苏云金芽孢杆菌的电穿孔及其工程菌的构建

本文对苏芸金芽孢杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ,Ｂｔ)和蜡状芽孢杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ,Ｂｃ)等部分菌株的电穿孔转化进行了研究 ,主要从电穿孔的供体质粒和受体菌株等方面讨论了各种因素对该方法的影响。同时利用电穿孔方法对部分Ｂｔ的高效野生株进行遗传改良 ,希望获得含有ｃｒｙ1Ａｃ和ｃｒｙ1Ｃ高效基因组合的对鳞翅目棉铃虫、甜菜夜蛾都有效的广谱工程株。利用质粒 ｐＳＢ1 40 2 (ｃｒｙ1Ｃ) ,ｐＡＭＹ(ｃｒｙ1Ａｃ) ,ｐＮＱ1 2 2 (Ｃｍｒ)对所有的供试菌株进行电穿孔转化 ,不同菌株表现出不同的转…     

苏云金芽胞杆菌YBT1520杀虫晶体蛋白基因的属性

通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交发现高毒力苏云金芽胞杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）ＴＢＴ－１５２０菌株含有两个杀虫晶体蛋白基因片段,其５’＝末端所在ＨｉｎｄⅢ片段分别为６．８ｋｂ和４．６ｋｂ,它们对应的基因分别命名为ｃｒｙ２１８和ｃｒｙ４．６。经ＰＣＲ鉴定,该菌含有ｃｒｙ１Ａａ、ｃｒｙ１Ａｂ和ｃｒｙ１Ａｃ基因,以及ｃｒｙ２基因,其中ｃｒｙ２１８属于ｃｒｙ１Ａｃ。分析了ｃｒｙ１Ａｃ基因     

苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因cry3A在鳞翅目特异菌株中的？…

将对鞘翅目昆虫有特异毒性的苏云芽孢杆菌ｃｒｙ３Ａ基因电转化到只对鳞翅目昆虫有毒性的苏云金芽孢杆菌野隆型菌株ＹＢＴ８０３－１中,获得转了ＢＭＢＹ－００１。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析及镜检结果表明,ｃｒｙ３Ａ基因可在该菌株中高效表达,但出发菌株中原有的ｃｙｒ１Ａｂ、ｃｒｙ１Ａｃ及ｃｒｙ２的表达则受到不同程度的影响。生物测定结果显示,转子ＢＭＢＹ－００１对柳蓝叶甲（鞘翅目）具有较高毒力,ＬＣ５０为０．４１３μ     

高毒广谱杀虫Bt工程菌TnY

目前 ,农作物害虫在不同程度上对Ｂｔ制剂产生了抗性或不够敏感 ,在对这些害虫有效的Ｂｔ制剂中均不含Ｃｙｔ1Ａａ蛋白。含有ｃｙｔ1Ａａ和ｃｒｙ1 1Ａａ基因的天然苏云金杆菌 ,这两个基因均位于大质粒上。而通过质粒转移或ＩＣＰｓ的共表达构建苏云金杆菌重组菌株以期扩大Ｂｔ杀虫谱和增强毒力 ,常因质粒的不稳定性和质粒间的排斥性而受到一定限制。本研究利用转座子衍生载体ｐＴＶ1ＴＳ将ｃｙｔ1Ａａ和ｃｒｙ1 1Ａａ基因导入新分离Ｂｔ菌株Ｓ1 84的染色体中 ,并使之缺失转座酶而获得遗传稳定的初始工程菌Ｂｔ ＴｎＸ。在筛选工程菌过程中 …     

水稻光敏素基因(phyA)和-1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基基因(rbcS)的染色体定位

以生物素标记的水稻单拷贝光敏素基因（ｐｈｙＡ） 和１ ,５二磷酸核酮糖羧化酶／ 加氧酶小亚基基因（ｒｂｃＳ） 的基因组克隆为探针,其大小分别为６ ．６ 和１ ．１ ｋｂ ,通过原位杂交技术将它们分别定位到水稻染色体上。ｐｈｙＡ 和ｒｂｃＳ基因的检出率分别为２９ ．７９ ％ 和２１ ．５６ ％ 。ｐｈｙＡ在第３ 染色体上有３ 个座位：长臂近着丝粒、短臂末端、长臂中部。ｒｂｃＳ分别定位于第７ 染色体长臂近着丝粒（８ ．６２ ％ ） 、第５ 染色体长臂末端、第６ 染色体长臂距着丝粒近２／３ 处。此外,对信号转导相关基因定位的意义,水稻染色体的准确识别、功能基因在染色体上的分布及位置意义等也进行了讨论。     

