养殖乌鳢类立克次体分离纯化的初步研究

1989年,Fryer等从导致智利海水养殖Coho salmon(Oncorhynchus kisutch)90%死亡率的病鲑组织感染的鲑细胞系中首次分离得到一种类立克次体(Kickettsia like organism,RLO)并命名为Piscirickettsia salmonis gen.nov.,sp.nov.。近十年来,这种被日益重视的、专性细胞内寄生的RLO(细胞内的细菌),已被证实为导致鱼类严重传染性疾病的致病因子.2001-2002年,作者首次发现湖北省某养殖场淡水养殖乌鳢(Op hiocep halus argus C.)突发性大规模发病死亡系RLO感染引起。由于乌鳢细胞系的建立尚在进行之中,因此从病变组织直接进行RLO的分离、纯化对进一步开展病原体分类及快速、准确的诊断技术等分子生物学研究至关重要。       

热带地区的膜盘菌属一新种（英文）

对采自我国热带地区的柔膜菌科标本进行了研究,发现膜盘菌属1个新种,命名为海南膜盘菌,该种子囊盘盘状、具柄,外囊盘被为矩胞组织、厚60~160μm,盘下层为交错丝组织、厚80~400μm,子囊长棒状、8孢、(58~)61~70×5~6(~7)μm,子囊孢子梭椭圆形、7~8×2.5~3.0μm。对其形态解剖学特征进行了详尽描述和图示,对与相近种的差异进行了讨论。     

小麦黄化条纹病类立克次氏体病原的初步研究

发现了小麦的一种“黄化类型”病害。病株维管束的韧皮部内有大量病原体。病原体有多种形态,大小一般约为0．5—0．8μm,并看到膜有厚薄不均的现象。四环素族抗菌素和青霉素能暂时抑制这种病害的发展。观察结果表明,小麦黄化条纹病的病原体为类立克次氏体(Ricketcslalike organism)。     

侧足厚蟹有髓鞘神经纤维的超微结构电镜观察

侧足厚蟹(Helice latimera)的有髓鞘神经纤维直径约在5—12μm之间,髓鞘厚约2μm左右。髓鞘由内外膜层和中间微管层组成。外膜层层数约20层,排列紧密,微管层厚约0．31μm,内膜层层数约20层。轴突膜形成嵴,伸进轴腔内,在轴腔内还存在维管束和膜层束结构。在髓鞘结构中观察到两种类型的高嗜锇性区域,一种是由排列规则且明暗交替的膜层结构组成,另一种是非膜层结构组成。     

嗜冷和冷育微生物的研究III．地丝霉属一新种，光滑地丝霉

在研究食品冷库中嗜冷微生物区系时,获得很多冷育型真菌。地丝霉和金孢菌类在这些菌中占优势。其中一菌在PYE上于18℃培养14天,菌落白色,厚毡状,中央常有淡黄色渗出液滴,菌落直径3 3ram,背面浅黄褐色,有辐射沟纹,老后仍为白色。菌丝分隔,直径1 O一2．0μm。该菌有明显的分生孢子梗,直立,宽度1．0—2．0μm,长10一25(一35)μm,无色或淡黄色,分生孢子梗具分枝,由分枝产分生孢子。分生孢子无色或淡黄色,顶端者为梨形、倒卵形或楔状,间生者矩椭圆形或桶状,1．5—2．5×2．5—3 5(一4．0)μm,光滑、1一3成链。该菌生长温度范围为O一25℃,最适温度为18℃,30℃不生长。此菌产生果胶酶,但是不分解角朊。该菌从冷库中生霉的蒜苗上分离得。其特征与carmichael(1962),Domsch等(1 9 80)所订正的金孢菌属(Chrysosporium Corda)中各种,以及Sigler和Carmichael(1976),Oorschot(1980)所订正的地丝霉属(GeomycesTraaen)中各种均有显著的差异,而其性状符合地丝霉属的特征集要。故命名为光滑地丝霉 Geomyces laevis Z．Q．Li et Cui。 模式：菌株AS 3．4605 为模式菌株,保藏在中国科学院微生物研究所菌种保藏研究室;模式标本HMAS No．54875保存在该研究所真菌标本室。     

