水解蛋白注射液中色氨酸测定方法的比较

<正> 本文对水解蛋白注射液中色氨酸比色测定的方法进行了比较研究,结果表明用N-1-萘基乙二胺方法比对二甲氨基苯甲醛法具有灵敏度高(约相当于20倍),精密度好(前法的变异系数为1.7%,后法为13.1%)等优点,两法的平均回收率均为97%。另外,还测定了上述二法的吸收曲线和应用两法对武汉地区用不同工艺生产的水解蛋白注射液进行了实际考察。结果表明用酶法生产的水解蛋白,其色氨酸含量可达550μg/ml。     

酶水解血蛋白制水解蛋白注射液

<正> 水解蛋白注射液是目前国内肠道外补充氮素营养的主要来源。虽然复方氨基酸注射液比较先进,但多种纯品氨基酸缺乏,十几种氨基酸很难备齐,且价格昂贵,故在临床上还不能广泛应用。所以研究水介蛋白还相当必要,是符合实际的。水解蛋白是个相当古老的制剂。在生产原料上,传统使用酪蛋白、纤维蛋白和大豆蛋白;在水介方法上主要采用盐酸或硫酸水介,其次则为胰酶水介。在精制脱酸时,应用钙,钡沉淀硫酸。用阴离子交换树脂脱去氯离子。酸水介方法适用于大批生产,但由于色氨酸大     

二阶导数光谱法测定脑活素注射液中色氨酸的含量

用二阶导数光谱法测定脑活素注射液中色氨酸的含量,可以消除该注射液中其它成份对其干扰。以水作为参比:波长选定282.0nm(峰):285.2nm(谷),色氨酸测定浓度0～0.05mg/ml,线性关系良好,回归方程D=94.585C—0.0111r=0.999.9平均回收率(%)100.6(n=5 CV(%)=1.2)     

发酵液中 L-色氨酸的提取

L-色氨酸为必需氨基酸之一,在人体代谢有着重要的功用,是配制复合结晶氨基酸注射液的基本原料,其价格昂贵,国内尚供不应求。至今,除用化学合成生产色氨酸外,利用微生物发酵法生产 L-色氨酸已越来越受到人们的重视,国内外均有不少研究报告。根据中国科学院微生物研究所的研究报告,我们于1976年采用邻氨基苯甲酸为前体物发酵法,协作进行了 L-色氨酸的试制工作。当时,由于受到强烈地震的影响,试制工作未能园满结束,但在克服重重困难之后,仍然摸索了一     

复合氨基酸注射液中L-色氨酸含量测定方法的研究

利用色氨酸结构中的吲哚基团在酸性条件下与对二甲氨基苯甲醛的特殊反应 ,在 6 10nm处测定复合氨基酸注射液中L 色氨酸的含量 ,获得满意的结果     

L-色氨酸的生产方法

专利要求的范围 用节杆菌属(?一丈。,夕夕一)中对一种或二种以上的色氨酸类似物具有抗性的LO色氨酸产生菌,在培养液中积累色氨酸,并从该培养液中提取L一色氨酸的发酵生产法。 本发明详细池叙述了节杆菌属中的L一色氨酸生产菌,通过培养,从发酵液中分离、回收L一色氨酸的方法,由于采用了生成L一色氨酸能力高的菌株,所以使必须氨基酸中的L-色氨酸达到了兼价工业生产的要求。 过去发酵法生产L一色氨酸,采用的是在培养基中添加叫噪或邻氨基苯甲酸的方法,此法因必须采用高价的引噪或邻氨基苯甲酸作前休物质,使色氨酸的生产存在着成本高的缺点…     

响应面分析优化L-色氨酸清液发酵培养基

L-色氨酸是八种必需氨基酸之一,随着L-色氨酸应用市场的不断扩大,进行发酵法生产L-色氨酸的研究具有重要的现实意义。为了提高L-色氨酸产量,本文利用响应面分析法对L-色氨酸清液发酵培养基进行优化。利用优化培养基进行发酵,考察清液发酵对L-色氨酸发酵过程中生物量、L-色氨酸产量、副产物生成量的影响。结果表明:在优化条件下利用清液发酵培养基发酵,乙酸含量与原工艺相比降低了(6.75±1.26)%,L-色氨酸产量提高了(16.54±1.15)%,实验值与响应面分析预测值基本相符。     

