低氧对雄性高原鼠兔性腺的影响

在人工模拟低氧环境下（低压舱模拟５０００ｍ和７０００ｍ海拔高度）,低氧暴露２４ｈ和７ｄ,观察低氧对受试动物性腺的影响。结果表明,急性低氧２４ｈ,高原鼠兔血浆雌二醇（Ｅ２）明显升高;低氧暴露７ｄ,高原鼠兔血浆Ｅ２仍维持一较高水平;５０００ｍ低氧暴露７ｄ,其睾丸指数无明显变化,７０００ｍ时却有所降低。同等条件下,大鼠睾丸指数明显增高;５０００ｍ和７０００ｍ低氧暴露７ｄ对高原鼠兔睾丸组织形态无明显影响,然而,大鼠曲细精管间隙增大,且曲细精管内各级细胞排列紊乱。低氧环境下,高原鼠兔雄体血浆Ｅ２增高,可能是其低氧适应的特征之一     

β－内啡肽对低氧引起的促肾上腺皮质激素释放因子分泌的影响

本文研究了模拟高原低氧条件下内源性阿片肽β－内啡肽（βｅｎｄｏｒｐｈｉｎ,βＥＰ）对大鼠和高原土著动物高原鼠兔（Ｏｃｈｏｔｏｎａｃｕｒｚｏｎｉａｅ）促肾上腺皮质激素释放因子（ｃｏｒｔｉｃｏｔｒｏｐｉｎｒｅｌｅａｓｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＣＲＦ）分泌的影响。７０００ｍ低氧２ｈ,正中隆起（ｍｅｄｉａｎｅｍｉｎｅｎｃｅ,ＭＥ）和下丘脑（Ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ,Ｈｙ）ＣＲＦ含量水平降低。脑室注射βＥＰ后,海拔７０００ｍ低氧暴露２ｈ,大鼠和高原鼠兔ＭＥ处的ＣＲＦ含量升高,大鼠Ｈｙ的ＣＲＦ含量也升高,而高原鼠兔下丘脑ＣＲＦ含量下降。βＥＰ的作用被纳洛酮反转。上述结果提示,βＥＰ有抑制由低氧引起的大鼠ＣＲＦ分泌的作用。     

低氧对大鼠体液免疫的抑制作用

本实验以模拟高原低氧的方法,探讨了低氧对大鼠体液免疫的作用,并与高原鼠兔比较,体液免疫以溶血素和ＩｇＧ产生为指标。实验结果：与对照组相比,大鼠低氧１０ｄ,５ｋｍ海拔抑制溶血素形成１０．３％,７ｋｍ海拔抑制溶血素形成２１．９％;经再次免疫后又低氧１０ｄ,５ｋｍ海拔抑制溶血素形成４．２％,７ｋｍ海拔抑制溶血素形成４．６％,高原土著动物高原鼠兔则不表现上述的抑制现象;大鼠经ＳＲＢＣ腹腔致敏形成２ｄ后低氧     

β—内啡地低氧引起的促肾上腺皮质激素释放因子分泌的影响

本文研究了模拟高原低氧条件下内源性阿片肽β－内啡肽对大鼠和高原土著动物高原鼠兔促肾上腺皮质激素释放因子分泌的影响,７０００ｍ低氧２ｈ,正中隆起和下丘脑ＣＲＦ含量水平降低。     

不同频率电刺激膈神经导致膈肌肌浆网Ca~(2 )-ATPase和Ca~(2 )释放-摄取动力学改变

研究不同频率慢性电刺激（ＣＥＳ）后兔膈肌肌浆网（ＳＲ）Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性以及ＳＲ Ｃａ２＋摄取－释放动力学对不同频率ＣＥＳ的适应性变化。建立不同频率ＣＥＳ组;用定磷法测定ＳＲ Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性;用Ｆｕｒａ－２荧光法测定ＳＲ　Ｃａ２＋摄取－释放动力学。与对照组比较,慢性低频电刺激１０ Ｈｚ和２０Ｈｚ组的ＳＲ　Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性明显降低（Ｐ＜０．０１）,Ｃａ２＋释放－摄取动力学也显著降低（Ｐ＜０．０１）;慢性高频电刺激５０ Ｈｚ和１００Ｈｚ组的ＳＲ Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性则显著升高（Ｐ＜０．０１）,Ｃａ２＋释放－摄取动力学亦明显升高（Ｐ＜０．０１）。实验提示,ＣＥＳ后不同频率ＣＥＳ导致膈肌ＳＲＣａ２＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋摄取－释放动力学产生不同的适应性变化;对不同功能状态的膈肌应用不同频谱的慢性电刺激可能具有重要的临床意义。     

