苦参生物碱的研究

从苦参(Sophora flavescens Ait)根中分离得到9个生物碱,用波谱等方法确定为槐果碱(sophocarpine)、苦参碱(matrine)、异苦参碱(isomatrine)、槐醇(sophoranol)、N-甲基野靛碱(N-methylcytisine)、槐定(sophoridine)、氧化苦参碱(oxymatrine)、氧化槐果碱(oxysophocarpine)和氧化槐醇(sophoranol N-oxide)。其中氧化槐醇是首次从苦参根中得到的。     

恒定磁场对小鼠精子毒性作用的实验研究

观察不同强度恒定磁场对雄鼠睾丸、附睾重量、精子数量、精子活动度及精子形态的影响. 结果显示睾丸与附睾重量各组无显著差异, 精子数量在实验组与对照组中亦无明显改变. 在 0.12T磁场环境暴露下, 雄鼠精子畸形率增加及活动率下降, 与对照组相比有显著差异. (P< 0.01), 提示磁场对小鼠精子有一定毒性, 并且毒性与其强度有关.     

丙烯酰胺对小鼠血液毒性的研究

目的 为探明丙烯酰胺对小鼠血液的毒性效应.方法 采用丙烯酰胺溶液连续灌胃小鼠16天,记录小鼠体重、器官系数变化并对小鼠血液成分进行检测.结果 当染毒剂量为120、150 mg/kg时,小鼠体重增重率、肝系数、WBC、LYM、RBC、MCHC、PLT、P-LCR显著降低(P<0.05),GRAN显著增加(P<0.05);...     

苦参碱的提取分离及对小鼠的毒性研究

采用酸性乙醇提取、乙醚萃取、硅胶柱层析分离等方法从苦参中分离到苦参碱单体.以小鼠为实验动物进行毒性测定,小鼠的死亡主要集中在48h内,48h后无小鼠的死亡现象.小鼠对苦参碱的耐受量大于30mg.k-g1,小于140mg.k-g1,致死中量LD50为64.01mg.kg-1,回归方程Y=-3.2370+4.5602X,LD50标准误差SE=6.14.适口性的测定表明,苦参碱对小鼠有较好的适口性,可以作为杀鼠剂使用.     

苦参总生物碱提取工艺优化及杀蚜虫活性研究

目的：研究苦参总生物碱的提取工艺及杀虫生物活性。方法：以总生物碱含量为指标考察乙醇冷浸、乙醇渗漉、乙醇回流三种提取方法的提取效率差异,同时用正交设计对乙醇回流工艺条件进行优化,并以蚕豆蚜虫为供试靶标,探讨苦参总生物碱的杀虫生物活性。结果：乙醇回流提取效果较好,液料比、乙醇浓度、提取次数对提取效果均有影响,其最佳提取条件为：液料比12：1,乙醇浓度为60％,提取次数3次;苦参总生物碱对蚕豆蚜虫有一定的杀虫活性,其中氯仿直接提取物对蚜虫杀虫活性最好,随着总生物碱浓度降低,杀虫活性有下降。     

生物碱抗心律失常的作用及其分子机制

生物碱是广泛存在于生物体内尤其是天然植物中的碱性含氮有机化合物，部分生物碱具有抗心律失常、抗高血压、抗炎以及抗肿瘤等多种生理功能。心律失常是由心脏电生理活动紊乱引起的疾病，是心血管疾病高发病率和死亡率的主要原因，在世界范围内严重威胁人类生命健康。文中综述生物碱在抗心律失常中的作用和分子机制研究进展，并展望其开发应用前景。     