木瓜蛋白酶在谷物色氨酸测定上的应用

目前测定谷物色氨酸的方法操作繁琐,费用昂贵,准确性也差,为了适应在普通实验室条件下进行大批样品的测定,我们采用木瓜蛋白酶水解玉米粉等谷物的蛋白质,然后用对二甲胺基苯甲醛(DAB)显色法进行比色测定,方法简单、快速,可达到上述测定目的。     

HPLC测定莪术油葡萄糖注射液中四种成分的含量

采用HPLC法测定了莪术油葡萄糖注射液中四种成分(莪术二酮、莪术醇、牻牛儿酮、呋喃二烯)含量。本法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相为甲醇-水(85∶15 V/V),流速为0.8mL/min,柱温:30℃,检测波长为215nm。在该色谱条件下,分别建立莪术二酮、莪术醇、牻牛儿酮、呋喃二烯的线性回归方程。结果表明,该法的精密度、重复性、稳定性良好(RSD<2.0%),平均回收率均大于96%(RSD<3.0%,n=5),通过测定得到莪术油葡萄糖注射液中四种主分的含量分别为67,26,20,45μg/mL。HPLC法准确、可靠、重复性良好,可用于莪术油葡萄糖注射液的质量控制。     

二阶导数光谱测定复合氨基酸注射液中的L-色氨酸和L-苯丙氨酸的含量

<正> 导数光谱法是解决光谱重叠和光谱干扰的新方法,操作简便。复合氨基酸注射液是含有11种氨基酸及甘露醇的一种复方制剂。用氨基酸分析仪测定时,未能测出L—色氨酸,而测出L—苯丙氨酸数值偏高,如果采用比色法测定L—包氨酸,操作繁复,准确度较差。由于11种氨基酸仅L—色氨酸和L—丙氨酸具有特征吸收光谱,     

食物和饲料中色氨酸的高效液相色谱测定

<正> 色氨酸是人和动物营养中的重要的必需氨基酸,是合成体蛋白的重要原料。在某些动物体内它可以转化为烟酸,对生命的存在起着重要的作用。因而食物和饲料中色氨酸的测定一直受到人们的重视。一般氨基酸分析,常用6mol盐酸水解样品,使色氨酸完全破坏。所以在测定色氨酸时,最常用的仍然是用不同浓度,不同碱对样品进行水解,然后用各种方法,如比色     

微生物发酵法生产L-色氨酸的代谢工程研究

L-色氨酸作为人体内的一种必需氨基酸,广泛应用于医药、食品与饲料等行业.工业上采用的色氨酸生产方法有化学合成法、转化法及微生物发酵法.近年来,随着代谢工程在色氨酸菌种选育中的成功运用,微生物发酵法逐渐成为主要的色氨酸生产方法.系统综述了微生物发酵法生产色氨酸所涉及的代谢工程策略,包括生物合成色氨酸的代谢调控机制以及途径...     

结核分枝杆菌H37Rv 色氨酸合成酶α亚基编码基因的克隆、表达及酶学性质分析

目的 克隆表达色氨酸合成酶α亚基编码基因并对其进行功能分析。方法 以结核分枝杆菌( 简称结核杆菌)H37Rv 基因组为模板, 扩增trpA 基因, 构建pET30a-trpA 重组质粒; 转化重组质粒到大肠埃希菌DH5α并在BL21( DE3) 诱导表达, 纯化可溶性的结核杆菌重组色氨酸合成酶α亚基( His-rMtTrpA) 。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE) 和质谱分析测定相对分子质量( Mr) 后, 用圆二色光谱( CD) 分析和同源模建方法检测二级和三级结构。研究不同浓度HisrMtTrpA对β亚基酶活反应的影响。结果 成功克隆了813 bp 的目的基因trpA, 并获得了高纯度的His-rMtTrpA 蛋白。重组蛋白Mr 为33. 151 ×10³ ( 含载体蛋白) 。25 ℃时His-rMtTrpA 的二级结构包括31. 8% α 螺旋、31. 8% β 折叠、8. 4% β转角和27. 9%无规则卷曲, 它的三维模型显示为( β/ α) 8 桶状结构。酶学性质研究表明, 在His-rMtTrpA 与MtTrpB 的摩尔比为2. 2时, 色氨酸合成酶α亚基可以最大限度促进β亚基酶活反应。结论 成功得到高纯度的重组目的蛋白His-rMtTrpA, 其功能分析为针对色氨酸合成酶的药物筛选设计提供理论基础。     

