家兔热原试验和鲎试验预测疫苗的热原性对人体使用的可靠性

<正>实验室方法检测非肠道药剂的热原性已进行数十年。为此目的,一般均采用家兔热原质试验,同时,目前也日渐频繁地采用鲎变形细胞溶解物试验(LAL试验)。鲎试验反应的本质是因为鲎变形细胞中含有一种能与微量内毒素产生凝结的蛋白质。LAL试验是具有严格的内毒素-特异性的,而其它化学性质的物质却也能引起家兔发热。由于注射剂的热原性常常是由于内毒素污染,所以LAL试验阳性反应显然是热原性的良好标志。     

热原质与脂多糖

<正>脂多糖(LPS)是革兰氏阴性(G~-)细菌细胞的主要成分之一,它具有广泛的生物活性,如人和动物非肠道使用可引起机体的发热及其它毒害反应。如果强调其生物毒性,内毒素与其是同义的。LPS亦具有免疫佐剂活性、抗肺瘤活性等。本文就其热原的概念及研究简史,G~-细菌致热作用的本质及热原质、内毒素与LPS之间的关系,LPS的物理化学特性,生物学特性,免疫学特性等有关的研究资料综述如下。 一、热原的概念及研究简史(5—7) 在一个多世纪以前人们已经发现注射污染的药剂可引起人体的发热反应。1976年Burdon—Sanderson把引起这种发热性的物质称为热原(Pyrogen)。1911年英国Horf等氏发现发热性物质不能用细菌过滤器或普通蒸馏法去除。1925年英国     

重组人干扰素和细菌内毒素对家兔致热阈剂量的影响

确定重组人干扰素和细菌内毒素对家兔致热阈剂量的影响。按照《生物制品热原质试验》要求 ,测定纯细菌内毒素对家兔致热阈剂量、重组人干扰素中细菌内毒素对家兔致热阈剂量以及干扰素的药物热阈值。纯细菌内毒素对家兔致热阈剂量为 5EU/mL ,重组人干扰素中细菌内毒素对家兔致热阈剂量为 1 .2 5EU/mL ,重组人干扰素的药物热阈值为 1 5EU/剂量。重组人干扰素和细菌内毒素对家兔的致热性存在协同作用。     

氢氧化铝结合的S和R型志贺氏Ⅰ型菌内毒素及其亚单位用于免疫接种制剂的新趋势

<正>引言 革兰氏阴性菌细胞壁成分中的内毒素具有多种生物活性,脂类A一般被认为是引起病理反应的成分。对高等生物来说,内毒素可能有致死性或致热原性,但对于人类,内毒素可通过提高非特异性抗感染免疫或激发抗体生成等作用而使其得益。 本文主要研究了用不同方法提取的S型及R型志贺氏I型菌的脂多糖和脂类A,其目的是对这些物质的体外抗原特性和体内保护效果等生物学活性     

鲎试验法检测A群流脑多糖菌苗中内毒素的研究

本文应用鲎试验凝胶法定量测定了２１２批Ａ群流脑多糖菌苗中内毒素含量,并与家兔热原试验结果进行了比较,通过试验求得内毒素标准品对家兔体温升温变化关系的线性方程和内毒素对家兔最小致热剂量。结果表明,占检定总批数９４．３％的制品中内毒素含量＜１００ＩＵ／μｇ多糖,家兔热原试验合格率为１００％,５．７％的制品中内毒素含量≥１００ＩＵ／μｇ多糖,家兔热原试验合格率为５８．３％。根据实验结果,可制订用凝胶法替代家兔法进行Ａ群流脑多糖菌苗的热原质试验的判定标准。作者建议：内毒素含量＜１００ＩＵ／μｇ多糖者,热原质试验判为合格,≥１００ＩＵ／μｇ多糖者,用家兔法予以仲裁。     

静注人免疫球蛋白细菌内毒素检查方法的建立

目的 :建立用于静脉注射用人免疫球蛋白 (IVIG)的细菌内毒素检查方法。方法 :通过干扰评价实验证明IVIG对细菌内毒素检查法有强烈的抑制作用 ,单纯用简单稀释和调整pH值法无法消除干扰 ,如果用稀释剂 (Ⅰ )对IVIG作 1∶4以上的稀释 ,即可消除样品对该检查法的干扰 ,利用灵敏度为 0 1 2 5EU ml的鲎试剂 ,将样品用稀释剂 (Ⅰ )稀释 4倍 ,按中国药典 ( 2 0 0 0版 )进行细菌内毒素的检查 ,结果与家兔热原质试验进行比较。结论 :IVIG用稀释剂 (Ⅰ )进行适当稀释后 ,可以用细菌内毒素检查法替代家兔热原试验 ,应用于生产过程及半成品的质量控制。     

