萱草花粉动力蛋白的分离与特性

动力蛋白（dynamin）是一类具有可被微管激活的GTP酶活性的新型马达蛋白,被证明在动物细胞受体介导的内吞小泡的形成,突触小泡再循环及高尔基体的囊泡运输中起关键作用。近几年,一些植物细胞也被发现有动力蛋白类似物。本研究通过分子量鉴定和免疫印迹法证明萱草（Hemerocallis fulva L.)花粉中存在动力蛋白,其分子量为100kD。经过高度纯化的花粉动甩具有GTPase活性,且可被牛脑微管激活1．64倍;电子显微镜表明,花粉动力蛋白可自我组装成环状结构。     

Dynactin辅助dynein进行细胞内物质运输的研究进展

胞质动力蛋白(cytoplasmic dynein)是沿微管向负极运动的马达蛋白,参与细胞内多种物质的运输,运输的货物(cargo)小至信使RNA和蛋白质,大至细胞器和囊泡。动力蛋白只有与动力激活蛋白(dynactin)结合在一起时才有活性。动力激活蛋白是一个分子量为1.2 MDa的多亚基复合物,利用分子生物学和免疫电子显微镜技术,研究者已阐明了其亚基的组成信息,并得到了一个初步的结构模型。10年来,随着对各亚基功能研究的不断深入,研究者发现动力激活蛋白不仅可以增强动力蛋白在微管上的运动持续性,而且还可帮助其结合细胞内的其他成分。然而,动力激活蛋白与动力蛋白之间如何相互调节功能,动力激活蛋白作为接头蛋白如何控制货物在动力蛋白上的结合与解离,这两个核心问题尚未解决。本文就动力激活蛋白的亚基组成及其辅助动力蛋白发挥功能等研究成果进行总结,并对以后的研究趋势进行展望。     

银杏花粉微管蛋白的纯化及鉴定

采用丙酮粉抽提,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－５０、Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－３００、ＭｏｎｏＱ柱层析,从银杏花粉中分离纯化出微管蛋白,其两个亚基的分子量分别为５４ｋＤ和５２ｋＤ纯化的微管蛋白可与鸡脑微管蛋白抗体发生免疫交叉反应。     

知母绒毡层和乌氏体细微结构的研究

从个体发育来看,知母绒毡层具有3个明显的特点;（1）在小孢子母细胞阶段,绒毡层细胞中有丰富的细胞器,如粗糙内质网,脂体,造粉体和小泡等,粗糙内质网－脂体－小泡常常联系在一起,形成细胞器复合体。（2）在单核花粉阶段,绒毡层细胞质中出现大量小泡,它们可以融合成小泡,而且在小泡或大泡中开始沉积与脂体电子密度相似的亲锇物质,这些物质或者充满整个小泡,或者沉积在小泡周缘,此刻,也是乌氏体形成并达到高峰的阶段。（3）在成熟花粉阶段,绒毯层细胞几乎被具膜束缚的小型脂粒和巨型脂体所占据,这些亲锇物质是质体起源的,也许它们是花粉鞘的先质。     

知母绒毡层和乌氏体细微结构的研究

从个体发育来看,知母绒毡层具有3个明显的特点;（1）在小孢子母细胞阶段,绒毡层细胞中有丰富的细胞器,如粗糙内质网,脂体,造粉体和小泡等,粗糙内质网－脂体－小泡常常联系在一起,形成细胞器复合体。（2）在单核花粉阶段,绒毡层细胞质中出现大量小泡,它们可以融合成小泡,而且在小泡或大泡中开始沉积与脂体电子密度相似的亲锇物质,这些物质或者充满整个小泡,或者沉积在小泡周缘,此刻,也是乌氏体形成并达到高峰的阶段。（3）在成熟花粉阶段,绒毯层细胞几乎被具膜束缚的小型脂粒和巨型脂体所占据,这些亲锇物质是质体起源的,也许它们是花粉鞘的先质。     

