耐万古霉素肠球菌基因分型及耐药机制的研究进展

近年来肠球菌的耐药性呈上升趋势,已引起越来越多的临床医生和微生物学家的重视。目前,肠球菌对抗生素的敏感性以糖肽类最高,但20世纪90年代以来,国内、外均报道了耐万古霉素的肠球菌。耐药菌株的增多给临床治疗带来了较大困难,因此,对耐万古霉素肠球菌耐药机制的探讨尤为重要。基于对万古霉素和替考拉宁的耐药水平、诱导性及转移性的不同,对糖肽类抗生素耐药的肠球菌已报道5类为获得性耐药肠球菌,1类为固有耐药肠球菌。本文就耐万古霉素肠球菌的基因分型与耐药机制的研究进展作一综述。     

临床分离肠球菌的耐药性研究

目的了解近3年来粤东地区临床分离的肠球菌的耐药特征,为预防耐万古霉素肠球菌（VRE）的产生和控制VRE播散提供理论依据和实验基础。方法收集临床分离的215株肠球菌,细菌鉴定及药敏试验采用VITEK-60全自动细菌鉴定仪。结果215株肠球菌中,尿标本中分离肠球菌75株（35％）;痰液中分离出34株（16％）。粪肠球菌141株（65．5％）,屎肠球菌74株（34．5％）。粪肠球菌对万古霉素、呋喃妥因、青霉素G和莫西沙星的敏感率较高,70％～100％;对红霉素和四环素的敏感性较差,11％～33％。屎肠球菌对万古霉素敏感性较好为100％,四环素为62％;而对呋喃妥因、高链霉素、青霉素和左氧氟沙星等敏感性较差（5％～47％）。未检出耐万古霉素肠球菌。结论粤东地区近3年来未发现耐万古霉素肠球菌。肠球菌对各种常见抗生素敏感程度呈下降趋势。屎肠球菌较粪肠球菌耐药性更高。应根据细菌学培养结果合理用药,减少耐药菌株的发生率。     

不同人群肠道携带耐万古霉素肠球菌的研究

调查住院病人、门诊病人和正常人粪便中耐万古霉素肠球菌的携带率及其耐药表型、基因型和同源性, 为临床预防和治疗选药提供依据。根据CLSI指南做药敏试验, 用PCR法检测万古霉素耐药基因, 用重复基因外回文序列-聚合酶链反应(REP-PCR)进行同源性分析。从住院病人肠道中分离出31株(20.67 %)耐万古霉素肠球菌, 其中22株VRE为VanA基因型, 9株VIE为VanC1基因型。22株VRE同源性分析, A型有19株, 其中A1型4株, A2型6株, A3型4株, A4型3株, A5型2株。B型、C型、D型各1株。9株VIE中有3对菌株分别有100%同源性。门诊病人分离出4株VIE(4%), 为VanC1型, 其中两株有100%同源性。正常人中分离出11株(27.5%)VIE, 8株为VanC1型, 3株为VanC2型; 11株VIE同源性分析, 以A型为主, A1型有1株, A2型有2株, A3型有1株, A4型有1株, D1、D2、D3型各有1株, B、C、E型各有1株。2株住院病人VIE与2株门诊病人VIE有100%同源性, 另外2株住院病人VIE与1株门诊病人VIE有100%同源性。他们与正常人分离的VIE同源性低。22株VRE对万古霉素的MIC值>512 μg/mL, 16株VIE对万古霉素的MIC值为16 μg/mL。8株VIE对万古霉素MIC值为8 μg/mL。可见住院病人肠道中VRE携带率高, 是医院感染的危险因素, 46株耐万古霉素肠球菌的耐药表型与耐药基因型一致; 耐万古霉素肠球菌对多种抗菌药物耐药; 部分菌株有较高的同源性。     

