60Co-γ 诱变皖麦50HMW—GS变异的筛选及其M3代品质分析

为了探讨60Co-γ 射线对小麦HMW—GS组成的变异,以及变异后代的稳定性和品质变异效应,获得优质的种质资源,本试验用200Gy 60Co-γ射线辐照皖麦50于种子,SDS—PAGE法对M2代HMW—GS组成进行变异筛选,并对M3代HMW—GS组成变异稳定性进行鉴定和GMP含量、GMP粒度、部分营养及加工品质进行测定。结果表明：655株M2群体中,有1个单株HMW—GS组成发生变异,变异率0．15％;HMW—GS组分由亲本的7＋9／2＋12变为1／7＋9／2＋12,并在M3代保持稳定;M3代5个变异穗行,蛋白质含量、GMP含量、GMP／Pr均比皖麦50提高,GMP粒度分布范围扩大,粒径大于10．28μm的比例增加。     

酚-次氯酸钠显色法测定大鼠脑中游离氨-N含量

本文介绍一种用酚-次氯酸钠试剂直接测定动物组织样品中游离氨-N含量的方法,此法简便、灵敏、省时,最小检测量为0.05微克氨-N。酚-亚硝基铁氰化钠试剂:取酚0.6克、亚硝基铁氰化钠5毫克、加水至50毫升,放置24—48小时后使用。次氯酸钠试剂:Na_2HPO_4·12H_2O 1.79克、Na_3PO_4·12H_2O 1.9克、氢氧化钠0.5克、次氯酸钠原液1毫升,加水至50毫升,贮于棕色瓶内。硫酸铵标准液(1毫升=0.05     

维生素B12对大腸杆菌β-半乳糖苷酶合成的作用

(一)大腸杆菌Escherichia coli K12M-1 的营养试验及细菌细胞内游离氨基酸变化的分析,确定为稚生素B12缺陷型变种。 (二)在诱导形成β-牛乳糖苷酶时,甲硫氨酸为其必需的物质,如果同时加入B₁₂,则形成诱导酶的活力显著提高。 (三)当有甲硫氨酸存在于诱导系兢中时,a-硫代尿嘧啶有抑制大腸杆菌K12M-1菌株对β-半乳糖苷酶合成的作用,以B12代替甲硫氨酸,这种抑制作用不明显,如果甲硫氨酸与B12同时加入,则B₁₂有抵制a-硫代尿嘧啶对酶合成的抑制作用。 (四)应用标记甘氨酸-1-C14作试验,分析甲硫氨酸与B12对β一半乳糖苷酶合成的作用, 结果指出,甲硫氨酸或B12均能增加甘氨酸-1-C14的参入。如B12加入到含有甲硫氧酸的诱导系统中,则酶此活力较甲硫氨酸或B12单独存在时为高。     

H+-Lsfet型青霉素酶传感器

将sos型H^＋－ISFET与戊二醚交联的牛血清蛋白-青霉素酶膜组合成单管输出式青霉素酶－H＋－ISFET传感器的探头(以下简称青霉素－酶FET),并用于测定溶液中的青霉素含量。青霉素－酶FET在0．005mol/L、O．Olmol／L、0．02mol／L磷酸缓冲液中的响应灵敏度分别为11—12mV／m mol／L、7．5—8．0mV／m mol／L以及3．7—4．OmV／m m01／L;响应时间为30s,在0．02mol／L磷酸缓冲液中的标定曲线线性范围为O．5—25mmo】／L’相关系数为O．9976。该青霉素·酶FET在青霉索浓度为10mmol／L的0．01mo1／L磷酸缓冲液中重复测定8次的标准偏差sD为1．67mv,变异系数cv为2．1％;贮存寿命大于4个月,使用寿命在1个月以上(每天测试一次)。     

微生物传感器测定维生素B12的研究

将大肠杆菌(Escherichia coli)215用吸附法固定于醋酸纤维素膜上,与氧电极配合组成微生物电极,建立了对维生紊B₁₂的快速测定系统。测定浓度范围5×10^-6mg—2．5×10^-5mg／ml;测定温度范围在28—39℃;最适Ph为6．7—7．8,测定一个样品所需时间为2h,比常用的生物学测定方法所需时间缩短10倍以上。该系统对维生素B₁₂重复测定的相对误差为±3％。固定化菌体在－25℃保存25天后再进行测定,应答电流不低于初始值的92%。     

