植物和土壤δ13C的分析误差校正与数据标准化

植物和土壤中稳定碳同位素(δ¹³C)可用于指示、示踪和整合碳循环关键过程与功能。双路和连续流气体稳定同位素比值质谱仪(IRMS)是δ¹³C的两种测试技术,其精度和准确度受分析误差和数据标准化方法影响。分析误差包括记忆效应、时间漂移和信号强度依赖性等。将测定序列按样品δ¹³C从低到高排列或延长气路冲洗时间消除或降低记忆效应;在测样序列中内插标准物质并建立测定时间与分析误差的函数关系校正时间漂移;信号强度依赖性应先校正样品空白效应,再校正仪器非线性响应。数据标准化包括标准物质和数据标准化方法选择。选择的标准物质δ¹³C应涵盖待测样品δ¹³C,且遵循同等处理原则;标准物质数量≥4或每个标准物质重复测定次数≥4;数据标准化体系应长期稳定,并添加监测标准物质。     

一种测量细胞面积的显微光度方法

细胞生物学研究中广泛应用显微分光光度计测定单个细胞中特定物质的含量。通常在测含量的同时还要求获得单个细胞内此种物质分布的面积。对形状规则的被测物质,一般常用目镜测微尺测出长度,再算出面积。但这种方法不仅费时,费力,而且不适于测量形状不规则的单个细胞。我们在采用双区法,在测量物质含量的同时,可以很方便地测出不规则形状细胞內被测物质所占的面积。显微分光光度计测量物质含量的方法中常用的有两种——双区法和双波法。在公式推导中有一项被测物面积:B(1-F),其中(1-F)是测量光阑面积中含有被测物部份所占的百分数,B是测量光阑面积。在双区法中(1-F)=(1-T)/(1-T~*)(其中T~*是测量     

一种测量细胞面积的显微光度方法

细胞生物学研究中广泛应用显微分光光度计测定单个细胞中特定物质的含量。通常在测含量的同时还要求获得单个细胞内此种物质分布的面积。对形状规则的被测物质,一般常用目镜测微尺测出长度,再算出面积。但这种方法不仅费时,费力,而且不适于测量形状不规则的单个细胞。我们在采用双区法,在测量物质含量的同时,可以很方便地测出不规则形状细胞内被测物质所占的面积。显微分光光度计测量物质含量的方法中常用的有两种——双区法和双波法。在公式推导中有一项被测物面积:B(1—F),其中(1—F)是测量光阑面积中含有被测物部份所占的百分数,B是测量光阑面积。     

唐菖蒲球茎中抗真菌物质的部分性质研究

本文报道唐菖蒲球茎中抗真菌活性物质的成分及其分子量测定方法和结果。用沸水提取,经过超滤、透析、柱层析,纯化到一种有抗真菌活性的物质。排除了它是蛋白质、核酸、脂类及小分子物质的可能性,确定这是一种多糖,定名为唐菖蒲抗真菌多糖（Gladiolus hntifungal Polysaccharide,简称GAFS）。真空旋转蒸发干燥后,用苯酚-硫酸法测得干燥后的样品糖含量为44．08％,用FPLC（快速蛋白质液相层析仪）测其分子量为15750。     

低能离子在植物样品中长程穿透行为的研究

采用透射法测量了一定厚度的植物样品在接受低能离子辐照时从其后表面出射的荷能粒子。所测样品包括30、50和100μm芸豆子叶切片和20μm的西红柿皮,测量结果表明低能离子在植物样品中存在长程穿透现象,在芸豆切片中的穿透深度至少可达60μm,此时穿透的概率很小,大于10^-5;长程穿透的离子产生的损伤空间分布不均匀。样品的高能质子透射能谱显现辐照损伤不是特别严重,推测这种长程穿透的现象由植物样品本身的结构决定。     

MPV_2显微分光光度计测量光阑的改进

MPV_2显微分光光度计是西德Leitz的产品,可对细胞内物质作定量测量。仪器原有的测量光阑是连续可变的虹彩式光阑,测量过程中用目镜测微尺读出光阑的直径,按内接多边形或圆的面积公式近似求出光阑的面积。用双区法、双波法测定细胞内物质相对质量时,由于被测物的相对质量与测量光阑面积成正比,因此如对光阑直径的读数稍有误差,就会直接影响测量结果的准确性。此外,每测量一个细胞,都要在目镜测微尺上读光阑直径,既费时又费力。为此,我们设计     

基于ATP的微菌含量样品快速检测方法的研究

本实验分别采用ATP生物发光法和营养琼脂平板培养法对血透用水中微量细菌总数进行检测,针对ATP检测方法在微菌含量样品检测中的应用限制,设计并实现了新的集菌方式和进样方式。首先将被测样品中的微量细菌浓缩到集菌膜上,再原位使其充分裂解,然后取微量液体进行测试,这样解决了现有ATP生物发光监测仪微量进样测试要求的弊端。通过这种改进,成功实现了利用ATP发光法快速检测微量浓度菌液。利用该检测装置和测试方法,我们尝试了检测0-100CFU/mL的被测样品,并用平板培养法进行定标,实验结果表明:在2—100CFU/mL被测范围内,其线性度和灵敏度较好,相关系数达到0.99887。这就为微菌含量样品快检领域提供了新的可尝试的实验方法和机遇。     

