MPV_2显微分光光度计测量光阑的改进

MPV_2显微分光光度计是西德Leitz的产品,可对细胞内物质作定量测量。仪器原有的测量光阑是连续可变的虹彩式光阑,测量过程中用目镜测微尺读出光阑的直径,按内接多边形或圆的面积公式近似求出光阑的面积。用双区法、双波法测定细胞内物质相对质量时,由于被测物的相对质量与测量光阑面积成正比,因此如对光阑直径的读数稍有误差,就会直接影响测量结果的准确性。此外,每测量一个细胞,都要在目镜测微尺上读光阑直径,既费时又费力。为此,我们设计     

测定细胞内自由钙的显微荧光光度计的研制和应用

以ＸＳＪ－２型荧光显微镜为基础,建立了测定细胞内自由钙的显微荧光光度计,为建立这套装置,对荧光显微镜主要作了如下改动：首先,为提供稳定的激光光源,交流汞灯被换成直流氙灯;其次光路中安装了镶有两块干涉滤色片的激发滤色片转盘,使生物样品交地被两种不同波长的光激发。整套装置的运转在微机控制下,在这套装置上,成功地用Ｆｕｒａ－２测定了细胞内自由钙变化,文中提供了应用实例。     

紫外分光光度计法与酶标仪微量法测定酚氧化酶蛋白含量及活力的比较

分别采用紫外分光光度计比色法与酶标仪微量法测定菜青虫Pieris rapae(L.)体内酚氧化酶蛋白含量和活力,以水杨醛缩对硝基苯胺为抑制剂,对2种方法的结果进行比较。结果表明,微量法和比色法在检测酚氧化酶(PO)蛋白含量、酶活力和抑制剂对PO抑制作用时结果无显著性差异。因此,微量法可以替代比色法,使用试剂量大大降低,重复性好,操作简单、快捷。     

应用MPV—2型显微分光光度计测定真菌分生孢子细胞核的DNA含量

准确测定真菌分生孢子细胞核的DNA含量,是研究真菌遗传学和细胞化学的重要手段。过去,测定真菌孢子细胞核DNA含量的方法,大多采用常规的生物化学方法,通过提取孢子内的DNA物质,进行测定。但是,这种测定方法对真菌来讲,往往由于难以准确核计被测定孢子的数目,且提取孢子内的DNA步骤繁     

一种测量细胞面积的显微光度方法

细胞生物学研究中广泛应用显微分光光度计测定单个细胞中特定物质的含量。通常在测含量的同时还要求获得单个细胞内此种物质分布的面积。对形状规则的被测物质,一般常用目镜测微尺测出长度,再算出面积。但这种方法不仅费时,费力,而且不适于测量形状不规则的单个细胞。我们在采用双区法,在测量物质含量的同时,可以很方便地测出不规则形状细胞內被测物质所占的面积。显微分光光度计测量物质含量的方法中常用的有两种——双区法和双波法。在公式推导中有一项被测物面积:B(1-F),其中(1-F)是测量光阑面积中含有被测物部份所占的百分数,B是测量光阑面积。在双区法中(1-F)=(1-T)/(1-T~*)(其中T~*是测量     

一种测量细胞面积的显微光度方法

细胞生物学研究中广泛应用显微分光光度计测定单个细胞中特定物质的含量。通常在测含量的同时还要求获得单个细胞内此种物质分布的面积。对形状规则的被测物质,一般常用目镜测微尺测出长度,再算出面积。但这种方法不仅费时,费力,而且不适于测量形状不规则的单个细胞。我们在采用双区法,在测量物质含量的同时,可以很方便地测出不规则形状细胞内被测物质所占的面积。显微分光光度计测量物质含量的方法中常用的有两种——双区法和双波法。在公式推导中有一项被测物面积:B(1—F),其中(1—F)是测量光阑面积中含有被测物部份所占的百分数,B是测量光阑面积。     

