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相似文献
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1.
将含有Anabaenasp.PCC7120反义glnA基因片段的穿梭表达质粒pDC-ATGS转化单细胞蓝藻聚球藻Syne-chococcus sp.PCC7942,通过同源重组,外源DNA定位整合到染色体上。经过抗菌素筛选,获得一种高效泌氨的Synechococcus sp.7942突变种。将此突变种固定化在聚氨脂泡沫中后,定量测定其谷氨酰胺合成酶(GS)活性。结果表明,固定化后的突变藻培养9d后泌氨活性比自由生活的野生藻高156倍,GS活性降低73.6%;其生长速度与同条件下野生藻相近,77K荧光光谱表明突变种固定化后光系统Ⅱ活性提高44%。  相似文献   

2.
以单细胞蓝藻球藻Synechococcus sp.PCC7942为材料,利用甲基磺酸乙酯(EMS)进行化学诱变获得了一个高CO2需求突变株。它能在4%CO2下生长而不能在空气中生长。对突变株的初检表明:其回复突变率约为10^-7。该突变株从高CO2条件下转到空气中后,细胞在2~3d内逐渐趋于死亡;其光合作用对外源无机碳的依赖性高于野生型细胞,碳酸酐酶活性也低于野生型细胞。在超微结构水平,突变株细胞  相似文献   

3.
人尿激酶原基因在聚球藻7002中的克隆和表达   总被引:2,自引:0,他引:2  
将人尿激酶原基因连在PpsbA启动子之后,再将启动子连同基因克隆入整合载体pTZ18中。pTZ18-8中含有一段来源于集胞藻6803的psbB基因片段作为整合平台。将整合表达载体用直接转化的方法转聚球藻Syne-chococcus sp.PCC7002中。经氨苄青霉素选前扩大培养后的转化进行DNA斑点印迹及Western印迹, 基因的存在及表达,菌体破碎后的上清液有较高的溶解纤维蛋白的活性,说明表  相似文献   

4.
将人肝金属硫蛋白(MT)突变体β基因插入到中间载体pRL-439上的强启动子PpsbA 下游,利用载体pRL-β上的PpsbA 和β基因与phasm id pTZ18-8上整合平台PsbB,构建整合表达载体pTZ-β.整合平台PsbB与集胞藻(Synechocystissp.PCC6803)染色体DNA 上psbB基因下游片段为同源序列.为了发生单交换同源重组,将外源基因β插入到整合平台PsbB下游的克隆位点.利用自然转化方法将表达载体pTZ-β整合到Synechocystitsp.PCC6803的染色体上.经氨苄青霉素筛选得到遗传性状稳定的转基因蓝藻.Southern blotting 证明β基因已整合到Synechocystis sp.PCC6803的染色体上;Western blotting 表明β基因已在蓝藻中表达.ELISA 测定在Zn2+ 浓度为150 μm l/L时表达量最高,为590 μg/g 鲜藻;原子吸收表明转β基因的藻对Zn2+ 的富集能力约为野生型的2倍.  相似文献   

5.
铁氧还原白-NADP^+氧还酶(FNR)是光合电子传递中的关键酶之一。蓝细菌Synechococcus sp.PCC7002中编码FNR的petH基因被克隆到表达载体pET-3d上,在大肠杆菌中得到了高效表达,其表达量占大肠杆菌总蛋白的505%以上。高效表达的产物以可溶性和包含体两种形式存在。可溶性部分具有FNR的酶活性,在经过离子交换和凝胶层析后产生了电泳纯的FNR。包含体形式的部分经6.7mo  相似文献   

6.
单细胞蓝藻(Synechococussp.PCC7942)以50μmol/LZn2+诱导8d后收集,破碎取上清液经凝胶过滤、离子交换层析及反相HPLC纯化得到类金属硫蛋白,产率为每升培养液收集1.5g鲜藻,得2.5mg纯品.其单体分子量为8750,N未端测定为缬氨酸,氨基酸组成分析得每分子(56个氨基酸)含10个半胱氨酸,疏水氨酸较多,且含有芳香族氨基酸,原子吸收光谱测得每分子蛋白结合4个二价金属.以上表明,该种类金属硫蛋白与哺乳动物金属硫蛋白结构差异很大,可能只是一种进化上的趋同.  相似文献   

7.
《日经生物技术》1999年4月12日第11页报道:近畿大学农学部教授重岗成等小组将耐过氧化氢兰草所具有的碳同化系基因导入烟草,促进植物生长获得成功。成果的详细情况于3月28日在仙台市召开的日本植物生理学会1999年年会上发表。这次导入的基因是兰草ynechococcusMPCC7942株的fbp-1基因。其产物在Calvin途径中决定反应速度,该酶具有弱胁迫的FBPase和SBPase两方面酶活性。使用番茄RuBisCo小亚单位(rbcS)启动子和叶绿体抑制肽,导入烟草。不用担心基因沉默等问题,…  相似文献   

