全自动生化分析仪测定血清AST同工酶

应用天冬氨酸氨基转移酶抑制剂“AMANO-3”水解样品中的线粒体型天冬氨酸氨基转移酶同工酶（m-AST）,测定血清中剩余的胞浆型AST同工酶（c-AST）活性,进而与总AST活性相比较并计算出受抑制剂水解的m-AST同工酶活性．由于此方法采用蛋白水解反应破坏m-AST,因此测定方法可直接应用于生化自动分析仪．亦建立了一个适于日立7150分析仪的AST同工酶联合测定方法．其测定和计算出的m-AST同工酶批内CV为3.5％～7.9％;其结果(y)与AST同工酶电泳迁移率(x)相关．y=1.019x-0.489,r＝0.996（n＝30）．测定了113名健康人m-AST和c-AST,其m-AST参考值范围1.64～9.64U/L,x±s＝(5.641±2.013)U/L;c-AST参考值范围5.69～16.81U/L,x±s＝(5.641±2.013)U/L．     

免疫沉淀法测定乳酸脱氢酶同工酶1的研究

应用免疫沉淀法测定了乳酸脱氢酶同工酶1(LD1).血清与抗血清用量为10:1,加入抗血清5min后再加入与血清量相等的饱和硫酸铵溶液.离心后测定上清液中的LD.总酶活性在618U/L内线性关系良好.二份标本批内精度CV值分别为3.76%和4.70%,批间CV值为7.00%,免疫沉淀法与电泳法高度相关(n=22,r=0.976).72例正常人LD参考值为102.31±16.4U/L,LD1为23.65±4.39U/L,LD1/LD为23.12±3.85%.免疫沉淀法的优点是特异性高,操作简单,可用于自动生化分析仪.精确度高,线性关系好,测定范围宽,是测定LD1的理想方法.     

圈养林麝粪样类固醇激素水平与麝香分泌的关系

基于非损伤取样和放射免疫法（RIA）,于2018年9月1日-10月15日期间对四川马尔康林麝繁育场的36头雄性圈养林麝（Moschus berezovskii）的粪样类固醇激素水平进行了检测,结合麝香分泌数据采集,探究了林麝的粪样睾酮和皮质醇水平与其麝香分泌的关系,结果表明：四川马尔康圈养林麝的麝香分泌（12.53±0.76）g（n=36）与粪样睾酮水平（106.03±12.34）ng/g（n=36）呈显著正相关（r=0.436,P < 0.01）,泌香较多雄麝（16.50±0.61）g（n=17）的睾酮水平（141.51±21.86）ng/g（n=17）显著地高于泌香较少（8.98±0.59）g（n=19）雄麝（74.27±7.93）ng/g（n=19）（t=-3.252,df=34, P < 0.01）,方程y=0.021x+10.270（R²=0.120,P < 0.05）可较好地拟合二者间关系。麝香分泌与皮质醇浓度（47.49±1.53）ng/g（n=36）相关不显著（r=0.078,P > 0.05）,泌香较多雄麝的皮质醇浓度（48.98±2.28）ng/g（n=17）略高于泌香较少雄麝（46.17±2.14）ng/g（n=19）,差异不显著（P > 0.05）,方程y=0.038x+10.730（R²=0.023,P > 0.05）可近似拟合皮质醇与泌香量间的关系。此外,雄麝睾酮水平对泌香量有显著影响（P < 0.05）,睾酮水平较高林麝泌香量（14.97±1.17）g（n=12）显著高于睾酮水平较低个体的泌香量（11.32±0.90）g（n=24）（F=4.79,P < 0.05）,而睾酮、皮质醇和年龄对麝香分泌的综合效应及变量间的交互作用均不显著（P > 0.05）。研究确定了圈养林麝粪样睾酮和皮质醇水平与麝香分泌量间的关系,可用于麝类驯养实践的麝香产量预测及品系选育。     