水稻光敏素基因（phyA）和1,5—二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶小亚基？…

以生物素标记的水稻单拷贝光敏素基因和１,５－二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶小亚基基因的基因组克隆为探针,其大小分别为６．６和１．１ｋｂ,通过原位杂交技术将它们分别定位到水稻染色体上。ｐｈｙＡ和ｒｂｃＳ基因的检出率分别为２９．７９％５ ２１．５６％,ｐｈｙＡ在第３染色体上有３个座位：长臂近着丝粒,短臂末端,长臂中部。ｒｂｃＳ分别定位于第７染色体长臂近着丝粒,第５染色体长臂末端,第６染色体长臂距着丝粒近２     

苏云金芽胞杆菌菌株YBT833含不同杀虫晶体蛋白基因转化子的特性

用电脉冲方法将含有苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因ｃｒｙ１Ｃ的重组质粒ｐＢＭＢＬＣ转入野生菌株ＹＢＴ８３３,获得含不同杀虫晶体蛋白基因的４个转化子。质粒检测和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明它们均为菌株ＹＢＴ８３３含重组质粒ｐＢＭＢＬＣ的转化子。ＰＣＲ扩增表明,转化子ＹＢＴ８３３－１保留了原有的杀虫晶体蛋白基因;转化子ＹＢＴ８３３－２丢失了基因ｃｒｙ１Ａｂ;转化子ＹＢＴ８３３－３则丢失了所有的杀虫晶体蛋白基     

苏云金杆菌遗传工程杀虫剂

苏云金芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ,简称 Ｂｔ）是一种对昆虫有致病作用的细菌。其杀虫活性物质主要是杀虫晶体蛋白质（Ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄｅ ｃｒｙｓｔａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＩＣＰ）。由于该杀虫剂对人、畜无害,无致癌和致畸作用,是一种有着广泛应用前景的微生物杀虫剂。 根据１９９８年最新的分类,把ＩＣＰ基因分为２５类ｃｒｙ基因和２类ｃｙｔ基因,每类ＩＣＰ基因产生针对不同昆虫的晶体蛋白质。例如,ｃｒｙ３Ａ基因产生杀鞘翅目昆虫的晶体蛋白质,而ｃｒｙ１基因所产生的活性物质主要用于防治鳞…     

光敏核不育水稻光敏色素基因的RFLP分析

以灿稻“ＩＲ３６”光敏色素基因ｐｈｙＡ的ｃＤＮＡ克隆作探针,对光敏核不育水稻“农垦５８Ｓ”和对照水稻“农垦５８”进行ＲＦＬＰ分析,性内切酶ＥｃｏＲｖ,ＤｒａＩ,ＨｉｎｄⅢ、ＸｂａＩ、ＭｓｐＩ等都没有显示出多态性,而用ＨｐａⅡ显示出了多态性。ＭａｐＩ和ＨｐａⅡ是一对同裂酶（识别位点为ＣＣＧＧ）,但二者对识别位点上第２个胞嘧啶（即ＣｐＧ）甲基化的敏感性不同。实验结果表明,“农垦５８Ｓ”ｐｈｙＡ基因中Ｃ     

免疫测定光敏核不育水稻中光敏色素Ⅰ含量

光敏核不育水稻（农垦５８Ｓ）是中国水稻研究中的一个重要发现,在水稻杂交育种上有巨大潜力。研究表明：农垦５８Ｓ的雄性不育性受光周期调控,光敏色素是育性转变过程中光周期反应的光受体,然而,鉴于高等植物中存在至少两种不同的光敏色素分子,并且它们同时存在于水稻中,人们对调节农垦５８Ｓ雄性不育过程的光敏色素分子种类及作用方式仍然不清楚。本文采用酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）,比较了不同光周期下农垦５８Ｓ和对照品种农垦５８叶片（光周期感受器官）中光敏色素Ｉ（ｐｈｙＡ）的含量。从农垦５８Ｓ的二次枝梗原基分化期开始,进行１０天的光周期处理。一组为短日照（ＳＤ）,另一组为长日照（ＬＤ）。在第１０个暗期结束前,于暗绿光下收获每株水稻的最上部两片新展叶,立即保存在液氮中。样品在研钵中磨成液氮粉,然后加入提取液（含５０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣＩ和０．２ｍｏｌ／Ｌ巯基乙醇,ｐＨ８．５）匀浆。粗提液经０．５％聚乙烯亚胺（ＰＥＩ）沉淀后,上清液供ＥＬＩＳＡ分析。以燕麦ｐｈｙＡ的多克隆抗体、单克隆抗体分别作ＥＬＩＳＡ的一抗和检测抗体。采用ＥＬＩＳＡ可以专一性地检测水稻ｐｈｙＡ（Ｔａｂｌｅ１）。几次独立的实验说明,光周期处理对ｐｈｙＡ含     

