评价植物悬浮细胞培养物两项测定指标的建立

An experiment on suspending rice cell cultures in sucrose solution and on optical density (OD) value in culture solution at 576 nm wave width was carried out, the result indicates that suspension rate (%) of suspensions, while suspending in 0.76 mol/L sucrose solution for 15 minutes at room temperature, can be employed as an judgment criterion of cell state. Suspending cell suspension in 0.76 mol/L sucrose solution is also a good approach on selecting cells from suspension cell mass, as a result, it is beneficial to establishing cell suspension. The browning of cell suspension is related to the necrosis degree of suspension cells. OD value of cell suspension liquid at 576 nm can be taken as a criterion with which the necrosis degree of cell suspension can be evaluated.     

紫茉莉悬浮细胞培养体系的建立

为建立紫茉莉(Mirabilis jalapa L.)悬浮细胞培养体系,以紫茉莉无菌苗叶片诱导的愈伤组织为材料,筛选紫茉莉悬浮细胞的适宜培养体系。结果表明,紫茉莉愈伤组织在MS+2,4-D 1 mg L-1+KT 0.5 mg L-1的液体培养基中悬浮继代培养3~4次,能得到稳定的悬浮细胞系。培养基的pH值为5.5~5.9,蔗糖浓度为30 g L-1更适合悬浮细胞的生长。紫茉莉悬浮细胞的生长曲线大致呈S型。最佳继代培养时间是10 d,培养液的体积为40 mL时,接种量为7.5 mL,可以较好地保持悬浮细胞系。1 L培养液中可提取分泌蛋白(0.42±0.15) g。这些有助于对悬浮细胞提取分泌蛋白的研究。     

植物悬浮细胞的研究进展

综述了植物悬浮细胞培养的原理、培养类型、不同植物悬浮细胞培养基的配方和培养方法.同时阐述了悬浮细胞系在细胞生物学和分子生物学领域中的应用前景.     

一个快速测定悬浮培养植物细胞生物量的方法的建立

以悬浮培养的玫瑰茄（Hibiscus sabdariffa)细胞为材料,分别探讨了胞外过氧化物酶活力与培养细胞生物量、胞外蛋白浓度与培养细胞生物量之间的相关关系。结果表明,胞外过氧化物酶与培养细胞生物量之间相关性较差,而胞外蛋白浓度与培养细胞生物量之间却具有高度相关性,因此通过胞外蛋白浓度的测量,可以对培养细胞的生物量作出快速的推算。     

半夏细胞悬浮培养中生理生化指标的测定

目的：了解半夏细胞悬浮培养中生理生化指标的变化以及它们之间的关系。方法：以半夏幼嫩叶片和叶柄为材料,诱导和筛选愈伤组织,在光照和黑暗条件下进行细胞悬浮培养。每3d取样,冰浴匀浆,于4℃、10000g离心20min,取上清液进行测定。结果：光照条件利于半夏悬浮细胞的生长,其最佳收获期为24d,细胞的生长曲线呈“S”形;在不同的条件下,其培养液pH都呈先上升后下降趋势;培养细胞中可溶性蛋白质和过氧化物酶的活性均出现两个峰值,但出现的时间不同;MDA(丙二醛)的含量先升高后下降随后又上升。结论：光照有利于半夏细胞的生长并且蛋白质含量和酶活性呈正相关性,MDA含量和细胞的生长、分化呈负相关性。     

新疆紫草细胞培养物的化学成分研究

从新疆紫草[Arnebia euchroma(Royle)Johnst.]的细胞培养物分离到5个萘醌类化合物,据其理化性质和光谱数据,分别鉴定为去氧紫草素(deoxyshikonin,Ⅰ)、β,β-二甲基丙烯酰紫草素(β,β-dimethylacrylshikonin,Ⅱ)、乙酰紫草素(acetylshikonin,Ⅲ)、2,3-二甲基戊烯酰紫草素(teracrylshikonin,Ⅳ)和β-羟基异戊酰紫草素(β-hydroxyisovaleryl-shikonin,Ⅴ)。细胞培养物不含从新疆紫草根中分得的紫草素(shikonin);各成分在细胞培养物中的含量与在新疆紫草根中的含量有很大差异。     

濒危植物珙桐愈伤组织的诱导及悬浮细胞培养初探

以珙桐（Davidia involucrate）无菌苗的下胚轴为外植体,以LSD分析和正交设计与分析为主要研究方法。诱导和筛选愈伤组织,进行悬浮培养,初步建立了珙桐悬浮培养体系,并对珙桐悬浮培养中生物量和pH值的变化进行了初步研究。结果表明：KT和2,4-D的组合诱导出的愈伤组织更适合进行细胞悬浮培养,最佳愈伤组织诱导培养基为WPM＋KT 1.0 mg/L＋2,4-D 0.5 mg/L＋Vc 1.0 mg/L;悬浮细胞培养中,接种量和Ca2＋浓度是影响生物量的主要因素,最佳接种量为25 g/L,最佳Ca2＋浓度为标准WPM培养基中Ca2＋浓度的2倍;黑暗条件下,珙桐悬浮培养生物量变化曲线呈＂S＂型,在21 d时可获得最大生物量;pH值的变化与生物量的变化有一定的相关性。     

草莓悬浮细胞系的建立及某些影响因素

草莓悬浮细胞系的生长受到激素浓度和细胞培养密度的调控.悬浮细胞系在继代5～9 d时,pH值显著升高,细胞增殖明显加快.建立了草莓栽培品种宝交早生、丰香和野生种新疆3号的悬浮细胞系.     