由原油及其制品生产细菌胞外多糖的研究II.黄橙色棒状杆菌由原油产生的胞外多糖

从胜利油田的油污土样中分离出一株革兰氏阳性、无芽孢、不分枝,不运动、不抗酸、能从原油产生胞外多糖的杆菌D 9004。生长12—24小时,细胞0．5—0．6×1．5—3．5μm,到48小时,成为类球状和短杆。在营养琼脂平板上,菌落圆形,隆起,枯红色,表面光滑、润泽,边缘些齐。该菌不还原硝酸盐,石蕊牛奶中产碱,产生硫化氢,脲酶和过氧化氢酶阳性。从葡萄糖、果糖和蔗糖氧化产酸。不液化明胶。在SSC系统中,DNA解链温度(Tm值)为94．35士0．59℃,G+C含量为61．1土1.44克分子％。上述特征与黄橙色棒状杆菌(Corynebactertum flavoaurantiacum)基本一致。     

食药两用植物——决明和钝叶决明

决明(Cassia tora)和钝叶决明(C.obtu-sifolia)都是豆科灌木状草本植物,高1—2米,羽状复叶,小叶3对,倒卵形。决明叶的叶轴最下两对小叶间各有一枚棒状腺体,钝叶决明仅在叶轴最下一对小叶间有一枚棒状腺体。花腋生,通常2朵聚生。花黄色,荚果细长,长达15厘米,宽3—4毫米,含种子25粒左右。种子菱     

膜雌激素受体介导一氧化氮合酶活性增高的快速非基因效应

实验利用新生小牛胸主动脉内皮细胞(BAECs)作为模型,观察17β-雌二醇(E2)、E2BSA对BAECs中内皮型一氧化氯合酶(eNOS)的快速激活作用,并探讨了丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在其中的作用。结果显示,不同浓度的E2(0．001—1lμmol/L)作用于BAECs l5 min均能快速激活eNOS;0．01μmol/L浓度的E2作用于BAECs,5min即能激活eNOS,15min达到最大效应,随后eNOS快速失活;E2BSA(17．5ng／m1)作用于BAECs,15min同样可激活eNOS。E2、E2BSA激活eNOS的作用均能被雌激素受体(ER)拮抗剂tamoxifen(0．1μmol/L)或MAPK激酶特异抑制剂PD98059(50μmol/L)所阻断。放线菌素D(25μg/ml)不能阻断E2、E2BSA对eNOS的激活作用。E2(0．01μmol/L)、E2BSA(17．5ng/ml)作用于BAECs l5 min后可明显促进p42／p44磷酸化MAPK蛋白表达,而对p42／p44 MAPK总蛋白表达无影响。Tamoxifen可部分阻断E2;E2BSA激活p42／p44磷酸化MAPK的作用。这些结果提示,BAECs膜上可能存在膜雌激素受体(membrane estrogen receptor,mER),E2、E2BSA作用于mER后可通过MAPK信号途径快速激活eNOS。     

类立克次体侵染中华绒螯蟹神经组织的光镜和电镜观察

对患颤抖病的中华绒螯解（Eriocheir sinensis）神经和肌肉组织进行光镜和电镜观察,结果显示类立克次体广泛存在于胸神经节中的神经胶质细胞、结缔组织以及细胞间隙中。在神经细胞与步足肌肉细胞连接处,即运动终板部位有大量类立克次体侵染,并且侵染方式与在胸神经节中一样,均以聚集成团的形式存在。胸神经节是支配步足的神经丛,而颤抖病是以步足颤抖为病症的疾病。类立克次体大量侵染胸神经节和运动终板部位,表明该微生物与病蟹步足颤抖的病症有密切关系,进一步证明类立克次体是颤抖病的致病微生物。     