农杆菌介导的苏云金杆菌抗虫基因cryIA(b)和cryIA(c)在水稻中的遗传转化及蛋白表达

通过农杆菌介导法用含有抗潮霉素和 Ｇ Ｕ Ｓ 基因的双元载体将杀虫结晶蛋白基因ｃｒｙ Ｉ Ａ（ ｂ） 和ｃｒｙ Ｉ Ａ（ｃ） 导入到籼、粳稻幼穗愈伤组织中,然后经过在含有不同浓度潮霉素的培养基上进行数次筛选,获得一批 Ｂｔ 转基因株。经 Ｐ Ｃ Ｒ、 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交及 Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹分析证实此二基因已整合进水稻中,饲虫试验结果表明,转基因株具有１００ ％ 杀虫率。     

粗壮女贞的组织培养与快速繁殖

1　植物名称　粗壮女贞 (Ｌｉｇｕｓｔｒｕｍｒｏｂｕｓｔｕｍ) ,又名“苦丁茶”。2　材料类别　胚、下胚轴。3　培养条件　基本培养基 :Ｌｌｏｙｄ和ＭｃＣｏｗｎ培养基 (Ｌｌｏｙｄ ,1 980 ) 蔗糖 1 5 % 琼脂 0 8% (以下简称ＬＭｃ)。胚萌发培养基 :(1 )ＬＭｃ 6 ＢＡ 0 5ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＮＡＡ 0 1 ＧＡ 0 1 ;(2 )ＬＭｃ 6 ＢＡ1 0。愈伤组织诱导培养基 :(3 )ＬＭｃ 6 ＢＡ 1 0 2 ,4 Ｄ 0 4。芽分化培养基 :(4)ＬＭｃ 6 ＢＡ 2 0 ＩＢＡ 0 0 2。芽增殖培养基 :(5 )ＬＭｃ 6 ＢＡ 0 4 ＮＡＡ 0 0 2 …     

小麦K型及V型细胞质雄性不育系线粒体DNA的比较分析

采用ＲＦＬＰ和ＲＡＰＤ技术对具有相同核遗传背景的小麦Ｋ型不育系Ｋ１４９Ａ,Ｖ型不育系Ｖ１４９Ａ及相应保持系１４９Ｂ的线粒体ＤＮＡ进行了比较分析。结果表明它们之间线粒体ＤＮＡ的结构显著不同,ａｔｐＡ,ａｔｐ９,ｃｏｘⅡ,ｃｏｂ等线粒体功能基因有组织结构上的差异。     

仙人掌"黄体绯牡丹"的组织培养

1　植物名称　黄体绯牡丹仙人掌 (Ｇｙｍｎｏｃａｌｙｃｉ ｕｍｍｉｈａｎｏｖｉｃｈｉｉｖａｒ.ｆｒｉｅｄｒｉｃｈｉｉｃｖ .Ａｕｒｅａ)。2　材料类别　仔球。3　培养条件　诱导小球培养基 :( 1 )Ｂ5 6 ＢＡ 2 .0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＮＡＡ 0 .2 ;( 2 )Ｂ5 6 ＢＡ 5     

SUBJECT INDEX TO VOLUME 41(1998)

