双歧杆菌脂磷壁酸对B16荷瘤小鼠NK细胞受体NKG2D及其配体的影响

目的探讨双歧杆菌脂磷壁酸（LTA）对黑色素瘤B16荷瘤小鼠NK细胞受体NKG2D及其配体的影响。方法将黑色素瘤B16细胞接种于C57BL／6小鼠皮下,待触及肿块后于荷瘤小鼠皮下注射双歧杆菌LTA。采用MTT、流式细胞术（FCM）、RT-PCR方法分别检测经双歧杆菌LTA处理后B16荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性、NK细胞NKG2D受体蛋白表达以及肿瘤组织内Rae-1、H60 mRNA表达的变化。结果与对照组相比,经双歧杆菌LTA处理后,B16荷瘤小鼠的NK细胞杀伤活性增强（P〈0．05）,NK细胞受体NKG2D表达明显增加（P〈0．05）,肿瘤组织Rae-1、H60 mRNA表达上升（P〈0．05）,并具有浓度依赖性。结论双歧杆菌LTA能够增强B16荷瘤小鼠NK细胞的杀伤活性,其机制可能与上调NK细胞受体NKG2D的蛋白表达和肿瘤组织Rae-1、H60 mRNA的表达有关。     

小鼠自然杀伤细胞在病毒感染应答中受调节性T细胞的调节和许可

自然杀伤细胞（NK细胞）根据其结合自身主要组织相容性复合物（MHC）限制的能力可具有不同的功能。该研究在体内确认了同源造血干细胞移植（HSCT ）或调节性T细胞（Treg细胞）缺失后,NK细胞亚群对抗小鼠巨细胞病毒反应许可的不同生理效应。造血干细胞移植后,许可NK细胞缺失导致在感染早期感染的靶器官病毒载量远远大于未缺失和缺失未许可NK细胞的小鼠。在未缺失许可NK细胞的小鼠接受造血干细胞移植和Treg细胞删除并感染后,C型凝集素样活化受体Ly49H阳性的许可NK细胞优先扩展,并能增加γ干扰素（IFN-γ）生产。与移植总NK细胞群或未许可NK细胞群相比,许可NK细胞亚群移植到免疫缺陷宿主对小鼠巨细胞病毒感染具有更高的抵抗力。在非造血干细胞移植小鼠中,只有同时Treg细胞缺失或中和转化生长因子β（TGF-β）才能检测到许可NK细胞的效应。表明该许可NK细胞是对巨细胞病毒感染初始和快速响应的NK细胞,且由Treg细胞和TGF-β调节。     

生物肽SP对NK细胞NKG2D/NKG2A受体表达的影响

选择NK92-MI细胞为研究体系,研究SP对NK细胞的杀伤活性及功能性受体NKG2D/NKG2A表达的影响,以探讨SP对NK细胞功能的调节作用机制。采用MTT法测定NK92-MI细胞对K562细胞的杀伤活性;采用Real-Time PCR和流式细胞术检测NK92-MI细胞活化性受体NKG2D和抑制性受体NKG2A的基因表达和膜表达。10-14～10-8 mol/L的SP在体外可明显增强NK92-MI细胞的杀伤活性。该浓度范围的SP均可上调NKG2D/NKG2A的mRNA水平;10-14～10-8 mol/L的SP均上调NKG2D/NKG2A的膜表达,较低浓度（10-14 mol/L）的SP仅使NKG2D表达上调,而NKG2A表达无明显变化;SP刺激NKG2D膜表达增加的程度高于NKG2A。生物肽SP调节NK细胞功能性受体NKG2D/NKG2A的表达,可能是SP增强NK细胞杀伤活性的一种原因。     

黄芪含药血清对NK细胞活性及KLRK1 表达的影响

目的：探讨黄芪含药血清对自然杀伤（NK）细胞活性及杀伤细胞凝集素样受体K1（KLRK1）表达的影响。方法：SD大鼠灌胃 不同剂量的黄芪水煎剂制备黄芪含药血清。NK92MI细胞与不同剂量黄芪含药血清及对照血清孵育12 h后,采用乳酸脱氢酶释 放测定法检测NK 细胞对靶细胞YAC-1 的杀伤活性,采用qPCR和western blot 检测KLRK1 mRNA 和蛋白表达。结果：不同浓度 黄芪含药血清刺激12 h后NK 细胞杀伤活性明显增强,KLRK1 表达显著升高。结论：黄芪含药血清能活化NK 细胞,其机制可能 与其激活KLRK1 有关。     

