多荧光标记引物增强甘蔗染色体寡聚核苷酸探针杂交信号

荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization, FISH）是植物分子细胞遗传学研究最为重要的手段之一。近些年，基于参考基因组设计的低拷贝寡聚核苷酸探针在FISH中应用得越来越广泛。然而，由于植物基因组中分布大量的重复序列，这使得oligo-FISH的分辨率存在一定局限性。利用包含多个荧光基团的荧光PCR引物，扩增出甘蔗染色体特异oligo探针，并进一步优化甘蔗的荧光原位杂交体系，提高了甘蔗oligo探针识别近缘物种染色体的效率。通过开发多荧光标记的甘蔗oligo探针以及甘蔗荧光杂交体系的优化，有效拓宽荧光信号的最小分辨率，提高信噪比（signal-to-noise ratio, SNR），并成功基于甘蔗oligo探针对高粱1-10号染色体分型。多荧光标记引物增强oligo探针信号的新方法及FISH体系的优化为今后在其他物种中提高oligo-FISH鉴定染色体及捕捉微弱的荧光信号提供了参考。     

D1／D2／Cyt b—559几个不同寿命组分的荧光发射光谱的分辨

菠菜叶绿体光系统Ⅱ反应中心Ｄ１／Ｄ２／Ｃｙｔ ｂ－５５９复合物的荧光衰减包括４个组分，其寿命分别大约为１．０ｎｓ，５．９ｎｓ，２４ｎｓ和７３ｎｓ，所占整个荧光的量子产率依次为０．０５，０．３４，０．３５和０．２６。这些不同寿命组分的荧光发射光谱相互重叠在一起，稳态光谱只显示１个发射峰。根据相调荧光测定的“硬件”分析方法，通过选择检测器的相角，可以选择性地把各个寿命组分的荧光分别滤掉。如果５．９ｎｓ     

一种基于类花菁检测过氧化氢荧光探针的合成

文章以2-甲基苯并噻唑和尼泊金乙酯为原料，合成了一种具有红色荧光的花菁类染料，该染料与4-溴甲基苯硼酸频哪醇酯反应可以生成用于检测过氧化氢的荧光探针。通过紫外和荧光研究该探针在不同溶剂、过氧化氢浓度、黏度条件下检测过氧化氢的响应。研究结果表明。在该实验中，过氧化氢浓度越高、体系黏度越低，探针荧光强度均逐渐降低，同时具有良好的选择性。     

g-C3N4的制备及其对氯霉素荧光传感的研究

文章利用电化学碳化一锅法，以三聚氰胺为原料，成功制备得到了功能化荧光g-C₃N₄纳米材料，然后采用荧光分光光度计(FL)技术表征g-C₃N₄的荧光性质，考察g-C₃N₄作为免标记的荧光探针检测抗生素药物氯霉素(CAP)的传感性能。实验结果表明该方法制备得到的g-C₃N₄具有良好的荧光性能，且基于CAP对g-C₃N₄荧光强度(激发/发射波长分别为380/468 nm)的猝灭作用，可实现对CAP的检测。在优化实验条件下，所制备的g-C₃N₄荧光探针对CAP具有较好的传感性能，线性检测范围为1 m M～10 m M，线性回归方程为y=0.013 9x-0.09，线性相关系数R2=0.959。该方法可用于简便、快速、灵敏地检测抗生素药物CAP，并有望在食品安全、环境监测和生物医学等领域中实现广泛应用。     

基于荧光生物传感器的真菌毒素检测方法研究进展

综述了荧光型真菌毒素检测生物传感器的研究进展，重点介绍了荧光型真菌毒素检测生物传感器的设计及其灵敏度、特异性等性能，分析了黄曲霉毒素等主要毒素的免疫荧光传感器和适配体荧光传感器的检测方法，提出将来的研究可以针对纳米材料/纳米复合材料的表面化学调节，设计用于检测各种分析物的目标特定无标签分析方法，实现毒素的多种同时检测。     

作用光关闭后玉米叶片叶绿素荧光短时上升的数学分析及其对 …

经连续光照射以后，玉米活体叶片由光是电子链的非光化学还原引起的叶绿素荧光在暗中的短时上升可以用三重指数模型来逼近，从而为该荧光信号的定量分析提供了便利。当照光时间由３０ｓ逐渐增至２７０ｓ时，叶绿素荧光在暗中上升的最大速率，最大高度以及峰的面积均呈先上升的最大速率、最大高度以及峰的面积均呈现先升高而后缓下降的变化趋势，而荧光在升至最高峰后下降的最大速率则呈单调递减之势。荧光上升幅度随照光持续时间的变     

