雄激素受体与雄激素应答元件的相互作用

将雄激素受体（ＡＲ）的ｃＤＮＡ１１１９ｂｐ片段（１１０５－２２２４）（其中包含其ＤＮＡ结合结构域到部分激素结合结构域）克隆于表达南粒ｐＧＥＸ中,通过ＩＰＴＧ诱地,在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达ＧＳＴ－ＡＲ融合蛋白,经谷胱甘肽－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ亲和层析得以部分纯化。利用一个有雄激素应答元件（ＡＲＥ）活性的Ｃ３（１）ＤＮＡ片段为阳性探针,通过凝胶阻滞分析和ＤＮａｓｅ１足迹法证明此表达产物具有牧民的ＤＮＡ     

前列腺专一蛋白因子抑制雄激素受体与其应答元件作用

雄激素受体片段（氨基酸：３５９￣７３２）以及糖皮质激素受体片段（氨基酸：３９６￣５４８）以与ＧＳＴ融合形式在大肠杆菌中分别表达为ＧＳＴ－ＡＲ和ＧＳＴ－ＧＲ两种融合蛋白,它们含有ＤＮＡ结合结构域和一些旁侧氨基酸,凝胶阻滞分析表明能与雄激素／糖皮质激素应答元件（ＡＲＥ／ＧＲＥ）在体外结合。本文报道在大鼠前列腺中发现有抑制ＧＳＴ－ＡＲ以及ＧＳＴ－ＧＲ与ＡＲＥ／ＧＲＥ结合的因子,抑制作用与ＡＲＥ／ＧＲＥ来     

COUP—TE和RARβ受体的表达影响癌细胞对视黄酸的敏感性

视黄酸(RA)通过其受体RARs和RXRs发挥作用。Northern blot显示,RARβ的表达介导RA对癌细胞的生长抑制作用。然而,其它的结果表明,RARβ的表达还不能完全驱动癌细胞对RA的应答,由此提示,癌细胞的RA敏感性除了受RARβ影响外,还受其它因子影响。COUP-TF则是其中的一个因子。凝胶阻抑测定和CAT测定表明,COUP-TF通过降低βRARE的基础转录活性来加强癌细胞的RA敏感性。结果证实,RARβ和COUP-TF受体的表达能够调节癌细胞对RA的敏感性。     

孤核受体的研究进展

孤核受体是没有配体或尚未发现配体的核受体。数十种孤核受体亚家族广泛分布于机体各组织。孤核受体可以在孤核受体相关辅助因子的调控下，以单体或多聚体形式与孤核受体作用元件作用来调控基因转录，从而调节机体的各种生理活动。目前已有部分孤核受体的配体被发现，这对孤核受体的研究具有重要意义。     

胃癌细胞中视黄酸受体抑制AP-1活性的不同方式

 研究胃癌细胞中视黄酸受体RARα和RARβ抑制活化蛋白 1(activatorprotein 1,AP 1)活性的不同方式及其与全反式视黄酸 (ATRA)作用的相关性 .瞬时转染RARβ表达载体到MKN 4 5细胞后 ,佛波脂 (TPA)诱导的AP 1活性受到明显抑制 ,且与RARβ浓度正相关 ,与ATRA存在与否无关 ;相反 ,RARα转染细胞后 ,对TPA诱导的AP 1活性的抑制不仅与RARα的浓度相关 ,而且依赖于AT RA .凝胶阻抑测定表明 ,TPA可以显著加强AP 1结合活性 ,当ATRA处理不表达RARβ和低表达RARα的MKN 4 5细胞后 ,AP 1结合活性不受影响 ;然而 ,表达RARα和RARβ的BGC 82 3细胞经AT RA处理后 ,TPA诱导的AP 1结合活性则受到抑制 .另外 ,分析与抗AP 1活性相关的RARβ功能区表明 ,DNA结合区的缺失导致RARβ抑制AP 1活性作用的丧失 ,而配体结合区对于RARβ抑制AP 1活性则是非必需的 .以上结果证实 ,有胃癌细胞中 ,RARβ可能是AP 1活性的抑制因子 ,RARα则可能是ATRA作用的靶向 .尽管它们的作用方式有所不同 ,但最终都可以通过抑制AP 1活性来抑制胃癌细胞生长     