丙型肝炎病毒E2基因DNA免疫实验动物研究

将编码丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ２蛋白４１７～７５０位氨基酸的ＤＮＡ片段　克隆到真核表达载体ｐｃＤＮＡ　３．１（－）中的ＣＭＶ　ＩＥ启动子下游,构建成ＨＣＶ　Ｅ２重组真核表达质粒　ｐｃＥ２。ＥＬＩＳＡ法检测ｐｃＥ２　ＤＮＡ免疫兔血清中的Ｅ２抗体变化和维持规律,结果显示免疫２０ｄ已有　抗体产生,３０ｄ后开始进入高峰,４０ｄ时达到最高值,至第９０ｄ抗体水平保持平稳,抗体滴度　达到１∶１６００左右。流式细胞计数仪（ＦＡＣＳ）检测ｐｃＥ２　ＤＮＡ免疫鼠ＣＤ４＋、ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞变　化情况,与注射空载体ｐＣＤＮＡ３．１（－）的阴性鼠相比,ＣＤ４＋淋巴细胞水平略有上升,ＣＤ８＋　细胞水平有较大升高,增幅达３５．４６％。免疫组化检测结果显示注射ｐｃＥ２的小鼠组织中有明显　的阳性着色,而注射ｐｃＤＮＡ３．１（－）的对照组小鼠免疫组化结果为阴性。以上结果表明：ｐｃＥ２　在实验动物内表达出的ＨＣＶ　Ｅ２蛋白可以引起免疫动物的体液免疫应答和细胞免疫应答,尤其　是ＭＨＣ－１限制性杀伤性ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞水平的提高对清除　病毒是十分有利的,因此ＨＣＶ　Ｅ２　ＤＮＡ免疫有可能成为预防和治疗ＨＣＶ感染的一条新途径。     

高原鼠兔氧比传导特征的实验研究

本实验采用国外新近提出的一项能综合评价机体气体交换系统中各氧降阶差时运氧能力的适应水平高低的重要指标──氧比传导（ＭＯ２－ＳＣ）,研究了高原鼠兔气体交换系统运氧能力的低氧适应特征及规律。结果表明,对照条件下,在吸入气（Ｉ）至肺泡气（Ａ）（Ｉ→Ａ）、Ａ至动脉血（ａ）（Ａ→ａ）、ａ至混合静脉血（ｖ）（ａ→ｖ）及Ｉ→ｖ各阶差中,以Ａ→ａ的ＭＯ２－ＳＣ运氧能力最大。低氧１５ｍｍ后,Ｉ→Ａ及ａ→ｖ的ＭＯ２－ＳＣ均显著升高,并以Ｉ→Ａ增加最为显著,该水平运氧能力是对照的２倍,增长１２０．９％;而Ａ→ａ及Ｉ→ｖＭＯ２－ＳＣ变化无显著性差异。低氧３０ｍｉｎ时,Ｉ→Ａ的ＭＯ２－ＳＣ继续显著增长,运氧能力是对照的２．７倍,增长１７０．７％,其余３个氧降阶差的ＭＯ２－ＳＣ无显著性改变。以上结果表明,高原鼠兔低氧代偿贮备较大,尤以肺泡气至动脉血阶差最为重要,而通气氧传导能力的增强也是高原鼠兔低氧适应的主要原因。     

促肾上腺皮质激素释放因子介导低氧应激抑制淋巴细胞转化的实验研究

本实验以模拟高原低氧方法观察大鼠淋巴细胞对丝裂原（ＣｏｎＡ）的反应性及促肾上腺皮质激素释放因子（ＣＲＦ）介导急性低氧的免疫调节作用。实验结果表明：急性低氧可抑制大鼠外周血淋巴细胞转化,高原土著动物高原鼠兔（Ｏｃｈｏｔｏｎａｃｕｒｚｏｎｉａｅ）则不表现这种低氧抑制作用;肾上腺完整和肾上腺摘除大鼠第三脑室给予外源性ＣＲＦ１μｇ,表现出与低氧作用类似的淋巴细胞转化下降现象;低氧时第三脑室给予高效价ＣＲＦ抗血清可部分阻断低氧抑制作用。放射免疫分析法检测外周血浆中ＣＲＦ和皮质酮水平显示急性低氧大鼠血浆ＣＲＦ、皮质酮水平均升高,高原鼠兔无明显变化。因而,本研究提示：急性低氧可抑制淋巴细胞转化,ＣＲＦ是介导急性低氧抑制淋巴细胞转化的一种因子,而与肾上腺皮质激素的变化可能无关,高原鼠兔免疫功能对低氧不敏感。     