8.
用PCR的方法克隆出了编码蓝细菌Synechococcussp.PCC7002FNR中FNR区的基因petHL,克隆到达载体pET3a上,转化大肠杆菌BL21(DE3)后实现了大量表达。重组FNR区(rFNRD)经DEAESephdexA50离子交换层析及SephadexG100凝胶层析得到大量的电泳均一的rFNRD。N末端氨基酸序列分析表明,表达产物确为petHL所编码。且起始Met翻译后未被除去。rFNRD与rFNR的吸收光谱相同,其黄递酶活性的最适pH和最适温度也相同。rFNRD能在体外催化电子从P700到NADP+的传递  相似文献   

9.
用PAM叶绿素荧光仪测定了饥饿细胞、光自养细胞和混合营养细胞的叶绿素荧光,并对3种类型细胞的荧光参数:PSⅡ实际光化学效率ψⅡ和还原型质醌Q^-A进行了比较。用双重转盘磷光机测定了光自养细胞和混合营养细胞的毫秒延迟发光。根据叶绿纱荧光动力学分析和毫秒延迟发光的结果及光合电子传递抑制剂3,4-二氯苯基二甲脲(DCMU)、溴百里香醌(DBMIB)对集胞藻6803(Synechocystis sp.PC  相似文献   

10.
本文报道9种尾孢菌,其中有2个新种:蟹甲草尾孢 Cercospora cacaliae Y. L. Guo & Y.Jiang和菜蓟尾孢Cercospora  cynarae Y. L. Guo & Y. Jiang,中国新记录种有迪氏尾孢Cercosporademetrioniana  G. Winter,田菁生尾孢 Cercospora  glothidiicola  Tracy &  Earle,甘草尾孢 Cercosporaglycyrrhizae  (Savulescu & Sandu)Chupp,野桐尾孢Cercospora malloti Ellis &  Evsrh,木薯尾孢Cercospora manihobae Viegas,补骨脂尾孢 Cercospora psoraleae-bituminosae Savul.& Sandu和香豆尾孢Cercospora traversiana Sacc。文中为新种提供了拉丁文描述并附图,研究的标本保存在中国科学院微生物研究所菌物标本馆(HMAS)。  相似文献   

11.
东濮凹陷早第三纪的海侵(泛)事件   总被引:11,自引:0,他引:11  
依据生物化石Sphenolithus ciperoensis,Dictyococcites abisectus,Coccolithus pelagicus,Reticulofenestra sp.,Sinocysta minuta,S.subtilis,Cordosphaeridium,Achomosphaera,Spiniferites,Ophinomorpha nodosa,Cladosiph  相似文献   

12.
铜和其他重金属离子诱导大肠杆菌抗铜启动子的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过测定荧光酶活性研究了大肠杆菌抗铜基因上的两个铜诱导的启动子。结果表明,在缺少抗铜质粒pBIN19pco的情况下,启动子PpcoAbox-lux和PpcoAlong-lux的最大诱导均出现在5mmol/LCuSO4,而且PpcoAbox是一个比即PpcoAlong强的启动子;铜对两个PpcoE-lux构建的诱导的生物荧光曲线中,有两个峰,第一个峰出现在0.5mmol/LCuSO4时,第二个峰亦即最大诱导出现在约5mmol/LCuSO4时,并且PpcoElong的活性比PpcoEbox高。结果还表明,启动子PpcoE比PpcoA活性高得多;此外,由于两个Ppcoshort-lux构建均不显示任何荧光酶活性,说明Copperbox对于抗铜基因来说是非常重要甚至是必需的。在质粒pBIN19pco存在的情况下,所有启动子的最大诱导均出现在6mmol/LCuSO4时,而且比无该质粒时的相应最大诱导值高得多。以其他重金属离子进行诱导实验结果表明,锌和镍可以作为诱导物且锌的效果较好,镉和银则不能诱导抗铜系统。  相似文献   

13.
从采自安徽祁门枯牛降自然保护区的一种虫草[Cordyceps.sp.]的内菌核上分离出一株产生孢梗束的丝孢菌,鉴定为地生枝顶孢,在中国属首次报道。地生枝顶孢Acremonium terricola(Miller et al)Gams,Cephalosporium-artige Schimmelpilze(Hyphomycetes),GustavFisherVerlag,Stuttgart,p.67,1971.Fusidium terricola Miller,Giddens & Foster,M…  相似文献   

14.
用Kunkel突变法,将单链尿激酶型纤溶酶原激活剂(scu-PA)cDNA基因中编码Pro155—Lys158的片段定点突变,并将此突变的scu-PA(tscu-PA)的cDNA克隆到表达载体pCM-β-neo中,与pCM-dhfr共转染CHO/DHFR-细胞.获得的稳定表达株在无血清培养基中24h的表达量为620IU/106细胞.经锌离子螯合Sepharose亲和层析得到tscu-PA纯品.SDS-PAGE显示tscu-PA分子量为53kD左右,与预期的结果相符.tscu-PA是由凝血酶激活而不是由纤溶酶激活,但激活后也能转变为双链分子(tcu-PA).tscu-PA仍保持了scu-PA的血纤维蛋白亲和性.酶动力学研究表明,激活后的tscu-PA水解S2444的Km和Kcat值与高分子量尿激酶(HUK)相似.体外溶栓实验结果表明,tscu-PA可以选择性地溶解富含凝血酶的血凝块,对贫凝血酶的血凝块作用不大  相似文献   

