微柱凝胶技术诊断伤寒及副伤寒的临床应用

目的 比较微柱凝胶技术(MGT)与肥达反应法(WR)在诊断伤寒及副伤寒中的意义.方法 采用微柱凝胶技术及肥达反应法分别检测317例疑似伤寒及副伤寒患者.结果 317例疑似患者中,通过对已被临床确诊或得到血培养和(或)粪便培养阳性报告的患者血清标本检测,微柱凝胶法要比肥达反应法平均提高1～2个滴度.统计学差异有显著性.结论 微柱凝胶技术检测伤寒杆菌抗体方法简便快速,灵敏度高,便于观察,能为临床早期诊断,快速诊断提供重要的参考依据.     

卡式微柱凝胶法在猴血型鉴定中的应用

灵长类动物的ABO血型抗原都表达在组织器官内,而不是在红细胞上,这给灵长类动物血型的鉴定带来很大的困难。为找到更加简捷、准确鉴定灵长类动物类人ABO血型的方法,采用近年来临床上广泛应用的卡式微柱凝胶正、反定型法对34只猕猴和16只食蟹猴的血型进行了鉴定,并与肾组织免疫组化法的检测结果进行比较。结果显示:卡式微柱凝胶正定型法的检测结果中无一例为阳性结果;血浆中的纤维蛋白原和人-猴种属间非特异性抗体都会对卡式微柱凝胶反定型法的部分检测结果产生干扰;采用经正常人O型红细胞吸附处理后的清亮血清,卡式微柱凝胶反定型法的检测结果明确,与免疫组化法判定结果一致。由此得出:卡式微柱凝胶反定型法可以用于灵长类动物血型的鉴定,其主要干扰因素为血浆内的纤维蛋白原和人-猴种属间非特异性抗体,在采用清亮血清及经正常人O型红细胞吸附处理后能消除其干扰。     

Bioxun微柱凝胶筛查红细胞不规则抗体的研究

目的:探讨Bioxun微柱凝胶法(Bioxun Micro-column Gel anti-globulin Test,BMGT)筛查红细胞不规则抗体的敏感性和特异性。方法:使用盐水介质法(Saline Media Test,SMT)、传统抗人球法(Traditional anti-Globulin Test,TGT)、达亚美凝胶法(DiamedMicro-column Gel Test,DMGT)和Bioxun微柱凝胶法分别检测红细胞不规则抗体,对方法学灵敏度和特异性进行观察比较。结果:Bioxun微柱凝胶法与达亚美凝胶法的结果无显著差异(P>0.05),二者的敏感度和特异性超过盐水介质法和传统抗人球法(P<0.05)。结论:Bioxun微柱凝胶法操作快捷,敏感度高,适宜在临床输血中推广应用。     

新生溶血病患儿红细胞上致敏抗体对Rh 血型检测的影响

目的:探讨新生溶血病患儿红细胞致敏抗体对其Rh血型鉴定的影响。方法:采用抗球蛋白法、盐水法、微柱凝胶法(Rh血型测定型)、凝聚胺法和抗血清微柱凝胶法(Ig G型)五种方法对近三年来我院收集的163例新生溶血病患儿红细胞进行Rh血型检测,对五种检测结果不一致的患儿红细胞进行0.2 M 2-巯基乙醇抗体放散,比较放散后五种方法检测结果并验证其准确性。结果:29例直接抗体试验阳性患儿的五种Rh血型检测结果不一致,经0.2 M 2-巯基乙醇抗体放散后检测结果均一致。Rh血型准确性验证表明,红细胞放散测定的Rh血型完全符合临床现象。结论:患儿红细胞的致敏抗体达一定数量后,会影响抗球蛋白法、盐水法、微柱凝胶法(Rh血型测定型)、凝聚胺法和抗血清微柱凝胶法(Ig G型)对Rh血型鉴定,0.2M 2-巯基乙醇抗体放散法是一种正确鉴定新生儿Rh血型的简单可行的方法。     

卡式微柱凝胶法在ABO、RhD血型鉴定中的应用价值

目的:探讨微柱法在ABO、RhD血型鉴定中的应用价值。方法:抽取2012年3月至2013年3月我站检验科血液筛查标本共1081份作为研究对象,在metis全自动血型仪进行初筛的基础上,同时进行卡式微柱凝胶法ABO、RhD血型鉴定,据定型结果配血,统计输血结局并作为评价依据。结果:筛查RhD阴性者6份占0.56%,阳性者1075份占99.44%;所有血液输用后均未产生输血反应。结论:ABO、RhD血型鉴定是保障输血安全、抑制溶血性疾病的必要措施,而微柱法具有操作简便、价格低廉、科学准确的优点,适合血站的血型鉴定和临床的推广。     