慢性缺氧大鼠心肌肌浆网功能及其钙泵基因表达的动态变化

将实验大鼠放置模拟５０００ｍ海拔高度低压舱内１、２和４周。结果表明：与对照组比较,１,２和４周组动物的心肌重量分别增加１５％,１８％和５７％;心肌ＳＲＣａ２＋摄取分别降低３３％,３８％和５３％;心肌ＳＲＣａ２＋ＡＴＰａｓｅ活性分别降低５４％,６０％和７４％;钙泵ｍＲＮＡ含量（基因表达分别降低１４％,４６％和６８％。这些结果提示,缺氧导致的ＳＲ钙泵功能降低可能是心肌功能受损的重要生化基础之一,而钙泵数目减少可能是钙泵功能降低的分子生物学机制。     

N~ 离子注入对不同辐射敏感性微生物超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性的影响

以Ｅ．ｃｏｌｉ和耐辐射微球菌（Ｄｅｉｎｏｃｏｃｃｕｓｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ）为试材,研究了Ｎ＋离子注入对其ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＰＯＤ活性的影响及其对自由基的清除。结果表明：Ｄ．ｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ经Ｎ＋离子注入后ＳＯＤ和ＣＡＴ酶活高于Ｅ．ｃｏｌｉ的,而ＰＯＤ酶活不仅很低也低于Ｅ．ｃｏｌｉ的;随剂量的增大,两者ＳＯＤ和ＣＡＴ酶活均为先增后减,只是其ＳＯＤ酶活的变化峰值对应剂量分别为６×１０１５Ｎ＋／ｃｍ２和２×１０１５Ｎ＋／ｃｍ２,而ＣＡＴ的则均为４×１０１５Ｎ＋／ｃｍ２;它们的ＰＯＤ酶活变化则不同,各处理耐辐射微球菌ＰＯＤ酶活保持低而恒定的水平,而大肠杆菌的则是中低剂量较恒定,较高剂量逐渐增大;对１０１６Ｎ＋／ｃｍ２注入的细胞培养到后对数期,再测其自由基ＥＳＲ波谱信号强度,发现比同剂量注入、未进行培养的要弱的多。     

Molecular cloning and characterization of hemoglobin alpha and beta chains from plateau pika (Ochotona curzoniae) living at high altitude

Hemoglobin (Hb) plays an important role in oxygen transfer from lung to tissues. Possession of a Hb with high oxygen affinity helps highland animals to adapt to high altitude, has been studied profoundly. Plateau pika (Ochotona curzoniae), a native species living at 3,000-5,000 m above sea level on Qinghai-Tibet Plateau, is a typical hypoxia and low temperature tolerant mammal. To investigate the possible mechanisms of plateau pika Hb in adaptation to high altitude, the complete cDNA and amino acid sequences of plateau pika hemoglobin alpha and beta chains have been described. Compared with human Hb, alterations in important regions can be noted: alpha111 Ala-->Asn, beta35 Tyr-->Phe, beta112 Cys-->Val, beta115 Ala-->Ser, and beta125 Pro-->Gln. Phylogenetic analysis of alpha and beta chains shows that plateau pika is closer to rabbit than to other species. This study provides essential information for elucidating the possible roles of hemoglobin in adaptation to extremely high altitude in plateau pika.     

败血症休克过程中心肌肌浆网钙摄取功能的变化及其机理探讨

本工作在大鼠盲肠结扎加穿孔（ＣＬＰ）腹膜炎败血症休克模型上休克不同阶段心肌肌浆网（ＳＲ）钙摄取功能的变化,并探讨了其变化机制。结果显示：败血症休克早期,心肌ＳＲ摄钙初速率降低,但ＳＲ最大摄钙量及Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性没有明显变化;败血症休克晚期,心肌ＳＲ摄钙初速率、最大摄钙量以及Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性显著降低。测定Ｘａ＾２＋,Ｍｇ＾２＋和ＡＴＰ对早、晚期要克大鼠心肌ＳＲ钙泵的亲和力以及     

高原鼢鼠和高原鼠兔骨骼无机化学成分的研究Ⅰ.常量元素

本文对高原鼢鼠和高原鼠兔骨骼中的无机常量元素K、N a、Ca、M g、P 和A l 进行了比较分析。研究结果表明, 高原鼢鼠骨骼中Ca、P、A l 的含量极显著地高于高原鼠兔(P <0.01) ,K 含量高原鼢鼠极显著地低于高原鼠兔(P < 0.001) , N a 和M g 的含量两者间无显著差异(P > 0.05) ; 骨骼各部位元素总量的分布顺序为: 高原鼢鼠下肢骨> 头骨> 脊柱; 高原鼠兔头骨> 下肢骨> 脊柱。15个元素对中, 大部分元素之间线性相关非常显著, 其中高原鼢鼠10对呈显著的线性相关, 高原鼠兔13对呈显著相关。     