黄芪含药血清对NK细胞活性及KLRK1表达的影响

目的：探讨黄芪含药血清对自然杀伤（NK）细胞活性及杀伤细胞凝集素样受体K1（KLRK1）表达的影响。方法：SD大鼠灌胃不同剂量的黄芪水煎剂制备黄芪含药血清。NK92MI细胞与不同剂量黄芪含药血清及对照血清孵育12h后,采用乳酸脱氢酶释放测定法检测NK细胞对靶细胞YAC-1的杀伤活性,采用qPCR和western blot检测KLRK1 mRNA和蛋白表达。结果：不同浓度黄芪含药血清刺激12h后NK细胞杀伤活性明显增强,KLRK1表达显著升高。结论：黄芪含药血清能活化NK细胞,其机制可能与其激活KLRK1有关。     

肿瘤对自然杀伤细胞的杀伤敏感性研究

自然杀伤细胞（NK细胞）是机体抗肿瘤的第一道防线,是机体天然免疫的主要承担者,也是获得性细胞免疫的核心调节细胞。NK细胞对肿瘤的杀伤活性与其细胞表面受体和肿瘤细胞表面的配体密切相关,由于肿瘤细胞表面配体表达不同致使对NK细胞杀伤的敏感性有很大差异,临床疗效不一。我们简要介绍了影响肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性的机制,对目前提高肿瘤细胞敏感性的策略和方法进行了总结。     

鼻NK／T细胞淋巴瘤间质清道夫受体A的表达及意义

目的 观察清道夫受体A（scavenger receprorA,SR-A）在鼻NK／T细胞淋巴瘤间质中的表达,探讨其意义。方法 对鼻NK／T细胞淋巴瘤,鼻B细胞淋巴瘤以及鼻部炎症的石蜡标本进行HE染色和SP免疫组织化学染色检测SR-A的表达。结果 SR-A蛋白在鼻NK／T细胞淋巴瘤,鼻B细胞淋巴瘤和鼻部炎症中阳性率分别为92．7％,29．2％和6．25%。统计学分析发现,鼻NK／T细胞淋巴瘤中SR-A的表达与B细胞淋巴瘤和炎症中SR-A的表达均有显著差异（P〈0．001）。结论 SR-A可能在鼻NK／T细胞淋巴瘤的诊断及鉴别诊断中有一定的参考价值。     

NK细胞和NKT细胞发育的转录调控

自然杀伤（natural killer,NK）细胞和自然杀伤T（natural killer T,NKT）细胞是参与机体抗病毒免疫和肿瘤免疫的两群淋巴细胞亚群,是介导先天性免疫（innate immunity）应答和调节适应性免疫（adaptive immunity）应答的重要效应细胞。近年来,随着对NK细胞和NKT细胞及其转录调控因子研究的不断深入,NK细胞和NKT细胞的发育机制逐步被阐明,这将为提高NK细胞和NKT细胞的抗病毒和肿瘤免疫疗效提供新的策略。     

自然杀伤细胞受体及其配体表达的转录和表观遗传调控

自然杀伤(natural killer cell,NK)细胞受体及其配体在NK细胞发挥抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用中起重要作用.NK细胞功能的发挥取决于NK细胞受体及其配体的表达水平和其所传递信号的综合.病毒、肿瘤和热休克等刺激可以通过激活相应的转录调节因子,提高启动子活性而上调NKG2家族受体及其配体的表达,而启动子区DNA的甲基化状态、组蛋白的乙酰化和甲基化等表观遗传调控,在NK细胞受体及其配体的表达方面亦起重要作用,并决定NK细胞受体的克隆性分布.深入探讨NK细胞受体及其配体的表达调控机制,将为提高NK.细胞抗肿瘤和抗感染疗效提供新的策略.     

人类NK细胞活化受体的研究进展

近年来,因为一大批活化和抑制性受体在功能和分子水平上得到阐明,使我们对NK细胞尤其是其表面表达的分子有了较为深入的了解。一方面,NK细胞表达HLA-I类分子特异的抑制性受体,由于宿主自身组织细胞表面HLA-I类分子表达正常而使杀伤抑制性受体介导产生的作用占主导地位,因此能使正常细胞免受NK细胞的杀伤;而另一方面,不同的活化受体参与NK细胞介导的细胞毒作用,他们参与人类NK细胞杀伤HLA-I类分子表达减少或缺失的靶细胞。本文主要就NK细胞的活化受体和协同活化受体以及它们的配体作一综述。     

NKG2A的生物学特性与临床应用

NKG2A是主要表达于自然杀伤(natural killer, NK)细胞表面的抑制性受体,与NK细胞表面的激活性受体相互竞争,从而调控NK细胞的活性.近年来,抑制NKG2A免疫检查点可以恢复NK细胞活性从而杀伤肿瘤细胞,使得NKG2A成为抗肿瘤治疗的焦点之一.然而诸多研究发现,NKG2A还参与病毒感染、自身免疫等疾病...     

