视黄醇结合蛋白研究

人视黄醇结合蛋白 (ｒｅｔｉｎｏｌｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏ ｔｅｉｎ ,ＲＢＰ)由 1 84个氨基酸组成 ,分子量 2 1ｋｄ ,是单链、疏水小分子结合蛋白 ,属于脂肪酸结合蛋白家族成员。ＲＢＰ在肝脏中合成 ,释放入血后与视黄醇 (ＲＯＨ)、甲状腺素运载蛋白(ＴＴＲ)以 1∶1∶1的比例形成三元复合物 ,是体内运送视黄醇至其特定靶组织的运载蛋白[1] 。ＲＢＰ的ｍＲＮＡ在肝中的含量最高。ＲＢＰ只有受到视黄醇的刺激才分泌 ,视黄醇的缺乏会阻断细胞内合成的ＲＢＰ由内质网到高尔基体的转运 ,从而影响ＲＢＰ的分泌 ,而且分泌入血的ＲＢＰ量也受到视黄醇…     

视黄醇类结合蛋白的分类、结构及功能

视黄醇类结合蛋白(retinoids binding protein)是体内负责结合并转运维生素A的各种活性代谢物(视黄醇类)的一类蛋白质,主要包括血浆视黄醇结合蛋白(RBP)、胞内视黄醇结合蛋白(CRBP)、胞内视黄酸结合蛋白(CRABP)、胞内视黄醛结合蛋白(CRALBP)和光受体视黄醇类结合蛋白(IRBP)五大类。它们空间结构高度保守,分布广泛,功能多样,与多种疾病的发生发展关系密切。     

视黄醇结合蛋白的分子生物学

视黄醇结合蛋白 (RBP)是维生素A(VitA)的运载蛋白 ,结构上为疏水小分子结合蛋白家族的成员。视黄醇结合蛋白在肝脏中合成并释放入血液后 ,通过与视黄醇 (ROH)、甲状腺素运载蛋白 (TTR)及细胞表面受体相互作用 ,在VitA的储存、代谢、转运到周围靶器官中发挥重要功能。本文从基因结构与表达、构效关系及临床意义等方面介绍了视黄醇结合蛋白的分子生物学。     

视黄醇结合蛋白的分离纯化

在变性条件下,应用Sephacryl-100凝胶过滤和Source-30Q阴离子交换两步分离,实现了分离纯化性质不稳定、易于降解的视黄醇结合蛋白(RBP)之目的。最后经过分步缓慢复性,获得具有生物活性的RBP,为其单克隆抗体制备及最终应用于临床营养评价和相关疾病的诊断创造了条件。     

视黄醇结合蛋白及其基因的分子生物学

视黄醇结合蛋白（RBP）是一类维生素A（VitA）的运载蛋白,参与血清和细胞内视黄醇/视黄酸的转运,是疏水小分子结合蛋白家族的成员。这类RBP主要在肝脏中合成并释放入血液进而进入各种组织。血清RBP通过与视黄醇、前白蛋白及细胞表面受体相互作用,在VitA 的储存、代谢、转运到周围靶器官中具有重要功能;细胞RBP则主要在细胞内发挥类似作用。本文介绍了视黄醇结合蛋白的作用机理、组织定位和发育性表达,还介绍了视黄醇结合蛋白基因的结构、染色体定位以及与动物繁殖性能的关系。Abstract: Retinol-binding proteins (RBPs) are a kind of circulating carrier proteins for serum and cellular retinol and retinol acid, which are lipid-soluble vitamins, and are members of hydrophobic binding protein family. Serum RBPs were synthesized primarily in liver, then was released into blood streams, and then to various tissues. Under the interaction with substances such as retinol, pre-albumin and the receptors of cellular surface, they play important roles in storage, metabolism of VitA and transport of VitA to the target cells. Cellular RBPs play the similar function as serum RBPs in intracell. This review introduces action mechanism, tissue localization and developmental expression of retinol-binding proteins. This review also introduces the structure, chromosome mapping and their relationships with reproductive performance of retinol-binding protein genes.     

