几种微量测定蛋白质新方法的比较

蛋白质的微量定量测定法至今最广为使用的是Lowry改进的Folin酚法。但是Lowry法的操作较为麻烦,灵敏度有时也达不到要求,因此在最近的十年,许多研究者仍在继续寻找更为合用的新方法。我们在参考国外文献的基础上,有选择地建立了几种微量测定蛋白的新方法,并对它们的优缺点和适用范围加以比较。现将主要结果介绍如下。材料和方法一、Lowry法配制含有下列成分的混合溶液。(A)Na_2Wo_4·2H_2O 100克、NaMo_4·2H_2O 25克,加     

基于整树称重法的Granier经验公式对毛白杨树干液流测定的适用性

为了评估Granier经验公式在树干液流测定中的适用性,以毛白杨为对象,利用热扩散式探针法(TDP)测定树木的液流速率,以整树称重法进行同步测定,对比分析Granier经验公式在毛白杨树干液流测定中是否存在误差,并对整树称重法测定的蒸腾速率与热扩散法测定的温差系数K进行幂指数回归拟合,建立校正的Granier公式。结果表明:与整树称重法测定的蒸腾速率相比,通过Granier经验公式计算的液流速率低估了67.7%;建立了毛白杨的Granier校正公式F_d=0.0135K^0.6952(R²=0.77),校正后Granier公式的计算结果与整树称重法测定的蒸腾速率相比仅降低了3.4%,具有较好的一致性。因此,采用Granier经验公式计算毛白杨树干液流速率需进行校正。     

蓖麻蚕、粘虫及玉米螟血淋巴若干生理指标的测定

一、前言 围绕着农业生产中存在的问题,国内就几种主要的经济昆虫,开展了较为全面系统的研究工作。但是对于它们的一些正常生理指标,国内外尚缺乏报导。本文以蓖麻蚕、粘虫和玉米螟为材料,对其血淋巴的有关生理指标——比重、总量、渗透压、血细胞数目及血细胞组成进行测定,作为进一步探讨其生理机能,及实验对比工作的基础资料。 二、材料和方法 蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricinia)和粘虫(Psei-daletia separata)皆为室内饲养的个体。蓖麻蚕以蓖麻叶为饲料,生长达五龄时取用;粘虫以玉米叶为饲料,取六龄幼虫供试;玉米螟(Pyrausta nubelalis)于9月中旬采自田间的玉米植株,为即将准备越冬的老龄幼虫。所用试虫事先皆经称重,选取体重相似的个体,以10—30个为一组,分别进行各指标的测定。 血淋巴比重的测定,采用Lowry等(1945)的梯度     

液体闪烁计数器用于蛋白质Lowry比色法

蛋白质Lowry比色测定是生物学研究中应用最广的方法。不言而喻,比色须在比色计上完成。然而,苏格兰Hannah研究所的Noble等成功地把液体闪烁计数器用于蛋白质Lowry比色定量测定。基本原理是:放射性标准源产生的光子被有色蛋白质溶液淬灭,淬灭程度与蛋白质浓度成正比,制备计数率对蛋白质浓度标准校正曲线,即可进行蛋白质定量测定。方法很简单。用低钾玻璃管制成长42毫米、内径10毫米、体积4毫升的小瓶(内杯),放入100微升(1×     

细胞颗粒平均外切直径与数密度的测算

本文提供了测算颗粒平均外切直径的实用方法,从而得到计算细胞颗粒数密度的新公式,式中N_V代表数密度,N_A为薄切片单位面积上被切割的颗粒数,δ为颗粒的比表面,γ为新确定的形状因子,J_d是校正因子,用以修正颗粒大小不均匀的影响。本方法适用于形状规则的亚微颗粒、细胞核以及细胞的切片图像分析。     

乳腺冷冻切片的优化

目的优化乳腺冷冻切片的关键条件,以期提高制片效率与切片质量。方法通过实验,分别比较不同取材大小、速冻方法、切片厚度等条件对乳腺冷冻切片质量的影响。结果乳腺冷冻切片取材大小以1cm×1cm×0.2cm至2cm×1.5cm×0.3cm为佳;预先制作"带垫"的托头有利于提高速冻效率、减少组织块崩裂、减少冰晶;切片厚度以5μm及6μm为佳。结论优化乳腺组织取材大小、速冻方法、切片厚度等条件,可显著提高乳腺冷冻切片的制片效率与切片质量,为术中病理诊断及手术方案的制定提供保障。     

