酵时间18h,pH5.5,接种量5%优化发酵条件后,产壳聚糖酶活力增长了37.4%.     

戊糖乳杆菌31-1菌株产细菌素发酵条件优化

对戊糖乳杆菌31-1产细菌素的条件进行了优化,分别研究了培养温度,培养基起始pH值,培养基碳源、氮源,刺激因子等因素对细菌素产量的影响。组合因素优化结果得到最佳培养基与培养条件为：乳糖30g、胰胨15g、豆胨20g、牛肉膏30g、蛋白胨20g、吐温801mL、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸铵2g、硫酸镁0．58g、硫酸锰0．25g,蒸馏水定容至1000mL,30℃培养24h,培养起始pH为6．5。在此条件下培养细菌素效价可达到640AU／mL,与起始培养基相比细菌素产量提高了8倍。     

木聚糖酶生产菌株的筛选及产酶条件的优化

以甘蔗渣半纤维素为碳源,从垃圾场土壤中分离到6株分解半纤维素的菌株。通过固态发酵的木聚糖酶活力比较筛选到1株木聚糖酶活力较高的菌株。该菌株18S rDNA序列与曲霉（Aspergillus sp.）的同源性达97%,根据对菌株形态学分析和18S rDNA序列分析的结果,将该菌株鉴定为曲霉HQ3。HQ3的最佳产酶条件为：甘蔗渣:麸皮为7:3（W/W）,固液比为1:4（W/W）,尿素0.4 %,pH7.0,温度30℃,发酵产酶时间4 d。在最佳产酶条件下,其木聚糖酶活最高可达3421U/g干曲。     

反硝化聚磷菌的脱氮除磷机制及其在废水处理中的应用

摘要:水体富营养化是当前水污染治理的重点关注对象,利用微生物脱氮除磷开展富营养化水体治理是一种重要的技术。基于反硝化细菌和聚磷菌的脱氮除磷功能,兼具反硝化和聚磷功能的微生物研究及其在污水工艺中的应用越来越广泛。在厌氧和好氧/缺氧环境中,反硝化聚磷菌的脱氮除磷机制有很大差别,且在化学和酶学方面都有所体现。其中,质子驱动力/电子受体理论能够很好地解释反硝化聚磷的化学过程,而反硝化酶系和多聚磷酸盐激酶是酶学过程的主要参与者。当前研究已明确在不同氧含量环境中氮素对磷去除的影响机制,但是否存在磷对除氮作用的影响仍有待进一步研究。在此基础上,本文以氮-磷的偶联过程为切入点,分别从反硝化聚磷的化学过程和酶学机制方面进行简要综述。此外,介绍了反硝化聚磷菌在实验室以及工厂化污水处理中的应用近况,并提出了今后的研究重点与方向,以期为反硝化聚磷菌在环境修复中的进一步开发应用提供理论依据。     

蛭弧菌类菌株JU-PX1的生物学特性和16S rDNA序列分析

[目的]研究蛭弧菌类菌株JU-PX1的噬菌特性、形态特征,并分析16S rDNA序列从而对其进行种属鉴定.[方法]采用双层平板法和三角瓶培养法研究蛭弧菌类菌株JU-PX1的噬菌特性,通过光镜和电镜观察其形态,利用16S rDNA序列的蛭弧菌类特异性引物以及细菌通用引物进行PCR扩增.[结果]JU-PX1对10株宿主菌中的6株具有噬菌作用,特别对大肠杆菌和副溶血弧菌侵噬能力较强.菌体呈弧状或杆状,单极鞭毛,大小为(0.2-0.5) μm×(0.8-1.2) μm,在其增殖阶段也有长约3.2 μm的较长个体.扩增后分别获得了一段长为831 bp和1 515 bp的DNA序列,进一步通过NCBI BLAST和MEGA 5.10等软件分析并构建了系统发育树.[结论]蛭弧菌类菌株JU-PX1属于噬菌弧菌属(Bacteriovorax),与海岸噬菌弧菌(Bv.litoralis)亲缘关系最近,两者的16S rDNA序列相似性为93％.     

L-组氨酸产生菌的选育及发酵条件优化

以粘质沙雷氏菌（Serratiamarcescens）ATCC31026为出发菌株,经过硫酸二乙酯（DES）、亚硝基胍（NTG）和紫外（uV）逐级诱变,选育出了一株具有3-氨基-1,2,4-三氮唑抗性（AMTr）、6-巯基嘌呤抗性（6．MPr）、组氨酸甲酯抗性（HEr）、2-硫尿嘧啶抗性（2-Tur）、D-组氨酸抗性（DHr）等遗传标记的突变株ZJZ625（AMTr6．MPrHEr2-TUrDHr）,L-组氨酸产量由最初的2．0g／L提高到7．6g/L。对ZJZ625进行培养基及培养条件优化,研究了单因素对发酵的影响,由响应面分析得出最佳培养基配方,使最终产量达到9．7g／L。     

Growth characteristics of Tyzzer''s organism in cultured mouse hepatocytes

The growth characteristics of Tyzzer's organisms in cultured mouse hepatocytes were examined by direct bacterial counting and plaque assay. The viability of propagated bacteria and time required for the maximum titers depended on incubation time and inoculum dose, respectively. Both infectious titers and bacterial counts at optimum harvests were much higher than those obtained from infected mouse livers. Immunofluorescence revealed, after a lag phase of about 2 h, a linear multiplication during a 6 h period.     