利用蚕蛹生产复合氨基酸营养物的研究——树脂法对酶介液中蚕蛹脱臭的研究

本文报导了用离子交换树脂法脱除蚕蛹酶解存在的蚕蛹本身的恶臭;用胰酶进行蚕蛹分解,酶解后经732树脂脱臭,获得无臭、黄色粉末的混合氨基酸,对蛋白质的收率达44%以上,保留了人体必需的色氨酸,弥补了蚕蛹酸解色氨酸被破坏的缺陷,符合要素膳对氨基酸的质量要求,从而可利用蚕蛹生产营养价值高的混合氨基酸。     

发酵液中L-色氨酸分离纯化工艺研究

通过静态吸附实验,考察了温度、pH值对001×7阳离子交换树脂平衡吸附量的影响,并测定了吸附动力学曲线。通过动态实验,测定了动态吸附曲线和洗脱曲线。最后确定了001×7阳离子交换树脂分离纯化L-色氨酸的最佳工艺条件:用001×7阳离子交换树脂吸附L-色氨酸,以浓度为2 mol.L-1氨水进行洗脱,收集的流份经D315阴离子交换树脂脱色,浓缩结晶后得L-色氨酸成品,总提取率为73.0%。     

应用磺酸水解法进行人血白蛋白氨基酸组成分析

磺酸对色氨酸无破坏作用,因此,磺酸水解蛋白质可以同时测定出色氨酸。但,磺酸溶液制备比较繁琐,因此,至今在我国尚无人使用。本文用对甲苯磺酸法水解人血白蛋白,用氨基酸自动分析仪进行其氨基酸组成分析,其结果与理论值基本相符。     

四苯硼钠容量法测定谷氨酸钾注射液钾含量

目的:研究建立四苯硼钠容量法测定谷氨酸钾注射液中钾离子含量的方法.方法:分别采用四苯硼钠容量法与四苯硼钠重量法测定谷氨酸钾注射液中钾的含量,并比较其测定结果.结果:四苯硼钠容量法平均加样回收率为102.50%(RSD=0.41%,n=9),与四苯硼钠重量法所测得的结果进行t检验,结果无显著性差异.结论:四苯硼钠容量法简便、快速、准确,可替代四苯硼钠重量法快速测定谷氨酸钾注射液中钾的含量.     

代谢副产物乙酸对L-色氨酸发酵的影响

分析了重组大肠杆菌(E.coli TRTH/pSV-709)发酵生产L-色氨酸的发酵过程,检测结果表明发酵液中有大量代谢副产物乙酸的积累。利用外源添加试验研究了乙酸对L-色氨酸发酵的影响,结果表明乙酸浓度高于2g/L时对L-色氨酸生产菌的生长和产酸均有抑制作用。分析了乙酸的产生机制,并采取了调节溶氧水平、确定合适初始葡萄糖浓度、限制葡萄糖流加及控制菌体比生长速率等措施来减少乙酸的生成。在优化条件下,乙酸含量与原工艺相比降低了51.35%,菌体生物量和L-色氨酸产量分别提高了51.07%和46.54%,实现了高密度发酵培养的目的。     

酸性茚三酮法测定非水解食物和饲料中的色氨酸

本文报导了直接测定大豆粉、小麦、玉米、大麦、黑麦、向日葵、鱼粉和肉粉中色氨酸的最佳条件。酸性茚三酮溶液可直接与样品中蛋白质反应,而无需进行蛋白质的预分离或预分解。再现性和回收率的研究表明:测定其色氨酸含量为10—100μg的蛋白质,标准误差为2.7%或2.7%以下。处理过的大豆中色氨酸的减少量是一个不可缺少的应用参数函数。保留的色氨酸含量,以未处理样品中色氨酸含量的百分率表示,结果如下:81%HCl+H_3PO_4(pH～1.8),中和;79%HCL+H_3PO_4(pH～2.0),中和;67%HCl+H_3PO_4(pH～2.0),未中和;63%微波炉5分钟;57%HCl(PH～2.0),未中和。     

改进色氨酸前处理方法的试验报告

<正> 色氨酸是生物体主要的必需氨基酸之一,在营养代谢中起着重要作用,因而准确测定有一定意义。但由于色氨酸前处理方法较复杂,分析比较困难,导致目前国内外开喂该项目的不多。我所于83年曾进行了用日立835—50型氨基酸分析仪测定色氨酸方法的试验,并取得了较好效果。但为了更好