测定谷氨酸的微生物传感器的研究

本文研究了测定谷氨酸的微生物传感器。用琼脂固定化的大肠杆菌(Escherichia coli As 1．505)和二氧化碳电极制成膜状传感器,用聚丙烯酰胺固定化的大肠杆菌和二氧化碳电极制成柱状传感器。结果表明,膜状传感器在25℃测定谷氨酸的范围为60－1200mg／I,响应时间为1020min,柱状传感器在30℃测定谷氨酸的范围为60－800mg／1,响应时间为5—7 min。两种传感器测定误差为2—3％以下,20天内使用60多次,不见其活力下降。     

环境温度对不同龄期鸽子热能代谢的影响

本文主要讨论1—25日龄雏鸽及其成鸽在12—36℃环境中的热能代谢。静止代谢是以闭路系统呼吸计测定。产热是据消耗氯气1毫升产热4.7卡计算,即48cal=1毫升氧气。现摘要如下: 1.成鸽在12—36℃环境中的代谢率呈U型曲线,其标准代谢率为1.4333±0.0535 O_2ml/g/hr,中性温度区约18—32℃ 2.雏鸽在22℃与28℃环境,其化学凋温机制建成年龄为8—10日龄。 3.雏鸽的代谢率呈两个相反趋向的年龄相,当化学调温机制建成之前,代谢率与日龄或与体重正相关;而后,负相关。 4.雏鸽在22—28℃环境,4日龄前的代谢率(cal/W 0.67/hr)比成鸽低;5日龄后,则高于成鸽;至化学调温机制建成时,达到最高水平。但是,在36℃环境,却始终低于成鸽水平。     

草鱼肠道肝胰脏蛋白酶活性初步研究

对不同种类不同蛋白质水平的饲料与草鱼肠道、肝胰脏蛋白酶活性之间的关系,对草鱼前、中和后肠蛋白酶活性的差异,以及这些酶的最适酪蛋白浓度和最适pH值进行了测定研究。草鱼肠道和肝胰脏蛋白酶活性在饲料含蛋白质32—40％的范围内随着蛋白质含量的增加而升高。肝胰脏蛋白酶活性要比肠道稍高些。饲草草鱼肝胰脏蛋白酶比活为每毫克酶蛋白每分钟产生332．5微克酪氨酸,肠道蛋白酶比活为260．0微克酪氨酸。草鱼肠道蛋白酶活性以后肠较高,前、中肠次之。在pH4—9范围内,以酪蛋白作为底物,草鱼肠道、肝胰脏蛋白酶最大活性分别在pH6．5和pH7．0。在酪蛋白实际浓度为83．33—333．33微克／毫升范围内,肠道和肝胰脏蛋白酶最适酪蛋白浓度分别为166．67微克／毫升和208．33微克／毫升。     

亚硝基甲基脲对短小芽孢杆菌AS 1.271的诱变作用

确定了亚硝基甲基脲诱发短小芽孢杆菌AS 1.271的最适条件。在pH7.0的tris-maleic缓冲液中,以1000微克／毫升的剂量处理生长对数期的菌体。30℃处理1小时可获得较高比例的营养缺陷型菌株。经测定,氨基酸缺陷型菌株占全部营养缺陷型菌株的71.4％;核酸碱基缺陷型菌株占11％。     

APM诱导蒜分生组织细胞染色体结构变异与蛋白质组变化(简报)(英文)

当蒜根尖分生组织细胞在4umol／L、6umol／L、8umol／L、10umol／L微管解聚型除草剂APM处理16h后,多极分裂细胞、凝集染色体、桥一断片及微核细胞可明显被观察到．其中多极分裂细胞可分别达10．7％、10．7％、11．1％和10．0％;凝集染色体为5．5％、5．9％、7．1％和9．1％：出现桥和断片的频率为1．9％、1．8％、2．7％和5．5％;出现微核细胞的频率分别为2．8％、8．7％、12．5％和16．3％。分生组织内蛋白质组也产生了明显变化,有5个分子量和等电点分别为66kD／p16．3、48kD／p16．6、48kD／p16．9、16kD／p15．6、18kD／p15．2的蛋白质在8umol／LAPM处理的分生组织中被合成．通过MALDI—TOF—MS分析和NCBI 20070528数据库查询．其中3个新合成的蛋白质被确认,它们是S-腺苷甲硫氨酸合成酶、抗坏血酸过氧化物酶和磷酸甘油酸激酶C。染色体结构变异和蛋白质组变化被认为与APM的处理有关的．     