博莱霉素致肺间质成纤维细胞MMP-2/TIMP-1表达失衡

观察博莱霉素对肺间质成纤维细胞中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）表达的影响,探讨博莱霉素引起肺纤维化的机制。体外培养肺间质成纤维细胞,并向培养基中加入博莱霉素,在作用不同时间后收集样本,采用酶谱图测定细胞培养上清液中MMP-2酶活性、ELISA测定TIMP-1量,免疫组织化学法检测细胞中MMP-2、TIMP-1的原位表达,RT-PCR法检测MMP-2和TIMP-1的mRNA水平。结果发现,博莱霉素在2h、12h促进MMP-2的分泌,24h后无促分泌作用;而2-48h,MMP-2的原位表达及mRNA均不受博莱霉素的影响;博莱霉素从12h开始促进TIMP-1及mRNA的表达,并持续至48h。结果表明博莱霉素可引起肺间质戍纤维细胞MMP-2／TIMP-1表达失衡,并可能参与肺纤维化的发生。     

抗生素诱导内毒素血症的研究进展

许多抗生素杀死细菌时,可促使内毒素从细菌外膜释放。感染病灶内的革兰阴性菌死亡后释放进入血液的内毒素,或由大量污染液体输入而进入体内的内毒素,可通过与机体一系列连锁反应促进免疫活性因子和炎症反应介质的释放,从而引起局部水肿、充血及微循环障碍等,即内毒素血症。由抗生素诱导的内毒素血症与细菌的种类,抗生素的种类、浓度、给药方式等均有关。因此,临床医生应合理应用抗生素,将副作用降到最低。     

抗淋巴细胞免疫球蛋白制品中热原处理

对热原不合格的抗淋巴细胞免疫球蛋白 (ALG)半制品再制条件进行了研究。将高热原的ALG半制品通过使用碱、酸以及A5 0处理后 ,细菌内毒素的含量明显降低 ,热原质经家兔和鲎试剂检测均合格 ,其生物学效价仍不低于 1 :4 0 0 0 ,而且它们的其它各项主要指标也都达到中国生物制品暂行规程的要求。这一试验结果表明碱、酸处理并辅以A5 0吸附是去除ALG制品中热原的一种有效方法     

A C群脑脊髓膜炎球菌多糖菌苗生产工艺与内毒素含量研究

A群及C群流脑多糖抗原用 10 0 0 0 0×g离心或不经超速离心处理 ,经用鲎试验法测定内毒素含量 ,2种工艺生产的A群及C群流脑多糖抗原的内毒素含量均很低。用未经超速离心处理的A群及C群流脑多糖抗原制成的A C群流脑多糖菌苗 ,经鲎试验法测定 ,内毒素含量也很低 ;经家兔升温法进行热原质试验 ,家兔体温未明显升高。证明A C群流脑多糖菌苗生产工艺不经 10 0 0 0 0×g离心去除内毒素步骤是可行的。所制备的流脑多糖抗原内毒素含量符合要求。     

细菌内毒素耐受的研究进展

细菌内毒素或细菌脂多糖,是临床上引起全身性炎症综合征的主要原因,细菌内毒素或脂多糖耐受也是临床常见的现象,近年来有关细菌LPS耐受机制的研究倍受关注。本文就细菌LPS耐受引起巨噬细胞的变化,对细菌LPS耐受的分子机制进行阐述。     

浙江省热原检查用兔敏感性状况调查

目的调查浙江省热原检查用兔对细菌内毒素的敏感性情况,为提高热原检查结果的准确性和可靠性提供参考。方法对全省所有取得生产许可证单位的家兔,用国家颁发的细菌内毒素标准品,＂热原检查法＂进行检查,剂量分别为5EU/Kg和10EU/Kg,记录并比较各单位家兔的平均升温值和升温率。结果对细菌内毒素,各兔场家兔的敏感性有一定的差异。静脉注射5EU/kg,平均升温值为0.40℃～0.87℃,升温率为35%～83%;静脉注射10EU/kg,平均升温值为0.74℃～1.16℃,升温率为70%～94%。结论不同生产单位的家兔对细菌内毒素的敏感性不同,有必要对热原检查用家兔进行细菌内毒素敏感性检查。     