改良硫代巴比妥酸荧光法测定血清过氧化脂质

对目前使用的过氧化脂质（LPO）硫代巴比妥酸（TBA）荧光测定法进行了改进．血清样本在冰醋酸存在的条件下,100℃水解60min,LPO释放的雨二醛（MDA）与TBA形成复合物,用甲醇沉淀血清蛋白质并减少非特异性干扰,以λ_ex＝515nm、λ_em＝550ｎｍ测定MDA－TBA复合物的荧光强度．此法操作简便、快速,结果准确,荧光稳定．LPO含量（以MDA表示）在0～20μmol／L与荧光强度呈线性关系（r＝0．9994）,最低检测限为0．16μmol／L,回收率为105．08％,重复性CV＝4．23％．     

成年大鼠海马CA1区锥体神经元外向整流氯离子单通道特性

采用膜片钳内面向外式技术,在急性分离成年大鼠海马CAl区锥体细胞上记录到了外向整流氯离子通道（outwardly rectifying chloride channel,ORCC）.长时间去极化（≥60 mV）刺激后,在30%的游离膜片上记录到有外向整流特性的单通道氯电流,膜电位在－60 mV到0 mV之间的单通道电导为(16.58±1.54) pS（n=10）,而在0 mV到+60 mV之间电导为（40.92±3.17） pS.通道开放概率有明显的电压依赖性(膜电位－60 mV时,P_o=0.44±0.12;膜电位为+60 mV时,P_o=0.86±0.06, n=10).在对称Cl^－浓度（150 mmol/L）时,通道翻转电位为(－4.17±1.84) mV.当溶液中部分NaCl被葡萄糖酸钠替代后,翻转电位为：(－34.23±4.86) mV (［Cl^－］_i/［Cl^－］_o=(30 mmol/L)/(150 mmol/L)),接近氯离子通道的理论值,这表明通道具有氯离子选择性.浴槽液中分别加入氯通道阻断剂DIDS和SITS可以使+40 mV的通道开放概率从(0.83±0.06)和(0.86±0.06)分别降低到(0.12±0.05)和(0.13±0.04)（n=5）,冲洗后可使开放概率基本恢复.上述研究结果显示,在成年大鼠海马CA1神经元上存在外向整流氯离子通道.     

蝎毒素BmkTXKβ对家兔心房肌细胞瞬间外向钾电流的抑制作用

为研究蝎毒素BmkTXKβ对家兔心房肌细胞瞬间外向钾电流(I_to)的影响,采用全细胞膜片钳技术记录应用BmkTXKβ前后的I_to电流. 结果显示BmkTXKβ（1 μmol/L）使心房肌细胞I_to（刺激电压为+50 mV）从（13.63±0.87）pA/pF减少到（7.98±0.78）pA/pF,抑制率为41.4% (n=16, P＜0.001).冲洗后, I_to部分恢复至(11.18±0.82)pA/pF (n=6, P＜0.01,与给药后比较).在0.01～100 μmol/L范围内BmkTXKβ呈浓度依赖性地抑制I_to,IC₅₀的均值为0.95 μmol/L (n=10, P＜0.01),但无频率依赖性(n=6,P＞0.05). 1 μmol/L的BmkTXKβ可使I_to通道的失活动力学曲线明显左移,V_1/2分别为（－23.6±2.7） mV和（－35.3±3.6） mV（n=8,P＜0.05）,曲线斜率基本不变.同时可使I_to通道的恢复过程明显减慢,恢复曲线右移,τ值从（51.2±8.5） ms延长至（93.5±13.4） ms（n=9,P＜0.01）,但不影响其激活过程.据此推断BmkTXKβ对家兔心房肌细胞I_to具有显著的抑制作用,主要作用于失活过程,延长该通道的恢复时间.     

重庆市主城区患者对民营医院的推荐意愿调查

目的 了解患者对民营医院的推荐意愿及其影响因素,为民营医院完善自身发展提供依据。方法 选取重庆市主城区在民营医院就诊或治疗的患者作为样本,使用自制问卷进行现场调查。采用χ² 检验描述不同因素对推荐民营医院的差异,用多元logistic回归分析法分析推荐民营医院的影响因素。结果 χ²检验结果显示：年龄段（P＝0.000）、婚姻状况（P＝0.000）、文化程度（P＝0.000）、职业（P＝0.000）、医疗保险类型（P＝0.028）、身体不适（P＝0.001）、确诊患病（P＝0.025）、慢性病（P＝0.001）不同的患者对推荐民营医院有显著差异。多元logistic回归分析结果显示：婚姻状况、文化程度、职业、医疗保险类型、家庭年人均收入等因素对是否推荐民营医院有显著影响。结论 民营医院应根据患者对民营医院的推荐意愿,抓住特定人群,采取相应措施规范医疗服务行为,为患者提供更好的就医环境。     