固定化谷氨酸氧化酶管流动注射测定谷氨酸的研究

多孔玻璃珠固定谷氪酸氧化酶与过氧化氢酶分别制成相应的固定化酶管,结合流动注射分析系统测定谷氨酸的含量。测定线性范围在0．1—2．O mmol／L．精度(c．V)O．7％．测定速率每小时80样以上．使用寿命至少4个月。在各氨酸浓度低于2．5mmol／L时．pH在6．5—8．0．温度20—35℃．磷酸盐浓度在0.05—0.25mol／L范围内对测定几乎无影响．对不同发酵时间的谷氨酸发酵液测定,测定的结果与酶试剂盒及瓦氏法比较,结果一致．说明该方法已具有实际应用价值。     

培养草履虫的一点经验

取陈旧稻草垫子的稻草,剪成0.5—1寸长,放在150毫升的小烧瓶内,加5克葡萄糖,再放100毫升凉开水(经煮沸10—15分钟后晾凉的),用纱布盖好,放在恒温箱内培养,在23℃左右,经5—7天就可培养出草履虫。此时将表面白膜移开,用肉眼即可观察到草履虫的白色小点。培养液中加葡萄糖的作用是使培养液中增加营养,有利于细菌和其他微生物的繁殖,为草履虫提供了充足的饵料。同样道理,在培养液中加入维生素,草履虫会生长得更好、更大。     

制备免疫纯乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的一种综合方法

本文报告包括胃蛋白酶消化、DEAE纤维素离子交换层析、亲和层析、凝肢过滤等四个工序的生产纯HBsAg的综合方法。所得产品经对流电泳、琼脂免疫扩散、免疫电泳等法检查,不含正常人血清蛋白质(HuSP)成份,用来免疫动物可获得不合抗-HuSP高效价的单特异性抗HBs血清,因而证明了它是免疫纯品。本法所需条件一般,而且结果比较稳定。从100毫升HBsAg阳性血清(对流电泳效价1：16)一般可以制得纯HBsAg 13毫升(对流电泳效价1：16,0.3—0.4毫克／毫升),即3．9—5．2毫克。     

抗真菌抗菌素414的研究II．抗真菌性能

抗真菌抗菌素414(球红霉素)对念珠菌、隐球菌和啤酒酵母等酵母菌作用强,对一些皮肤癣病原菌,霉菌和阴道滴虫也有作用,对细菌无效。它对由临床分离的新型隐球菌的抑菌旅度为0．2—0．39单位／毫升,杀菌浓度为0．39一1．56单位／毫升;对白色念珠菌的抑菌浓度为0.1一1．56单位／毫升,杀菌浓度为0．39—6．25单位／毫升。该抗菌素在酸性环境和含氯化钠的培养基中抗菌话力增大;氯化钙、氯化镁、血清、胆固醇和酵母膏减低其抗菌活力。接种量增大,抗菌活力有所降低。本文还报道了抗真菌抗菌素414和其它抗菌药物联合应用,抑制白色念珠菌和新型隐球菌的初步试验结果。     

发酵重组Pichia pastoris生产腺苷甲硫氨酸的研究

在5L发酵罐中对高产S腺苷甲硫氨酸的重组Pichia pastoris发酵进行了研究。重组菌在pH5．0生长,然后调为pH6．0积累腺苷甲硫氨酸,在30℃、溶氧5％及流加甲硫氨酸和尿素的条件下培养82h后,产量达4．3g／L。     

在组织切片中肥大细胞的证明及迅速记数的简单方法

肥大细胞的选择性染色法如下:1)薄片新鲜组织(3—5毫米厚)于下液固定18—24小时,但标本置于此液至少一周尚无显明害处。配法:福尔马林液10毫升;95%酒精90毫升;醋酸钙1克。2)组织以95%酒精洗2次,每次1小时。3)以常法制做石蜡切片(8—12微米厚),粘片,脱蜡,经纯酒精至95%酒精。4)在室温于下液内染1小时。配法:甲苯胺蓝(toluidine blue)0.25克;70%酒精100毫升;浓盐酸     

