蛋白质定量方法的进展

本文在简要比较常用蛋白质定量方法的基础上,结合自己的工作,选择性地叙述了Lowry法、考马斯亮蓝G-250染料测定蛋白质的改进法。还介绍了银染色定量法和4-甲酸喹啉测定蛋白质含量的新方法。     

蛋白质质谱分析的无标记定量算法研究进展

作为发现疾病相关生物标志物的重要途径,定量研究已成为蛋白质组学的热点问题.随着实验方法的发展和改进,定量数据处理算法也在不断更新和完善.将现有的无标记定量方法归纳为需要/不需要鉴定结果两类方法,分析比较了两类方法的异同及优缺点,详细讨论了所涉及的主要算法,总结了一些常用的无标记定量软件及对应的网络资源.展望了无标记定量数据分析的未来研究方向.     

原位定量检测磷酸化蛋白质的Duolink PQ技术

很多蛋白质功能的变化往往要借助于特定位置和一定数目的磷酸化变化,因此原位和定量检测将是磷酸化蛋白质分析发展的新方向。一种可原位定量检测磷酸化蛋白质的新技术——Duolink PQ在国内还被了解得很少。本文从原理、方法及应用三个方面对其进行了介绍,并进而对现有磷酸化蛋白质检测的主要技术进行了简要评价。     

基于电感耦合等离子体质谱的蛋白质定量技术研究进展

综述了ICP-MS法应用于蛋白质定量技术方面的研究进展.蛋白质定量研究已成为蛋白质组学研究领域的热点,它是解析生物体蛋白质功能的重要途径.基于同位素标记和生物质谱分析技术是蛋白质定量最常用的方法之一,近年来,随着质谱技术的发展,电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)技术成为元素测量的重要手段,这使其在蛋白质定量中具一定的应用前景.     

蛋白质活性计量技术研究进展

随着科学的发展和社会的进步,生命科学已经从现象描述发展到了精准定量的阶段,国际上蛋白质计量技术也已经取得了长足的进展。目前已经初步构建了蛋白质计量的框架体系,并建立了相应的量值传递方法,形成了基本固定的研究模式。综述了迄今为止蛋白质活性计量技术的研究进展以及取得的突破,重点介绍了酶催化活性浓度、蛋白质免疫亲和活性浓度计量技术及其应用。最后对蛋白质活性计量技术未来的发展方向进行了总结与展望。     

中国科大等实现蛋白质酪氨酸磷酸化的定性和定量检测

中国科学技术大学田长麟教授、中科院生物物理所王江云研究员及龚为民研究员合作发展了新型非天然氨基酸,并应用这种19F同位素标记的非天然氨基酸和固体核磁共振方法实现了蛋白质     

荔枝胚蛋白质的提取方法

以不同体积的Tris-HCl(0.1mol／L,pH8．8)为提取液,结合不同含量(以胚鲜重计)的PVP40,对怀枝、黑叶和桂味等荔枝(Lithi chinensis)品种的胚蛋白质进行提取。结果表明,提取液体积为胚鲜重的5倍(ml g-1 FW),并加入15％的 PVP40时,提取蛋白质的效果最好,可用于荔枝胚可溶性蛋白质含量的测定;胚乳蛋白质的提取则以等体积的提取液(内含2％的PVP40)为佳。加入10% PVP40的胚蛋白提取液可直接进行SDS-PAGE电泳,用10倍于蛋白质提取液体积的乙醇沉淀胚和胚乳的蛋白提取液,可得到最佳的SDS-PAGE电泳效果。     

泡桐叶片蛋白质多态性及其聚类分析

研究了9种泡桐叶片蛋白质的多态性,并根据其叶片蛋白质聚丙烯酰胺凝胶单向和双向电泳结果,将它们聚类为白花泡桐组[白花泡桐（Paulownia fortunei）和白花兰泡桐（P.elongata f.allba）]、南方泡桐组[南方泡桐（P.australis )和成都泡桐（P.albiphloea var.chengtuensis)]和毛泡桐组（毛泡桐（P.tomentosa）、川泡桐（P.fargesii）、鄂川泡桐（P.albiphloea）、山明泡桐（P.lamprophylla）和兰考泡桐（P.elon-gata）]。该结果可为了解泡桐属植物的亲缘关系和种的鉴定提供参考依据。     

蛋白质组研究新前沿：定量蛋白质组学

在过去几年里,蛋白质组研究取得了令人鼓舞的进展,2DE-MS途径的自动化,多维色谱整合串联质谱的使用,弥补了一些用双向凝胶电泳分离蛋白质的技术缺陷;从稳定同位素标记到ICAT战略的提出,为准确定量在细胞或组织中发挥重要调节功能的低丰度蛋白质提供了一个较为理想的方法。同时,蛋白质芯片技术的不断发展,也极大的丰富了定量蛋白质组学的研究。就定量蛋白质组学及其相关技术研究进展作一简要综述。     

泡桐叶片蛋白质多态性及其聚类分析

研究了9种泡桐叶片蛋白质的多态性,并根据其叶片蛋白质聚丙烯酰胺凝胶单向和双向电泳结果,将它们聚类为白花泡桐组［白花泡桐（Paulownia fortunei）和白花兰考泡桐（P. elongata f. alba）］、南方泡桐组［南方泡桐（P. australis）和成都泡桐(P. albiphloea var. chengtuensis)］和毛泡桐组［毛泡桐（P. tomentosa）、川泡桐（P. fargesii）、鄂川泡桐（P. albiphloea）、山明泡桐（P. lamprophylla）和兰考泡桐（P. elongata ）］。该结果可为了解泡桐属植物的亲缘关系和种的鉴定提供参考依据。     