NK细胞与HIV/SIV感染相关性的研究进展

NK细胞作为天然免疫系统的重要组成部分,其在HIV/SIV感染后的免疫机制及如何发挥抗病毒作用成为近几年艾滋病研究的热点之一。研究中发现,伴随HIV/SIV的感染,NK细胞亚群比例发生改变同时伴有功能缺陷,这种变化与HIV/SIV慢性感染阶段病毒复制水平有显著相关性。并且由于归巢受体表达的改变引起NK细胞在HIV/SIV感染者体内不同组织间的重新分布。NK细胞表面的受体KIR3DL1和KIR3DS也表现出对HIV感染的抵抗作用。这些发现为我们进一步研究NK细胞的抗HIV/SIV病毒感染的免疫机制提供了新的思路和方向。     

丙肝病毒进入的潜在受体及其生物学作用

已确定是假定丙肝病毒（HCV）受体的细胞分子有：CD81蛋白跨膜蛋白、清道夫受体B类Ⅰ型（SR—BI）、甘露糖结合凝集素DC—SIGN和L—SIGN、低密度脂蛋白受体、乙酰肝素蛋白多糖和唾液酸受体。由于在细胞培养基中复制丙肝病毒的困难,因此这些分子大部分是通过分析它们与HCV糖蛋白E2可溶缩短形式之间的相互作用被确定的。近来研究HCV进入的主要步骤是发展假颗粒（HCVpp）,即：把未经修饰的HCV包膜糖蛋白组装到逆转录病毒核心颗粒上。这一方法可对候选受体在HCV复制周期早期步骤中的作用进行研究,所获得的数据现在能够借助新近发展的允许HCV有效扩增的细胞培养系统（HCVcc）被确认。     

自然杀伤细胞对妊娠期糖尿病患者并发高脂血症的影响

目的：观察自然杀伤细胞（NK 细胞）对妊娠期糖尿病患者并发高脂血症的影响。方法：选择2013 年2月至2015 年4 月在我 院确诊的妊娠期糖尿病高脂血症患者95 例,作为研究组,同期选择体检健康孕妇100 例,作为对照组,对比两组的血糖、糖化血 红蛋白、身体质量指数（BMI）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、白 细胞介素-2（IL-2）、IL-6、干扰素-r（IFN-r）、NK 细胞及细胞亚型,并采用Person相关性分析NK细胞与血脂的相关性。结果：①研 究组空腹血糖、餐后2 h 血糖、糖化血红蛋白、BMI均明显高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）;②研究组TC、TG、LDL-C 均明显高于对照组,HDL-C明显低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）;③研究组IL-2、IFN-r明显低于对照组,差异具有统 计学意义（P<0.05）;IL-6 明显高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）;④研究组的NK 细胞数量、CD4+/ CD3+、CD4+/ CD8+、 CD56++CD4+/ CD3+均低于对照组的（P<0.05）;CD8+/ CD3+、CD18+/ CD8+、CD19+/ CD3+均高于对照组的（P<0.05）;两组CD28+/ CD8+差异无统计学意义（P＞0.05）。⑤NK 细胞数量与TC、TG、LDL-C水平均呈负相关（r=-0.527、-0.598、-0.485）,NK 细胞数量与 HDL-C 水平呈正相关（r=0.528）。结论：NK 细胞在妊娠期糖尿病孕妇中数量减少,活性也降低,可能与参与免疫反应的NK细胞 不同表型细胞含量发生变化,导致血脂调节失衡,引发高血脂症的过程有关。     

自然杀伤T细胞的研究进展

自然杀伤T细胞(NKT)是一类具有NK受体和T细胞受体且显示NK细胞和T细胞两方面性质的淋巴细胞.因其表型和功能与T细胞,B细胞和NK细胞等免疫细胞有所不同,近年来颇受关注.NKT细胞具有高度保守的TCR表型(TCRVα24/β11-人),同时共表达NK细胞特有标志CD161.NKT细胞识别由CD1d分子提呈的特异糖脂分子,并能够分泌大量细胞因子,参与机体的先天性免疫和获得性免疫反应.研究发现,NKT细胞在抗感染,抗肿瘤,以及抑制自身免疫性疾病(如:肥胖型糖尿病,再生障碍性贫血等)的发生中发挥着重要作用.本文将对有关NKT细胞特征和功能的研究现状,以及存在的问题作一综述.     