Enhancement of haloacetate dehalogenase production by strain mutation and condition optimization

Enhancement of the activity of an inducible chloroacetate dehalogenase was carried out by efficient and safe mutation with UV and microwave irradiation along with optimization of culture conditions. First, a stable mutant of Pseudomonas sp. CGMCC 3267-MW6 with chloroacetate dehalogenase activity of 2.77 U/mL (3-fold higher activity than the wild strain) was produced by mutation. The maximum activity of this inducible enzyme was measured as 29.41 U/mL when Pseudomonas sp. CGMCC 3267-MW6 was cultured with 4 g/L 3-hydroxybutyrate for 12 h followed by 40 mM 3-chlorobutyrate for an additional 20 h. Production of the enzyme was found to be associated with growth of the bacterium. According to these results, we determined that the optimum inducer of chloroacetate dehalogenase activity would be a hard degradable substrate. The optimum auxiliary carbon source would be the primary metabolite of the substrate or the precursor of the metabolite. The optimum time of inducer supplementation would be during the middle stage of exponential phase. The optimum concentration of substrate would be sufficient but would not induce inhibition. Finally, the optimum collection time would be at the later stage of exponential phase. This work provides further knowledge of chloroacetate dehalogenase and the optimization of inducible enzyme production.     

产弹性蛋白酶菌种的筛选及发酵条件优化研究

从合肥肉联厂附近的土壤和污水中分离得到19株产弹性蛋白酶菌株,初步鉴定该菌株属于假单胞菌属.经过发酵复筛有三株产酶能力超过15u/mL.实验对菌株最佳产酶发酵条件进行了优化2%干酪素、0.5%葡萄糖、0.4%酵母膏、0.2% K2HPO4、0.01% MgSO4·7H2O;起始pH值7.0;最适发酵温度为30℃;装液量为25mL/250mL;该菌株在28h左右产弹性蛋白酶的量达18u/mL.     

两株高效聚磷菌的筛选及其聚磷特性的研究

采用梯度驯化及平板分离技术,从巢湖底泥中筛选到两株高效聚磷菌,分别命名为P6与P8。经过厌氧和好氧两个阶段的处理,两种菌株的聚磷率均达到80%以上。实验结果表明,P8菌株在10℃-40℃以及pH值4-11的较宽范围内都显示出稳定的聚磷效果,而P6菌株仅在30℃-35℃以及pH值4-5的狭窄范围内达到较高的聚磷率。不同碳氮源的影响实验表明,除了乳糖以外,P8菌株在所考察的多种碳氮源下都能表现出较高的聚磷率,当乙醇浓度为3.75g/L时,聚磷率可达到92.9%;而P6菌株对碳氮源则有较严格的要求。     

一株PCBs降解菌的降解特性及发酵条件优化

【目的】针对一株多氯联苯的高效降解菌,考察其对多氯联苯(PCBs)的降解特性,并对降解条件进行优化。【方法】以不同浓度的2,4,4′-TCB与3,3′,4,4′-TCB为唯一碳源,研究苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium melilon)对不同多氯联苯的降解转化能力,并进行发酵条件优化以及共代谢试验。【结果】接入菌株转化7 d后,随着底物浓度的增加,该菌对2,4,4′-TCB的降解能力呈下降趋势。在最低浓度1.0 mg/L时降解率最高,为93.3%;而在最高浓度50.0 mg/L时为65.1%。对于较难降解的四氯联苯3,3′,4,4′-TCB,菌株在最低浓度1.0 mg/L时降解率为56.2%,最高浓度25.0 mg/L时为22.8%。在温度30°C、pH 7.0、接种量4.5 mL、装液量25 mL时,获得菌株转化10.0 mg/L 2,4,4′-TCB的最优发酵条件,7 d的降解率由原来的54.8%提高到83.6%。柠檬烯、香芹酮及甘露醇作为共代谢底物也可较好地提高菌株降解效果。【结论】苜蓿中华根瘤菌对PCBs有很好的降解效果,研究结果对PCBs的微生物降解及环境中PCBs的生物修复具有较好的意义和应用价值。