不同人群肠道携带耐万古霉素肠球菌的研究

调查住院病人、门诊病人和正常人粪便中耐万古霉素肠球菌的携带率及其耐药表型、基因型和同源性,为临床预防和治疗选药提供依据.根据CLSI指南做药敏试验,用PCR法检测万古霉素耐药基因,用重复基因外回文序列-聚合酶链反应(REP-PCR)进行同源性分析.从住院病人肠道中分离出31株(20.67%)耐万古霉素肠球菌,其中22株VRE为VanA基因型,9株VIE为VanC1基因型.22株VRE同源性分析,A型有19株,其中A1型4株,A2型6株,A3型4株,A4型3株,A5型2株.B型、C型、D型各1株.9株VIE中有3对菌株分别有100%同源性.门诊病人分离出4株VIE(4%),为VanC1型,其中两株有100%同源性.正常人中分离出11株(27.5%)VIE,8株为VanC1型,3株为VanC2型;11株VIE同源性分析,以A型为主,A1型有1株,A2型有2株,A3型有1株,A4型有1株,D1、D2、D3型各有1株,B、C、E型各有1株.2株住院病人VIE与2株门诊病人VIE有100%同源性,另外2株住院病人VIE与1株门诊病人VIE有100%同源性.他们与正常人分离的VIE同源性低.22株VRE对万古霉素的MIC值>512μg/mL,16株VIE对万古霉素的MIC值为16μg/mL.8株VIE对万古霉素MIC值为8μg/mL.可见住院病人肠道中VRE携带率高,是医院感染的危险因素,46株耐万古霉素肠球菌的耐药表型与耐药基因型一致:耐万古霉素肠球菌对多种抗菌药物耐药;部分菌株有较高的同源性.     

肝硬化患者肠球菌感染及体外药敏监测

目的研究肝硬化患者肠球菌感染的现状及药敏特点,以加强对肝硬化肠球菌感染的认识,指导用药。方法留取标本进行细菌培养、鉴定及药敏试验。结果所有纳入研究范围的肝硬化患者共检出肠球菌112株,其中粪肠球菌89株,占79.5%,比例最高,屎肠球菌占14.3%,居第2位。腹水中检出肠球菌64株,占57.1%,其次为痰和尿液,分别为38.1%和14.4%。肠球菌对红霉素、奈替米星的耐药率超过80%,对青霉素G、氨苄西林、呋喃妥因的敏感率超过70%,对左氧氟沙星的敏感率为58.9%,对头孢唑啉、头孢派酮的敏感率分别只有25.0%和33.0%,检出高耐氨基糖苷类肠球菌(HLAR)58株,占51.8%,未检出耐万古霉素和替考拉宁肠球菌,但检出万古霉素中介肠球菌4株,占3.6%。结论肠球菌是肝硬化患者医院感染的重要致病菌,尤以粪肠球菌和屎肠球菌为主,屎肠球菌的耐药率高于粪肠球菌,万古霉素和替考拉宁是治疗肠球菌感染的首选药物。     

广州地区肠球菌属耐万古霉素、高耐庆大霉素的调查

目的 了解脾性球菌耐药特征,尤其对万古霉素耐药肠球菌和庆大霉素高水平耐药肠球菌的对药状况,指导临床合理用药。方法 对广州地区１２家医院感染标本中分离出的１６８株肠球菌,分别进行纸片扩散法,琼脂筛选法、浓度梯度法（Ｅ－ｔｅｓｔ法）药敏试验和β－内酰胺酶测试,并以“ＷＨＯＮＥＴ４”软件对试验数据捏造分析处理。结果：广州地区未发现耐万古霉素肠球菌,庆大霉素高水平耐药肠球菌占６２．５％,未发现产β－内酰胺     

267株肠球菌分布及耐药性分析

目的 了解肠球菌的分布特征和耐药特点,指导临床合理用药.方法 采用美国Dade Behring Mi-croscan Walkaway40全自动细菌鉴定及药敏测试仪对267株肠球菌进行鉴定和药敏测试,用全国医院感染监测网软件和P检验进行分析.结果 267株肠球菌以屎肠球菌和粪肠球菌为主,分别占60.7%和31.5%,以尿液和脓液中分离出最多,其次为血液和胆汁,依次是56.6%、14.2%、10.9%、9.7%,占总标本的91.4%.肠球菌不同种间的耐药性差异存在显著性.屎肠球菌的耐药率相对较高,除对万古霉素的耐药率3.7%最低,四环素37.7%外,对其它抗菌药物的耐药率均超过了50%.粪肠球菌的耐药率虽比屎肠球菌低,但对红霉素、四环素、氨基糖苷类的耐药性仍高,在60%以上.屎肠球菌和粪肠球菌对高浓度庆大霉素和链霉素的耐药率均在55%以上.共检出耐万古霉素株11株,对万古霉素的耐药率为4.1%.结论 肠球菌可引起多种部位感染,呈多重和高耐药性,耐万古霉 素的菌株出现,增加了感染控制难度,应引起临床重视.     