3种酰胺类稻田除草剂对克氏原螯虾的急性毒性

[目的] 研究稻虾共作模式条件下,稻田封闭除草剂对克氏原螯虾产生的急性毒性。[方法] 采用半静态试验方法,研究3种酰胺类除草剂（乙草胺、丙草胺和丁草胺）对克氏原螯虾的急性毒性,计算3种酰胺类除草剂对克氏原螯虾的安全浓度,并分析其LC₅₀衰减规律。[结果] 随着暴露时间和除草剂浓度的增加,虾体侧躺,步行足和游泳足活动频率降低,最终死亡。乙草胺对克氏原螯虾的96 h半致死浓度（LC₅₀）和安全浓度（SC）分别为0.0707和0.0146 mL·L^-1;丙草胺对克氏原螯虾的96 h LC₅₀和SC分别为0.0119和0.0021 mL·L^-1;丁草胺对克氏原螯虾的96h LC₅₀和SC分别为0.0073和0.0014 mL·L^-1。乙草胺、丙草胺及丁草胺除草剂LC₅₀随着暴露时间延长呈下降趋势,符合双曲线衰减模型,回归方程分别为：① y₁=2.0840x^-0.7380（R²=0.9973）;② y₂=0.1106x^-0.4930（R²=0.9872）;③ y₃=0.2236x^-0.7480（R²=0.9990）。克氏原螯虾对3种除草剂的敏感性由高到低依次为：丁草胺 > 丙草胺 > 乙草胺。[结论] 乙草胺和丙草胺可在稻田综合种养生产过程中按常规剂量使用,而丁草胺按常规剂量使用可能存在较大的风险。     

直接法测定低密度脂蛋白胆固醇

为了提高血脂检验技术,探讨直接法测定低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),选用市售的两种直接测定LDL-C的试剂盒进行方法学的实验评价,结果表明：直接法具有简便、快速、准确和适合自动分析等特点.两种试剂盒的测定结果都能满足建立分析方法要求的目标,不精密度＜４％,两法显著相关r=0.994, y=1.0572x－0.1052, S_y/x=0.1913,且各种方法学检验结果相近,使用者可结合实际选作常规测定之用.     

一种多聚羟基烷酸产生菌的诱变育种

以野生型自养黄杆菌为出发菌株,经亚硝酸、紫外线、60Coγ射线诱变处理选得三株性状优良的突变株（Uγ－、Uγ－17、Uγ－20）。Uγ－1突变株的菌落形态为菊花形,白色。Uγ-17和Uγ－20突变株的菌落形态均为圆凸光滑型,微黄色。40h的摇瓶发酵结果表明,Uγ－1、Uγ－17、Uγ－20突变株的干细胞产量分别为8．1g／1、11．2g／1、10．5g／1,其产物对干细胞的得率系数（y_p/x）分别为0．74、0．75、0．79。与野生型菌株相比,这些突变株的干细胞产量yp/x分别增加     

医务人员心理资本对工作满意度与离职倾向的影响研究

目的 分析医务人员的工作状况,心理资本、工作满意度与离职倾向的关系。方法 采用问卷调查法进行数据收集,运用SPSS、AMOS软件进行数据分析。结果 心理资本总体处于较高水平（M＝4.44）;心理资本及其希望、乐观两维度对工作满意度有显著正向影响（β＝0.308～0.516,P＜0.01）,对离职倾向有显著负向影响（β＝-0.227～-0.271,P＜0.01）;工作满意度在心理资本对离职倾向的负向影响中具有完全中介作用。结论 医务人员心理资本的提升对提高工作满意度、降低离职倾向具有重要作用,提出优化医院内部管理等相关对策建议。     

