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目的建立间接ELISA法定性检测矛头蝮蛇血凝酶,用于巴曲亭蛇毒种属来源检测。方法将矛头蝮蛇血凝酶为抗原免疫小鼠,与尖吻蝮蛇血凝酶、白眉蝮蛇血凝酶交叉筛选获得特异性单克隆抗体。优化矛头蝮蛇血凝酶单抗(一抗)、HRP标记的羊抗鼠(二抗)IgG、矛头蝮蛇血凝酶(抗原)工作浓度,建立间接ELISA检测方法。考察方法的重复性、中间精密度,确定方法的适用性。采用膜超滤法将巴曲亭中辅料去除,按照建立的ELISA法检测,判定种属来源。结果矛头蝮蛇血凝酶单抗具有强特异性,一抗的最佳工作浓度1∶4000(250ng),二抗的最佳工作浓度1∶4000(250ng),抗原浓度2μg/孔,该法重复性和中间精密度较好。巴曲亭与矛头蝮蛇血凝酶单抗有特异性反应,与其它蛇毒来源血凝酶单抗无交叉反应,确定巴曲亭来源于矛头蝮蛇蛇毒。结论本研究建立的ELISA法具有较好的特异性,可作为巴曲亭蛇毒种属来源判断的方法。 相似文献
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目的研究观察蛇毒酶治疗帕金森氏病(PD)、帕金森综合征(PS)的临床效果,方法对82例PD和PS患者进行随机分组,A组应用精制蝮蛇抗栓酶,B组应用东菱克栓酶,C组应用力源精纯溶栓酶;对每例病人进行治疗前后Webster记分和记录多巴制剂的递减/递增量,同时检测血液流变学和血凝学5项指标,并给予统计比较,结果A组病例不论是临床症状的改善,还是多巴制剂的用量递减、血液流变学和血凝学指标变化均优于B、C 相似文献
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II型限制性核酸内切酶在真核生物染色体显带中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
限制性核酸内切酶(简称限制酶)能切割DNA双链。已知的限制酶有I, II和III型三类。II型限制酶能识别专一核普酸序列,并在识别序列内有固定切割点,是分子生物学研究和基因工程重要工具酶。1980年,以II型限制酶处理印度鹿染色体,沿染色体纵轴得到选择消化结果[16]。目前,限制酶这一应用研究发展成称为限制性核酸内切酶显带(Restriction endonuclease banding)的最新显带技术,已应用于哺乳类、鸟类、两栖类、鱼类和昆虫等真核生物。限制酶显带与其他显带法相比有其特点,特别在揭示异染色质的异质性方面有其独到之处。本文介绍此项技术的发展与现状,并指出需要进一步探索的几个主要方面。 相似文献
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蛇毒抗栓酶是从我国南方地区蝮蛇毒中提取制成的具有抗凝、去纤、溶栓作用的新药。临床上已用于治疗脑血栓、脉管炎疾病,收到了满意的疗效。但其对体外血凝和溶栓作用,尚未见报道。本文利用体外凝血时间和血块溶解试验,观察蛇毒抗栓酶对血凝和血块溶解的作用。材料与方法一、蛇毒抗栓酶由中国医科大学蛇毒研究室提供,系白色冻干粉末,每支含酶活力0.2单位。经测定,主要成分为精氨酸酯酶,使用时以生理盐水稀释。二、实验对象健康人血液,在无菌条件下由肘静脉采血。三、实验方法实验随机分为对照组(0.9%生理盐水溶液0.2ml),实验组以用药浓度分两组(0.02u、0.016u)。四、实验结果及分析 1.体外凝血时间测定对照组:注射器内加入生理盐水溶液0.2ml,抽血至2ml放入表玻璃皿上,记录凝血时间。 相似文献
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杂交酶及其相关技术进展 总被引:1,自引:0,他引:1
根据杂交酶研究目的以及构建杂交酶方法,文中总结近年来杂交酶研究的成果,将杂交酶的应用分为以下几个主要的方面:改变酶的非催化特性;创造新活性的酶;研究蛋白质的结构和功能的关系等。还介绍了DNA序列改组、表达克隆、分子筛选、人造细胞样区室筛选基因等技术的进展以及这些技术在构建杂交酶方面的应用。 相似文献