气管炎疫苗滴鼻剂对机体非特异性免疫功能的影响

采用白色葡萄球菌ATCC26104、流感嗜血杆菌ATCC58528、卡它布郎汉姆氏菌ATCC29108和甲型溶血性链球菌ATCC32212为气管炎疫苗滴鼻剂的生产菌株。选择适宜的吸收促进剂和凝胶剂,将传统的气管炎疫苗针剂改制成气管炎溶菌菌苗凝胶滴鼻剂。通过动物模型实验,观察凝胶滴鼻剂和针剂对小白鼠的非特异性免疫功能的影响。结果,气管炎疫苗凝胶滴鼻剂对小白鼠的非特异性免疫功能有明显的调节作用,与针剂相比,对小白鼠的非特色性免疫功能的调节作用无差异。     

微柱凝胶技术在临床输血中的应用分析

随着我国科学技术和医疗卫生事业的不断发展,输血治疗已经成为临床中常用的治疗手段,但是血型鉴定、交叉配血则是临床中为了避免输血导致的不良反应的重要环节,对于输血的正常进行和效果、治疗的质量乃至患者的生命健康安全都起到了至关紧要的作用。微柱凝胶技术目前是临床中常用的血型鉴定技术,在临床输血等治疗中起到了极为重要的保障作用,不仅保证了治疗的正常进行,而且从根本上避免了输血可能造成的危险,具有不可替代的价值和作用。本文对于当前临床治疗工作中输血时使用的微柱凝胶技术进行综述,分析其应用过程和方式,以期促进临床治疗工作的发展。     

聚皂凝胶对蛋白分子的吸附与释放

以牛血清白蛋白为对象,研究了丙烯酸－丙烯酰胺型９ＰＢｕＡＭＡ）和疏水改性的四乙烯五胺－环（ＨＰＴＥ）聚合物凝胶对蛋白质的及附与释放过程。在吸附过程中,当溶液ＰＨ值在牛血清白蛋白电点（４．７）附近时,凝胶蛋白抽的吸附值最大;而在释放过程中,ＰＨ＝７的释放率远大于其它ＰＨ值时的释放率。实验表明凝胶结构对蛋白质吸附与释放有较大影响。未疏水改性的凝胶与疏水改性的凝胶相比,前 的释放速率约为后者的２倍。结果     

ABO血型正反定型及交叉配血实验在外科病人手术输血中应用

目的:探讨ABO血型正反定型及交叉配血实验在外科手术患者输血中的应用效果及影响因素。方法:选取我院自2017年2月-2019年2月收治的80例行ABO正反定型与交叉配血治疗的外科手术患者,记录ABO反定型与交叉配血不合的标本,使用2-Me处理被患者自身冷抗体凝集的红细胞,同时使用微柱凝胶法、凝聚胺法对血型不规则抗体以及特异性进行筛选和鉴定。分析ABO血型反定型不符合以及交叉配血不合的影响因素。结果:对正反定型完全无凝集反应的80例血清标本进行交叉配血实验,其中8例存在凝集反应,配血不合情况;导致外科手术患者输血中ABO血型反定型不符交叉配血不合的主要因素包括自身冷抗体、血型抗原性减弱、血型不规则抗体以及血型抗体效价减弱等。结论:ABO血型正反定型及交叉配血治疗中的患者中,大部分配血一致,少数的交叉配血不合,主要与自身冷抗体、血型抗原性减弱、血型不规则抗体以及血型抗体效价减弱等因素相关。     

一种快速提取植物病毒DNA的方法

介绍在PCR检测体系中一种快速提取病毒DNA的方法。利用高盐缓冲液溶液释放病毒DNA,同时利用葡聚糖凝胶微柱纯化提取液,有效消除样品中PCR抑制物质并直接作为PCR反应模板扩增检测病毒。该法无需任何特殊设备,适合对大量植株进行大通量的检测分析。     

39302例患者不规则抗体筛查结果分析及其临床意义

目的:对需要输血的患者进行输血前不规则抗体筛查,为受血者选择合适的供血者血液成份,确保临床输血安全有效地进行。方法:选择2009年10月1日～2011年10月31日在本院入院进行治疗性输血和手术备血的患者,采用微柱凝胶法对受血者进行血清中不规则抗体的筛查,并对筛查阳性标本进抗体特异性鉴定。确保临床输血安全有效。结果:在39302例受血者血清中共检测出不规则抗体69例(阳性率0.18%),其中抗-D 5例、抗-E 15例、抗-C 2例、抗-c 2例、抗-e 2例、抗-C,e 1例、抗-M 8例、抗-S 1例、抗-Lea2例、抗-Leb1例、自身抗体5例、25例未确定抗体的特异性。结论:不规则抗体筛查对保证输血安全、降低免疫性溶血性输血反应、及时寻找相容血液及预防和减少新生儿溶血病的发生很有必要。     