棉花花粉水合和萌发时超微结构的变化：着重论述内质网和被膜小泡

棉花(Gossypium hirsutum L.)花粉在授粉后水合至萌发时期的营养细胞中贮藏的大量淀粉粒和脂体被动用。超微结构的观察表明,首先是造粉质体中的淀粉粒降解,尔后是脂体。在花粉水合至萌发时期,营养细胞中内质网和高尔基体十分活跃,并含丰富的被膜小泡。内质网的构型发生明显的变化:花粉刚水合时内质网潴泡高度扩张,不同程度扩张的内质网潴泡连续成网状并折迭形成许多囊袋状结构单位,其中包含造粉质体、脂体和被膜小泡群;其后,内质网潴泡形成的囊袋状结构消失,变为分支互通的网状结构;至萌发时,内质网潴泡略为扩张,有些连续成简单的网状,有些呈游离的囊泡状。被膜小泡始终是成群地分布,并与脂体联结,当脂体降解时一些被膜小泡与之融合。根据棉花花粉在水合至萌发时期,营养细胞质中存在独特形态的内质网系统和含丰富的被膜小泡,它们的动态行为及与淀粉和脂体的转化和降解之间的密切关系,讨论了这两种细胞器可能的功能。     

银杏花粉微管蛋白的纯化及鉴定

采用丙酮粉抽提,DEAE-SephadexA-50、SephacrylS-300、MonoQ柱层析,从银杏（GinkgobilobaL．）花粉中分高纯化出微管蛋白（tubulin）,其两个亚基（α、β）的分子量分别为54kD和52kD．纯化的微管蛋白可与鸡脑微管蛋白抗体发生免疫交叉反应．     

萱草花粉类动力蛋白生物物理学及药理学性质

利用FPLC技术从萱草花粉中鉴定并纯化了动力蛋白,研究了它的酶学性质及部分生物化学性质。结果如下:纯化的类动力蛋白分子量为100kD,等电点pI=6·15和6·80。在280nm波长激发下,最大的荧光发射波长是346nm。荧光光谱分析结合紫外吸收光谱及导数光谱分析推断它含有色氨酸和酪氨酸残基。药理学性质研究表明巯基可能在酶的活性中心起重要作用。     

花粉高尔基囊泡类动蛋白的鉴定

在萌发的烟草花粉管顶端,有囊泡状的颗粒被牛脑动蛋白重链的单克隆抗体所识别。用蔗糖密度梯度离心法从榛木花粉中分离得到高尔基囊泡,体外免疫胶体金处理后可被标记。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹表明,分子量为１００ｋＤ的多肽大量存在于高尔基囊泡,此多肽可与动蛋白单克隆抗体进行特异性反应,证明花粉高尔基囊泡上有关动蛋白,其重链分子量为１００ｋＤ。     

朱顶红花粉萌发过程中营养细胞质的超微结构变化

本文应用透射电对朱顶红成熟花粉水合、活化和萌发的动态过程中营养细胞质的结构和组成变化进行了观察,成熟花粉具质体、线粒体、高尔基体。微丝束以聚集体的形式存在。花粉活化后,细胞器的数目和结构发生显著变化;质体和线粒体的片层明显增加,内质网片层狭窄,高尔基体活跃产生小泡,脂体降解及微丝聚集体散开。花粉萌发后,细胞质中出现周质微管和被刺小泡,此期细胞器的变化不明显。微丝以纤丝状遍布整个花粉管中。     

六种藓类植物茎的比较解剖学研究

通过对6种藓类植物,即褶叶青藓(Brachythecium salebrosum(Web.et Mohr.)B.S.G.)、湿地匐灯藓(Plagiomnium acutum(Lindb.)Kop.)、侧枝匐灯藓(Plagiomnium maximoviczii(Lindb.)Kop.)、大凤尾藓(Fissidensnobilis Griff.)、大羽藓(Thuidium cymbifolium(Doz.et Molk.)B.S.G.)和大灰藓(Hypnum plumaeforme Wils.)嫩茎和老茎的石蜡切片和显微观察发现,同一藓类植株的嫩茎和老茎,茎结构稳定,不同种藓类植物茎横切面具有不同特征.植物体茎横切面形状、表层细胞的层数、细胞大小和细胞壁厚薄、皮层细胞大小和形状、中轴的有无以及比例等特征可以作为藓类植物的分科分类依据之一.     