杀伤细胞抑制性受体P58分子的结构与功能

P58分子是存在于自然杀伤细胞（NK）和部分T细胞的跨膜受体,属免疫球蛋白（Ig）样杀伤细胞抑制性受体（KIR）家族成员,具有复杂的结构多态性和精细的配体特异性。P58的配体为靶细胞膜上的HLA－C分子,两者结合后启动P58细胞内段的免疫抑制基序（ITIM）中的酷氨酸磷酸化,磷酸化的ITIM可与激活信号传导所必须的含SH2结构的磷酸酶偶联,从而抑制免疫激活信号的细胞内传导,抑制杀伤细胞对靶细胞的杀伤活性。P58介导信号是杀伤细胞区分“异己”和外周免疫耐受形成的重要机制。与造血干细胞移植后的移植物抗宿主病（GVHD）密切相关。     

乙酰胆碱对自然杀伤细胞活性的影响

目的:观察乙酰胆碱(ACh)对自然杀伤(NK)细胞活性的影响,并初步探讨其作用的受体机制.方法:根据不同的实验目的,选择ACh、胆碱能受体激动剂和拮抗剂分别作用于NK细胞,以乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)自然释放法检测不同实验条件下NK细胞杀伤肿瘤靶细胞(Yac)的活性.结果:ACh、M受体激动剂毛果芸香碱和N受体激动剂烟碱在10-10～10-6mol/L浓度范围内都能显著抑制NK细胞杀伤肿瘤细胞的活性.M受体拮抗剂阿托品(10-8和10-7mol/L)能完全阻断同浓度ACh抑制NK细胞活性的作用;但N受体拮抗剂筒箭毒碱(10-8和10-7mol/L)不能阻断同浓度ACh抑制NK细胞活性的作用.结论:ACh可抑制NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,此作用主要由淋巴细胞上的M受体和N1受体介导.     

NK细胞生物特性及抗肿瘤治疗研究进展

自然杀伤(natural killer, NK)细胞是体内的关键先天淋巴细胞,具有抗肿瘤和抗感染等功能。与适应性免疫细胞不同, NK细胞缺乏特异性抗原受体,在发育、分化和激活方面具有明显的生物学特性。NK细胞与多种疾病(包括癌症和感染性疾病)的发生和发展相关。目前,主动修复肿瘤患者NK细胞功能缺陷或被动输入高活性NK细胞已成为基于NK细胞的治疗的两种主要策略。前者包括NK细胞免疫检查点抑制剂、细胞因子激活剂和特异性NK细胞活化性受体衔接器等方法;后者则包括同种异体NK细胞和嵌合抗原受体修饰的NK(chimeric antigen receptor engineered NK, CARNK)细胞治疗等。该文将介绍NK细胞的生物学特性以及近期在基于NK细胞的生物治疗方面的一些新进展。     

鼻咽癌组织ki67表达与外周血NK细胞的关系及意义

目的：研究鼻咽癌组织Ki67的表达及外周血NK细胞水平的意义。方法：检测66例鼻咽癌组织Ki67水平及与外周血NK细胞的百分含量。结果：Ki67表达阳性率为96．97％,与临床分期有关（r=0．290,P=0．030〈0．05）,与淋巴结转移状态相关性在统计学上无意义（r=0．068,P=0．412〉0．05）;放疗前中后鼻咽癌外周NK细胞水平差别均有统计学意义（前中、中后、前后F=0．513,0．627,0．623,P分别为0．005,0．004,0．000,均〈0．05）;ki67的表达与放疗后NK细胞NK值负相关（r=-0．433,P=0．017〈0．05）。结论：Ki67的表达可能与临床分期有关,可能与放疗后NK值有关;Ki67表达与外周血NK细胞水平可以提示鼻咽癌组织增殖活跃程度和机体防御系统的状态.     

总状蕨藻盾叶变种多糖及其硒化产物对小鼠T细胞和NK细胞的调节

一种分离自总状蕨藻盾叶变种的多糖CrvpPS与纳米硒反应之后形成稳定的多糖纳米硒（CrvpPS-nano—Se）系统．实验检测了CrvpPS和CrvpPS—nano-Se对小鼠T淋巴细胞亚群及NK细胞的调节功能．用氢化可的松制造免疫功能低下的小鼠动物模型,给模型小鼠分别连续10天灌胃CrvpPS、蔗糖-纳米硒、CrvpPS—nano-Se溶液和阳性对照药物左旋咪唑,检测脾脏和胸腺指数的变化,并用流式细胞仪检测血中T细胞亚群（CD3^＋,CD4^＋,CD8^＋）和脾脏NK细胞百分比．结果表明,CrvpPS和CrvpPS-nano-Se对胸腺有较大的刺激作用,能使模型小鼠的CD3^＋,CD3^＋CD4^＋,NK细胞百分比以及CD4^＋／CD8^＋明显升高（P〈0．05）,CrvpPS-nano—Se提升CD3^＋,CD3^＋CD4^＋细胞百分比的作用明显优于CrvpPS、蔗糖-纳米硒及左旋咪唑（P〈0．05）．表明CrvpPS对免疫功能低下小鼠的胸腺指数、T细胞亚群和NK细胞百分比具有正向调节作用;其硒化产物CrvpPS-nano-Se对CD3^＋,CD3^＋CD4^＋细胞的调节作用优于单纯多糖和单纯纳米硒．