寨卡病毒感染者血液、尿液和唾液中IgA抗体水平初步研究

为研究寨卡病毒(ZIKV)感染者血清、尿液和唾液样本中特异性IgA抗体水平,进一步了解ZIKV感染免疫机制,本研究重组表达制备寨卡病毒NS1蛋白,对其浓度、纯度进行鉴定,初步评估了NS1蛋白抗原性,并建立间接酶联免疫(Indirect-ELISA)方法,检测患者临床血清、尿液和唾液样本中的寨卡特异性IgA抗体。利用健康人群血清、尿液和唾液标本,评估检测方法的特异性,并确定以阴性对照的均值加3倍标准差作为判定检测结果的阈值,特异性为100%。对经病毒核酸检测所确诊病例的33份血清样本、4份尿液样本和3份唾液样本进行检测。选择3份具有较高IgA抗体水平的血清,通过2倍系列稀释的方法评价了血清样本中特异性IgA抗体的滴度,可有效检出经3 200倍以上稀释的血清样本中的IgA抗体。重复性检测实验显示板间变异系数为(3.0±0.8)%,板内变异系数为(2.7±1.0)%。寨卡患者血清、尿液和唾液样本中的特异性IgA抗体的检出率分别为75.8%(25/33)、100%(4/4)和33.3%(1/3),提示IgA抗体在3种体液标本中均具有显著的存在,具有充当体外诊断指标的意义。同时尿液、唾液标本中特异性IgA抗体的存在,提示潜在的粘膜免疫效应,有助于增强对病毒体内播散和体外传播的理解,也初步提示了寨卡病毒NS1蛋白可用于相关免疫学诊断试剂的研发。     

卡介菌多糖核酸联合重组人干扰素α-2b凝胶对尖锐湿疣CO2激光治疗术后复发预防作用

目的观察卡介菌多糖核酸联合重组人干扰素α-2b凝胶对尖锐湿疣(CA)CO2激光治疗术后复发预防作用。方法选取皮肤科门诊治疗的CA患者88例,随机分为观察组(n=44例)与对照组(n=44例)。两组患者均予以CO2激光治疗,并予以外搽红霉素软膏预防感染。观察组患者予以卡介菌多糖核酸联合重组人干扰素α-2b凝胶治疗,对照组予以单纯重组人干扰素α-2b凝胶,其中卡介菌多糖核酸针1 mL肌注,隔日1次;重组人干扰素α-2b凝胶局部涂擦,2次/d,两组均连用4周。观察两组患者治疗后随访3个月内的复发率和治疗期间的药物不良反应。结果治疗后随访3个月,观察组患者的复发率明显低于对照组(29.55%vs 11.36%)(χ2=4.47,P<0.05)。观察组和对照组患者治疗期间出现分别药物不良反应4例(9.09%)和2例(4.55%),症状均较轻微,两组患者治疗期间药物不良反应比较差异无统计学意义(χ2=0.18,P>0.05)。结论卡介菌多糖核酸联合重组人干扰素α-2b凝胶预防CA激光治疗术后复发的疗效较确切,能明显降低其复发率,安全性较好,为预防CA的复发提供一种新的选择。     

2623名患者红细胞不规则抗体筛选结果分析*

目的:对红细胞抗体筛选阳性的标本进行红细胞不规则抗体特异性鉴定与分析,为临床安全输血提供帮助。方法:2011年8月至2018年12月天津市各医院送至本中心实验室检测的2623份血液标本,进行红细胞不规则抗体筛选和鉴定;采用低离子强度溶液-抗人球蛋白微柱凝胶卡方法和盐水直接离心方法进行抗体筛选和抗体鉴定。结果:共检出2744个红细胞抗体,其中2139个为同种抗体,509个为自身抗体,96份标本未能确定抗体特异性;在所检出的同种抗体中,Rh系统的抗体最常见,占比为54.7％(其中抗-E 26.2％,抗-c 8.7％,抗-C 7.7％,抗-e 6.9％,抗-D 4.9％),MNS系统、Lewis系统、Kidd系统、P系统、Duffy系统、Kell系统、Diego系统均有抗体检出。结论:在输血前检测中,为预防检出不规则抗体的情况出现,应提前备血,以免由此导致的延迟输血,影响治疗。     

O型孕妇ABO同种异体免疫型IG抗体效价的分析

目的:检测O型孕妇血清ABO同种异体免疫型IG抗体效价.方法:将1204例O型孕早期孕妇按照其夫的血型分为四组,即O-A、O-B、O-AB-A、O-AB-B,用微柱凝胶法抗人球蛋白试验分别测定抗体效价;同时从中随机选择304例抗体效价≤ 1:64的孕妇定期检测.结果:在O-A、O-B组中及O-AB组中抗A及抗BIgG抗体效价>64的病例分别占29.88%,19.92%,20.00%及18.18%,各血型组合均有发生新生儿溶血病的可能性,差异无显著性(P>0.05);部分抗体效价低于1:64的孕妇在孕后期效价上升,与孕早期比较差别有统计学意义(t=2.271,P<0.05),且随孕周增大而上升(r=0.979,t=8.293,P<0.05).结论:常规对孕妇血清血型抗体IgG效价进行检测有助于有助于诊断新生儿溶血病(hemolytic disease of the newborn,HDN),指导临床干预措施,尤其应该注重低抗体效价孕妇的定期检测.     