氧氟沙星对小鼠生殖毒性和致畸性的研究

目的研究氧氟沙星对昆明系小鼠胚胎和胎鼠发育的影响,确定其是否存在生殖毒性和致畸性。方法①雄鼠分别灌服各剂量氧氟沙星,连续10d,末次给药24h后与母鼠合笼,在妊娠第三天取胚胎,记录各剂量组胚胎发育率。②孕鼠妊娠零天给药,分别经口灌服高、中、低剂量[36、72和360mg(kg.bw)]氧氟沙星溶液,连续给药3d,在妊娠第三天收集胚胎,记录胚胎发育率。③孕鼠妊娠零天给药,分别经口灌服各剂量氧氟沙星溶液,连续给药10d,在妊娠第16天取出胎鼠,记录胎鼠体重、胎盘重、活胎数、胎鼠外观畸形和内脏畸形等指标。结果给药组与对照组相比,雄鼠服用高剂量组360mg(kg.bw)氧氟沙星对着床前胚胎发育影响显著(P<0.05),而中等剂量和低剂量组对着床前胚胎发育的影响不显著(P>0.05)。雌鼠服用不同剂量氧氟沙星对着床前胚胎发育影响不显著(P>0.05)。氧氟沙星对受孕鼠的活胎数和吸收胎数均无明显影响,给药组的活鼠体重、胎盘重均未见明显差异(P>0.05);药物组和对照组均未出现外观畸形和内脏畸形,也不存在剂量和效应关系。结论孕鼠服用不同剂氧氟沙星对昆明系小鼠胚胎和胎鼠发育无明显的影响,表明氧氟沙星对雌性鼠不具有明显的生殖毒性和致畸性;但雄鼠服用高剂量氧氟沙星对着床前胚胎发育影响显著。     

山豆根和苦参生物碱类成分UPLC/Q-TOF MS^E比较研究北大核心CSCD

使用UPLC/Q-TOF MSE对山豆根和苦参的生物碱类成分进行详细的比较研究。色谱柱:Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×150 mm,1.7μm);流动相:乙腈-5 mmol/L甲酸铵水溶液;流速为0.5 m L/min;检测器:四极杆串联飞行时间质谱(Q-TOF),正离子检测模式。根据离子流色谱图中色谱峰的分子量及其二级质谱碎片离子的裂解规律,结合参考文献进行结构推定;利用主成分分析及正交偏最小二乘法进行聚类分析。结果从山豆根总生物碱中鉴定12个主要成分,从苦参生物碱中鉴定了11个主要成分,其中有10个是相同的结构,但相同成分在两种药材中的含量差异很大;聚类分析表明山豆根和苦参具有显著的差异。本研究表明山豆根和苦参的主要生物碱成分虽然结构相同,但含量差异很大,二者临床疗效差异,可能由于生物碱含量的差异,或生物碱以外的其他成分所引起。     

氧化苦参碱的提取分离及对小鼠的毒性研究

采用酸性乙醇提取、硅胶柱层析分离、乙醚分级沉淀、丙酮重结晶的方法从苦参中分离到氧化苦参碱单体。对小鼠的毒性测定表明,试鼠的死亡主要集中在48 h内,48 h后无试鼠的死亡现象。小鼠对氧化苦参碱的耐受量大于50 mg/kg,小于20 mg/kg,致死中量LD50为85.95 mg/kg,回归方程Y=-3.2664 4.2737X,LD50标准误差s=8.77。氧化苦参碱毒性较低,致死中量适宜,对试鼠有较好的适口性,可以作为杀鼠剂使用。     

苦参组培快繁技术体系的初步研究

采用正交实验设计(L934)用MS、White和改良MS培养基,分别加入不同质量浓度的玉米素(ZT)、6-苄基氨基腺嘌呤(6-BA)、异戊烯基腺嘌呤(2-ip)进行苦参组培快繁技术体系研究。结果表明,以苦参种子萌发的幼苗为外植体效果较好。3种基本培养基对诱导芽增殖效果差异不显著;在基本培养基中分别加入6-BA、2-ip和ZT诱导芽增殖,但3种细胞分裂素之间差异不显著。培养基中含2 mg/L 6-BA(或ZT或2ip)增殖效果最好,其次是3mg/L的细胞分裂素;以改良MS 2 mg/L 6-BA是苦参较好的增殖培养基;组培苗在1/2 MS 1.5 mg/L IBA培养基上根诱导效果最好(98%),移栽到珍珠岩 蛭石基质(1∶1)中成活率最高(96%)。     

苦参植株中总生物碱的分布及含量测定

选用酸性染料络合显色法测定了江苏盱眙产苦参的根、茎、叶、种子等部位中苦参总碱的含量 ,为充分利用苦参全植株提供了一定的依据。     

Five New Alkaloids from the Roots of Sophora flavescens

Five new quinolizidine alkaloids, including three sparteine‐type alkaloids ( 1  –  3 ) and two cytisine‐type alkaloids ( 4 and 5 ), along with four known ones, were isolated from the roots of Sophora flavescens. Their structures were determined by extensive spectroscopic techniques including IR, UV, NMR, and HR‐ESI‐MS. All the compounds were evaluated for their antibacterial activities against Staphylococcus aureus and Escherichia coli.     