15.
日本血吸虫26kD抗原基因在BCG中的表达   总被引:5,自引:0,他引:5  
研究了外源基因日本血吸虫26kD抗原(Sj26GST)在卡介苗(bacilusCalmete-Guerin,BCG)、耻垢分枝杆菌(M.smegmatis)和大肠杆菌(E.coli)中的表达.运用重组DNA和聚合酶链反应(PCR)等分子生物学技术,以表达Sj26GST的E.colipGEX衍生质粒为模板,经PCR得到编码Sj26GST的全长cDNA片段.将其按正确的阅读框顺序,克隆到人结核杆菌热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)70的启动子下游,再将HSP70启动子和Sj26GST基因一起亚克隆到E.coli-分枝杆菌穿梭质粒pBCG-2000中,得到E.coli-分枝杆菌穿梭表达质粒pBCG-Sj26.pBCG-Sj26电转化入BCG和M.smegmatismc2155中表达Sj26GST抗原,所表达的天然重组Sj26GST(rSj26GST)为可溶性蛋白,在SDS-PAGE上分子量为26kD处可见明显的表达蛋白带.其表达量分别占BCG和M.smegmatis菌体总蛋白的15%和10%.可见,Sj26GST基因能在BCG中高效表达.  相似文献   

16.
浸润垄作稻田土壤生态系统的研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
浸润垄作稻田土壤生态系统的研究魏朝富,高明,车福才,邓春(西南农业大学土化系重庆630716)AStudyonInfiltrated-RidgedPaddySoilEcosystem¥.WeiChaofu;GaoMing,CheFuchai;DengChun(SouthwestAgriculluralUniversity,).ChineseJournalofEcology,1993,12(3):26-30;Thispaperdealswichaninfiltrated-ridgedpaddysoilecosystemwhichisconstructedbyridgingandcon-tinuousfurrowinfiItratiOnirrigation,ComparingwithlevelinfiItratedpaddysoilecosystem,thisecosys-temhascoexistedgas-liquid,gas-solidandliquid-solidinterfaces,enlargessoilsurfaceby38%andincreasescuItivatedlayerby5-10cm.  相似文献   

17.
研究和整理了我国黑粉蚧属Atrococcus及其近似属的种类,计有5属12种,其中包括2新种;鹤虱奥粉蚧Allococcus leppulus Wu,sp.nov和山西配粉蚧Allotrionymus shanxiensis Wu,sp.nov.,和个中国新纪录种,细长黑粉蚧Atrococcus cracens Williams。模式标本保存在山西农业大学蚧虫研究中心。  相似文献   

18.
吴庆余  徐红 《Acta Botanica Sinica》1997,39(11):1003-1009
利用DNA体外重组技术构建了蓝细菌Synechocystissp.PCC6803突变种ORF469,它的染色体DNA缺失ORF469片段,该突变种在加入5mmol/L葡萄糖的BG-11培养基中经遮光培养2周后叶绿素全部消失,细胞甲醇提取液光谱中665nm处叶绿互峰消失,629nm处出现原叶绿素酸酯峰,完整细胞光谱仅存在620nm的藻胆蛋白肩峰,细胞的类囊体膜消失,但藻胆体颗粒并未减少;细胞培养物重  相似文献   

19.
研究和整理了中国绵粉蚧属Phenacoccus Cockerell的种类和分布。截至目前,我国该属计有20种,其中包括本文3新种:无管绵粉蚧P.atubulatus sp.nov.,内蒙粉蚧P.neimengulicus sp.nov.和山西绵粉蚧P.shanxiensis sp.nov.及6个中国新纪录种:盐木绵粉蚧P.arthrophyti Archangelskaya,时麦绵粉蚧P.prei  相似文献   

20.
少棘巨蜈蚣(ScolopendrasubspinipesmutilansL.Koch)经95%乙醇脱脂后,再经4℃水冷渗,水提液低温旋转浓缩,冻干,得到的冻干粉先后经过SephadexG-25柱,等电聚焦制备电泳,再经SephadexG-150柱,SephadexG-100柱,最后经HPLC制备得到一个纯的碱性蛋白,命名为SSmp-d.该蛋白经HPLC、超薄等电聚焦电泳检验是均一的.采用HPLC和Protein-PakTM125柱测定其分子量为24.64kD.IEF-HPCE显示其等电点为9.27.氨基酸分析表明SSmp-d含较多的Arg、Lys等碱性氨基酸,另外还含有较多的Ala、Leu.使用蛋白质自动序列分析仪测定了SSmp-dN端的11个氨基酸,序列为NH3+-Asp-Val-Asn-Phe-Arg-Leu-Ser-Gly-Ala-Asp-Pro.  相似文献   

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