团头鲂寄生吸管虫一新种,双泡毛管虫的研究

描述了寄生在团头鲂(Megalobrama amblycephala)鳃上的一吸管虫新种,双泡毛管虫。活体无色透明至淡黄色,正面观为卵圆形至长椭圆形,稍扁平;侧面观为棒状或香肠状,常附着在鳃小片上。身体的表膜中有不明显的细小颗粒。吸管指状,一束,着生在虫体前端,一般有4—8根,最多达23根,收缩时其表面出现明显的螺旋纹8—11个。两个伸缩泡,交替地进行伸缩,彼此间隔约为10μm,位于吸管基部的胞质中。大核短杆状或椭圆形,核膜明显,染色质均匀。小核圆球形。成虫和幼虫没有固着柄,游泳幼虫的纤毛带宽6.0—7.0μm,由7—11行纤毛纹组成,无锥形的钻孔器。       

黄金茅孢堆黑粉菌新记录种

寄生在四脉金茅[Eulaliaquadrinervis（Hack．）Kuntze]植物上的黄金茅孢堆黑粉菌（Sporisoriumpollinianum（Zundel）Vanky＆Shivas）新记录种,其孢子堆生在全部小穗中,外有白色包被包围。中轴单个,弯曲。孢子团黑褐色,半粘结。黑粉孢子球形,近球形,卵圆形或椭圆形,10～12.5×8.5～10．5μm,黄褐色;壁厚均匀,0．5～0.8μm,有刺或瘤。不育细胞球形,近球形,卵圆形或椭圆形,10～20×8.5～16．5μm,无色,光滑。     

斑点热群新疆立克次体对宿主细胞感染过程的形态学研究

对新疆立克次体(精河株,下同)感染体外培养的人胚肾传代细胞(简写MERN)和体内鸡胚卵黄囊膜细胞的标本进行了电镜观察。发现立克次体以宿主细胞膜内翻形式进入宿主细胞,在胞浆和胞核内寄生,以二分裂方式增殖;并能察见多个立克次体的链状结构;胞浆内的菌体以核膜内翻方式进入核内,以密集成丛或散在方式生长;在感染后第5—8天的MERN中,立克次体以出芽方式释放,在第8天后通过宿主细胞解体方式释放。文中讨论了新疆立克次体感染宿主细胞过程中的有关机制。我们还发现在宿主细胞内立克次体的附近有直径为20—23nm的微管结构,其功能待深入研究。     

白及锈病病原菌的鉴定及抗锈病资源筛选

为鉴定引起广西种植区白及锈病的病原菌种类且筛选抗锈病的白及资源,该研究对白及锈病病原菌进行分离,并采用形态学和分子生物学的方法对病原菌进行鉴定,同时通过人工接种病原菌法对23份白及进行锈病抗性评价以及筛选抗锈病的白及资源。结果表明:(1)从白及感病叶片中分离的锈病病原菌X2夏孢子呈金黄色,卵圆形或椭圆形,大小为(21.43～30.95)μm ×(13.10～19.05)μm; 冬孢子呈橘红色、红褐色,倒卵形或棍棒状,大小为(17.25～30)μm ×(5.5～6.65)μm。(2)把菌株X2全长689 bp的ITS序列(OQ826009)与GenBank 已登陆的序列进行相似性分析发现,菌株X2与Coleosporium sp.(KY783686.1)匹配度最高,序列一致性为95.86%,但系统发育树表明,X2与Coleosporium bletiae(MN108161.1,OP363680.1)聚为一类群; 结合形态学和分子生物学的方法,鉴定菌株X2为Coleosporium bletiae。(3)人工接种菌株X2 14 d后,23份白及的病情指数范围在0～70.7之间,并根据病情指数将 23 份白及划分为 6 个抗性等级,即表现为免疫的白及1份,病情指数为0; 表现为高抗的白及4份,病情指数为1.7～4.7; 表现为抗病的白及6份,病情指数为5.6～9.4; 表现为中抗的白及5份,病情指数为12.7～18.3; 表现为感病的白及5份,病情指数为32.0～49.1; 表现为高感的白及2份,病情指数为62.2～70.7。综上认为,表现为免疫和高抗的5份白及(分别来自云南红河、广西恭城、广西百色、贵州遵义、湖北宜昌)病情指数低、抗锈病能力强,可推广应用或作为培育抗锈病优良种质的亲本材料。该研究结果为后续开展白及锈病的有效防治与致病机理研究提供了支撑。     