视黄醇结合蛋白L35和Q98位点突变及其对与视黄醇结合的影响

根据视黄醇结合蛋白 (RBP)晶体结构和计算机模拟对拟突变位点所作出的结构预测 ,筛选出 2个可能对RBP结合能力有影响的氨基酸位点 .利用定点突变技术分别将 35位亮氨酸突变为能引入较大构象变化的甘氨酸 ,将 98位谷氨酰胺突变为亲水、带正电的精氨酸 .将突变后的RBP基因转入表达宿主菌获得表达后 ,对突变体蛋白实现了变性条件下的分离纯化 .复性后与视黄醇的荧光增强饱和滴定试验表明 ,35位突变为甘氨酸后对RBP结合能力没有产生明显的影响 ,但 98位突变为精氨酸后 ,则显著的提高了与视黄醇的结合能力 ,说明 98位是影响RBP与视黄醇结合和解离的重要位点 .     

视黄醇结合蛋白的分离纯化及其抗血清的制备

建立了经硫酸铵分级、DEAE-Sephadex A25柱、Sephadex G200柱、Ultrogel ACA44柱和 Sephadex G100柱层析分离纯化人血浆视黄醇结合蛋白的方法.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,其纯度达到电泳纯.以此电泳纯的视黄醇结合蛋白免疫家兔得到了高效价的抗血清.     

血清视黄醇结合蛋白4与慢性乙肝的相关性分析

目的:观察慢性乙肝患者血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)、前白蛋白(PA)、血氨水平,分析RBP4与慢性乙肝的相关性。方法:采集90例慢性乙肝患者分为轻度组26例,中度组34例,重度组30例,另选择30例健康对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清RBP4水平,采用免疫透射比浊法测定血清PA水平,用全自动生化分析仪测定血氨水平。结果:血清RBP4、PA在病例组中低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),血氨水平在病例组中高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清RBP4、PA、血氨水平在轻度、中度、重度组内比较P<0.05,有统计学意义。经Pearson’s相关分析,血清RBP4与PA浓度呈显著正相关相关(r=0.896,P<0.01),与血氨浓度呈显著负相关(r=-0.781,P<0.01)。结论:RBP4与慢性乙肝存在一定的相关性,与肝脏的损伤程度有关,可作为预测肝脏损伤的血清标志物。     

血清视黄醇结合蛋白4与慢性乙肝的相关性分析

目的：观察慢性乙肝患者血清视黄醇结合蛋白4（RBP4）、前白蛋白（PA）、血氨水平,分析RBP4与慢性乙肝的相关性。方法：采集90例慢性乙肝患者分为轻度组26例,中度组34例,重度组30例,另选择30例健康对照组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清RBP4水平,采用免疫透射比浊法测定血清PA水平,用全自动生化分析仪测定血氨水平。结果：血清RBP4、PA在病例组中低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,血氨水平在病例组中高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。血清RBP4、PA、血氨水平在轻度、中度、重度组内比较P〈0.05,有统计学意义。经Pearson＇s相关分析,血清RBP4与PA浓度呈显著正相关相关（r=0.896,P〈0.01）,与血氨浓度呈显著负相关（r=-0.781,P〈0.01）。结论：RBP4与慢性乙肝存在一定的相关性,与肝脏的损伤程度有关,可作为预测肝脏损伤的血清标志物。     

视黄醇结合蛋白4与2型糖尿病微血管病变的研究进展

视黄醇结合蛋白4（Retinolbindingprotein4,RBP4）是一种分泌型视黄醇结合蛋白,主要由肝脏合成,在协助视黄醇发挥生理功能中起着重要的作用。近年研究发现,RBP4是一种新的循环性脂肪因子,亦能由脂肪组织特异性分泌,它不仅能够抑制肌肉组织中的胰岛素信号通路,而且能够促进糖异生,增加肝糖输出,从而导致胰岛素抵抗的发生,增加糖尿病的发病风险。目前RBP4与2型糖尿病（Type2diabetes mellitus,T2DM）关系逐渐受到人们的重视,本文就RBP4的生理功能、RBP4与T2DM微血管病变的研究进展作一综述。     

蛋白质结构与功能中的结构域

结构域是蛋白质亚基结构中的紧密球状区域.结构域作为蛋白质结构中介于二级与三级结构之间的又一结构层次,在蛋白质中起着独立的结构单位、功能单位与折叠单位的作用.在复杂蛋白质中,结构域具有结构与功能组件与遗传单位的作用.结构域层次的研究将会促进蛋白质结构与功能关系、蛋白质折叠机制以及蛋白质设计的研究.     