痰中卡他布兰汉氏菌的分离、鉴定及临床意义

本文对来自临床的670份合格痰标本进行了分离鉴定,检出卡他布兰汉氏菌49株,检出率为7.3%。对其中10例患者双份血清抗体的测定结果表明,在患者恢复期血清中有较高的抗卡他布兰汉氏菌的相应抗体。30株菌的药敏试验结果为:对青霉素、氨苄青霉素耐药,对先锋霉素、氯霉素、庆大霉素较敏感。     

兔抗麻雀IgY酶标抗体的制备

目的制备辣根过氧化物酶（HRP）标记的兔抗麻雀IgY抗体,为禽类血清学检测体系的建立提供技术储备。方法硫酸铵盐析法粗提麻雀血清IgY,进一步在SDS-PAGE上分离后,切下带有目的条带的凝胶作为免疫原,免疫实验兔制备抗血清,Protein-A柱亲和纯化兔抗IgY血清IgG,,使用改良过碘酸钠法制备酶结合物。ELISA检测酶标抗体的工作浓度,western blotting检测酶标抗体的特异性。结果硫酸铵盐析法粗提IgY,可去除部分杂蛋白,SDS-PAGE上分离后切下带有目的条带的凝胶,可以得到足够纯度的抗原,将带有IgY的凝胶作为抗原免疫后获得的抗血清经Protein-A纯化后,二抗在SDS-PAGE上鉴定,纯度达到99%以上。改良的过碘酸钠法标记获得的抗体浓度为1.008 mg/mL,ELISA检测酶标抗体效价为1∶1000。Western blotting鉴定抗体具有特异性。结论获得了优质可靠的兔抗麻雀IgY酶标抗体。     

中药补骨脂及鸦胆子对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的防治研究

目的探讨中药补骨脂及鸦胆子对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的防治效果。方法用地塞米松皮下注射建立大鼠卡氏肺孢子虫肺炎动物模型,用补骨脂、鸦胆子及两者合剂治疗实验鼠,观察其肺脑组织病理、肺脑组织和血清中MDA(丙二醛)、XOD(黄嘌呤氧化酶)、GSH(谷胱甘肽)等指标变化。结果补骨脂、鸦胆子及合剂治疗实验大鼠体重明显回升,与模型对照差异有显著性(P<005);各治疗组的包囊减少率均高于60%,合剂治疗组不优于各单独治疗组,鸦胆子及合剂治疗组清除氧自由基能力较强。结论鸦胆子及补骨脂对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎具有一定疗效。     

可原位注射的十二羟基硬脂酸水凝胶制备及药物控释性能

超分子水凝胶能被吸收、易降解,使得它在生物医学领域有广泛的应用前景。本研究选择十二羟基硬脂酸(HSA)作为小分子凝胶因子,详细研究了十二羟基硬脂酸的聚乙二醇200 (PEG200)溶液对水的胶凝能力,利用流变、扫描电子显微镜(SEM)等技术表征了凝胶的力学性能及组装形貌。结果表明,十二羟基硬脂酸在凝胶中组装形成了纤维状聚集体且凝胶拥有很好的机械性能,药物缓释实验结果确认该凝胶对药物具有良好的缓释性能。小鼠皮下注射实验表明注射十二羟基硬脂酸的聚乙二醇200溶液可以在小鼠体内形成稳定原位凝胶,且小剂量HAS-PEG200凝胶对小鼠正常生长几乎没有影响,表明该水凝胶体系可用于原位缓释给药。     

正交设计法优选妇宁康凝胶剂的基质配方

目的优选妇宁康凝胶剂的基质配方。方法通过体外释药试验,采用HPLC法测定接收液中甘草酸含量,并计算甘草酸释药速率;以甘草酸释药速率为筛选指标,采用L9（3^4）正交试验对妇宁康凝胶剂的的基质配方进行优选。结果妇宁康凝胶剂的最佳基质配方为：卡伯姆2％,甘油5％,EDTA-2Na0．006％,丙二醇10％,三乙醇胺约1g。结论甘草酸体外释药符合Higuchi方程,配方中甘油和丙二醇的含量为主要影响因素,有极显著影响。