注射用炎琥宁的细菌内毒素检查

目的:建立注射用炎琥宁细菌内毒素检查方法。方法:按《中国药典》2010年版(二部)附录收载的细菌内毒素检查方法,用不同厂家的鲎试剂对不同批号的样品分别进行干扰试验。结果:注射用炎琥宁稀释至质量浓度为0.17mg.mL-1的供试品溶液时对试验无干扰作用。结论:细菌内毒素检查方法可用于注射用炎琥宁的热原检查。     

细菌内毒素检测法在注射用肝复肽检测中的应用

通过对注射用肝复肽稀释后,采用细菌内毒素试验对其进行检测,并与家兔热原试验相比较。结果表明,细菌内毒素试验可以替代家兔热原试验用于注射用肝复肽的检测。     

有氧溶液中博莱霉素A_5与铁的复合物的瞬态荧光的研究

利用停流仪观测到博莱霉素Ａ５、Ｆｅ２＋、氧形成的三元活性复合物,测得其激发波长为３２７．５ｎｍ,在ｐＨ７．４的ＰＢＳ中半衰期约９．３×１０２ｍｓ。中性及偏碱性ｐＨ有利于该活性复合物的形成,但其寿命随ｐＨ值升高而缩短。Ｆｅ３＋、Ｃｕ２＋、ＥＤＴＡ等物质对其形成有抑制作用。通过反应速率常数的比较表明,该活性复合物具有较强的氧化性,可被ＤＴＴ,ｐｈＣＯＯＮａ所清除,但不与甘露醇反应。该活性复合物具有一定的底物专一性,它与ＤＮＡ的反应活性远大于ＲＮＡ,对脱氧核糖的反应活性远大于其它单糖。它对４种碱基也有一定的反应活性,但远低于·ＯＨ。以上结果表明,该三元活性复合物是博莱霉素Ａ５切割ＤＮＡ反应的启动因子     

热原质检测进展

本文综述了热原质检测的进展。重点介绍了鲎试剂凝胶法、合成基质鲎三肽显色法和十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电脉银染法检测内毒素或脂多糖的原理和方法的新进展。     

关于建立栀子提取物热原检测方法的考察

目的根据2015版《中国药典》规定的新品种建立热原的指导原则,建立栀子提取物热原的测定方法。方法用国家颁发的细菌内毒素标准品,对设限值剂量的供试品组、10EU/kg内毒素组与10EU/kg内毒素的供试品组同时进行热原检查试验,观察三组家兔的升温情况。结果以上三组同时进行热原检查试验,限值剂量的供试品组结果无异常反应并符合规定,10EU/kg内毒素组与10EU/kg内毒素的供试品组的家兔升温显著且结果为不符合规定。结论以上三组同时进行热原检查试验,限值剂量的供试品组无异常反应并符合规定,10EU/kg内毒素组与10EU/kg内毒素的供试品组的家兔升温显著且结果为不符合规定。说明用该方法对栀子提取物进行热原检查是有效的。     

重组人戊型肝炎疫苗细菌内毒素检查方法的建立

确立重组人戊型肝炎疫苗原液的细菌内毒素检查方法。供试品参照《中华人民共和国药典》(2005年版三部)热原检查法进行热原检查,结果符合规定。该供试品同时参照《中华人民共和国药典》(2005年版三部)细菌内毒素检查法要求进行试验。供试品溶液在40μg/m l浓度下,确定内毒素限值为40EU/m l。供试品在该内毒素限值下干扰试验有效,且细菌内毒素检查法符合规定。该疫苗用内毒素检查法代替热原检查法,方法可行。     

用荷兰兔(Dutch)做热原质试验研究

<正>由于家兔对热原质敏感性高,正常时体温稳定,加之性情温顺,所以在热原质试验中广泛使用。日本主要使用大型的日本白兔,日本药典没有统一规定,但按体重记载推断是大型兔。据其他国家药典记载,热原     

刺五加注射液的细菌内毒素检查探讨

细菌内毒素检查法与热原检查法相比 ,成本低、快速简便、灵敏度高。为探讨采用细菌内毒素检查法检测刺五加注射液热原的可行性 ,我们进行了鲎试剂灵敏度复核试验、干扰试验 ,结果表明刺五加注射液稀释 2 .85倍 ,用灵敏度为 0 .2 5 EU·ml-1的鲎试剂作细菌内毒素检查 ,仍有干扰。1　实验材料　　鲎试剂 (批号 0 30 4 1 9,标示灵敏度 0 .5 EU·ml-1;批号 0 30 5 0 3,标示灵敏度 0 .2 5 EU· ml-1,福州新北生化工业有限公司 ) ;细菌内毒素工作标准品 (批号 2 0 0 30 3,规格 1 5 0 EU·支 -1,中国药品生物制品检定所 ) ;鲎试剂溶解水 (批号 …