湖南张家界的丝孢菌I．假尾孢属

本文报道了假尾孢属的6个种,其中有2个新种,即：枫杨假尾孢(Pseado-cercospord pterocaryae Gu et W. X. Zhao)和清风藤假尾孢(Pseudocercosporasabiae Guo et W．X．Zhao);3个新组合：紫珠假尾孢[Pseudocercospora callicarpae(Cooke) Guo et W. X．Zhao], 蕺菜假尾孢[Pseudocercospora houttuyniae(Togashi& Kats) Guo et W．X．Zhao],冬青假尾孢[Psegocercospora mate (Speg．) Guo etW．X．Zhao]。两个新种的模式标本保存在中国科学院微生物研究所真菌标本室,其等模式标本保存在中国林科院林业科学研究所病理标本室。 枫杨假尾孢(Pseudocercospora pterocaryae Guo et W．X．Zhao)斑点叶两面生,近圆形,直径O．5—12 0 mm,无明显边缘,叶面褐色至暗褐色,叶背灰褐色,子实体叶背生,具表生菌丝。子座生于表皮下,近球形。分生孢子梗浅青黄色至青黄色,不分枝,0—4隔,9．7—73．5×3．7—4．3 μm。分生孢子倒棍棒形至倒棍棒一圆柱形,极浅的青黄色,光滑,干燥,具2—10个不明显的隔膜,35．0—99．5×3．7—4 3μm。 清风藤假尾孢(Pscudocercospora sabiae Guo et W. X. Zhao)斑点叶两而生,圃形,直径1．5—4．0μm。叶面黄褐色至褐色,外围以暗褐色细线圈,有时还具浅黄褐色晕圈,叶背中度褐色。子实体叶面生,具表生菌丝,无子座。分生孢子梗青黄褐色至浅褐色,平滑,具2一10个隔膜,17．0—162．O×3．0—3．9(一4．3)μm。分生孢子倒棍棒形至圆柱形,浅青黄色,平滑,干燥,3—8隔,43．0—99．5×2．8—3．9(一4．3)μm。     

三江平原小叶章湿地剖面土壤微生物活性特征

为阐明三江平原不同类型小叶章湿地剖面土壤微生物活性及土壤质量的变化规律,研究了沼泽化小叶章(XZ)湿地和草甸小叶章(XD)湿地0—100cm剖面土壤有机碳(SOC)、微生物量碳(MBC)、基础呼吸(BR)、呼吸势(PR)、微生物商(qMB)和代谢商(qCO2)等微生物活性指标。结果表明,XZ和XD湿地0—40cm土壤的SOC、MBC、BR、PR和qMB均随土壤深度的增加而迅速降低,而qCO2随土壤深度的增加而显著增加;XZ和XD湿地50—100cm土壤的SOC、MBC、BR、PR、qMB和qCO2变化不明显。相关性分析表明,XZ和XD湿地土壤微生物活性指标与土壤理化性质呈显著相关(P0.05),不同微生物活性指标间均呈极显著相关(P0.01)。XD湿地0—40cm土壤微生物活性各指标均明显低于XZ湿地(P0.05),其中XD湿地土壤0—10cm的SOC、MBC、BR、PR和qMB分别仅为XZ湿地的77.85%、54.05%、59.09%、51.83%和69.52%。小叶章湿地土壤微生物活性特征表明XZ湿地土壤质量优于XD湿地。     