血清对全反式视黄酸抑制肺癌细胞生长的影响

 研究不同浓度的血清对全反式视黄酸 (ATRA)抑制肺癌细胞生长的影响 .当细胞培养在 10 %血清中 ,ATRA不能抑制肺癌细胞生长 ,但是当细胞培养在 1%血清中 ,ATRA能够有效地抑制肺癌细胞生长 .视黄酸受体RARβ介导视黄酸的抗癌作用 .Northern印迹分析表明 ,在高浓度血清中AT RA不能诱导RARβ表达 ,但在低浓度血清中ATRA可以诱导RARβ表达 ,并且瞬时转染和CAT测定证实是通过激活RABβ启动子转录活性而诱导RARβ表达的 .孤生受体Nur77受到血清生长因子刺激后会大量表达 ,具有抗视黄酸活性的作用 .肺癌细胞培养在低浓度血清中 ,Nur77mRNA低水平表达和Nur77蛋白不表达 .然而在高浓度血清中 ,Nur77mRNA和蛋白高水平表达 .另外 ,在无血清条件下 ,EGF也可以诱导Nur77表达 .结果提示 ,血清中的生长因子可能拮抗ATRA抑制肺癌细胞生长的作用 ,其作用途径可能是通过刺激细胞中Nur77表达 ,或者通过下调RARβ启动子的转录活性而抑制RARβ的表达     

雄激素受体的作用机制

主要概述了雄激素受体的作用机制,特别对影响雄激素受体特异性的因素进行探讨.雄激素受体（AR）属于甾体激素受体超家族,能通过配体依赖方式与特异的DNA序列结合,调控基因转录.     

雄激素应答元件假冒DNA对PSA基因启动子的抑制作用

研究雄激素应答元件假冒DNA(AREdecoy)对前列腺特异抗原 (PSA)基因启动子的抑制作用 .联合运用报告基因和假冒DNA策略 ,构建了含PSA基因 5′侧启动子区 6 40bpDNA的萤光素酶表达载体pGL3 PSA ,与人工合成的双链硫代ARE假冒DNA共转染前列腺癌细胞株PC3 M并作用不同的时间 (2 4h、4 8h、72h) .应用双萤光素酶测定系统 ,检测萤光素酶的表达活性 .结果显示 :AREdecoyDNA显著抑制报告基因萤光素酶的表达 ,抑制率可达 95 % ,而对照decoyDNA无此作用 .作用不同的时间对萤光素酶活性的抑制无显著性差异     

低氧预适应对小鼠海马组织HIF-1与EPO低氧应答元件结合活性的影响

目的：观察低氧预适应对小鼠海马组织HIF-1与EPO的低氧应答元件（HRE）结合活性的变化,探讨这种变化与低氧预适应形成的关系。方法：小鼠低氧0次（H0）,1次（H1）,4次（H4）后取海马组织,应用凝胶迁移改变试验（EMSA）,染色体免疫共沉淀（ChIP）试验和荧光定量PCR（real—time PCR）技术,检测小鼠海马组织内HIF-1与EPO的低氧应答元件结合能力的变化。结果：EMSA体外结合实验及ChIP体内结合实验发现。H0、H1和H4组结合活力依次增强。结论：HIF-1与EPO的低氧应答元件结合增强可能参与预适应的形成。     

拟南芥鼠李糖合成酶基因AtRHM1启动子区葡萄糖应答调控元件的鉴定

植物中,UDP-L-鼠李糖是细胞壁骨架的主要成分,由鼠李糖合成酶催化底物UDP-α<,-D->葡萄糖合成.本实验从拟南芥基因组中分离了鼠李糖合成酶基因AtRHM1 1058bp的启动子序列并对启动子5'端进行了不同长度的缺失.将全长启动子及不同缺失启动子与GUS报告基因进行融合后转化野生型拟南芥,获得了一系列转基因植株.启动子缺失分析结果表明,AtRHM1基因在转录水平上受葡萄糖的诱导,参与葡萄糖应答反应的顺式调控元件位于启动子的-931 bp～-752bp区域.     