苦参提取物对口腔主要致龋细菌作用的实验研究

目的 观察苦参提取物对口腔主要致龋细菌及其生物膜生长、黏附、产酸和产糖的影响,探寻其防龋作用机制。方法 将苦参提取物按照二倍梯度稀释法测定最低抑菌浓度,0.5 g/L氯己定为阳性对照,不含药液组为阴性对照组;采用紫外分光光度计测定细菌黏附能力;通过生物膜结晶紫染色法测定生物膜抑制浓度和生物膜清除浓度;通过ΔpH法和苯酚‒硫酸法分别测定细菌的产酸和合成水不溶性胞外多糖情况。结果 苦参提取物对口腔主要致龋细菌的最低抑菌浓度均为4 g/L;在4 g/L时,对变形链球菌、远缘链球菌、血链球菌、粘性放线菌和内氏放线菌黏附抑制率分别为（77.6%±1.2%）、（66.7%±1.8%）、（60.68%±2.9%）、（79.8%±1.2%）和（85.1%±1.3%）。2 g/L时能够显著抑制浮游菌产酸及合成水不溶性胞外多糖能力。4 g/L时对变形链球菌、远缘链球菌、血链球菌、粘性放线菌、内氏放线菌和嗜酸乳杆菌生物膜形成抑制率分别为（87.5%±1.3%）、（85.4%±0.5%）、（89.0%±0.3%）、（77.2%±0.7%）、（87.4%±1.1%）和（80.4%±1.3%）;并对以上细菌生物膜的最低清除浓度分别为16、16、16、16、8和8 g/L。苦参提取物在50%的最小生物膜清除浓度下对单菌生物膜的产酸和合成水不溶性细胞外多糖的抑制率分别为67.5%~94.1%和42.3%~60.0%。结论 苦参提取物能够抑制口腔主要致龋细菌浮游和生物膜状态下的生长、黏附、产酸和产糖,其有望成为一种龋齿预防制剂。     

苦参凝集素的分离纯化及部分性质研究

从苦参 (SophoraflavescensAit.)根浸出液经硫酸铵分级 ,得苦参凝集素 (SFL)粗品 ,再经DEAE_Sepharose、SephadexG_1 5 0和HPLC层析 ,获得具有强凝集活性的SFL样品 ,用PAGE和SDS_PAGE检测均为单一蛋白染色带。SDS_PAGE显示SFL分子仅有一条肽链 ,SephadexG_1 0 0和SDS_PAGE测得其分子量均为 32kD。当SFL浓度为 0 .97μg/mL时能凝集兔红细胞 ,无血型专一性 ,其凝血活性可被甘露糖和果糖抑制 ,麦芽糖和葡萄糖有弱的抑制作用 ,凝集素分子含有 2 .89%的中性糖 ;当SFL量为 6 2 μg时 ,对棉花枯萎病菌 (FusariumvasinfectumAtk .)、小麦赤霉病菌(Gibberllasaubinetii (Mont.)Sacc .)和水稻稻瘟病菌 (PiriculariaoryzaeCav)菌丝体的生长发育有明显地抑制作用。用Edman法在蛋白测序仪上测出SFL的N端肽链 30个氨基酸的排列顺序为 :T/A/VDXLXFTFSDFDP NGEDLLFQGDAHVTSNN。     

Purification and Characterization of Sophora flavescens Lectin

A lectin with strong hemagglutination activity was isolated from roots of Sophora flavescens Ait. by extraction, fractionation with (NH 4) 2SO 4, ion-exchange chromatography on DEAE-Sepharose and followed by gel filtration on Sephadex G-150 and HPLC assay. The purified lectin showed a single protein band on PAGE and SDS-PAGE . The molecular weight of S. flavescens lectin was 32 kD when SDS-PAGE and Sephadex G-100 was used. The lectin agglutinated rabbit red blood cells at 0.97 μg/mL and showed no specific agglutination with any type of human erythrocytes. The hemagglutination activity could be inhibited by mannose and levulose and slightly by glucose and maltose. The SFL contained 2.89% neutral saccharide. It could inhibit apparently the growth of the mycelium of Gibberlla saubinetii （Mont.） Sacc.,Piricularia oryzae Cav. and Fusarium vasinfectum Atk. at the dosage of 62 μg. It was determined by Edman that the sequence of the N-terminal thirty amino acids was: T/A/VDXLXFTFSDFDPNGEDLLFQGDAHVTSNN.     