190株肠球菌的鉴定及药敏分析

目的了解黑龙江省医院肠球菌的菌种分布及对常用抗生素耐药性的现状。方法对2004年8月至2006年6月检出的190株肠球菌的菌种鉴定及药敏结果进行回顾性分析。结果粪肠球菌(46.3%)分离率下降;屎肠球菌(33.2%)、鹑鸡肠球菌(13.7%)分离率增加。耐药株检出率屎肠球菌为85.1%,粪肠球菌为75.0%,鹑鸡肠球菌为70.2%。青霉素和呋喃妥因对粪肠球菌引起的感染有一定的疗效,万古霉素,替考拉宁是治疗肠球菌引起感染的最佳选择。结论肠球菌已成为引起临床感染的重要致病菌,它的天然耐药和多重耐药的特性使得临床可选治疗药物范围狭窄。应防止耐万古霉素肠球菌株的产生。     

细菌对利奈唑胺的耐药机制及检测方法研究进展

利奈唑胺是一种重要的噁唑烷酮类药物, 对临床上具重要意义的革兰阳性菌, 包括多重耐药葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌等有抗菌作用。目前虽然细菌耐利奈唑胺的情况并不严重, 但临床耐药株的出现值得关注。本文综述了细菌对利奈唑胺的耐药机制及检测方法。其耐药机制主要由细菌单个碱基突变和甲基转移酶的产生所介导, 还有一些耐药机制尚不明了。检测方法主要有微生物学和分子生物学方法, 部分方法尚需进一步完善。     

临床分离肠球菌的分布特征及耐药性分析

目的:了解我院临床分离肠球菌的分布特征及耐药现状,为临床合理用药提供依据。方法:对我院2010年1月至2012年12月期间所有临床分离的肠球菌分布情况及药敏结果进行回顾性分析。结果:临床共分离肠球菌242株,粪肠球菌分离率(55.0%)高于屎肠球菌(40.9%),屎肠球菌分离率有增高的趋势。标本来源以尿液(62.9%)、分泌物(10.3%)、血液(6.9%)为主。肠球菌对万古霉素、替考拉宁的敏感性最高,均高于90%。发现耐万古霉素的肠球菌(VRE)7株,其中5株同时耐高浓度的氨基糖苷类抗生素(HLAR);对克林霉素、复方磺胺、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、苯唑西林耐、头孢西丁耐药率最高,均高于95%。屎肠球菌对青霉素类、氨苄西林、红霉素、呋喃妥因、环丙沙星耐药率均高于粪肠球菌;对四环素、奎努普丁/达福普汀耐药率低于粪肠球菌。结论:肠球菌是临床感染重要病原菌,且具有多重耐药性,屎肠球菌和粪肠球菌耐药水平差异较大,临床应根据药敏结果合理选择抗菌药物。     

检出一株含插入片段的VanD型耐万古霉素肠球菌

糖肽类抗生素(如万古霉素)的抗菌活性是通过与肽聚糖前体末端的D-Ala-D-Ala结合,从而抑制革兰阳性菌细胞壁合成.耐万古霉素肠球菌(VRE)因为细胞壁前体D-Ala-D-Ala被D-Ala-D-Lac或D-Ala-D-Ser取代,使其与糖肽类抗生素亲和力下降而产生耐药.     

临床分离肠球菌的分布特点及耐药性变迁

目的分析临床分离肠球菌的分布特点及耐药性变迁,为临床合理应用抗生素提供依据。方法从中国医科大学附属盛京医院门诊和住院病人采集血液、尿液、手术切口分泌物、腹腔引流液等标本,应用法国生物梅里埃API细菌鉴定系统进行细菌的分离和种属鉴定,用K-B纸片琼脂扩散方法对不同肠球菌做药物敏感试验。结果肠球菌属的数量占全部分离到细菌种类的第6位。其中屎肠球菌的构成比,2002年为30.9%,2006年上升到71.6%,超过粪肠球菌的比例。肠球菌主要分布于ICU、普通外科、呼吸内科、肾内科、干诊、感染科和新生儿科病房。粪肠球菌对青霉素、氨苄西林和呋喃妥因的耐药率分别从2002年的53.6%、38.5%和30.4%下降到2006年的4.5%、0和4.5%,屎肠球菌对氯霉素的耐药率从2002年的37.1%下降到2006年的14.3%,两种菌对万古霉素和替考拉宁的敏感性均高,但临床出现耐万古霉素和耐替考拉宁的肠球菌。结论中国医科大学附属盛京医院临床肠球菌出现新的分布特点,屎肠球菌比例有增加趋势。调查肠球菌尤其是屎肠球菌感染的危险因素和采取相应的防治措施是当前研究的重要课题。     

