吸水链霉菌井冈变种的色素合成基因缺失对井冈霉素产量的影响北大核心CSCD

【目的】通过缺失井冈霉素高产菌株TL01中4个典型的色素合成基因簇来考察其对井冈霉素产量、菌体生长和发酵液颜色的影响。【方法】通过同源重组双交换对4个色素合成基因簇进行逐个同框缺失,HPLC检测突变株井冈霉素产量的变化,q RT-PCR检测突变株中井冈霉素合成基因转录变化,通过称量菌丝体干重来绘制其生长曲线。【结果】和出发菌株TL01相比,多巴类黑色素基因簇缺失株PY06中井冈霉素的发酵产量由原来的20.6 g/L上升至23.1 g/L,提高了12%;III型聚酮合酶编码的黑色素基因簇缺失株PY07产量无明显变化;II型聚酮合酶编码的孢子色素基因簇缺失和褐黄素基因簇缺失分别导致井冈霉素产量下降11.7%和17.2%。所有缺失突变株中井冈霉素基因簇转录水平和发酵液颜色均没有明显变化。【结论】不同色素基因的缺失对井冈霉素产量和菌株生物量积累具有不同的影响。多巴类黑色素与井冈霉素的生物合成过程竞争共同前体,将其中断后使前体流向井冈霉素生物合成,达到了进一步提高产量的目的。     

蛋白激发子PeaT1与井冈霉素混合使用诱导烟草对TMV抗性的研究

烟草病毒可侵染危害烟草、番茄、辣椒和土豆等多种作物导致病毒病发生,是生产上难以防治的病害。为了探索蛋白激发子Pea T1与井冈霉素混合使用对烟草病毒病防治的最佳混配比例,本研究选用3-7片真叶的本生烟(Nicotiana benthamiana cv.Huangmiaoyu),分别喷施清水、井冈霉素、蛋白激发子Pea T1及蛋白激发子Pea T1-井冈霉素复合制剂,采用摩擦接种的方式接种TMV-GFP病毒,在紫外光下观察病毒的侵染情况。结果表明,喷施了井冈霉素和蛋白激发子复合制剂的本生烟对TMV的抗性较单剂具有增效作用,其中蛋白激发子Pea T1-井冈霉素按3:4混配的性价比最高,共毒系数达到157.64,相对防效为73.39%。这说明井冈霉素和蛋白激发子Pea T1都能使烟草产生对TMV的系统获得抗性,而其复合制剂更有着叠加效应。     

井冈霉素效价测定的两种方法

井冈霉素经离子交换层析分离可得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四个组份,经理化鉴定,其中H、Ⅲ两个组份分别为Valdamycin A、B。目前主要采用稀释法和比色法测定井冈霉素的效价。现分述如下。     

井冈霉素土法生产工艺

为了适应农业生产的需要,使井冈霉素能在各地农村土法上马。我们与有关生产单位共同协作摸索出了井冈霉素土法生产工艺。经生产实践证明这种方法是可行的。现将土法生产方法介绍如下:     

钛离子注入井冈霉素生产菌株的诱变效应

探讨了利用金属Ti 离子注入井冈霉素生产菌的生物学效应,比较了不同的注入能量与注入剂量对菌株突变效果的影响.在注入能量为15 keV,剂量为1.5×1015 个/cm2离子的诱变条件下,筛选到一株井冈霉素高产菌株C3-6,其发酵生产井冈霉素A组分的效价为19 684 μg/mL,比出发菌株提高41.3%.经多次传代实验表明该菌株的遗传稳定性较好.     

