DNA修复的分子机制

ＤＮＡ是遗传信息的载体,需要有极高的保真度,这不仅有赖于完善的复制体系,而且还需要有能纠正已存在错误的修复系统。对于不同的ＤＮＡ损伤,生物体内存在许多不同的修复系统。本文介绍三种主要修复系统即核苷酸切割修复,错配修复及转录偶联修复的分子机制,深入研究ＤＮＡ修复作用对了解某些癌症成因及细胞衰老等过程有重要意义 。     

DNA的紫外线损伤与修复

ＤＮＡ的紫外线损伤与修复张海赖兵（北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系,北京市１００８７１）ＤＮＡ的损伤是指在外界因素作用下,ＤＮＡ的结构发生变化,ＤＮＡ损伤通过转录,翻译的产物———ＲＮＡ与蛋白质,来作用细胞,并影响其代谢。为了防止ＤＮＡ损伤...     

核苷酸切除修复的研究进展

核苷酸切除修复的研究进展明亮（杭州大学生命科学学院,杭州３１００１２）关键词核苷酸切除修复自１９５８年Ｒｕｐｅｒｔ等首次证明紫外线照射造成的ＤＮＡ损伤可由光裂合酶催化的光复活作用进行修复后,有关ＤＮＡ修复的研究和探索长期来为生命科学工作者所重视。ＤＮ...     

具有修复功能的尿嘧啶—DNA糖苷酶

具有修复功能的尿嘧啶－ＤＮＡ糖苷酶刘丽贲昆龙（中国科学院昆明动物研究所免疫学实验室,昆明６５０２２３）关键词尿嘧啶－ＤＮＡ糖苷酶尿嘧啶ＤＮＡ修复在真核或原核生物中,尿嘧啶都不是正常ＤＮＡ的组分。但是,在下列两种情形下,尿嘧啶会成为ＤＮＡ的成分;①当细...     

DNA连接酶的结构与功能

在ＤＮＡ合成中 ,合成方向为 5′→ 3′ ,即一条链上是连续复制的 ,而另一条链的复制是不连续的 ,必须先合成岗崎片段 (真核细胞的岗崎片段为 10 0ｂｐ ,原核细胞的为 10 0 0ｂｐ)。ＤＮＡ连接酶的作用就是催化岗崎片段的连接以完成ＤＮＡ的合成。另外 ,ＤＮＡ连接酶在ＤＮＡ修复过程中也起重要作用 ,如在切除修复中 ,切除损伤的ＤＮＡ片段 ,以未受损伤的链作为模板合成一条新的ＤＮＡ链后 ,ＤＮＡ连接酶将新合成的ＤＮＡ链与原来的ＤＮＡ链之间的缺口封闭完成ＤＮＡ的修复。ＤＮＡ链未封闭的缺口对细胞具有潜在的危险性 ,所以 ,ＤＮＡ连接…     

跨损伤合成的ＤＮＡ聚合酶：—一类新的ＤＮＡ聚合酶

细胞虽然拥有多种修复途径,但有些ＤＮＡ损伤仍不可避免地会逃避修复而在基因组上保留下来,细胞跨损伤ＤＮＡ的合成的分子机制一直是ＤＡＮ修复中的主要的未解决问题之一,最近通过对一类结构相关性UmuC/DimB蛋白质超家族成员的研究发现它们具有ＤＮＡ聚合酶功能,这类新发现的ＤＮＡ聚合酶不同于经典的复制性ＤＮＡ聚合酶,它们能以易误／突变（error-prone/mutagenic)或无误（error-free)方式进行跨损伤（translesion)ＤＮＡ合成,并且从细胞到人在进化上功能保守。     

DNA损伤修复基本方式的研究进展

DNA损伤修复基因可修复由不同原因导致的DNA损伤．从而保护遗传信息的完整性。DNA损伤修复有3种基本形式,即碱基切除修复、核苷酸切除修复和错配修复。本文综述了DNA损伤修复3种基本形式的研究进展情况并讨论了DNA链断裂重组和重接合修复及DNA聚合酶绕道修复DNA损伤。     

AT细胞DNA双链断裂重接修复效率及其忠实性

用脉冲电场凝胶电泳和双标记基因质粒ＤＮＡ转染技术研究辐射敏感的毛细血管扩张性共济失调症患者皮肤成纤维细胞（ＡＴ５ＢＩＶＡ）和正常辐射抗性的人宫颈癌细胞（ＨｅＬａＳ３）ＤＮＡ双链断裂重接修复率及其忠实性。结果表明γ射线照射诱发ＤＮＡ双链断裂的产额和重接修复率,在两株细胞间无差别．而ＡＴ细胞对导入的限制性内切酶ＥｃｏＲＶ产生双链断裂质粒ＤＮＡ的重接修复忠实性显著低于ＨｅｌａＳ３ｔｅ胞,表明ＡＴ细胞易发生ＤＮＡ错误修复,这很可能就是ＡＴ细胞高度辐射敏感性的主要原因。     

