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酵母双杂合系统的改进和发展 总被引:1,自引:0,他引:1
酵母双杂合系统是在1989年由StanleyFields和Ok-kyuSong等提出并初步建立的[1],该系统是在酿酒酵母(Sacharomycescerevisiae)中研究蛋白质间相互作用的一种非常有效的分子生物学方法。近几年来随着人们对该系统的广泛应用,这一系统得到了不断的完善及改进,同时也衍生出单杂合系统,三杂合系统等一系列相关的技术。这些技术在不同研究领域中的广泛应用有力地推动了蛋白质与DNA,蛋白质与RNA,以及多种蛋白质分子间相互作用的研究。 相似文献
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MRSA感染抗菌药物治疗 总被引:3,自引:0,他引:3
王睿 《中国微生态学杂志》1994,(3)
MRSA感染抗菌药物治疗解放军总医院北京临床药物药理研究室北京100853王睿(综述)周贵民(审阅)随着抗菌药物广泛应用,细菌耐药性不断增强。近年来耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicilin-resistantstaphyloc-occusaur... 相似文献
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一种具有应用价值的基因工程表达系统 总被引:3,自引:0,他引:3
基因工程技术的目的是使外源基因在受体细胞内按人们期望的方式进行表达,表达系统是基因工程的关键。原核生物表达系统已为人们所深入了解并被广泛应用。真核生物表达系统一度发展缓慢,随着人们对真核生物如酿酒酵母U山ccharoapcescerev0。e)遗传表达机制的深入了解以及实验手段的不断提高,其基因工程表达系统也建立起来了。但是,人们发现酿酒酵母作为一种基因工程表达系统存在一些局限性川,因为酿酒酵母是以发酵为主的酵母,在采用常规的通气发酵条件下其所能达到的生长速度和密度并不高。所以表达外源基因很难达… 相似文献
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酵母双杂合系统在丙型肝炎病毒NS5A研究中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
母双杂合系统是在酵母细胞中研究蛋白-蛋白相互作用的新技术。应用该技术,以丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)为“诱饵”,筛检了人中细胞HepG2来源的cDNA文库,获得了7个NS5A结合蛋白的基因克隆。报道了其中两个阳性克隆(#2、#16)的结果,并对“人核小体组装蛋白相关蛋白”(Human nucleosome assembly protein-related protein,hNR 相似文献
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蛋白质的鉴定是蛋白质组学研究中必不可少的一步。用串联质谱(tandem mass spectrometry,MS/MS)可以进行多肽的从头测序(de novo sequencing),并搜索数据库以鉴定蛋白质。用图论以及真实谱-理论谱联配(alingment)的方法对串联质谱得到的多肽图谱进行从头解析,得到了可靠的多肽序列,并应用到数据库搜索中鉴定了相应的蛋白质。同时,还用统计的方法对SwissP 相似文献
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毕赤酵母表达的重组乙肝表面抗原SS1的纯化及性质鉴定 总被引:2,自引:1,他引:2
对毕赤酵母(Pichia pastoris)表达的重组乙肝表面抗原SS1的纯化以及蛋白质的理化性质及免疫原性进行了进一步的研究。采用单抗亲和层析的方法,一步纯化即可得到纯度为95%的纯化蛋白质。ELISA和Western印迹鉴定表明,纯化的SS1融合蛋白同时具有良好的S和PrcS1抗原性。CsC1密度梯度离心和电镜检测的结果则表明,这一重组抗原可以形成与HBV亚病毒颗粒类似的颗粒结构。在BALB/ 相似文献
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控制培养基中氨苄青霉素的用量、pH和培养时间,从含E.coliargy变种argr381KA的E.coliTG1转化子中,得到了E.coliArgRS变种ArgRS381KA的高表达。从2升培养液中得到15克湿菌体,粗抽液中ArgRS381KA的比活为503单位/毫克。经过两次DEAESephacel层析,在4天时间内,可得到78毫克电泳一条带的纯酶活力回收达80%。该方法可以作为从含args的E.coliTG1转化子中提纯E.coliArsRS的通用方法。 相似文献