静丝霉素的分离与鉴定

吸水链霉菌井冈变种与吸水链霉菌柠檬变种很相近。除产生井冈霉素外,尚产生一种抗真菌抗菌素,定名为静丝霉素,其物理、化学及生物学特性与萨腊霉素很相似。其水解产物在纸层析上显出8个色点。其中5个分别为半胱氨酸,天冬氨酸,甘氨酸,苏氨酸与脯氨酸。本文报道静丝霉素的分离、鉴定及测定方法。     

井冈霉素产生菌的选育

井冈霉素对水稻纹枯病具有较好的防治效果。由于原始菌种发酵单位较低,几年来我们对该菌进行了大量的选育工作,并研究了变异菌株的最适发酵条件,使发酵单位大幅度提高,成本下降,基本满足了生产需要。现将井冈霉素产生菌的选育工作简报如下。     

我国井冈霉素合成机理研究取得重大突破

近日,中国科学院院士、上海交通大学邓子新教授领衔的教育部微生物代谢重点实验室与美国华盛顿大学、俄勒冈州立大学密切合作,成功克隆了具有重要农业应用和经济价值的抗生素农药的生物合成基因簇、从27个基因中定位了合成井冈霉素所需的8个基因,在异源宿主中实现了井冈霉素及其前体有效氧胺的工程化组装和表达,提出了井冈霉素生物合成机理的新模型,也为主要农作物水稻的转基因抗真菌育种提供了全新的候选基因。相关研究成果己在《细胞》系列期刊之一的《化学生物学》2006年4月期上发表。这是该实验室继首例报道聚醚类南昌霉素、多烯类杀念菌素代谢途径和代谢工程研究成果以来,连续第三次在《化学生物学》杂志报道该领域研究的系统性重要成果。     

利用甘蔗糖蜜生产井冈霉素

井冈霉素对水稻纹枯病有较持久的药效,防治效果在90%左右,水稻普遍增产达10—15%。对人、畜、鱼类、农作物无毒害,是很有前途的农用抗菌素。但是生产井冈霉素需要消耗大量的粮食,使工业生产受到一定限制。为了节省工业用粮,我们进行了多种发酵培养基配方试验,终于试验成功用甘蔗糖蜜代替玉米     

链霉菌原生质体种间融合重组的研究Ⅱ．RVA18——链霉菌原生质体种间融合重组子的一个新代谢产物

RvAl8是链霉菌原生质体种间融合(亲株为庆丰链霉菌和吸水链霉菌井冈变种)得到的一株原养型重组子所产生的一个新的代谢产物,它存在于细胞内,是一个酸性非水溶性的化合物,能溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和环已烷等,微溶于氯仿。它对革蓝氏阳性细菌和一些植物病原真菌有较强的制菌作用,能引起纹枯病菌的异常分枝。用柱层析和液相色谱相结合的方法提纯后的纯品经紫外、红外、高效液相、核磁共振、质谱等分析证明它是一个理化和生物性质均不同于=亲株产物一一井冈霉素和庆丰霉素的新代谢产物。并将RvAlB的理化、生物性质和二亲株产物井冈霉素及庆丰霉素作了比较。     

Activity and efficacy of Bacillus subtilis strain NJ-18 against rice sheath blight and Sclerotinia stem rot of rape

A strain of Bacillus subtilis (NJ-18) with broad antimicrobial activity was screened in the laboratory and in the field. NJ-18 inhibited the in vitro radial extension of hyphae of the phytopathogenic fungi Rhizoctonia solani and Sclerotinia sclerotiorum. The bacterium apparently produced antifungal metabolites that diffused through the agar and caused abnormal swelling of hyphae. The in vitro data and observations indicated that one of the mechanisms of inhibition by NJ-18 is antibiosis. In field experiments for control of sheath blight of rice, fermentation of NJ-18 at 5.0 × 10⁷ cfu ml⁻¹ significantly reduced disease incidence and severity; NJ-18 alone or combined with 50% kresoxim-methyl treatment at 225 g ai ha⁻¹ provided better control than 50% kresoxim-methyl at 225 g ai ha⁻¹ or Jinggangmycin at 120 g ai ha⁻¹, and control by NJ-18 alone was as high as 100.0%. In field experiments for control of Sclerotinia stem rot of rape, fermentation of NJ-18 at 1.0 × 10⁷ cfu ml⁻¹ again significantly reduced disease incidence and severity; control by NJ-18 was as high as 77.1% and was comparable with control by 46% dimethachlon and better than control by 50% carbendazim at 750 g ai ha⁻¹. We conclude that strain NJ-18 of B. subtilis is a promising biological control agent and should be further studied and tested for control of sheath blight of rice, Sclerotinia stem rot of rape, and other diseases.     