制备用于结晶的蛋白质样品

制备高质量蛋白质晶体是通过X射线衍射解析蛋白质分子三维结构的关键环节,是结构生物学领域中的瓶颈问题之一。蛋白质的结晶受多因素控制,其中蛋白质样品自身的质量是影响蛋白质能否结晶及晶体质量好坏的关键因素。我们从蛋白质纯度、可溶性、均一性及表面修饰等方面介绍了如何获得适于结晶的蛋白质样品,以及如何借助相关仪器检测蛋白质样品的质量,预测蛋白质的可结晶性。     

世纪之交的蛋白质序列测定技术

对蛋白质序列测定技术的发展过程作了简要回顾，介绍了近年在该方法学领域的主要进展，其中包括Ｎ－端顺序测定的微量化、毛细管ＨＰＬＣ与毛细管电泳的应用，新的Ｃ－端化学降解测序方法，以及快原子轰击（ＦＡＢ）、电喷雾（ＥＳＩ）和基质辅助激光解吸电离－飞行时间（ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ）质谱在蛋白质序列测定中的应用，还对世纪之交该领域的发展趋势作了扼要的展望。     

糖蛋白质组定量技术进展

蛋白质的糖基化是最重要和最普遍的蛋白质翻译后修饰之一,在生物体内起着极为重要的作用。糖蛋白质的量和（或）糖基化程度的改变以及糖链结构的改变等与许多疾病密切相关,因此定量糖蛋白质组研究已经成为一个新的热点。然而由于糖基化蛋白质所具有的独特特征,其定量面临严峻的挑战。糖蛋白质组学定量方法和技术的发展将为更好地研究糖基化蛋白质生物学功能起到重要作用。综述了基于生物质谱的糖蛋白质组定量研究的技术和方法,及其优缺点和未来的发展趋势。     

微芯片电泳-紫外检测系统分析蛋白质

微芯片电泳是基于微机电加工技术(MEMS)工艺,在芯片上的微管道中完成电泳检测过程的新型技术.依据紫外吸光度分析法,对蛋白质样品进行电泳分离与紫外检测.实验采用自控接口模板对进样及分离电压进行了系统的程序化控制,从而准确地控制整个电泳、检测流程,提高了微芯片电泳的分离效率和检测灵敏度.实验结果表明,夹流进样的方法可以有效分离混合蛋白,可用于蛋白质样品的分离检测.     

微量样品的传统与非传统定量方法

同时配备有微体积基座测量和比色皿测量的新系统,令科学家既可灵活使用新的微量样品保持系统的独特功能,同时也可以使用传统比色肌测定的功能。这种双重功能是一种理想的设计,因为微量样品分析仍在不断挑战检测的极限,同时分子技术的不断革新也要求仪器可以灵活的保留传统和非传统的定量方法。     

高效毛细管电泳在蛋白质分析上的应用

高效毛细管电泳（ＨＰＣＥ）是继高效液相色谱技术之后的又一新型分析及分离技术,本文应用高效毛细管电泳技术对基因工程干扰素、疫苗、动物脏器提取物等蛋白质产品进行了分离分析和纯度鉴定,并与凝胶电泳的分析结果进行对比。实验结果表明,ＨＰＣＥ可以用于生物产品分离、生物遗传研究和医学临床等领域的蛋白质定量分析、组分测定和纯度鉴定,是一种很有应用前途的新技术。     

毛细管电泳技术在蛋白质翻译后修饰中的应用

蛋白质中翻译后修饰蛋白的鉴定是蛋白质组学研究的主要内容之一。毛细管电泳技术由于其高分辨能力、低样品上样量、易操作性和较少的分析时间等特点,迅速发展成为一种重要的分离技术。通过毛细管电泳与质谱连用,可以得到许多关于蛋白质鉴定、纯化和结构改变方面的十分有价值的信息。对毛细管电泳技术进行了简单介绍,并且就其在蛋白质磷酸化和蛋白质糖基化研究中的应用进行了综述。     

用邻苯三酚红钼络合显色法测定临床样品蛋白质含量

长期以来,实验室对蛋白质含量甚微的尿液、脑脊液蛋白质定量分析缺乏满意的方法。一些文献报道的微量蛋白定量法,均有较严重的缺点。Bradford、Pierce等先后报道用考马斯亮兰G-250染料结合法测定微量蛋白质有不少优点,但测定蛋白质浓度的线性范围不宽,蛋白质浓度低时线性较差,比色皿及实     

樟子松突变丛生枝蛋白质的双向电泳分析

目的：研究樟子松突变丛生枝的发生机理。方法：对其正常枝和突变丛生枝进行蛋白质双向电泳,通过ImageMaster2-DE计算机分析系统对结果进行定性、定量分析。结果：共有59个蛋白点在表达的质和量上有变化,其中35个蛋白点在突变丛生枝2-DE图谱中表达量均高于正常枝的蛋白点,20个蛋白点在突变丛生枝2-DE图谱中表达量均低于正常枝的蛋白点,4个蛋白点在突变丛生枝图谱上发生缺失。结论：差异表达的蛋白点可能与突变丛生枝的发生有关。     

花生种子老化相关蛋白质的初步研究

本文以粤油 116花生(Arachis hypogaea L.)为材料,对不同处理种子的除子叶“种胚”(以下简称“种胚”)的蛋白质进行了研究.实验结果表明,当花生种子活力下降到一定程度时,其“种胚”内出现一种新蛋白质( pI6.2、MW 10 KD),随种子老化程度加深,含量逐渐增多.我们认为该蛋白质与花生种子老化存在着一定的相关关系,可作为该种子老化的标志.