山西历螨一新种

作者等在晋南临汾地区进行恙虫病调查期间采获一批螨类标本 ,经研究发现其中一厉螨标本为一新种 ,兹记述如下 :山西历螨 Laelapsshanxiensis,新种鉴别特征 :本新种近似纳氏厉螨 ( Laelaps nuttalli) ,但新种 4的间距大于 1的间距 ,S8长为 S7长的 2 /3,胸板较长而后缘具深凹。种的记述 :雌螨　体呈椭圆形 ,长 72 3μm,宽 5 5 0μm,背板几盖住整个背部 (图 1a) ,长 6 96μm,宽5 2 8μm,板上具 39对针状背毛。S8长约为 M11之半。螯肢定趾上的钳齿毛端部膨大 ,末端尖 ,状似土尔克厉螨 ( L aelaps turkestanicus)的钳齿毛(图 1c)。胸板前缘…     

扬子鳄胚胎大脑皮层神经元核内包涵体的超微结构特征

孵化40、50d扬子鳄胚胎的海马皮质及刚孵出的小鳄大脑皮层各部的部分神经元细胞核内均有核内包涵体出现。按其形态可将它们分为两大类：膜性包涵体和核体。膜性包涵体位于近内核膜处,直径0．3—0．9μm,是由一到几层膜组成的囊泡状结构;核体体积较小,0．2—0．4μm,位于近核仁处或近内核膜,周缘的电子致密度较高,中心较清亮。本文就扬子鳄的核内包涵体同其它动物的核内包涵体的形态、出现时间进行了比较,并就其作用进行了讨论。     

两类新型DNA质粒pSC1和pSC2的分离与观察

本文报道从一株啤酒酵母E4-2A分离到两类脱氧核糖核酸质粒pSC1与pSC2。经琼脂糖凝胶电泳分离质粒DNA分子,证明这两类质粒的分子量不同于已知的酵母2μmDNA质粒。电镜分析指出这两类新型核外DNA质粒的长度为0．91士0·12μm(pSCl)和0.48士0.10μm(pSC2),经计算分子量分别相当于1．9x106和1．0 x106。pSCI由共价闭环和开环两种构型组成,而pSC2仅有开环型。     

一株中度嗜热嗜酸细菌的分离与分子鉴定

用稀释分离法,从云南某温泉分离得到一株中度嗜热嗜酸细菌YN06。该菌株短杆状,革兰氏阴性,菌体大小为(0．3-0．5)μm x(1-2．2)μm。16S rDNA和16S—23S间隔区序列分析表明,YN06与嗜酸硫杆菌属的喜温硫杆菌处于同一进化树分支中,相似性均高达99%以上,因此该菌株被鉴定为喜温硫杆菌。     

炭角菌属一新种

报道了采自藏东南林区的炭角菌属一新种──委陵菜生炭角菌（XylariapotentillaeA．SXusp．nov．）。该种子座直立,头部分叉或柄基分枝,地上部分高2～4．5cm,顶端可孕。子囊座柱状或圆锥状或扁平,长1～3cm,宽3～7mm,表面精糙,桑葚状,黑色5内部蜡质,中实,白色。柄柱状,直或扭转,具纵皱折,地下具延伸的假根。子囊壳卵圆形,450～500×200～300μm,孔口突出,盾状或疣状。子囊棒状,70～100×6～8μm,8孢子,顶端遇Melzer's试剂变蓝部分为长方体状,6×2．5μm。子囊孢于单行排列,梭形、不等边椭圆形至半球形,10～163×5～7．5μm,成熟后褐至黑褐色,光滑,芽缝不明显,直,稍短于孢子长度。侧丝多,细长,径15μm,无色,无隔。地下假根寄生在蕨麻委陵菜（Potentillaanserina）的活根上。模式标本保存于西藏高原生态研究所标本室（HXZE）。