RRM RNA结合蛋白的结构与功能

RRM RNA结合蛋白是一类含一个或数个RRM结构域及附属结构域的RNA结合蛋白,参与RNA前体的剪接、RNA的细胞定位、RNA的稳定性等多种转录后调控过程.在RRM基序中含有许多保守的氨基酸以保证对RNA的结合活性,但是这一家族的不同蛋白质却能特异地结合各种不同的RNA分子.RRM RNA结合蛋白与某些人类遗传性疾病及肿瘤相关.     

X-连锁肾上腺-脑白质营养不良蛋白的结构与功能

X-连锁肾上腺 脑白质营养不良基因（ALD基因）编码的ALD蛋白（ALDP）是4种人类ABCD转运蛋白之一,为一种半ABC转运蛋白,既有ABC(ATP binding cassette)转运蛋白的共有特征,又有过氧化物酶体膜蛋白的特点. 其功能可能是将胞浆中极长链饱和脂肪酸（VLCFA）或其衍生物转运到过氧化物酶体内,并在其中进行β氧化. 已报道的ALD基因突变有900多个,其后果多种多样,但最终都使VLCFA或其衍生物无法进入过氧化物酶体,从而使VLCFA在体内蓄积. 作者认为,ALDP是研究ABCD转运蛋白,乃至所有ABC转运蛋白的一个极好模型.     

RabGTPase激活蛋白结构与功能

RabGTPase激活蛋白(RabGAPs)是一类含有TBC (Tre2/Bub2/Cdc16)结构域的蛋白家族,在Rab活性调节中起着失活Rab的作用。 近年的研究表明,RabGAPs蛋白通过与特定Rab相互作用参与细胞内膜泡运输的调节。 人类RabGAPs突变涉及细胞的极性运输、糖尿病和肿瘤发生等过程,植物RabGAPs蛋白介导病毒的细胞内迁移及气孔免疫等行为。 重要的是,RabGAPs作为一个关键的调节节点,整合Rab与其他小G蛋白之间的信号进而确保囊泡正确的分选、运输及锚定到不同的胞内膜泡系统。 本文综述了RabGAPs蛋白的结构特征、生理功能、底物识别及作用机制,并对RabGAPs蛋白未来的研究方向进行了展望。     

Homepeptide Repeats:Implications for Protein Structure,Function and Evolution

Analysis of protein sequences from Mycobacterium tuberculosis H37Rv(Mtb H37Rv) was performed to identify homopeptide repeatcontaining proteins(HRCPs).Functional annotation of the HRCPs showed that they are preferentially involved in cellular metabolism.Furthermore,these homopeptide repeats might play some specific roles in protein-protein interaction.Repeat length differences among Bacteria,Archaea and Eukaryotes were calculated in order to identify the conservation of the repeats in these divergent kingdoms.From the results,it was evident that these repeats have a higher degree of conservation in Bacteria and Archaea than in Eukaryotes.In addition,there seems to be a direct correlation between the repeat length difference and the degree of divergence between the species.Our study supports the hypothesis that the presence of homopeptide repeats influences the rate of evolution of the protein sequences in which they are embedded.Thus,homopeptide repeat may have structural,functional and evolutionary implications on proteins.     

后基因组研究中蛋白结构与功能的预测

阐述蛋白质结构建模和功能预测的基本方法以及最新研究进展,展望了蛋白质预测技术的前景。     

POU同源域蛋白的结构及发育中的功能

POU同源域蛋白含有两个保守的亚结构域以及它们之间有变化的连接区.两个亚结构域与DNA相互作用,在连接区可塑性和辅因子的帮助下,POU蛋白作为调控因子和转录因子,显示出错综复杂的DNA结合和识别能力.在脊椎动物和无脊椎动物中,POU蛋白参与胚胎发生的早期过程,在细胞谱系的分化和神经发育中起调控作用.     

Structure and Function of Multidrug Resistance Protein 1

This review considers one of the most clinically relevant representatives of the ABC transporters–multidrug resistance protein 1 (P-glycoprotein 1 or Pgp). Data on the primary, secondary, and tertiary structure of the protein, its synthesis and degradation, and roles of its fragments in transporter activity are presented. Particular attention is given to the mechanism of functioning of Pgp. In view of the absence of a generally recognized mechanism of action of Pgp, several existing models of the protein transport cycle are discussed. Epigenetic regulation of the ABCB1 gene and modulation of Pgp expression by microRNAs are discussed.