微波快速石蜡切片技术及其在肾穿刺活检中的应用

肾穿刺活检技术推动了肾脏病理的迅速发展,使肾脏病理学整体知识不断更新和提高,为临床诊断和治疗提供了大量的依据.由于肾脏活检组织标本小、切片薄,在固定、脱水、透明、浸蜡、切片及染色等方面均与常规石蜡切片有所不同,其技术要求较高.肾穿刺石蜡切片时间较长,相对制约了急性肾功能衰竭、急进性肾炎、肾移植急性排斥反应等急重症的快速诊断.     

成熟玉米秆组织结构切片方法的比较研究

于玉米成熟期选择健壮茎秆的基部第三节间为材料,采用徒手切片法、冰冻切片法、石蜡切片法、薄切片法等4种方法,比较不同方法的玉米茎秆组织结构切片质量,为研究玉米茎秆结构与其倒伏的关系奠定技术基础。结果表明:徒手切片法是获得成熟玉米秆组织结构切片较为方便、快速的方法,切片面积较大,适合大范围观察统计;冰冻切片法是获得成熟玉米秆组织结构较快的方法,切片面积较小,适合小范围观察;薄切片是获得高质量成熟玉米秆组织结构切片的最好方法,但切片面积太小,适合高倍数显微观察和小范围电镜扫描观察组织结构;石蜡切片不适合作为成熟玉米秆的组织切片方法。研究认为,徒手切片法是最适合成熟玉米秆组织结构观察研究的制片方法。     

蛋白质定量方法的进展

本文在简要比较常用蛋白质定量方法的基础上,结合自己的工作,选择性地叙述了Lowry法、考马斯亮蓝G-250染料测定蛋白质的改进法。还介绍了银染色定量法和4-甲酸喹啉测定蛋白质含量的新方法。     

新型捞片器具在昆虫触角连续切片中的应用

【目的】透射电子显微镜技术在生物学研究中发挥着越来越深入广泛的作用,通过透射电镜技术获得生物组织连续切片,从而对其神经网络等延伸结构进行连续追踪及三维重构是非常迫切的科研诉求。但捞片方法的限制使得连续切片的获得困难重重,尤其是对于组织致密的昆虫外骨骼如昆虫触角而言,常因包埋剂浸透不够充分而导致聚合欠佳,增加了连续切片收集的难度。为解决捞取昆虫触角连续切片过程中的系列问题,获得完整、平整的触角连续切片,我们自行研制了一种适用于狭缝载网捞片的组合器具。【方法】用组合器具中的捞样器和放样台分别捞取及放置超薄切片。【结果】捞取的昆虫触角切片不会局部脱离树脂切片而产生不同程度的折叠,不会整片脱离树脂切片而滑落至树脂切片一侧,样品切片完整无破损、无皱褶,连续切片成条贴附在狭缝覆膜区。【结论】新型捞片器具为获得昆虫触角连续切片提供了有力支持。     

用于光学显微镜研究的塑料半薄切片

本文介绍了以环氧树脂为包埋介质的用于光学显微镜的塑料半薄切片的制备技术和部分实验结果。叙述了固定、脱水、渗透、包埋、聚合、切片、染色及封片各程序。作为对石蜡切片技术的补充和发展。塑料半薄切片能充分发挥光学显微镜的分辨能力,能观察到许多在石蜡切片上看不清或看不到的细胞内部结构,如:花粉的外粉壁,萌发孔;细胞的微核,液泡和液泡问的原生质丝等。可用同一包埋材料在半薄切片基础上进行超薄切片,所以半薄切片技术是一种把光学显微镜水平的研究和电子显微镜水平的研究联系在一起的一种过渡性技术。因此,它无论对植物学工作者或其它生物学工作者都是很有用的一项技术。     

植物胚胎学研究中石蜡切片的几种整体染色法

石蜡切片法应用于生物学的研究历史已久,至今仍为细胞学、组织学、胚胎学及组织化学等方面广泛应用的研究方法之一。我们在观察小麦和玉米的受精及胚胎发育过程中摸索出制作石蜡切片的三种整体染色方法,使常规石蜡切片法得到了简化并且效果良好。     