重症监护病房肠球菌感染及耐药性分析

目的了解肠球菌在重症监护病房的感染状况及耐药现状,指导临床合理用药。方法从重症监护病房送检的各类标本中分离到的316株肠球菌,采用VITEK-AMS微生物自动分析仪进行鉴定和药敏试验。结果316株中以粪肠球菌(54.8%)及屎肠球菌(43.0%)为主,屎肠球菌对β-内酰胺类抗生素的耐药率明显高于粪肠球菌,但粪肠球菌对喹奴普汀/达福普汀的耐药率明显高于屎肠球菌(P<0.01)。粪肠球菌对万古霉素耐药率为3.7%,力奈唑烷耐药率为0.7%,屎肠球菌对万古霉素耐药率为0.6%,力奈唑烷耐药率为0%。结论肠球菌为重症监护病房感染的主要致病菌,万古霉素合理正确的使用仍是当前治疗肠球菌感染的重要途径,VRE的出现对临床合理使用抗生素提出了更高的要求。     

医院血流感染病原菌分布及耐药性分析

目的了解医院血流感染病原菌的分布及其耐药性,为临床治疗提供参考。方法收集2013年1月至12月浙江中医药大学附属第一医院患者血培养标本,采用WHONET 5.6软件对所分离的病原菌及药敏结果进行统计分析。结果 2 017份血培养标本共检出病原菌370株,阳性率为18.34%,其中革兰阳性菌142株占38.38%,革兰阴性菌213株占57.57%,真菌15株,占4.05%。排名前5位病原菌依次是凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、肠球菌属和金黄色葡萄球菌,分别占19.73%、17.03%、13.51%、6.22%和4.59%。除哌拉西林/他唑巴坦对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌仍保持较高的抗菌活性外,革兰阴性菌尤其是肺炎克雷伯菌对多种药物均产生了严重耐药性,其中产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别占46.80%和20.00%。革兰阳性菌对利奈唑胺100%敏感,检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)4株,占25.00%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNs)占92.00%,耐万古霉素的表皮葡萄球菌1株和耐万古霉素的粪肠球菌3株。结论血流感染病原菌分布复杂,以革兰阴性菌为主,耐药率高,且已出现耐万古霉素的表皮葡萄球菌和粪肠球菌,因此,进行早期监测和耐药性分析非常必要,对控制感染、指导合理使用抗菌药物,减缓耐药菌株的出现具有重要的临床意义。     

耐万古霉素肠球菌与 定植肠球菌的致病基因检测

目的通过对耐万古霉素肠球菌(Vancomycin-resistant Enterococci,VRE)及分离非耐万古霉素肠球菌(Vancomycin-sensitive Enterococci,VSE)致病基因的筛查,了解致病基因分布情况,探索肠球菌致病机制,为日后致病机制的研究提供基线资料。方法收集浙江省人民医院的部分临床患者标本中分离出的VRE,与ICU采集的患者肛周和手臂标本分离的肠球菌属细菌。以PCR方法筛查出ace、asa1、cylA、efaA、esp、gelE和hyl七种致病基因。结果 VRE组esp总体阳性率最高,约占71.4%,其中屎肠球菌中esp最高,约占73.5%,其致病基因携带谱以"esp-hyl"基因组合为主;粪肠球菌全部菌株均携带efaA基因,其致病基因均为三种以上基因组合,以"esp-cyl A-gelE-asa1-efaA"多见。VSE组总体阳性率同样esp最高,约占40.0%;其中屎肠球菌以esp、hyl单个基因携带为主;粪肠球菌以"esp-ace-cylA-gelE-asa1-efaA"最多见。结论两种肠球菌各种致病基因携带率差异较大,两种肠球菌致病机制存在差异,本地区致病基因发挥作用的以esp、hyl为主。     