TNT体外大鼠白内障模型中的DNA单链断裂及其重接修复的研究

在大鼠晶状体器官培养的条件下,运用单细胞电泳法（ＳＣＧ）,对远在晶状体混浊之前的晶状体上皮细胞进行了有关ＴＮＴ致其ＤＮＡ损伤（ＳＳＢ）与修复的初步观察。提示ＤＮＡ损伤也是体外ＴＮＴ性白内障中的早期变化。     

DNA损伤与修复

《ＤＮＡ损伤与修复,（第２卷）：高级真核生物的ＤＮＡ修复》（ＤＮＡＤａｍａｇｅａｎｄＲｅｐａｉｒ,ＶｏｌｕｍｅＩＩ：ＤＮＡＲｅｐａｉｒｉｎＨｉｇｈｅｒＥｕｋａｒｙｏｔｅｓ）由ＪａｃＡ．Ｎｉｃｋｏｌｏｆｆ和ＭｅｒｌＦ．Ｈｏｅｋｓｔｒａ编著,１９９８年ＨｕｍａｎａＰｒｅｓｓ出版,６３９页。ＤＮＡ损伤与修复提供了在广泛多样化生物体范围内ＤＮＡ修复主要方面的重要和简洁评论。第２卷：高级真核生物的ＤＮＡ修复集中于哺乳动物系统、人体遗传学疾病和癌症,强调最近５年发展的重要过程。主要题目：紫外线和Ｘ线的修复,…     

亚硒酸钠诱发的晶状体上皮细胞DNA损伤及修复

观察了亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）在体外作用于大鼠晶状体上皮细胞（ＲＬＥｃｅｌｌｓ）而造成的ＤＮＡ单链断裂（ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｂｒｅａｋｓ,ＳＳＢ）,并对其ＤＮＡ损伤、修复动力学做了初步研究．发现ＳＳＢ严重程度与亚硒酸钠的浓度呈线性相关,其ＳＳＢ重接修复约在３０～６０ｍｉｎ内完成．还作了有关非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）的检测,发现与ＳＳＢ相比,ＵＤＳ发生迟且持续时间更长,提示Ｎａ２ＳｅＯ３可能在体外对大鼠晶状体上皮细胞除造成ＳＳＢ以外,还可能造成其它种类的ＤＮＡ损伤．     

利用嵌合RNA：DNA寡聚核苷酸进行核酸序列突变

动物中内源基因的单核苷酸突变可以引起多种单基因疾病。传统的基因疗法大多利用外源基因的导入 ,由于转基因的效率和外源基因表达上存在问题 ,这种基因疗法有一定的局限性。本文介绍的利用嵌合ＲＮＡ :ＤＮＡ寡聚核苷酸 (ＲＤＯ)在ＤＮＡ水平上对突变基因进行修复是一种新的基因疗法。这种基因疗法同样适用于植物 ,并且在植物功能基因组的理论研究中有重要作用。1　嵌合ＲＮＡ :ＤＮＡ寡聚核苷酸 (ＲＤＯ)的分子结构ＲＤＯ有一段五碱基长的ＤＮＡ序列 ,除了突变的位点以外 ,与靶基因互补。五碱基的ＤＮＡ序列两旁各有 1 0个 2’ -Ｏ -甲基…     

UV辐射所致HL—60细胞DNA不均一修复的研究

在特定基因水平检测了ＵＶ照射后ＨＬ－６０细胞的ＤＮＡ修复,结果显示活性转录的ｃ－ｍｙｃ基因瓣修复水平明显高于非活性转录的β珠蛋白基因和全基因组。而进一步应用链专一性ＲＮＡ探针检测,发现ｃ－ｍｙｃ基因中的转录链和非转录,链的修复效率没有明显差异,上述结果表明,ＨＬ－６０细胞能够对活跃表达基因的损伤进行选择性高效修复,但不能对活跃表达基因中的转录链进行进一步的选择性修复。     