苦参凝集素蛋白基因的分离克隆

自苦参（Sophora flavescens Ait.)块根中分离得到一种32kD的凝集素蛋白（SFL）,其对兔血及人的4种血型都具有很强的凝集活性,对棉花枯萎病菌（Fusarium vasinfectum Atk.),小麦赤霉病菌（Gibberella saubinetii(Mont)Sacc.)和水稻稻瘟病菌（Pricularia oryzae Cav.)的生长有明显抑制作用,依此凝集素蛋白N端部分氨基酸序列合成引物,通过5',3'-RACE技术,从苦参块根总RNA中克隆到了编码这一凝集素蛋白的全长cDNA序列（已注册GenBank,AF285121) ,根据全长cDAN序列这一cDNA序列编码一个284个氨基酸的前体蛋白,而分离得到的凝集素蛋白为一个254个氨基酸残基的成熟蛋白,在其第182位点含一个N糖基化位点N－L－S。     

Cloning and Sequencing of a Lectin Protein Gene from the Roots of Sophora flavescens (in English)

A lectin protein（SFL） with molecular weight about 32 kD which markedly agglutinated rabbit and human red blood cells was purified from the roots of Sophora flavescens Ait. This protein, and apparently inhibited the growth of Fusarium vasinfectum Atk., Gibberella saubinetii (Mont.) Sacc., and Piricularia oryzae Cav. A set of degenerate PCR primer was synthesized according to the N-terminal sequence of the purified protein. The full-length cDNA coding the lectin was cloned by RT-PCR and 5′-RACE and sequenced (GenBank AF285121). The deduced amino acid sequence indicates that a preprotein with 284 amino acid residues is firstly translated and then processed to a mature protein with 254 amino acids. A N-Glycosylation site is the Asn 182 residue.      

The alkaloid matrine of the root of Sophora flavescens prevents arrhythmogenic effect of ouabain

Matrine, a alkaloid of the root of Sophora flavescens, has multiple protective effects on the cardiovascular system including cardiac arrhythmias. However, the molecular and ionic mechanisms of matrine have not been well investigated. Our study aimed at to shed a light on the issue to investigate the antiarrhythmic effects of matrine by using ouabain to construct an arrhythmic model of cardiomyocytes. In this experiment, matrine significantly and dose-dependently increased the doses of ouabain required to induce cardiac arrhythmias and decreased the duration of arrhythmias in guinea pigs. In cardiomyocytes of guinea pigs, ouabain 10 μM prolonged action potential duration by 80% (p < 0.05) and increased L-type Ca²⁺ currents and Ca²⁺ transients induced by KCl (p < 0.05). Matrine 100 μM shortened the prolongation of APD and prevented the increase of L-type Ca²⁺ currents and Ca²⁺ transients induced by ouabain. Taken together, these findings provide the first evidence that matrine possessed arrhythmogenic effect of ouabain by inhibiting of L-type Ca²⁺ currents and Ca²⁺ overload in guinea pigs.     

Matrine-Type Alkaloids from the Seeds of Sophora alopecuroides and Their Potential Anti-inflammatory Activities

Three new matrine-type alkaloids, 8β-hydroxyoxysophoridine ( 1 ), 9β-hydroxysophoridine ( 2 ), 9β-hydroxyisosophocarpine ( 3 ), together with one known analog, 11,12-dehydromatrine ( 4 ), were isolated from the seeds of Sophora alopecuroides L. The structures of new compounds were elucidated using extensive spectroscopic techniques including the experimental and calculated ECD data. The anti-inflammatory activities of all the isolates on NO production in RAW 264.7 cells stimulated by lipopolysaccharide were evaluated. Among them, 8β-hydroxyoxysophoridine ( 1 ) showed a significant inhibitory effect with an IC₅₀ value of 18.26 μM.