重症监护病房细菌分布及耐药性分析

目的分析永康市第一人民医院重症监护病房(ICU)感染细菌的分布及其耐药性,指导合理使用抗菌药物。方法对该院2004年1月至2005年12月感染部位标本中分离的主要细菌,采用美国Dade Behring Microscan Walkaway40全自动细菌鉴定,及其药敏测试仪及其配套药敏鉴定板测定MIC值。Microsoft Excel统计和χ2检验。结果ICU主要细菌分别是G-杆菌,前6位依次为鲍曼/溶血不动杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽黄单胞菌。G 球菌前4位依次为金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌。6种G-杆菌除嗜麦芽黄单胞菌天然耐亚胺硫霉素外,鲍曼/溶血不动杆菌对包括亚胺硫霉素在内的抗菌药物耐药率均超过50%,其它4种细菌对亚胺硫霉素的耐药率均较低。此外,肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药性相仿,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁和阿米卡星耐药率尚低,耐药率为8.3%-25.5%;铜绿假单胞菌对氨基糖苷类、头孢吡肟、环丙沙星的耐药率尚低,耐药率为10.5%-25.0%;阴沟肠杆菌对阿米卡星的耐药率尚低36.4%;嗜麦芽黄单胞菌对SMZco的耐药率最低为14.3%。4种G 球菌对万古霉素最敏感,金黄色葡萄球菌未检到耐万古霉素菌株。表皮葡萄球菌和屎肠球菌对万古霉素的耐药率为3.7%-5.3%,其次除屎肠球菌外,其它3种G 球菌对利福平的耐药率也还较低,为5.3%-9.5%。屎肠球菌对四环素的耐药率尚低为33.3%。不同的细菌耐药率不同,与其耐药机制有关。结论多重高耐药性是ICU感染菌的重要特征,加强ICU感染菌监测,对预防和控制ICU的医院感染有重要现实意义。     

葡萄球菌下呼吸道感染的细菌学分类及抗生素敏感性分析

目的：探讨葡萄球菌下呼吸道感染的细菌学分类情况及抗生素耐药性特点。方法：利用复星公司FOUTUNE IMS细菌鉴定药敏分析系统,凝固酶试验用试管法。结果：47株菌株分离到6种葡萄球菌,排在前3位的是施氏葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、木糖葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌占29．8％。耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）占78．7％,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）占凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）78．8％;MRS对万古霉素敏感率为81．1％。MRS建议用药依次为万古霉素、呋喃妥因、氯霉素、四环素和喹诺酮类,未发现对万古霉素耐药的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。结论：凝固酶阴性、耐甲氧西林葡萄球菌成为下呼吸道球菌感染的主要菌株,MRS比例上升,MRS治疗首选万古霉素。     

耐万古霉素肠球菌的耐药机制研究

肠球菌是致病性低的革兰阳性人体正常菌群,具有先天耐药性,也容易被诱导产生新的耐药性,在过去十年中,临床上出现了耐万古霉素的肠球菌,常引起致死感染,治疗极为困难.本文就其耐药机制、起源、危险因素、治疗和预防方面作一综述,有利于临床工作者对VRE的感染进行预防和控制.     

耐万古霉毒肠球菌的耐药机制研究

肠球菌是致病性低的革兰阳性人体正常菌群,具有先天耐药性,也容易被诱导产生新的耐药性,在过去十年中,临床上出现了耐万古霉素的肠球菌,常引起致死感染,治疗极为困难。本文就其耐药机制,起源,危险因素,治疗和预防方面作一综述,有利于临床工作者对VRE的感染进行预防和控制。     

肠球菌属细菌的临床分布与耐药性分析

目的了解2012-2017年临床分离肠球菌的分布特征及耐药性,为临床合理用药提供依据。方法采用全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验,对肠球菌的临床分布与耐药情况进行统计分析。结果共分离出1 432株肠球菌,其中粪肠球菌为603株(42.11%),屎肠球菌为596株(41.62%)。肠球菌属细菌标本来源以尿液、胆汁和全血为主,分别占39.66%、34.50%和11.59%,其中粪肠球菌主要来自普外科、泌尿外科和ICU,而屎肠球菌主要来自ICU、普外科和消化内科。肠球菌总体对红霉素的耐药率最高(67.81%),其次为四环素(47.49%)、环丙沙星(47.00%)和左旋氧氟沙星(46.44%),对利奈唑胺和万古霉素的耐药率较低,分别为4.89%和1.19%。粪肠球菌对奎奴普丁/达福普汀、四环素的耐药率分别为83.91%和64.01%,明显高于屎肠球菌(均P0.05)。屎肠球菌对红霉素、青霉素G、氨苄西林、喹诺酮类的耐药率均超过85.00%,且均高于粪肠球菌(均P0.05)。粪肠球菌和屎肠球菌对利奈唑胺的耐药率分别为6.80%和2.18%,对万古霉素的耐药率分别为0.66%和0.67%。结论肠球菌感染病原菌以粪肠球菌和屎肠球菌为主,肠球菌属细菌对万古霉素和利奈唑胺仍然保持较高的敏感性,不同种的肠球菌其耐药性差异显著。