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超高忠实性PCR用DNA聚合酶 总被引:4,自引:0,他引:4
PCR(PolymeraseChainReaction)法已在生物工程领域得到了广泛的应用,而PCR法的推广完全得益于Taq耐热性DNA聚合酶。近年来,PCR法的应用除生物工程领域外,已应用至工业、农业、医学、制药等与人们生活息息相关的各个领域。随着PCR法的不断推广,人们对DNA聚合酶的忠实性(Fidelity)要求越来越高,一般来说,TaqDNA聚合酶在进行PCR延伸反应过程中的错配率为0.5%左右。TaKaRa公司独自研制成功的PyrobestDNA聚合酶是一种来源于Pyrococcuss… 相似文献
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带有PreS的重组乙肝表面抗原在毕赤酵母中的表达 总被引:6,自引:0,他引:6
带有PreS区的乙肝表面抗原(HBsAg)有望成为新一代更高效的乙肝疫苗。利用毕赤属酵母(Pichia pastoris)表达系统,表达了带有PreS区免疫决定簇的理组乙肝表面抗原S1S、SS1和S2S。对表达产物的性质鉴定表明,产物可以形成2具有相应的S、PreS1或PreS2抗原性的颗粒,表达水平高于啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表达系统。 相似文献
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SLE,是systemiclupuserythematosus的缩写,其惯用的汉语译名为“系统性红斑狼疮”。这个译名已被许多专著、参考书、教材、专业刊物和一些医学词典所广泛采用。我认为,这个译法不妥。问题就在systemic一字的翻译上。可能当初的译者没有仔细地去辨别systemic和systematic两个字的意义,而把它们等同起来了。Systematic,译成“有系统的”或“系统性”,是不错的;可是把SLE中的S(systemic)翻译成“系统性”,就不对了。我最近查考了几种版本的Webst… 相似文献
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近年来 ,我国学者对人工养殖对虾暴发性病毒病的病原进行了较为系统的研究[1~ 5] ,本试验应用螯虾这一动物模型[6] ,利用斑点杂交方法 ,研究了白斑综合征病毒 (WSSV ,前称无包埋体对虾病毒Non -Occluded -ShrimpVirusNOSV )青岛株在螯虾体内的动态分布 ,为研究该病毒的传播途径、增殖致病机理提供了参考。1 材料与方法1.1 实验动物克氏原螯虾 (Cambarusproclarkii ,以下简称螯虾 ) 40尾 ,购自南京某农贸市场 ,实验室饲养一周以上 ,健康存活。1.2 种毒处理及接种白斑综合征病毒青岛株 (… 相似文献
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本研究采用了免疫细胞化学方法,首次系统观察了22例9—27周引产人胎儿下丘脑视上区的视上核和视交叉上核内的生长抑素免疫反应神经元(Somatostatinimmunoreactiveneuron,简称SOM-IR神经元)的发生、发育的形态学特征。从16周开始,在视上核(SupraopticalnucleusSON)和交叉上核(SuprachiasmatienucleusSON)内可观察到SOM-IR神经元,在SON、SOM-IR神经元数随着胎龄增加而增多,到22周时数量最多,以后随着胎龄增加SOM-IR神经元数出现逐渐减少现象;SCN内的SOM-IR神经元在18周和22周时出现两次高峰,研究结果提示,SON和SCN内的SOM-IR神经元在胚胎发育过程中出现消长现象,表明了SOM-IR神经元在SON和SCN内各有其独特的发育过程。 相似文献