双挤压膨化可提高对麦麸膳食纤维的溶解性

采用双螺杆挤压膨化机处理添加了0%、10%、20%、30%玉米的小麦麸皮及100%玉米的样品,提取各组样品中的水溶性膳食纤维（SDF）、水不溶性膳食纤维（IDF）、总麦麸纤维（TDF）,从而选出SDF含量最高的一组,并测定了100%麦麸与添加20%玉米样品的组分,研究了由该两组样品提取出来的SDF的物理性质。结果表明：水溶性麦麸纤维有了很大的变化,其中添加20%玉米的样品组相对于其他样品组提高了4.33%~7.00%,被改性的物质主要是不溶性纤维中的半纤维素。由添加20%玉米的样品组得到的SDF相对于同条件下未添加玉米的样品组的膨胀力由0.100 4增长到2.291 0mL/g,保水能力由2.098 9增长到4.274 6g/g,水溶解度由79.29%增长到84.02%。     

以核糖体蛋白质鉴别铜绿微囊藻的应用分析

旨为研究以核糖体蛋白质为生物标识物的基质辅助激光解吸/电离平衡飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)法鉴别混合及实际蓝藻样品的可行性。通过机械破碎和高速离心的前处理步骤获取待测蓝藻样品的核糖体蛋白质组分,使蛋白质原位结晶后进行MALDI-TOF MS测定,并选择特定的13个核糖体蛋白质为生物标识物进行蛋白质组学分析。结果表明在筛选的最优实验条件下,模式藻株铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)能在混合样品中被精确鉴别出,标识物特征峰的检出率均大于75%,通过对不同藻细胞密度的样品测定,混合蓝藻样品中M.aeruginosa的最低生物量检出限为2.88×106cell,所占比例为37%,核糖体蛋白质特征峰值的误差在合理范围内;M.aeruginosa在太湖实际蓝藻样品中也被成功鉴别出,特征峰的检出率为76.9%。综合分析表明,基于核糖体蛋白质为生物标识物的MALDI-TOF MS法能成功应用于混合和实际蓝藻样品的鉴别且可能成为未来实际水体中蓝藻日常监测的手段。     

用管碟法测定碱性蛋白酶活力

参照抗生素效价生物测定法,用管碟法测定碱性蛋白酶活力,可大大提高菌种筛选的工作效率。待测样品在２％酪蛋白平板上的水解圈直径被效正后,从标准曲线上可查得相应的酶活。管碟法测得的酶活与Ｆｏｌｉｎ法测得的酶活相差一般小于２０００ｕ／ｍｌ。管碟法测定酶活时,操作要求认真仔细,操作误差可使一样品的水解圈直径相差２．９ｍｍ,但一般误差在０．２～０．３ｍｍ,相应酶活误差小于１０００ｕ／ｍｌ。     

含油脂量高的生物样品的消化及其元素的测定

油脂样品,尤其是含油脂量高的生物样品,很难消化。目前还没有一种简便易行的通用方法。本文对此类样品,提出了碳化一消化法。该法较彻底地解决了油脂样品的消化,并适用于所有含油脂的生物样品。这为油脂样品中元素含量的测定,开辟了一条新的途径。通过用冷原子荧光测汞仪测定油脂样品中汞含量,说明本法不仅操作简便,而且用于回收汞这类极易挥发的物质,也能得到满意的结果。     

“太岁”生物学组分的研究

＂太岁＂是一种存在于地球上分类地位尚不清楚的生物体。对实验室保藏的7种不同的＂太岁＂样品进行了生物学组分的定性定量分析,旨在科学地了解＂太岁＂的组成成分,同时为＂太岁＂有效成分的开发利用和分类鉴定提供理论依据。对实验室保藏的7种＂太岁＂样品做生物组分及含量分析,具体包括：苯酚硫酸法测粗多糖含量、凯氏定氮法测粗蛋白含量、索氏提取法测粗脂肪含量、钒钼酸显色法测核酸含量、灼烧重量法测粗灰分含量、恒温干燥法测水分含量、原子吸收法测微量元素含量。实验结果表明,7种＂太岁＂样品含水量均较高,除LNUT006含水量73.58%外,其余＂太岁＂样品均达到90%以上;＂太岁＂样品中粗多糖含量在8.97~46.57 mg/g之间,其中LNUT006多糖含量明显高于其他＂太岁＂样品;粗蛋白含量在20.35~184.18 mg/g之间,其中LNUT006蛋白含量明显高于其他＂太岁＂样品;＂太岁＂样品中净核酸含量在2.053~35.128 6μg/g之间;灰分含量在42.93~246.4 mg/g之间;＂太岁＂样品钙、铁含量较高,分别为2 907.09μg/g和3 929.09μg/g,铅、镉含量最低。首次对未知生物＂太岁＂样品的组成成分进行初步系统的研究,为明确其组分和对其进一步的开发利用均有很重要的意义。     