基于鞣质的碳量子点荧光探针测定西咪替丁的研究

本研究以鞣花酸为原料，在碱性条件下，采用便捷的超声法制备了碳量子点(CQDs)，并用紫外光谱法和荧光光谱法研究了该CQDs与西咪替丁之间的相互作用，研究发现以该CQDs为荧光探针可以测定西咪替丁(CMTD)的含量。研究结果：鞣花酸(0.089 4 mol/L)与氢氧化钠溶液(0.100 0 mol/L)以1:3的比例混合后，在50℃下超声4 h得出的荧光碳量子点与西咪替丁结合，可以使碳量子点的荧光信号减弱。其浓度在1×10^-8～1×10^-7mol/L范围内与碳量子点荧光信号强度的减少值ΔF成良好的线性关系，相关系数r为0.996 42。以此提出用鞣质的碳量子点荧光探针测定西咪替丁的研究，该方法简便高效，可应用于样品中西咪替丁含量的测定，S_RSD范围为0.86%～1.06%；回收率范围为98.18%～103.2%。     

日本培育出能吐荧光丝的转基因蚕

新华网东京10月26日电（记者钱铮）日本研究人员最近利用转基因技术，培育出能吐带绿色荧光丝或粉红色荧光丝的蚕。他们认为，这种蚕丝在时装和装饰市场前景看好。     

研究选萃

蜘蛛求偶秘诀 美国《科学》杂志发表了李代芹等题为《雌雄特异性紫外光和荧光讯号在跳蛛求偶中的作用》的论。该主要探讨紫外光和荧光在动物两性间的交流及其在性伴选择中的作用。这是世界上首次发现动物界在紫外光和荧光上具有性别特异性。他们在一种跳蛛中发现只有雄蛛可以反射紫外光，雌蛛不反射紫外光，而只有雌蛛的触肢可发出由紫外光激发的荧光，雄蛛身体的任何部位都不发出荧光。并且，他们通过实验证实：此跳蛛必须用这2种颜色进行两性的识别和交流，如果遮住任一性别的紫外光，大多数跳蛛的交配行为就无法完成。     

外周伤害性刺激诱导大鼠脑干内延髓网状背侧亚核传入投入神经元的c—fos表达

用荧光金逆行追踪和FOS荧光免疫组织化学染色相结合的方法对外周伤害性刺激下大鼠脑干内向延髓网状背侧亚核传入投射的神经元中c-fos的表达进行了研究，在麻醉状况下将0.15μl2%荧光金注入大鼠单侧延髓网状背侧亚核，存活5d后用1％福尔马林刺激同侧前爪、后爪和口周，2h后灌注取材，再行FOS免疫荧光标记。结果发现在脑的中脑导水管周围灰质、中缝背核、线形核和中缝大核内观察到荧光金记细胞、FOS样免疫阳性反应细胞及荧光金／FOS双标细胞。在这四个核团中，双标细胞数分别占荧光金逆标神经元数的25％（中脑导水管周围灰质）、11.7%（中缝背核）、8.9%（线形核）和12.1%（中缝大核）。结果提示在脑干向延髓网状背侧亚核投射的神经元中，有一部分与外周伤害性刺激信息的调控有关，还有的神经元可能具有其它的功能。     

《自然-方法学》：新型荧光蛋白可用于活细胞观察

来自德国卡尔斯鲁厄理工学院等处的研究人员发现了一种新的，来自珊瑚虫的荧光蛋白。这种荧光蛋白可以用于高分辨率显微镜下观察活细胞。这一研究成果公布在《自然-方法学》（Nature Methods）杂志上。     