Ｓｐａｔｉｏｔｅｍｐｏｒａｌｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｉｍｐｌｅｃｅｌｌｒｅｃｅｐｔｉｖｅｆｉｅｌｄｓｉｎａｒｅａ18ｏｆｃａｔ’ｓｃｏｒｔｅｘ…………………………………ＬＥＩＪｉｎｇｊｉａｎｇ,ＬＩＣｈａｏｙｉ…………………………………………………………………………………………(1)Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ,ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄｓｐａｔｉａｌｓｉｔｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆγｓｕｂｕｎｉｔｓｏｆＢｐｈｙｃｏｅｒｙｔｈｒｉｎａｎｄＲｐｈｙｃｏｅｒｙｔｈｒｉｎＷＡＮＧＧｕａｎｇｃｅ,ＺＨＯＵＢａｉｃｈｅｎ…     

诸葛菜试管花朵发育的研究(英文)

ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＦｌｏｗｅｒＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＴｅｓｔｔｕｂｅＰｌａｎｔｌｅｔｓｏｆＯｒｙｃｈｏｐｈｒａｇｍｕｓｖｉｏｌａｃｅｕｓＬＵＯＰｅｎｇ,ＹＥＱｉｕ,ＺＨＡＮＧＸｕｅｍｅｉａｎｄＬＡＮＺｅｑｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏ...     

北醌化合物的光敏活性及其抗肿瘤机制

苝醌 (ｐｅｒｙｌｅｎｅｑｕｉｎｏｎｅ ,ＰＱ)化合物是一类分布于自然界生物中的光敏色素。ＰＱ类光敏色素是目前已知的在可见光区内优良的光敏剂 ,近年来的研究证明其具有良好的光敏杀伤肿瘤细胞和抑制艾滋病病毒 (ＨＩＶ 1 )的作用[1～ 4] 。1 .醌类化合物的光敏活性真菌能产生具有ＰＱ骨架的代谢产物 ,陈远滕先生报道竹红菌的光敏作用。安静仪报道竹红菌甲素 (ｈｙｐｏｃｒｅｌｌｉｎＡ ,ＨＡ)有产生1Ｏ2 的作用。张志义发现ＨＡ能产生Ｏ-2·、·ＯＨ和ＨＡ-,提出ＨＡ对生物系统的光敏损伤机制与上述多重作用有关[5 ] 。第五振军等报…     

新台糖22号甘蔗的快速繁殖

1　植物名称　甘蔗 (Ｓａｃｃｈａｒｕｍｏｆｆｉｃｉ ｎａｒｕｍ)新台糖 2 2号。2　材料类别　顶芽、腋芽。3　培养条件　 ( 1 )分化培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ1 .5ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) ＮＡＡ 0·2 ;( 2 )继代培养基 :ＭＳ 6 ＢＡ 1 .0 ＮＡＡ 0 .1 ;( 3)生根培养基 :1 / 2     

樱桃番茄的组织培养与植株再生

1　植物名称　樱桃番茄 (Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍｖａｒ.ｃｅｒａｓｉｆｏｒｍｅ)。2　材料类别　无菌种子苗下胚轴。3　培养条件　诱导愈伤组织的培养基 :( 1 )ＭＳ +6 ＢＡ 2ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) +ＩＡＡ 0 .2 ;( 2 )ＭＳ +6 ＢＡ 2 +ＮＡＡ 0 .2 ;( 3)ＭＳ + 6 ＢＡ 1 .0 +ＮＡＡ 0 .1 ;( 4 )ＭＳ + 6 ＢＡ 1 .0 +ＩＡＡ 0 .1。诱导分化的培养基 :( 5 )ＭＳ + 6 ＢＡ 1 .0。生根培养基 :( 6)ＭＳ +ＮＡＡ 0 .1。各种培养基均附加 3%蔗糖 ,0 .6%琼脂 ,ｐＨ 5 .8,培养温度为 ( 2 5± 2 )℃ ,每天光照 1 6ｈ ,光…     

苏云金芽孢杆菌菌株YBT1535转cry1C基因菌的构建

利用电脉冲将ｃｒｙ１Ｃ基因转子苏云金孢杆菌野生菌株ＹＢＴ１５３５,筛选得到３个转化子。质粒电泳、ＰＣＲ扩增及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果均证明,基因ｃｒｙ１Ｃ已转入菌株ＹＢＴ１５３５。生物测定结果表明,３个转化子对甜菜夜蛾的毒力比出发菌ＹＢＴ１５３５均有显著的提高,转化子ＹＢＴ１５３５－１和ＹＢＴ１５３５－３对小菜蛾和棉铃虫的生物活性与出发菌ＹＢＴ１５３５相近,而转子化子ＹＢＴ１５３５－２则有一定幅度