蝗虫复眼光谱敏感性的比较研究——Ⅰ.屏蔽色素显微分光光谱的测量

用显微分光光谱法,测定了9种蝗虫复眼两类屏蔽色素的光密度。咖啡色屏蔽色素在400—520nm 波段密度最高,在深红区密度最低。反光屏蔽色素在365—390nm 波段的密度最高,在深红区最低。此外还测定了9种蝗虫之一的黄脊蝗复眼的光屏蔽色素的反射光谱,结果显示在近紫外和橙红区反光率最高。关于屏蔽色素对蝗虫视觉功能如光谱敏感性、明适应、视锐度、视色素和间视紫红之间的转化等问题曾加以讨论。     

两种北虫草硒含量的比较

目的:比较富硒北虫草和普通北虫草的总硒含量、无机硒含量和有机硒含量。方法:采用紫外分光光度法测定富硒北虫草和普通北虫草的总硒含量和无机硒含量,然后通过计算得出有机硒含量。结果:富硒北虫草中总硒含量高于普通北虫草70倍左右,而有机硒含量则大约是普通北虫草的100倍,且富硒北虫草中有机硒含量为总硒含量的97%左右。结论:鞍山华宇生物科技有限公司开发的富硒北虫草中有机硒的含量明显高于普通北虫草,具有良好的使用前景。     

三种转基因酵母法筛选类雌激素活性物质方法的比较

利用转基因酵母菌株,分别采用摇瓶法、96孔板法和单板法筛选类雌激素活性化学品,并对实验参数进行了优化。通过对工作光密度及β半乳糖苷酶反应时间的优化,使改进后的转基因酵母筛选法筛选一批样品的时间从原来需要的几天缩短为半天。并且在时间缩短的同时,仍保留原来检测的高灵敏度和准确性,也节省了大量的试验耗材,达到了能应用于环境样品中类雌激素活性物质的快速测定的目的。       

线粒体的两种染色方法比较

取材与制作：制做光镜下线粒体的显微标本,材料可来自动、植物的不同组织,但相同的材料用不同的方法染色其效果大不相同。笔者在制作该切片过程中,取材于小鼠空肠段和肾脏器官,用Ｒｅｇａｕｄ液固定,常规石腊包埋并切片３微米。将两种不同材料的切片分别用两种方法染...     

斑马鱼两种转基因方法的比较

对斑马鱼(Danio rerio)的两种转基因方法进行比较,分别采用显微注射和电脉冲导入法将携带有GFP报告基因的表达载体质粒导入斑马鱼受精卵,得出电脉冲最佳导入条件为最适电压125 V/cm,电阻50 Ω,最佳导入时期为1-2细胞期(40-50 min),以及最佳外源基因浓度为300 ng/μL.利用两种方法均得到转GFP基因的斑马鱼,而两种方法对比的结果表明,显微注射法耗时费力,但转基因阳性率高;电脉冲法一次可以处理大批量受精卵,但转基因阳性率远低于显微注射法.     

两种质粒转化方法的比较

本文对一种快速质粒转化方法与传统质粒转化方法进行比较,发现前者每微克超螺旋质粒ＤＮＡ能获得１．３４×１０４～２．３６×１０５个转化子,且整个过程快速简便稳定,能满足一般的质粒克隆转化要求。     

两种纯化蓖麻毒素方法的比较

两种纯化蓖麻毒素方法的比较陈兴,赵立超,贺永怀,沈倍奋（军事医学科学院基础医学研究所,北京１００８５０）高纯度的蓖麻毒素（ｒｉｃｉｎ）对于免疫毒素的制备至关重要,直接影响到免疫毒素的应用效果。总结本实验室纯化ｒｉｃｉｎ的经验,我们发现蓖麻粗提物依次通...     

对同一细胞内DNA、RNA和蛋白含量相关测定的显微荧光光度法

用荧光染料DAPI、PyroninY和FITC分别染同一细胞内DNA、RNA和蛋白.在紫外光、绿光和兰光顺序激发后,用MPVⅡ显微荧光光度计测量反映单个细胞内DNA、RNA和蛋白含量的荧光强度.根据荧光发射光谱分析,每种染料荧光之间的干扰是可以忽略的.测量结果与FCM获得的结果是一致的.显微荧光光度术对单个细胞多参数相关测量的优点是简单、便宜,并可用于对活细胞获得形态学和定量细胞化学的组合信息.     