荧光标记技术在肿瘤模型研究中的应用

目的利用绿色荧光小鼠和红色荧光蛋白标记肿瘤细胞,建立荧光标记的小鼠肿瘤模型,并建立活体荧光成像和荧光显微镜成像在整体和细胞水平直接观察肿瘤的技术。方法将小鼠B16黑色素瘤细胞接种到绿色荧光蛋白转基因小鼠皮下,建立GFP小鼠肿瘤模型。以红色荧光蛋白作为标记基因导入小鼠黑色素瘤细胞B16细胞,建立稳定表达红色荧光蛋白的细胞株。将表达红色荧光蛋白B16细胞接种到绿色荧光转基因小鼠皮下,建立双荧光小鼠肿瘤模型。用荧光显微镜和活体荧光成像系统检测小鼠肿瘤的发生发展。结果分别建立了GFP小鼠肿瘤模型和双色荧光小鼠肿瘤模型。利用活体荧光影像仪可以观察双色荧光小鼠模型中受体绿色荧光组织和红色荧光移植肿瘤相互融合。利用荧光显微镜,可以观察到肿瘤内绿色荧光标记的来源于受体小鼠的血管和免疫细胞。经香菇多糖刺激的GFP小鼠肿瘤模型的移植瘤组织中,来源于受体小鼠绿色荧光标记的免疫细胞明显多于经生理盐水刺激的对照小鼠。结论利用绿色荧光小鼠和红色荧光RFP标记肿瘤细胞建立荧光标记的小鼠肿瘤模型,采用活体荧光成像仪和荧光显微镜可在整体和细胞水平直接观察肿瘤的生长以及肿瘤与宿主的相互作用。     

栉角雪萤的荧光酶基因结构及其系统发育分析

短角窗萤属是萤科第四大属，但未见有该属物种荧光酶基因的研究报道。通过对总基因组的PCR扩增，对该属的栉角雪萤荧光酶基因进行了测序分析。基因序列长1 958 bp。与已知荧光酶基因进行同源性比较后推断，栉角雪萤的荧光酶基因由7个外显子和6个内含子组成，编码547个氨基酸残基；由推导的氨基酸序列进行同源性比较后发现，栉角雪萤的荧光酶基因与同一亚科中Lampyrini族和Cratomorphini族分别具有93—94%和92%相似性，而与北美萤火虫Photinus pyralis(Photinini族)的相似性较低(83%)。系统发育分析进一步表明栉角雪萤与Pyrocoelia、Lampyris、Cratomorphus和Photinus同属于萤亚科，且与前3个属的亲缘关系较近。这在一定程度上与形态(Branham & Wenzel, 2003)及线粒体DNA(Li et al, 2006)系统发育分析所得结果一致。     

MFMS—2叶绿素荧光仪毫秒信号的数字化和计算机采集

在研究植物生理的仪器测量中常遇到诸如长时间、快速或者精确记录信号，准确处理记录信号等一些问题。用常规电子仪器取样可能做得很好，但如果能借助微机，问题的解决就更容易些，而且准确，比手工快得多。一些没有用单片机或微机控制的老式仪器的测定精度也不一定很差，如MFMS－2双路调制叶绿素荧光仪可以在毫秒级范围内对叶绿素荧光取样，但用普通示波器记录信号较难掌握，此外，台式记录仪因频率响应较差，不能记录毫秒级荧光。因此，如果利用微机使仪器输出的模拟信号数字化，就可最大限度地开发仪器的功能，也有利于该领域的研究。…     

红色荧光和绿色荧光转基因小鼠模型的建立

目的建立红色荧光和绿色荧光转基因小鼠,为活体荧光影像系统建立重要的实验动物模型。方法把DsRed-Express和EGFP基因插入chicken-βactin强启动子下游构建转基因载体,建立红色荧光和绿色荧光转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定红色荧光和绿色荧光转基因小鼠的基因表型,活体荧光影像系统分析红色荧光和绿色荧光转基因小鼠,荧光显微镜检测红色荧光和绿色荧光转基因小鼠全身组织器官的组织形态。结果分别建立了3个系的红色荧光和3个系的绿色荧光转基因小鼠。活体荧光影像系统分析转基因小鼠分别呈现红色荧光和绿色荧光。经荧光显微镜观察,DsRed-Express转基因小鼠的红色荧光蛋白在多个组织器官中表达,尤其在胰腺、肝脏、肾脏和脾脏等器官表达量较高。EGFP转基因小鼠绿色荧光蛋白在全身各个组织器官中表达,尤其在胰腺、心脏、小肠、外周血细胞和脑组织等器官组织中表达量较高。结论DsRed-Express和EGFP基因在转基因小鼠中系统性高表达,成功建立了红色荧光和绿色荧光转基因小鼠。DsRed-Express和EGFP转基因小鼠将成为活体荧光影像系统的重要实验动物模型。     