植物离体培养产生草珊瑚有效成分

报道了以草珊瑚外植体诱导愈伤组织的适宜培养基和各种植物激素在诱导及其生长培养中的调节作用。应用薄层层析（ＴＬＣ）和紫外光鉴定，证明所获得的愈伤组织具有合成与原植物材料相同的黄酮类、异嗪上以啶类、延胡索酸等有机酸的能力。亦通过愈伤组织无性系筛选过程，得到一个增长率和代谢物产量比愈伤组织母系高４倍左右的优良愈伤组织系。     

悬浮培养的谷子细胞的胚胎发生和植株再生(简报)

由谷子的胚性愈伤组织在附加2mg/l2,4-D和5%椰乳的UM液体培养基中建立了细胞悬浮培养,降低培养基中2,4-D的浓度,利于胚状体的形成。当液体培养中的细胞转移到MS琼脂培养基上后,通过改变激素的组成及浓度,可以促进胚性细胞团的增殖,进而再生出大量完整植株。这种通过形成胚状体而再生植株的能力,巳在该悬浮培养系中保持一年多,从由幼穗培养建立胚性愈伤组织开始,此细胞系的旺盛的再生能力至今巳保持了近三年。     

籼稻幼穗细胞悬浮培养物的胚胎发生和植株再生

籼稻幼穗诱导的愈伤组织,培养在MS基本成分并附加1—7 mg/l 2,4-D和5％椰子汁的液体培养基中,得到胚性小细胞团。这些细胞的特征是:形状小而圆,细胞壁薄,细胞内为稠密的胞质所充满,没有或具小的液泡,具淀粉粒。把它们转移到含1 mg/l BA的琼脂培养基中,在扫描电镜下观察到球形、心形、梨形和成熟胚,两周后萌发成具根、芽的完整植株。10—14天龄的悬浮培养物具有较高的再生植株能力。     

水稻悬浮细胞的超低温保存研究

本研究分析了水稻悬浮细胞的生理状态和各种冷冻前处理等因素对超低温保存后细胞存活率的影响。结果表明,继代后培养3—5天,处于对数生长期的细胞,采用二步冷冻法,超低温保存后存活率最高。电镜超微结构观察显示,0.5mol/L山梨醇预培养,10%DMSO 0.5mol/L山梨醇复合保护剂处理,液泡显著变小,数目明显减少,从而降低了细胞内自由水含量,增强细胞的抗冷冻能力。在上述合适的前处理和冷冻-化冻条件下,超低温保存水稻悬浮细胞的恢复生长率为58%,恢复生长的细胞转移到分化培养基上,可再生健壮绿苗, 移植到盆钵,在温室中长成正常结实的植株。     

用Ciprofloxacin去除传代细胞株中的支原体污染的研究

在应用细胞培养手段的生物学研究和生物工程产品中,支原体污染仍是一个非常棘手的问题。对Ｖｅｒｏ和ＳＰ２／０－Ａｇ１４等细胞,应用Ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ,１０μｇ／ｍｌ处理１４天,支原体检测全部转阴,经４个月的培养、传代、冻存、复苏,每次支原体检测均保持阴性。对去除了支原体的Ｖｅｒｏ和ＩＳＣ－１１６细胞株,测试了其生长特征和功能,均未见受影响。     

细胞培养物中的逆转录病毒检测

本文用非放射性法测定了K562,SP2/0,L-02,SPC-A-1,SMMC-7721和Hut-102等6个细胞培养液超离心沉淀物逆转录酶的含量,间接证明细胞培养物中逆转录病毒的存在。结果表明,Hut-102细胞为阳性,其它5个细胞系为阴性。     

真菌激发子对人参悬浮培养细胞的生长和人参皂甙生物合成的影响

真菌诱导子处理人参悬浮培养细胞后,人参皂甙的合成有明显增加,诱导处理改变人参皂甙的积累时程,促进人参细胞培养物中次生产物的外泌,同时增强细胞对蔗糖的摄取、吸收并引起细胞H~ 流的变化。     

桔青霉诱导子对红豆杉培养细胞中紫杉醇生物合成的影响

在红豆杉培养红胞中,桔青霉诱导子促进紫杉醇的合成。将培养６－７ｄ的桔青霉菌丝体的粗提物,以５０μｇ碳水化合物／ｍｌ培养液的浓度加入到处于指数生长期末期的红豆杉培养细胞中,诱导子促进紫杉醇合成的作用最大。高压灭菌处理２０－９０ｍｉｎ,不影响诱导子的活性。     

原生质体来源的大白菜悬浮细胞系的超低温保存

原生质体来源的大白菜 Brasstca campessris var.pekinsis 悬浮细胞系在二甲亚砜的保护下,能在液氮中(-196℃)长期冻存。加入山梨醇能增强保护作用;而加入甘露糖则降低保护作用。培养基对冻存也有明显的影响。在液氮中存放的时间长短对细胞存活率没有多大影响。冻后相对活性最高可达75.4％,恢复生长快,化冻后重新悬浮培养6天,生长量可达300-500％。遮光比不遮光对恢复更有利。冻存后恢复生长的悬浮细胞,能与未经冰冻的对照一样进行原生质体分离和培养。