球形芽孢杆菌Ts-1灭蚊毒蛋白的酶联免疫吸附测定

通过Sephadex G—200柱层析纯化得到球形芽孢杆菌Ts-1毒蛋白,其中主要是42Da和43kDa两种毒蛋白。用此毒蛋白免疫家兔获得抗血清。利用ELlSA双抗体夹心法比较测定了三种灭蚊球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)高毒株和两种无毒株,证明ELlSA具有很强的特异性。ELISA测定球形芽孢杆菌Ta-1纯化毒蛋白,最低可检值为1．56 x 10-5mg／ml。球形芽孢杆菌Ts—1发酵液的最低可检度为1：16000倍稀释。ELISA测定12和24小时发酵培养的Ts—1样品处理液中毒蛋白的含量,分别为0．049mg／ml和0．22mg／ml,毒蛋白含量相差4.59倍。而相应的生物测定LC50。值分别为0．71 ppm和0．154 ppm,毒力相差4.61倍。 ELISA与生物测定方法结果吻合。     

深层培养法生产无毒炭疽芽孢苗

1．以2％蛋白胨水溶液为培养基,以无毒炭疽芽孢为菌种,连续深层培养2—5代作为种子,再经深层通气培养制成芽孢苗。接种后先在35—36℃连续通气培养8小时,然后自然降温在31—33℃继续培养16小时至收苗。通气置为1:3(V／V),24—28小时芽孢形成率一般可达80％以上。此芽孢可经受60℃30分钟热处理。 2. 深层培养所得芽孢苗安全试验,对家兔注射1毫升(每毫升含1．5—2．5×10,活芽孢),对绵羊注射10毫升后动物均健活;区域试验时,对绵羊注射0．5毫升,对马、牛、驴、骡注射1毫升亦安全。 3. 免疫力试验表明,兔可获得3/4以上的保护,对绵羊,有二批可保护100％,一批保护80％。 4．用30％甘油水溶液稀释成含10‘活芽孢的液体免疫绵羊,二批可抗强毒炭疽芽孢200个,对最小致死量强毒芽孢获100％保护;一批保护75％,与同体培养芽孢苗相似。 5. 室温或10—15℃保存一年至43个月,芽孢菌原液活芽孢死亡不显著,免疫原性稳定,免疫力强。     

甲硫氨酸诱导高Hcy血症的抗氧化作用研究

为探讨甲硫氨酸在诱导高Hcy血症过程中的抗氧化作用,将Wistar大鼠随机分为正常组和1%甲硫氨酸组,喂养6周后,采用高效液相色谱法测定血清中同型半胱氨酸(Hcy)和谷胱甘肽含量(GSH),全自动氨基酸分析仪测定蛋氨酸和牛磺酸含量,转氨酶活性采用试剂盒测定。肝组织丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸法,黄嘌呤氧化酶法和比色法测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(FRAP值)和还原性谷胱甘肽含量。结果表明,1%甲硫氨酸组血清Hcy和牛磺酸含量分别为3.56±0.68μmol·L-1和568.68±57.02μmol·L-1,较正常组显著升高(p<0.05)。1%甲硫氨酸组肝组织GSH含量和SOD活性分别为132.19±25.49mg·g-1和6.86±1.46U·mg-1,较正常组103.97±16.30mg·g-1和5.01±1.24U·mg-1显著升高(p<0.05)。1%甲硫氨酸组较正常组肝组织FRAP值亦升高而MDA含量降低。结果表明,甲硫氨酸在诱导高Hcy血症过程中同时具有抗氧化作用。     

中药提取物对酵母菌抗真菌活性研究

目的探讨6味中药2种方法提取成分对酵母菌的抑菌和杀菌作用。方法采用药基琼脂稀释法,测定6味中药水提和醇提成分对白念珠菌和糠秕马拉色菌的MIC和MFC。结果对白念珠菌：水提黄连、醇提黄柏、醇提土槿皮MIC范围分别为0．625—1．25mg／mL、0．625～1．25mg/mL、0．313—0．625mg／mL;均值均为0．625mg／mL;对糠秕马拉色菌：水提和醇提黄连MIC范围分别为0．625～1．25mg／mL和1．25mg／mL,均值均为1．25mg／mL。对白念珠菌：醇提土槿皮MFC范围0．625～2．5mg/mL,均值0．625rag／mL。结论水提黄连、醇提黄柏和土槿皮对白念珠菌有较强抑菌作用,其中醇提土槿皮有较强杀菌作用。水提和醇提黄连对糠秕马拉色菌有较强抑菌作用。