针孔参数优化对激光扫描共聚焦显微镜荧光成像的影响

激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）是一种高分辨率的光学成像仪器，它利用“共轭成像”原理，获得的图片质量远超于普通荧光显微镜。LSCM有两组功能不同的针孔，即照明针孔和探测针孔，这是实现“共轭成像”的关键。由于照明针孔的大小和位置一般是固定的，LSCM主要通过调节探测针孔的大小来获得高质量的成像图片。然而，很多使用者对于LSCM中针孔大小与荧光成像质量的关联缺乏了解。因此，本文阐述了针孔在LSCM中的作用原理及其与显微镜分辨率的关系，并通过小鼠脊髓腹侧白质中的免疫荧光成像分析，发现针孔参数优化对提高LSCM荧光成像质量具有显著影响。这一发现将为LSCM成像分析提供重要参考。     

新品了望

超声成像介导显微注射，实时细胞成像，蛋白组级别去垢剂，蛋白质富集试剂盒，激光显微切割系统，荧光标记试剂和糖蛋Profiling试剂……     

家蚕荧光茧色的判性机理

以家蚕荧光茧色判性品种为实验材料,对蚕茧层表面和茧层抽提物的荧光光谱分析表明,蚕茧荧光色不论雌雄都出现黄色和蓝紫色二个荧光发射峰,因两者相对荧光强度不同而引起雌雄茧之间的荧光色差异,通过对家蚕中肠组织的荧光观察和荧光显微观察,发现蚕茧荧光色的雌雄差异或判性是由于雌蚕中肠组织对黄色荧光色素的特异性积累而引起的,5龄4日以后,雌蚕食桑后经过中肠消化与吸收,全部或大部分黄色荧光物质开始积累于中肠后部细胞内直至变态化蛹,所有蓝紫色荧光物质单独或与少量黄色荧光物质一起分泌进入血液,再到达丝腺体而使雌茧呈蓝紫或蓝白荧光色,而雄蚕中肠组织对这二类荧光物质都不积累,全部分泌进入血液再到达丝腺体最后使雄蚕茧呈黄白荧光色,应用硅胶薄层色谱和荧光光谱分析提示,蓝紫荧光色物质至少由5种蓝紫荧光色素成分组成,而黄色荧光物质至少由3种黄色荧光色素成分组成;从雄蚕茧层中提取到的黄色荧光色素与雌蚕后部中肠积累的色素完全相同,紫外光谱分析和AlCl3显色反应表明,3种黄色荧光色素属于黄酮类或黄酮苷类化合物,其中一种黄色荧光色素（Rf=0.82）为主要成分,其荧光发射光谱最大发射峰为533nm,激发光谱峰值为377nm,上述结果充分表明,家蚕荧光判性品种的雌雄荧光茧色差异就是由雌性家蚕中肠尤其是后部中肠对黄色荧光色素的特异性积累而引起的,因此,可以推测,在荧光茧色判性的5龄雌蚕中肠,特别是后部中肠上皮圆筒形细胞中特异表达一种能与黄色荧光色素结合的蛋白。     

β1—4半乳糖基转移酶检测方法的建立及动力学研究

本文分离纯化了人ＩｇＧ的糖肽，去掉末端大酸和半乳糖，，经解和荧光标记，用ＨＰＬＣ纯化了荧光标记的底物［Ｇｎβ１－２ｍａ１－６（Ｇｎβ１－２Ｍｄα－３）Ｍβ１－４ｎβ１－４Ｇｎ－Ｐａ］。     

菠萝叶片PEP羧激酶与底物结合时构象的变化

菠萝叶片PEP羧激酶与底物OAA和ATP及配基Mn^2 等结合时引起紫外差示吸收光谱峰位和方向上的变化。OAA与酶结合诱导产生的差示吸收光谱在268—280mm处有一个宽负峰。ATP与酶结合出现两个差示负峰(242．5和273．5nm)。双底物OAA和ATP同时与酶结合，光谱上呈现252nm和268nm两个峰。Mn^2 不论与ATP或与ATP OAA一起与酶反应时，皆使原来的峰位漂移，且正负方向逆转。酶蛋白在323nm有最大的荧光发射。OAA引起荧光发射强度增大，ATP及ATP Mn^2 则减弱荧光发射。Mn^2 与OAA及ATP的复合效应导致荧光强度进一步减弱。