黄连木雌雄株叶水溶性酚类物质和两种氧化酶活性的比较

黄连木为雌雄异株植物。为探索鉴别黄连木幼苗性别的方法,应用比色法对其雌雄株不同发育阶段叶片中水溶性酚类物质的含量、过氧化物酶(POD)活性和多酚氧化酶(PPO)相对活性进行测定和比较分析,结果表明:不同性别的黄连木叶片水溶性酚类物质含量存在极显著的差异(p<0.01);POD、PPO相对活性在雌雄株间也存在显著差异,特别在老叶中则存在极显著差异,认为黄连木雌雄株老叶中的水溶性酚类物质含量差异,可以作为其性别鉴定的依据,为进一步研究黄连木植株早期性别鉴定提供参考。     

测定植物体内氯离子含量的滴定法和分光光度法比较

以耐盐性较强的大麦(Triticum aestivum)品种‘鉴4’幼苗为材料,比较硝酸银滴定法与分光光度法(分别以明胶-乙醇水溶液和丙酮作为胶体保护剂)测定植物体内氯离子含量的结果表明,无论是实验数据的准确性和重现性,还是实验操作的简便性,分光光度法(特别是以明胶.乙醇水溶液作为肢体保护剂)都优于滴定法。     

巨噬细胞细胞内吞过程中膜受体流动性的测量——两种标记受体方法的比较

本文首次实现了细胞内吞过程中膜受体流动性的测量。实验选择巨噬细胞膜和伴刀豆凝集素A(ConA),分别用Con A-Biotin Avi-din-FITC(ABC法)和Con A-FITC(直接法)两种方法标记巨噬细胞膜Con A受体,比较了这两种方法标记的巨噬细胞Con A受体的荧光强度;利用FRAP(Fluorescence RecoveryAfter Rhotobleaching)技术,分别用两种标记方法测量了巨噬细胞Con A受体的流动性。结果显示Con A-Biotin Avidin-FITC标记的巨噬细胞受体的平均荧光强度比用Con A-FITC标记的平均荧光强度高大约3倍;直接标记法应用于细胞内吞过程中受体流动性的测量在方法学上存在着很大的缺陷,ABC标记法适合于测量细胞内吞过程中膜表面受体的流动性的变化,且灵敏度高、误差小;ABC方法标记受体的测量结果显示,Con A刺激后巨噬细胞膜表面Con A受体的扩散系数和荧光恢复率与静息状态相比呈下降趋势。     

两种稻田摇蚊采集方法的比较

本文介绍了一种较为简便和节省人工的稻田摇蚊田间取样方法:笼罩法,并将笼罩法得到的稻田摇蚊群落结构和发生动态和吸虫器法得到的结果进行了比较。研究结果表明:在水稻的4个生育期中,笼罩法和吸虫器法均采集到了中华摇蚊Chironomus sinicus Kiknadze,Wang,Istomina&Gunderina;台湾长跗摇蚊Tanytarsus formosanus Kieffer;云集多足摇蚊Polypedilum nubifer Skuse和刺铗长足摇蚊Tanypus puncitpennis Meigen,而吸虫器法还采集到微小沼摇蚊Limnophyes minimus Meigen。其中中华摇蚊和台湾长跗摇蚊为优势类群,笼罩法取样得到的两种优势种种群密度均高于吸虫器法的,例如在拔节期时笼罩法取样得到台湾长跗摇蚊的种群密度是吸虫器法的22倍。通过取样变异系数的比较发现,两种方法精确性都并不理想,在今后的试验中可以通过增加取样的样点量或取样面积来提高精确度。相比较而言吸虫器法操作复杂,而且较为耗时,在实际操作中往往受到一定条件的限制,而笼罩法则具有操作简便、准确度高等优点,试验安排可以进行高频率取样,能够更准确地反映田间摇蚊的种群动态。因此,笼罩法为以后研究与摇蚊生活习性相似的稻田节肢动物类群(如蚊科昆虫)提供了一种新的取样方案。