栖热菌属热稳定DNA聚合酶

ＤＮＡ聚合酶是能够以ＤＮＡ或ＲＮＡ为模板 ,在寡核苷酸或蛋白质引物的引导下催化合成ＤＮＡ的一类酶 ,已经分离纯化的有上百种 ,其中有半数已经被克隆和测序。它们之间在ＤＮＡ序列、氨基酸序列、二、三级结构方面有较高的同源性 ,且与ＲＮＡ聚合酶和反转录酶之间也有不同程度的同源性[1～ 4] 。1　ＤＮＡ聚合酶的分类ＤＮＡ聚合酶有许多不同的类群 ,如很小的 (3 9ｋＤａ) ,来自哺乳动物的修复性单亚基ＤＮＡ聚合酶 ,巨大的 (可高达 90 0ｋＤａ)、多亚基(可达 2 0多个亚基 )的复制性ＤＮＡ聚合酶 (如Ｅｃｏ聚合酶Ⅲ )。有些ＤＮＡ聚合酶则…     

不同抗原修复液对免疫组化结果的影响

以热处理来修复抗原是免疫组化(Immuno-histochemistry,IHC)染色中常用的手段,但使用哪种修复液却存在不同的看法,在长期工作实践中,我们发现不同的修复液对有些抗体表达的阳性强度及数量有差异。为此,本实验采用几种不同抗原修复液处理切片进行比较,观察其对IHC染色结果的影响。材料和方法1.材料选择我院外科手术病检乳腺癌标本5例,所有标本均经15%缓冲甲醛液固定,石蜡包埋切片。相同病例的标本切片9张,分别用于三种不同抗原修复液进行ER、PR、BRCA1标记。2.试剂抗体ER、PR、BRCA1及SP试剂盒均为Dako公司产品。3.修复液柠檬酸缓…     

DNA烷基化损伤修复新机制

广泛存在于自然环境和饮食当中的烷基化试剂 (如亚硝基胺类和亚硝基胍类 )是造成ＤＮＡ损伤的原因之一 .烷基化试剂能将ＤＮＡ中碱基 ,特别是嘌呤碱基烷基化 .除Ｎ7和Ｎ3烷基化外 ,还能在Ｏ 6及磷酸骨架上出现烷基化 .目前 ,对于ＤＮＡ烷基化损伤修复机制主要有两种 :一 ,Ｎ位置上的烷基由ＤＮＡ糖基酶去除 .细胞内糖基酶有多种 ,针对不同的碱基和烷基化位点分为尿嘧啶糖基酶、3 甲基腺嘌呤糖基酶、甲酰亚氨嘧啶糖基酶、嘧啶二聚体糖基酶等 .修复反应包括烷基化碱基的切除及与互补链相应碱基的重新配对 .二 ,Ｏ位置上的烷基由烷基转移酶去除…     

真核细胞DNA聚合酶

近年来,真核细胞ＤＮＡ体外复制模型的建立及蛋白纯化技术的提高,ＤＮＡ聚合酶基因的克隆,真核细胞ＤＮＡ聚合酶研究取得了很大进展。     

重离子射线照射后抗辐射菌基因组DNA的损伤修复

研究了不同种类的重离子射线及同一射线的不同剂量照射后引起的抗辐射菌(Deinococcus radiodu-rans)R1的DNA二条链的切断损伤修复时间。结果表明,抗辐射菌经重离子射线照射后所引起的DNA二条链的切断损伤经过培养能被修复;切断的DNA二条链的修复时间随着照射剂量的增加而延长;高LET的重离子射线照射所引起的损伤修复比低LET的重离子射线需要更长的时间,损伤修复的时间与射线的LET之间存在一定的依存性。由此认为:抗辐射菌经照射后引起的DNA二条链切断损伤与射线的种类及照射的剂量有关,照射的剂量越大,射线的LET越高,则DNA二条链的切断损伤越多,损伤修复所需要的时间越长。     

石油污染土壤植物-微生物修复研究进展

依据国内外近10年来有关石油污染土壤生物修复研究的成果,综合阐述了石油污染土壤的植物修复、微生物修复及植物-微生物联合修复方法研究,重点讨论植物-微生物联合作用,主要包括植物根际微生物、根分泌物以及菌根对石油污染物降解的影响,提出了污染土壤原位修复中需要重视的问题.     

TNT体外大鼠白内障模型中的DNA单链断裂及其重接修复的研究

在大鼠晶状体器官培养的条件下,运用单细胞电泳法（ＳＣＧ）,对远在晶状体混浊之前的晶状体上皮细胞进行了有关ＴＮＴ致其ＤＮＡ损伤（ＳＳＢ）与修复的初步观察,提示ＤＮＡ损伤也是体外ＴＮＴ性白内障中的早期变化．