研究报告: 基于AS1411适配体的DNA-RNA杂交载体的抗肿瘤研究

目的 研究连接适配体的DNA-RNA分子作为杂交载体靶向肿瘤细胞并导入功能性RNA分子进入细胞的有效性，以及对肿瘤细胞的影响。方法 设计合成短的互补DNA、RNA分子，组装成DNA-RNA杂合链；连接AS1411适配体为靶向分子，再分别连接p21 saRNA和TIGIT siRNA作为药物分子，记为P21 saRNA和TIGIT siRNA，构成杂交载体，通用结构式为AS1411-DNA/RNA-sxRNA；检测AS1411-DNA/RNA-sxRNA能否靶向结合并进入肿瘤细胞及其对瘤细胞生存、迁移、侵袭和凋亡的影响。结果 将设计的杂交载体各部分等摩尔加入杂交缓冲体系并于特定温度条件下孵育，TBM聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到AS1411-DNA/RNA-sxRNA成功组装；AS1411-DNA/RNA-sxRNA杂交载体在10%血清条件下也显示出良好的抗降解稳定性；荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察，SKOV3细胞表面及胞内存在绿色大量荧光信号，杂交载体成功进入肿瘤细胞。杂交载体孵育后：在mRNA水平上，p21基因表达（2.14±0.25）是对照组（1.02±0.10）2倍以上，P<0.05；TIGIT基因表达（0.63±0.09）低于对照组（1.09±0.15），P<0.05；在蛋白质水平上，p21基因表达（1.57±0.16）是对照组（1.10±0.09）1.5倍以上，P<0.05；TIGIT基因表达（0.61±0.12）低于对照组（1.01±0.07），P<0.05。CCK-8实验显示，P21 saRNA（3.10±0.13）和TIGIT siRNA（2.91±0.13）杂交载体孵育组与空白对照组（3.67±0.15）相比，卵巢癌细胞增殖能力显著下降（P<0.05）；划痕实验结果显示，P21 saRNA孵育组愈合率（42.53±2.90）%、TIGIT siRNA孵育组愈合率（36.23±3.43）%，明显低于空白对照组（76.47±3.64）%，P<0.05；Transwell检测迁移能力发现：P21 saRNA孵育组（128.25±5.36）、TIGIT siRNA孵育组（119.50±8.79）低于对照组（186.5±8.56）；侵袭能力：P21 saRNA孵育组（145.5±9.45）、TIGIT siRNA孵育组（112.25±5.63）也显著低于对照组（202.50±10.12），P<0.05；细胞凋亡率：P21 saRNA孵育组（11.74%±2.47%）、TIGIT siRNA孵育组（17.12%±2.04%）明显高于对照组（5.66%±1.44%），P<0.05。结论 所制备的AS1411-DNA/RNA-sxRNA杂交载体能够有效靶向肿瘤细胞，携带功能性小RNA靶向导入肿瘤细胞并调控目的基因表达，使肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力受到抑制；该结果为利用DNA-RNA偶联AS1411适配体作为靶向工具的杂交载体，靶向杀伤表面表达NCL蛋白的肿瘤细胞提供了实验基础。     

地衣芽孢杆菌β－甘露聚糖酶的纯化及酶学性质

地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ＮＫ－２７菌株发酵产生的β－甘露聚糖酶（β－ｍａｎｎａｎａｓｅ）经硫酸铵盐析沉淀,两次ＤＥＡＥ纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００离子交换柱层析以及制备ＰＡＧＥ筹步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用ＳＤＳ－凝胶电泳测得纯化后的β－甘露聚糖酶分子量为２６ｋＤ,用凝胶聚焦电泳测得等电点ＰＩ为５．０。酶反应的最适ｐＨ为９．０,最后温度为６０℃,稳定ｐＨ为６．０—９．０,稳定温度为４０℃。金     

真养产碱杆菌突变株65－7产羟基丁酸与羟基戊酸共聚物的研究

研究了真养产碱杆菌突变株６５－７,以葡萄糖为主原料,添加丙酸或戊酸,采用二步发酵积累共聚物聚β－羟基丁酸－β－羟基戊酸（ＰＨＢＶ）。摇瓶总发酵时间为５０ｈ,细胞干重达７－１１ｇ／Ｌ,共聚物含量占细胞干重的７０％以上,其中β－羟基戊酸（３ＨＶ）含量占ＰＨＢＶ的１０－７２％,主要取决于不同碳源的组成,丙酸和戊酸对ＨＶ的转化率分别为０．４１－０．６３ｇＨＶ／ｇ丙酸和０．４０－０．７４ｇＨＶ／ｇ戊酸,制得的ＰＨＢＶ产品纯度９９％以上,分子量６．９×１０^{５相似文献}   