视黄酸对胰岛素受体表达的影响

ＳＭＭＣ－７７２１细胞经１０μｍｏｌ／Ｌ视黄酸（ＲＡ）处理１－５天后,完整细胞或纯化胰岛素受体（Ｉｎｓ－Ｒ）对胰岛素（Ｉｎｓ）的结合容量逐日降低。＾％３５Ｓ－甲硫氨酸参人Ｉｎｓ－Ｒ明显减少,特别是β亚基。部分纯化Ｉｎｓ－Ｒ的酷氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活力也随ＲＡ处理时间延长而逐步降低。结果表明ＲＡ降低Ｉｎｓ－Ｒ的表达。但ＲＡ并不改变Ｉｎｓ－Ｒ与Ｉｎｓ结合的亲和力和它的负协同效应。     

甲状腺素及维甲酸对成骨样细胞甲状旁腺素受体的调节作用

研究了甲状腺素（T3／T4）及维甲酸（RA）对大鼠成骨样细胞ROS17／2．8细胞林甲状旁腺素（PTH）受体的调节作用．实验结果表明：细胞经T3／T4处理后,可显著增高PTH受体结合率及碱性磷酸酶活性,以及PTH受体mRNA的表达．细胞经RA处理后,则相反地降低PTH受体结合率及碱性磷酸酶活性．     

核孤儿受体TR3/nur77与一种新细胞凋亡机制

核孤儿受体TR3/nur77是一种立刻早期基因（immediate-early gene）的产物,与固醇类激素受体结构相似,是核受体超家族的重要成员之一,可被多种生长因子或凋亡诱导剂诱导表达,具有复杂的生物学功能,涉及细胞增殖、分化发育和凋亡过程.最近对其诱导凋亡机制的研究取得了重大进展,发现当细胞受到凋亡诱导剂刺激后,TR3基因表达升高,其产物从细胞核移位至线粒体膜,引起细胞色素c释放,从而导致细胞凋亡.即TR3的转录激活功能和诱导凋亡功能是由其不同的亚细胞定位结合所决定的,其诱导凋亡过程与其对基因的反式激活功能无关.核转录因子p53也具有类似情况.这种核转录因子由细胞核移位至细胞浆并发挥生物学功能的调控方式是一种新模式,可能具有重要的生物学意义.     

Tumor Necrosis Factor Receptors in Neuroblastoma SKNBE Cells and Their Regulation by Retinoic Acid

Abstract: The human neuroblastoma cell line SKNBE can be differentiated either by serum removal or by adding to the culture medium different morphogens, for instance, retinoic acid (RA), cyclic AMP derivatives, and phorbol esters. Both the differentiated and undifferentiated cells express the two types of membrane tumor necrosis factor (TNF) receptors (TNFRs) of 55 and 75 kDa (p55 and p75 TNFR, respectively) and also their soluble forms. After RA addition the number of the surface TNFRs per cell is increased approximately twofold, but the kinetics of expression are different, depending on the receptor type. The level of the mRNAs of 2.4 and 4.2 kb, which, respectively, encode the p55 and p75 TNFRs, is also increased during the time course of differentiation, and the kinetics of their expression are biphasic. In contrast, the number of TNFRs and the level of their encoding mRNAs remain unchanged after exposure of the cells to both a phorbol and a cyclic AMP derivative.     

孤儿受体与胆固醇及胆汁酸的代谢调节

30多年前,已经发现体内胆固醇及胆汁酸在转录水平受反馈激活或反馈抑制的调节,其机理不清楚。最近,随着孤儿受体LXR基因的克隆及其功能的研究,逐步认识到包括LXR在内的几种孤儿受体作为体内胆固醇及胆汁酸的感受器,在转录水平调节体内胆固醇及胆汁酸的代谢平衡。这4类孤儿受体在胆固醇及其代谢产物与自身代谢平衡之间建立了直接的联系。综述了4类孤儿受体的研究进展,特别是它们和胆固醇及胆汁酸代谢平衡的关系。     