Leptin cDNA cloning and its mRNA expression in plateau pikas (Ochotona curzoniae) from different altitudes on Qinghai-Tibet Plateau

Leptin, an adipocyte-derived hormone, plays an important role in body energy homeostasis. Plateau pika (Ochotona curzoniae), an endemic and keystone species living only at 3000-5000 m above sea level on Qinghai-Tibet Plateau, is a typically high hypoxia and low temperature tolerant mammal with high resting metabolic rate (RMR), non-shivering thermogenesis (NST), and high ratio of oxygen utilization to cope with harsh plateau environment. To explore the molecular mechanism of ecological acclimation in plateau pika, we first cloned pika leptin cDNA and compared its mRNA expression in different altitudes (3200 and 3900 m) using real-time RT-PCR (Taqman probe) technology. The full-length pika leptin cDNA was 3015 with 504 bp open-reading frame encoding the precursor peptide of 167 amino acids including 21 residues of signal peptide. Pika leptin was 70-72% homologous to that of other species and was of similarly structural characteristics with other species. The pika-specific genetic diversity in leptin sequence occurred at twenty sites. With the increase in altitude, there were larger fat store and high level of ob gene expression in plateau pika. Our results indicated that leptin is sensitive to cold and hypoxia plateau environment and may play one of important roles in pika's ecological adaptation to harsh plateau environment.     

高原鼠兔低氧诱导因子- 1α的初步研究

Hypoxia-induced factor-1 plays a key role during the cell hypoxia trausduction. Hypoxia induced factor-1α (HIF-1α) is a functional subunit of hypoxia-indueed factor-1. Plateau pika ( Ochotona curron/ae), which is a Qinghai-Tibet plateau native animal lived above 3 000 m, has high ratio of oxygen utilization to adapt to plateau hypoxia environments. One fragment of the coding re-gion of eDNA sequence of plateau pika HIF-1α was obtained by RT-PCR technique using a degeneracy PCR primer based on previ-ously reported eDNA sequence in human, cattle, house mouse and Norway rat HIF-1α gene. It was directly inserted into the vector pMD18-T. DNA sequencing proved that it was highly homology with human (91%), cattle (91%), house mouse (89%) and Nor-way rat 89%) HIF-1α gene. The study provides basic important information for the HIF-1α cDNA whole sequence cloning of pla-teau pika and its functional study.     

ATP稳定肌浆网膜蛋白色氨酸相关构象的机理的探讨

在无ＡＴＰ存在时,带相同正电荷、但饱和不同的两种胺类两亲物,即Ｃ１８饱和的硬脂胺与单不饱和的油胺引起肌浆网蛋白内源荧光强度降低,当ＡＴＰ或一些阴离子化合物先与肌浆网作用,再加入硬脂胺或油胺,则肌浆网蛋白内源荧光下降幅度明显减小,即存在拮抗作用。腺苷对硬脂胺或油胺均无此拮抗作用。肌浆网与油胺先保温,再加入ＡＴＰ或阴离子化合物,ＡＴＰ仍有拮抗,阴离子化合物对油胺则无拮抗作用。然而在肌浆网钙泵蛋白上存在     

高原鼢鼠和高原鼠兔骨骼无机化学成分的研究Ⅱ.必需微量元素

本文报道了高原鼢鼠和高原鼠兔整体骨骼及头骨、脊柱骨和下肢骨中Ｃｕ、Ｚｎ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｏ、Ｃｒ、Ｔｉ、Ｆ、Ｓｅ和Ｇｅ１２种必需微量元素的含量,并进行了显著性差异和相关性分析。结果表明：只有Ｃｕ的含量在两种动物骨骼中没有显著性差异（Ｐ＞０．０５）,其余１１种元素均有显著性或极显著性差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）,其中Ｚｎ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｍｏ、Ｆ和Ｓｅ的含量,高原鼢鼠＞高原鼠兔,而Ｃｒ、Ｔｉ和Ｇｅ的含量,高原鼠兔＞高原鼢鼠。微量元素在头骨、脊柱骨和下肢骨中分布很不均衡,以头骨的微量元素最为丰富     

高原鼠兔血清无机元素含量的分析

测定分析了高原鼠兔血清电解质、无机元素、血清铁和总铁结合力, 并与人和其它实验动物的相应指标进行了比较。得出以下主要结论: 1.高原鼠兔血清电解质浓度不受生活环境和食物条件的影响, 其机体能自身调节血清离子浓度, 以维持电解质在血液中的相对衡定; 2.高原鼠兔血清铁含量与其栖息地海拔相关, 随海拔升高血清铁含量增加; 3.高原鼠兔通过增加运铁蛋白与铁的结合力作为适应高原低氧环境的方式之一。