数字切片在组织胚胎学实验教学中的应用

传统的组织胚胎学实验课以观察玻璃切片为主,玻璃切片在实验教学使用中存在易褪色、不易永久保存和使用时受时间和空间限制等缺陷,利用全自动显微镜扫描系统将玻璃切片制作为数字切片,结合显微数码互动系统和校园网络系统应用于组织胚胎学实验教学,不仅能有效解决优质典型玻璃切片片源不足带来的教学问题,也有利于教师的备课讲解、学生的复习与讨论以及师生间的互动,推动了组织胚胎学实验教学和考试模式的改革。该文主要介绍组织胚胎学数字切片的特点、应用及发展前景。     

冰冻切片制作体会及常见问题

目的:探讨冰冻切片制作过程中的影响因素及改进措施,提高切片质量,确保实验结果科学性、稳定性及可靠性.方法:从标本的取材、制片以及固定等多个环节阐述冰冻切片常见问题.结果:通过调整切片机的相应设置并且在冰冻切片多个环节中采取了相应措施,使切片更完整,厚薄均匀,无脱片和冰晶空洞现象产生,切片质量优良.结论:制作出高质量的冰冻切片需在取材处理、切片、固定等诸多环节上精益求精,这对冰冻切片这一专业性很强的实验技术的质控有着重大意义.     

植物胚胎学研究中石蜡切片的几种整体染色法

石蜡切片法应用于生物学的研究历史已 久,至今仍为细胞学、组织学、胚胎学及组织化 学等方面广泛应用的研究方法之一。我们在观 察小麦和玉米的受精及胚胎发育过程中摸索出 制作石蜡切片的三种整体染色方法,使常规石 蜡切片法得到了简化并且效果良好。     

细胞体外生长的检测

植物细胞悬浮物生长测定需要取样、样品称重或测量.然而,植物细胞往往形成团聚体,这就使其难以获得匀质的样品.此方法劳动强度大,不准确且易受污染. 瑞士联邦工学院的M.Taya等人利用培养基的传导性变化研究了一个连续测定植物细胞生长的方法.干细胞质量与细胞悬浮物和“膜-底船式”培养物(咖啡、长春花、烟草和     

生物样品冷冻超薄切片技术简介

电子显微镜超薄切片技术的发展开拓了组织学和细胞学的显微和亚显微结构的研究。但由于常规超薄切片术采用强烈化学囿定,有机溶剂脱水和塑料包埋等步骤所带来的结构损伤和分子活性散失等缺点,人们在光学显微冷冻切片和常规超薄切片基础上,近年来发展了冷冻超薄切片制样技术。七十年代初期,商品冷冻超薄切片装置先后问世,进一步促进了这一技术的发展。     

有关半薄切片技术的几点改进

半薄切片技术是近几十年来才发展起来的一门新兴技术。它的优点是:能够更好地保存细胞成分和精细结构;切片厚度为0.3—2微米,染色程序简便,切片的清晰度高,可观察到细胞内较细微的结构。这种技术已广泛应用于细胞学、胚胎学和解剖学等研究领域。目前,有关半薄切片的染色方法已有详细报道,但对半薄切片的捞取、色度调整和刀痕的遮掩等国内还介绍不多。     

利用光盘制作植物临时切片的制取装置

针对普通徒手切片法存在的安全性低、操作难度高等不足,利用光盘等简单材料制作植物临时切片的制取装置,大大提高了实验的安全性,操作简单,切片效果良好,适合在中学生物学教学中推广。     

植物石蜡制片中透明和脱蜡技术的改良

石蜡切片是植物科学研究领域中一项重要的实验技术,为组织学的发展做出了卓越贡献。制片过程中采用不同试剂和处理程序对切片质量有较大的影响。该文针对常规石蜡切片方法在操作步骤上存在的繁琐及试剂安全性等问题,摸索出改进方法。实验结果表明,采用histolene(C1OH16)、环保透明剂van-clear、正丁醇(n-butanol)和松节油(oil of turpentine)代替二甲苯(xylene),可避免二甲苯的毒性危害;同时精简了传统石蜡切片的操作程序,缩短了实验周期并提高了制片质量。