尿液睾酮的准确测定

在放免测定中,分离纯化样品中待测物质是保证测定准确性的一个重要步骤。生殖甾体激素常规放免测定方法,一般采用乙醚或其它有机溶剂抽提分离样品中待测的甾体激素。但这种方法不能完全将甾体同样品中可与抗血清发生交叉反应的物质分离开,往往得到过高的测定结果。本文介绍在尿液睾酮的放免测定中加用Celite柱层析纯化步骤,获得较为准确的测定结果,并和常规放免方法所得结果相比较。     

食虫迁徙鸟白腹蓝[姬]鹟的能量代谢

生物与其环境之间最主要的连续性在于能量交换及能量传递。由于鸟类在动物界的特殊地位,对环境污染的敏感指示,以及与人们生活的密切关系,因而对鸟类能量及能流的研究一直受到重视。例如King(1961,1974)用物质平衡方法,把鸟类能量消耗划分基本维持生存能,运动活动能及生长繁殖能。 研究生命过程中的能量消耗及相互联系,可采用直接测热法与间接测热法。直接测热法是直接测量动物在一定时间放散到周围环境中的全部热量,但由于仪器装置庞大,操作复杂,误差较大等原因,故很少应用。目前广泛使用的是间接测热法,即测定动物的气体代谢,最常用的是测定动物的耗氧量,然后可根据耗氧量换算热量单位。     

非损伤微测技术及其在环境科学领域的应用

非损伤微测技术(NMT)主要是通过计算机控制选择性微电极,测量距被测物几微米处两点的电压,然后通过校正曲线、Nernst方程和Fick第一扩散定律公式换算出离子或者分子的移动速率。它具有保持样品完整性、时间空间分辨率高及可同时测量多个位点的优势,可用于生物体内分子或者离子流实时测量。本文概述了NMT在环境科学领域应用原理与特点,就该项技术在重金属污染土壤植物修复机理、植物抗土壤盐渍化和水环境生物监测等方面的应用进行了综述,并指出该技术在环境科学领域应用的不足与前景。     

一测多评法测定不同产地黄柏炭中4种生物碱含量

为建立同时测定不同产地黄柏炭中4种生物碱成分(黄柏碱、木兰花碱、小檗红碱、小檗碱)的一测多评法。实验以小檗碱为内参物,基于HPLC法建立小檗碱与其它成分的相对校正因子,并用校正因子计算4种成分的含量;用外标法和一测多评法同时测定30批黄柏炭样品的含量。结果表明30批黄柏炭样品的外标法与一测多评法结果之间无明显差异,说明了一测多评法的准确性和可行性。因此在缺乏对照品的情况下,以小檗碱为内参物同时测定黄柏碱、木兰花碱、小檗红碱的含量是可行的。该方法准确性和重复性良好,可用于黄柏炭的质量控制。     

用血球计数板测定核多角体病毒数量的误差分析

用血球计数板测定核多角体病毒的数目比较方便,但误差较大。我们曾分析了影响计数结果的一些因素,加以统计分析,希望找出减少误差的途径。现将结果报告如下。统计分析主要是对待测样品在计数室内静     

氧瓶燃烧法制备~3H生物样品

在液闪技术中,样品的制备是很关键的一步。根据实验材料的性质,可供选择的方法很多。由于液闪的测量是在非极性溶剂中进行的,而要测定的生物样品又大多是亲水性物质,这就构成了液闪测量技术中的一对矛盾。为解决这一矛盾而提出的各种样品制备方法不外乎两大类型,一类是将样品分散悬浮在闪烁液中(悬浮法、乳化法),或沉淀吸附在滤纸片、玻璃纤维膜制成的盘片或其他固体支持物上(纸片法)的非均相测量;另一类是加入助溶剂或长脂肪链季胺类组织溶解剂,使样品与闪烁液互溶     

旧石器和古人类遗址释光测年技术的可靠性和测年上限

释光测年技术已成为旧石器和古人类遗址,尤其是现代人类遗址,建立年代框架的重要工具之一。这一技术提供了现代人类出现在非洲、亚洲和澳大利亚的最早年代证据。本文简要介绍了释光测年的基本原理,对释光测年的可靠性和上限及所受的影响因素进行了综述。光释光测年的精密度(相对标准误差σ)一般为5%-10%,在理想条件下σ<5%,但是σ>10%的情况也不少见。与大量其他测年方法所获结果的一致性表明,光释光测年技术是可靠的。光释光测年的上限与样品的释光性质及环境剂量率有关,释光可靠年龄最大可达1百万年。对大多数遗址50万年的测年上限是可行的,这个年代范围涵盖了所有的现代人遗址。不同样品或颗粒间的释光性质差异很大,因而它们有不同的测年上限。同一样品中钾长石比石英有更高的测年上限,同一矿物中不同的释光信号对应的测年上限也不同。     

微板法在植酸酶活测定过程中的应用

在丙酮法测磷的基础上,在醇活测定时引入微板法。微板法是源于酶联免疫测定的一种新方法,用其进行植酸酶活测定时,可以大大提高工作效率,降低实验成本。并右减少测定过程中的人为误差。