蓝狐消化道内分泌细胞的免疫组化研究

蓝狐又名北极狐(Alopex lagopus),属于食肉目(Carnivora),犬科(Canidae),北极狐属(Alopex).     

不同种源山桐子果实脂肪酸组成变异分析

以采自11个种源的山桐子为材料,测定其果实脂肪酸的组成及其变异情况,结果表明：山桐子果实中不饱和脂肪酸含量较高,尤以亚油酸含量最高,11个种源的平均值为63．58％,且种源间差异显著,分宜、宜昌种源亚油酸相对含量明显高于其他9个种源;饱和脂肪酸以棕榈酸为主,11个种源山桐子果实棕榈酸差异显著,且以平武种源最高;其余脂肪酸含量均较低,变异幅度较大;种子中棕榈酸和棕榈烯酸含量明显高于果肉,而亚油酸、亚麻酸及硬脂酸含量明显低于果肉,油酸含量相近：果实不饱和脂肪酸含量依次为果肉〉全果〉种子,且变异系数及相对极差均较小,尤以果肉中最小;除硬脂酸外,山桐子果实中其他4种主要脂肪酸组分受海拔等地理环境的影响均较小。     

多层螺旋CT对肺结核合并肺癌患者的诊断价值

目的:研究多层螺旋CT对肺结核合并肺癌的鉴别诊断价值。方法:选择2013年3月至2015年9月在我院确诊的肺结核合并肺癌患者32例和单纯肺结核患者39例应用多层螺旋CT扫描患者肺部病变情况。结果:肺结核合并肺癌组:陈旧性肺结核28例、活动性肺结核4例;病灶位置经典部位29例、非经典部位3例,合并鳞癌11例、腺癌13例、小细胞癌5例、未分化癌3例;10例结核病灶与肺癌病灶不同侧、13例结核病灶与肺癌病灶同侧不同叶、9例结核病灶于肺癌病灶同侧同叶。单纯性肺结核组胨旧性肺结核36例、活动性肺结核3例;病灶位置经典部位34例(上叶尖段11例、后段9例、下叶背段14例)、非经典部位5例。肺结核合并肺癌组患者分叶征、毛刺征、胸膜凹陷征、阻塞性肺炎及肺不张以及棘状突起比例高于单纯肺结核组,而空泡影比例低于单纯肺结核组,差异具有统计学意义(P0.05);两组钙化、斑片条索影、结节影以及空洞或空腔比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:多层螺旋CT对肺结核合并肺癌具有较高的临床鉴别诊断价值。     

Specificity of yeast (Saccharomyces cerevisiae) in removing carbohydrates by fermentation

The specificity of Saccharomyces cerevisiae yeast on the removal of carbohydrates by fermentation was studied. The common monosaccharides, D-glucose, D-fructose, D-mannose, and D-galactose were completely removed; D-glucuronic acid and D-ribose were partially removed; but D-xylose, D-rhamnose, and L-sorbose were not removed and were completely resistant. Of four glycosides, methyl and phenyl alpha- and beta-D-glucopyranosides, three of the four were partially removed and methyl beta-D-glucopyranoside was not removed. The disaccharides, maltose, sucrose, and turanose were completely removed, while cellobiose, lactose, and melibiose were completely resistant. Isomaltose and alpha,alpha-trehalose were partially removed. Maltotriose and raffinose were partially removed, but isomaltotriose and melezitose were completely resistant. The tetrasaccharides, maltotetraose, isomaltotetraose, and acarbose, were completely resistant. Further, the yeast enzymes did not alter any of the resistant carbohydrates by transglycosylation or condensation reactions or by any other types of reactions.     