综合医院大数据应用需求调查与分析

目的 分析综合医院对于大数据应用的内在需求,为医院的大数据研发与应用提供导向和依据。方法 采用德尔菲法自制医院大数据应用需求调查问卷,随机抽取中国研究型医院学会医疗分会64家会员单位进行调查,获得有效问卷104份,有效回收率为94.55%。结果 精准医疗（4.31±0.42）分,精益管理（4.23±0.56）分,科学研究（4.19±0.52）分,健康管理（4.16±0.52）分,数字医疗（4.06±0.60）分,教育培训（3.69±0.69）分。不同性别、年龄、职称、岗位组间的需求差异有统计学意义（P＜0.05）。多元线性回归分析结果显示,医学人工智能（b=0.324,P=0.000）和互联网+医疗（b=0.161,P=0.047）的需求程度会对医院大数据应用前景态度产生显著的正向影响关系。结论 综合性医院对大数据具有较强的、多样化的应用需求,应以实际需求为导向,重点推进精准医疗、医学人工智能和互联网+医疗等相关应用的研发。     

手术能力考评体系在手术分级管理中的应用

目的 结合手术分级管理要求,初步建立医师手术能力考评体系,通过考评结果了解各临床外系科室的情况。方法 通过文献检索、现场问卷调查及专家咨询等方法,建立以临床操作技能评估（DOPS）为核心的医师手术能力考评体系。该体系包括了DOPS技能评估、非计划再次手术和年内手术量三个方面的考核。运用此体系对医院8个科室129名外科医生进行评估,并对评估结果进行比较。结果 采用t检验提示,外系科室中耳鼻咽喉科、骨科和妇产科高于整体水平（t＝2.42、2.18、2.35,P＝0.03、0.04、0.02,P＜0.05）,胸外科、神经外科低于整体水平（t＝－2.64、-2.63,P＝0.02、0.03,P＜0.05）,眼科、泌尿外科、普外科与整体水平无明显差异（t＝0.83、-1.84、-1.17,P＝0.43、0.86、0.25,P＞0.05）。结论 外科各科室之间的考核结果存在差异,医院需积极关注薄弱科室,根据考核结果强化培训和监督,保证患者医疗安全。

     

大陈岛海域浮游动物群落季节变化及其影响因素

为探究大陈岛海域浮游动物群落的季节变化,于2020年9月（夏季）、11月（秋季）和2021年1月（冬季）、4月（春季）分别对大陈岛海域的浮游动物及环境因子进行了4个航次的调查。结果共鉴定浮游动物90种,包括浮游幼体15类,其中夏季种类数最多（68种）,冬季最少（20种）,常见的优势种有：百陶箭虫（Sagitta bedoti）、微刺哲水蚤（Canthocalanus pauper）、中华哲水蚤（Calanus sinicus）等12种（Y>0.02）。浮游动物的年平均丰度和生物量分别为（153.40±214.73）个/m³、（411.93±561.76） mg/m³,二者存在明显的季节变化,平均丰度为春季（380.17±296.14）个/m³>夏季（135.30±112.59）个/m³>秋季（67.88±90.52）个/m³>冬季（25.30±19.11）个/m³;平均生物量为夏季（895.01±802.54） mg/m³>春季（623.39±358.73） mg/m³>秋季（91.08±82.36） mg/m³>冬季（45.96±84.95） mg/m³。多样性指数（H''）和均匀度指数（J''）的年平均值分别为1.71±0.96和0.53±0.20,均表现出夏秋季较高、冬春季较低的特征。聚类分析结果表明调查海域的浮游动物可划分为夏季类群、秋季类群、冬季类群和春季类群4组类群。Pearson相关性分析和冗余分析（RDA）结果表明,海水温度、盐度、叶绿素a浓度是影响大陈岛海域浮游动物群落特征的重要环境因素。此外,夏季大陈岛海域水母类浮游动物暴发的现象值得关注。研究结果将为大陈岛海域的生物多样性保护及渔业资源可持续开发利用提供可参考的数据资料。     