Cause of Senescence of Nine Sorts of Flowers

The levels of endogenous phytohormones and respiratory rate in nine sorts of flowers such as Cymbidium faberi Rolfe, Nopalxochia ackermannii Kunth and others were investigated both at full bloom and senescence and meanwhile the effect of exogenous phytohormones on prolonging the blossoms and promoting ethylene production were tested. There is a high content of endogenous ethylene in all the long-lived flowere, about 3–16 folds higer than the short-lived ones. There is a high level of ABA at full blooming flowers of short-lived flowers, in which there is no or only some cytokinins in it, but the ratio of CTK (6BA+zeatin)/ABA is smaller(l.7). The endogenous ABA reached a much higher level at senescence in all nine sorts of flowers, so it is reasonable to consider that it is ABA which plays an important role of regulation in controlling flower's senescence. There is a much higher level of GA3 and zeatin in the long-lived flowers which is not demonstrated in the shortlived ones. The respiratory rate is one of the factors controtling the longevity of flowers, but it does not play a decided role. Application of 6BA and zeatin prolongs distinctly orchid’s longevity, however exogenous IAA through the promotive action on ethylene production, evidently extends the longevity of the flowers of the Nopalxochia ackermannii Kunth.     

真菌类遗传学分析的知识结构教学

本文以认知结构理论为指导,讨论了真菌类遗传分析与高等动植物遗传分析的内在联系,认为利用这种内在联系进行教学可收到好的效果并说明了作者的具体教学过程。 Abstract:In the paper, the relationship between genetic analysis of Fungi and genetic analysis of high animal and plant was discussed.A good results were obtained when we adopted this method in the teaching.     

医疗机构合理用药评价模型的构建研究

目的 针对医疗机构的合理用药水平进行评价研究。方法 根据医疗机构合理用药的具体要求,构建医疗机构合理用药评价指标体系,采用基于模糊群决策的方法和多指标评价分析法构建医疗机构合理用药评价模型。结果 构建了基于模糊群决策的医疗机构合理用药评价模型,并通过实例分析证明了评价模型的可行性。结论 建立的基于模糊群决策的医疗机构合理用药评价模型能够对医疗机构的合理用药水平进行科学评价,为提高医疗机构合理用药水平奠定基础。     

棉铃虫钙粘蛋白N端多肽多克隆抗体制备及对Bt抗性的初步检测

用重组表达的棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)中肠钙粘蛋白N端多肽片段制备兔多克隆抗体,并利用其对Bt抗性进行鉴定。通过RT-PCR方法对棉铃虫中肠钙粘蛋白N端多肽的基因片段Cad285进行PCR扩增,将其克隆到pET-30a原核表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,得到35ku的重组融和蛋白,融合表达的包涵体经过变性、Ni-NTA柱亲和纯化、复性等方法处理包涵体,获得可溶性纯化蛋白,用纯化后蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA检测其效价高于1∶16000;利用最终获得的多克隆抗体对室内纯合Bt抗/感品系的棉铃虫中肠钙粘蛋白进行Western blot分析,结果显示敏感和抗性品系之间有明显差异,表明其能够应用对Bt抗性进行初步检测。     

Photoregulation of seed germination of wild-type and of an aurea-mutant of tomato

Seed germination of an aurea mutant of tomato ( Lycopersicon esculentum Mill.) is promoted by continuous irradiation with red, far-red or long-wavelength far-red (758 nm) light as well as by cyclic irradiations (5 min red or 5 min far-red/25 min darkness). Far-red light applied immediately after each red does not change the germination behaviour. Seed germination of the isogenic wild-type, cv. UC-105, is promoted by continuous and cyclic red light while it is inhibited by continuous and cyclic far-red light and by continious 758 nm irradiation. Far-red irradiation reverses almost completely the promoting effect of red light. The promoting effect (in the aurea mutant) and the inhibitory effect (in the wild-type) of continuous far-red light do not show photon fluence rate dependency above 20 nmol m⁻² s⁻¹. It is concluded that phytochrome controls tomato seed germination throgh low energy responses in both the wild type and the au mutant. The promoting effect of continuous and cyclic far-red light in the au mutant can be attributed to a greater sensitivity to P_fr.     

龙胆科药用植物化学成分的研究现状

龙胆科植物在我国的分布范围很广,且多数为药用植物,其多数种属的药用植物,至今其化学成分尚未被系统研究。综述了目前龙胆科药用植物的化学成分的研究现状及一般提取方法,对近年来发现的环烯醚萜及裂环烯醚萜类化合物进行了总结,为本科药用植物的更深入研究提供了参考。