鸭儿芹根、茎、叶挥发油的化学成分

采用水蒸气蒸溜法提取其根、茎、叶中的挥发油,利用GC-MS联用仪对其化学成分进行分析,以归一化法计算各个化学成分的相对含量.鸭儿芹根挥发油中共分离出11个峰,鉴定出11种化合物,占总离子峰的98.61％,主要成分为α-芹子烯、γ-芹子烯等;茎中共分离出25个峰,鉴定出25种化合物,占总离子峰的100.00％,主要成分为...     

微囊化新生大鼠卵巢组织体外及异体移植

为探讨海藻酸钠-聚左赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊化新生大鼠卵巢组织用于治疗实验性卵巢功能丧失大鼠的可行性,应用高压静电法,用海藻酸钠-聚左赖氨酸-海藻酸钠(APA)生物膜包裹新生大鼠卵巢组织,体外培养微囊,用免疫化学分析法检测雌二醇(E2)、孕酮(P)分泌情况,透射电镜观察卵巢组织形态,并将微囊移植到去势大鼠(切除双侧卵巢的雌性大鼠)腹腔中,检测大鼠血清中雌、孕激素变化情况,同时用阴道涂片观察大鼠动情周期恢复情况,并在不同时间回收观察微囊。结果显示在相同条件下制得的微囊粒径均匀、表面光滑;体外培养条件下持续分泌E2、P;卵巢组织中颗粒细胞发育成为粒性黄体细胞;大鼠腹腔移植微囊后无异常,E2、P水平上升,动情周期未恢复;回收的微囊大部分形态完整。提示用高压静电法制备的APA微囊化新生大鼠卵巢组织能持续稳定释放E2、P,明显改善大鼠卵巢功能,在大鼠体内有良好的生物相容性。     

淡黄绒泡菌和全白绒泡菌孢囊形成过程显微观察的染色差异

为了研究黏菌孢囊形成过程中显微结构的变化,文中探讨了番红-固绿和铁帆-苏木精染色条件下淡黄绒泡菌和全白绒泡菌孢囊不同发育阶段显微结构的差异显示效果。结果表明：在幼孢囊中原质团有种水平的割裂,大割裂和微割裂,这些割裂和孢丝及孢子的形成有关;全白绒泡菌囊轴表现了和孢囊柄不一致的状态和染色结果;番红-固绿染色下,淡黄绒泡菌在孢囊形成前期原质团被染成淡红色,可以分辨出大量游离存在的细胞核;孢囊壁及囊轴被染成绿色,孢子灰绿色;全白绒泡菌原质团被染成绿色,初期可见较厚孢囊壁,囊轴绿色。铁帆-苏木精染色下,淡黄绒泡菌和全白绒泡菌原质团均被染成灰色,囊壁不明显,成熟孢子发生皱缩。     

神农架大九湖湿地公园及周边区域两栖动物和爬行动物概况

神农架大九湖湿地公园独具特色的高山湿地生态系统孕育了独具特色的动植物资源,但其两栖动物和爬行动物物种多样性尚未报道.为此,2016至2018年对该区域的两栖动物和爬行动物进行了调查.共记录两栖动物21种,隶属于2目8科.其中,东洋种17种,古北种1种,广布种3种;湖北省级保护动物12种;IUCN收录21种,其中棘腹蛙(...     

陆地棉组织培养中再生植株的形态解剖学研究

在显微和超微水平不同层次上对陆地棉(Gossypium hisutum L.)再生植株中正常苗和玻璃苗叶及根端的形态结构进行了观察比较。结果表明:试管玻璃苗叶表面凹凸不平,气孔下陷,萎缩变形,表皮细胞形态不规则,排列不整齐,叶表面蜡质分布不均匀,其数量也较少;叶肉无明显的栅栏组织分化,细胞中叶绿体含量少、形态小,结构异常。超微结构显示,大部分叶肉细胞中叶绿体基粒片层分布少而含较多的基质片层,其它细胞器如线粒体、高尔基体、内质网等含量少或缺。叶脉维管组织发育不良,导管分子数目少,木质化程度低,根尖短而细,生长点仅由少数具分生能力的细胞组成,根冠细胞大,但数量少。正常苗形态结构基本类似于实生苗。