CCL229细胞经诱导后蛋白激酶C及抑制剂活性的变化

检测以维甲酸(RA), 1, 25－二羟基维生素D₃(1,25(OH)₂VD₃)诱导2d、佛波酯（PMA）诱导6h的人大肠癌细胞CCL₂₂₉的蛋白激酶C（PKC）及其抑制剂活性．结果显示：诱导后PKC总活性升高(P<0.05); RA, 1, 25(OH)₂VD诱导引起细胞质PKC活性增加,PMA诱导后细胞膜PKC比率（细胞膜活性／总活性）显著升高(P<0.01);诱导后PKC抑制剂活性均降低,其中1, 25 (OH)₂VD₃组与对照组有显著差异(P<0.05);提示PMA引起PKC从细胞质向细胞膜转移,不同药物诱导后PKC及其抑制剂活性出现不同的相对均衡关系．     

酸性区3融合重链促进基于蛋白质内含子的双载体B域缺失型凝血因子Ⅷ转基因表达

最近的研究表明,蛋白质内含子(intein)介导的B区缺失型凝血因子Ⅷ (BDD-FⅧ)的轻链和重链剪接可顺式促进后者的分泌,而且剪接反应在细胞内、外均可发生．为进一步提高基于蛋白质内含子的双载体转BDD-FⅧ基因的功效,将具有促进重链分泌作用的位于Pro¹⁶⁴⁰～Ser¹⁶⁹⁰的酸性区3(acidic region-3,AR-3)引入重链,检验对蛋白质内含子剪接的BDD-FⅧ蛋白分泌和活性的影响．用融合蛋白内含子的附加ar-3重链(HCAR3IntN)基因和轻链(IntCLC)基因共转染培养的HEK293细胞,分别用ELISA和Coatest法定量分析分泌至培养上清中剪接BDD-FⅧ蛋白量和生物活性,并用免疫印迹观察了细胞内的BDD-FⅧ剪接．结果显示,共转HCAR3IntN和IntCLC基因细胞,分泌至上清的剪接BDD-FⅧ蛋白量和活性分别为(173±26) μg/L和(1.31±0.15) U/ml,明显高于未添加ar-3的蛋白质内含子融合重链(HCIntN)与轻链(IntCLC)基因共转染细胞[(102±12) μg/L和(0.79±0.09) U/ml],提示AR-3对蛋白质内含子剪接的BDD-FⅧ蛋白分泌和活性有明显改善作用．而且,分别转HCAR3IntN和IntCLC基因细胞混合培养后的上清中,亦检测到剪接的BDD-FⅧ蛋白和活性[(35±7) μg/L和(0.28±0.08) U/ml],表明蛋白质内含子可进行不依赖细胞机制的蛋白质剪接．另外,转基因细胞总蛋白呈现明显的可与FⅧ多克隆抗体进行反应的剪接BDD-FⅧ蛋白条带,直观地反映细胞内BDD-FⅧ的剪接．为动物模体内运用蛋白质反式剪接技术的双腺相关病毒载体(AAV)转BDD-FⅧ基因实验提供了依据．     

评介Smnh等的热河群40Ae-39Ar同位素测年结果

对Ｓｍｉｔｈ等１９９５年热河群４０Ａｒ－３９Ａｒ同位素测年工作的背景以及各样品的采样地点、层位与测年目的等作了补充介绍．由于Ｓｍｉｔｈ等的论文中将３组后期火山岩的测年结果分别误解为义县组下部与上部地层的同位素年龄,因而整体上混淆了义县组不同层位的测年结果．Ｓｍｉｔｈ等１９９５年发表的６组样品的测年数据实际上至少代表了４个与热河群义县组相关层位的４０Ａｒ－３９Ａｒ同位素年龄：１２２．９±０．３Ｍａ（凌源大新房子沉积层下伏火山岩）、１２２．１±０．２～１２２．５±０．３Ｍａ（凌源二十里堡沉积层）、１２１．５±０．９～１２１．６±０．５Ｍａ（义县金刚山沉积层上覆火山角砾岩）、１２０．８±０．４～１２１．４±０．７Ｍａ（后期火山岩）。