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一般说来,从枝菌根(AM)真菌大多数是从植物根系根毛区(成熟区)侵入和扩展的,在显微镜下往往看不到根尖分生区和根冠表皮细胞被AM真菌侵染的特征。这就很容易给人们造成一种假象,似乎AM真菌不能侵染根尖分生区和根冠表皮细胞,即它们对AM真菌是免疫的。然而笔者多次于显微镜下看到AM真菌侵染根尖分生区和根冠表皮细胞,并形成典型的泡囊、丛枝、菌丝等结构。这一现象导致作者在温室盆栽和大田条件下研究了玫瑰红巨孢囊霉( Gigaspora rosea Nicol & Schenck)、珠状巨孢囊霉(Gigaspora margarita Becker & Hall)、根内球囊霉(Glomus omtraradices schenck & Smith、摩西球囊霉(Glomus mosseae (Nicol & Gerd.) Gerdemann & Trappe)、地表球囊霉( Glomus versiforme( Karsten)Berch)和弯丝硬囊霉( Sclerocystis sinuosa Gerdemann & Bakhi)对棉花(Gossypium hirsutum L.)、烟草(Nicotiana tabacum L.)和白 相似文献
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坏死病原菌(necrotizing pathogen)的侵染或者一些化学因子的处理能诱导植物的非侵染或非处理部位产生对多种病原再侵染产生抗性,即系统获得性抗性(systemic acquired resistance,SAR)。获得系统抗生的组织中SAR基因产物的累积和防卫反应的潜在诱导增加(potentiatiion)是其两类抗病机制。SAR至少有通过水杨酸(salicylic acid,SA) 相似文献
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本文报道在我国贵州省发现的一个盾盘菌属新种。此新种具有独特的球形子囊孢子,与该属中目前已知的球孢种类截然不同,故命名为中国盾盘菌Scutellinia sinensis M.H.Liu。根据Schumacher的分类系统,此新种应归属于盾盘菌属Scutellinia中的列氏亚属Subg.Legalia。列氏组Sect.Legalia,列氏系Ser.Lgalia。与此新种近似的种是沼生盾盘菌S.pa 相似文献
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利用能形成多角体的杆状病毒载体系统pSXIVVI+X3,把萤火虫荧光素酶(Fireflyluciferase,Luc)cDNA克隆到转移功体质粒pSXIVVI^+3/3通过共转染草地夜蛾(Spodopterafrugiperda,Sf)细胞得到重组毒株TnNPV-Luc-OCC,在该重组杆状病毒株中Luc基因受到合成启动子和XIV启动子的双重调控。该重组杆状病毒株在Sf9细胞中能形成多角体,有X- 相似文献
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通过有机试剂抽提,CF-11纤维素柱层析,从感染水稻齿叶矮缩病毒菲律宾分离株(RiceRaggedStuntVirus,Philippineisolate,简称RRSV-P)的水稻植株中获取该病毒的全基因组,即获得从Segment1到Segment10(S1-S10)的10条双链RNA(dsRNA),然后设计合适的引物,用RT-PCR方法得到S9的cDNA并将其克隆到pUC119质粒上扩增,以双链测序法测定该cDNA的全序列。同时又将此cDNA克隆到大肠杆菌表达质粒pGEX-3X上,在大肠杆菌菌株DE3中用IPTG诱导表达,经超声波破菌、离心、Glutathione-sepharose4B亲和层析,得到纯化的分子量为64kD的融合蛋白。 相似文献
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环状芽孢杆菌C-2几丁酶基因的克隆 总被引:4,自引:0,他引:4
环状芽孢杆菌(Baciluscirculans)C2总DNA经PstI部分酶切后分离2~10kb的片段,插入质粒pUC19的PstI位点,转化大肠杆菌(Escherichiacoli),利用几丁质平板从约8000个重组子中筛选到一个几丁酶基因阳性克隆(命名为pCHT1)。用12种限制酶对重组质粒进行的酶切分析表明,重组质粒中的插入片段长30kb,其中各有一个KpnI,SacI和SspI位点。把该克隆片段反向插入pUC19的PstI位点所得到的重组子同样具有几丁酶基因表达活性,说明此片段含有一个完整的几丁酶基因,其自身的启动子能被大肠杆菌转录系统所识别。Southern杂交证实了该片段来自于B.circulansC2基因组,且以单拷贝形式存在,它不能与来自于其它7株几丁酶产生菌的总DNA杂交。 相似文献