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本研究观察了家兔双后足重度冻伤后用蝮蛇抗栓酶(0.25U/kg体重加入20ml/kg体重生理盐水中,耳缘静脉点滴)进行治疗后其血凝系统某些指标的改变。结果表明,重度冻伤后家兔的出血时间及凝血时间明显缩短,血小板功能呈不同程度的改变,血浆纤维蛋白原含量增加,血液处于高凝状态;用蝮蛇抗栓酶治疗后,上述各项指标均有不同程度的改善,结果提示,蝮蛇抗栓酶可明显缓解冻伤所致的血凝增强的病变过程,这对重度冻伤的治疗将起到重要作用 相似文献
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漆酶作为一种绿色环保的多酚氧化酶类,目前被广泛地应用于染料降解、造纸等领域。细菌漆酶与真菌漆酶相比,有更好的热稳定性和更宽的最适pH范围。因此,在工业应用方面更具优势与潜力。综述细菌漆酶的来源、分布、分子结构等基本信息,以及目前细菌漆酶发酵生产水平,并对固定化细菌漆酶进行总结。此外,对细菌漆酶在染料废水、电化学应用及造纸等工业生产方面的应用作简要的介绍。 相似文献
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漆酶的性质、功能、催化机理和应用 总被引:26,自引:0,他引:26
漆酶是一种结合多个铜离子的蛋白,是铜蓝氧化酶蛋白家族的一员。本文叙述漆酶的分子结构、底物特异性及其物理化学特性,并讨论漆酶的酶促反应机理和生物学功能,包括植物漆酶参与细胞壁的形成以及漆酶与病原菌毒力的关系。本文还着重介绍了漆酶在环境生物修复方面的应用。 相似文献
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微生物乙内酰脲酶及其研究进展 总被引:7,自引:3,他引:7
乙内酰脲酶是广泛分布在微生物中的一类可降解乙内酰脲酶类化合物的酶系 ,包括乙内酰脲水解酶、N-氨甲酰氨基酸水解酶及乙内酰脲消旋酶。微生物的乙内酰脲酶在结构与组成、立体选择性、底物专一性、反应条件和作用机制等方面有所不同 ,在各种 L-及 D-型氨基酸的酶法生产中具有良好的应用前景。本文对乙内酰脲酶研究及应用的一般情况作了概述 ,并讨论了有关乙内酰脲酶研究的主要研究进展 相似文献
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葡糖磷酸变位酶是催化葡糖1磷酸与葡糖6磷酸之间可逆性转化的酶类,在有机体内的糖原合成及利用中起中枢作用。本文综述了葡糖磷酸变位酶在植物中的分布、重要性、功能及分子特性等,重点介绍了关于植物葡糖磷酸变位酶在遗传及分子生物学方面的研究进展和热点,并讨论了研究葡糖磷酸变位酶的理论和实际意义。 相似文献
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用八株不同来源的流行性出血热(EHF)病毒的单克隆抗体(McAb),采用血凝抑制试验、反向间接血凝抑制试验、间接酶联免疫及阻断酶联免疫试验等,对两种方法(TE、SA)制备的血凝素抗原进行分析。根据A35、2A6McA5试验的结果,证实血凝素抗原中的核蛋白上存在有非构象依赖性的血凝结合位点;而另外5株McAb在血凝抑制活性方面,虽具有明显的株间交叉,但在反向间接血凝抑制试验、间接酶联免疫试验时则均为阴性,故认为其血凝结合位点位于病毒的膜蛋白,可能与G_2糖蛋白有关,为构象依赖性位点。有关4G6McAb,在阻断酶联免疫试验时,虽与A35、2A6一样具有较高的阻断率,但在反向间接血凝抑制试验、间接酶联免疫试验时明显有别于后二者,对其属性有待进一步确定。 相似文献
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纳米酶是近年来我国科学家发现的一类自身蕴含酶学特性的纳米材料。作为一种新型人工模拟酶,纳米酶具有经济、稳定、易于大批量生产的优势. 更重要的是,纳米酶是一个双功能或者多功能的分子,它不仅具有催化活性,还兼有纳米材料特有的物理和化学性质,如磁性、荧光、光热特性等. 纳米酶的出现为酶催化反应在疾病诊断中的应用提供了新思路,新方法和新工具. 本文将重点介绍近几年纳米酶在疾病诊断方面的应用,涵盖了癌症、代谢性疾病、传染性疾病、神经退行性疾病、心血管疾病和炎症性疾病等不同疾病类型,并对该领域未来的发展方向进行了讨论和展望. 相似文献