外源性视黄酸对斑马鱼心血管系统发育的影响

目的观察不同浓度外源性视黄酸对斑马鱼早期胚胎和心血管系统发育的影响,为进一步研究视黄酸影响斑马鱼心脏前后轴(A-P轴)发育的分子机制提供形态学依据。方法选择斑马鱼胚胎孵育的3,6,9·5,12h四个时间点,用不同浓度视黄酸(1×10-6,1×10-7,4×10-8,1×10-8mol/L)处理斑马鱼胚胎,在解剖显微镜下实时观察斑马鱼胚胎心脏发育的全过程和视黄酸对斑马鱼心脏发育的影响。并采用胚胎整体原位杂交技术观察flk-1mRNA在斑马鱼胚胎的表达。结果1×10-6mol/L视黄酸可导致斑马鱼胚胎表现出多系统的严重畸形,胚胎很快死亡。在胚胎孵育的9·5、12h给与10-7~10-8mol/L浓度的视黄酸,胚胎只表现出心血管系统的畸形,其他系统无明显异常。胚胎整体原位杂交显示视黄酸对flk-1mRNA在斑马鱼胚胎血管的表达没有影响。结论视黄酸影响斑马鱼胚胎心脏发育有剂量依赖性和严格的时间窗,视黄酸影响心脏前后轴发育的关键时间是原肠胚晚期。视黄酸处理组胚胎的循环缺陷主要为心脏发育异常所致。10-7~10-8mol/L浓度视黄酸在9·5、12h处理斑马鱼胚胎可以作为研究心脏发育调控机制的动物模型。     

Retinoic Acid Isomers Facilitate Apolipoprotein E Production and Lipidation in Astrocytes through the Retinoid X Receptor/Retinoic Acid Receptor Pathway

Apolipoprotein E (apoE) is the major cholesterol transport protein in the brain. Among the three human APOE alleles (APOE2, APOE3, and APOE4), APOE4 is the strongest genetic risk factor for late-onset Alzheimer disease (AD). The accumulation of amyloid-β (Aβ) is a central event in AD pathogenesis. Increasing evidence demonstrates that apoE isoforms differentially regulate AD-related pathways through both Aβ-dependent and -independent mechanisms; therefore, modulating apoE secretion, lipidation, and function might be an attractive approach for AD therapy. We performed a drug screen for compounds that modulate apoE production in immortalized astrocytes derived from apoE3-targeted replacement mice. Here, we report that retinoic acid (RA) isomers, including all-trans-RA, 9-cis-RA, and 13-cis-RA, significantly increase apoE secretion to ∼4-fold of control through retinoid X receptor (RXR) and RA receptor. These effects on modulating apoE are comparable with the effects recently reported for the RXR agonist bexarotene. Furthermore, all of these compounds increased the expression of the cholesterol transporter ABCA1 and ABCG1 levels and decreased cellular uptake of Aβ in an apoE-dependent manner. Both bexarotene and 9-cis-RA promote the lipidation status of apoE, in which 9-cis-RA promotes a stronger effect and exhibits less cytotoxicity compared with bexarotene. Importantly, we showed that oral administration of bexarotene and 9-cis-RA significantly increases apoE, ABCA1, and ABCG1 levels in mouse brains. Taken together, our results demonstrate that RXR/RA receptor agonists, including several RA isomers, are effective modulators of apoE secretion and lipidation and may be explored as potential drugs for AD therapy.     

维甲酸对亚硝胺诱发大鼠肝癌的阻断作用

二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）诱发大鼠肝癌过程中,可使肝中增殖指标γ－谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）,谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）,胞液和膜性酪氨酸蛋白激酶（ｃ－ＴＰＫ,ｍ－ＴＰＫ）有不同程度的逐步升高,直至１６周（除ｃ－ＴＰＫ在第１２周活力最高外）,而分化指标精氨酸酶（ＡＧＮ）则明显降低,如在诱癌开始的同时给予全反式维甲酸（ＲＡ）连续１６周则可延缓γ－ＧＴ、ＧＳＴ和两种ＴＰＫ的升高和ＡＧＮ的降低,这种作用并非ＲＡ本身对酶活力的影响,而是ＲＡ阻断肝癌发展的结果。