重要禾谷类植物转基因研究

与双子叶植物相比,禾谷类植物的离体培养和再生主要采用一些胚性组织,对它们的转基因研究发展相对比较缓慢。90年代以来,离体培养方面的经验被有效地融入DNA转移技术;通过筛选和再生少量的转化细胞,已得到了不少可育的小麦、水稻、玉米、大麦等禾谷类转基因植物。本文着重综述了禾谷类植物转化方法和选择体系方面的研究现状,同时讨论了该研究方向的未来发展趋势。     

禾谷类原生质体培养研究及展望

禾谷类原生质体培养研究是植物生物技术的主要内容,也是重要基础之一。许多种遗传操作(体细胞杂交、细胞质重组、DNA直接摄入和转基因植株形成等)都依赖于原生质体的培养与再生。禾谷类植物是世界粮食作物的最主要来源,因而禾谷类原生质体培养也成为当今植物生物工程的主要目标之一。利用原生质体进行外源基因转移是禾谷类作物中少数几种能产生转基因植株的途径之一。遗憾的是,禾谷类原生质体特别难以培养,这方面进展很慢。最近三,四年来,通过利用胚性愈伤组织或胚性悬浮细胞系来分离原生质体这一方法,研究者们才相继在珍珠谷、羊草、紫狼尾草、水稻、玉米、小麦、大麦、甘蔗、谷子、高粱、小偃麦、鸭茅、羊茅、黑麦草和棒头草植物上获得了再生植株。但是,成功的培养方法仍是一     

重要禾谷类植物转基因研究

与双子叶植物相比,禾谷类植物的离体培养和再生主要采用一些胚性组织,对它们的转基因研究发展相对比较缓慢,90年代以来,离体培养方面的经验被有效地融入DNA转移技术,通过筛选和再生少量的转化细胞,已得到了不少可育的小麦,水稻,玉米,大麦等禾谷类转基因植物,本文着重综述了禾谷类植物转化方法和选择体系方面的研究现状,同时讨论了该研究方向的未来发展趋势。     

禾谷类作物胚乳的淀粉合成

禾谷类作物胚乳拥有独特的淀粉合成途径,需要多种特异性同工酶的参与,这些酶在禾谷类其他组织或非禾谷类作物中是不存在的。近来明确了单个淀粉同工酶的功能,这有助于我们更深入地了解禾谷类淀粉直链、支链的合成与分布。在对禾谷类淀粉合成进行遗传分析的基础上,提出了脱分支酶作用模型。以水稻全基因组序列草图为背景,本文首次全面分析了禾谷类作物的淀粉合成。     

杂交水稻植株组织的器官发生(简报)

近年来,植物组织培养和细胞培养的研究迅速发展,在生产上的作用也日益明显(罗士韦 1978)。禾谷类植物是重要的粮食作物,其组织与细胞培养及其在生产实际中的应用,一直受人重视。但目前禾谷类植物的组织培养与细胞培养尚不完善,能培养的材料仍然有限(Yamada 1977)。如以水稻为例,虽有不少人曾利用去壳的种子(Nishi等 1968)、胚根(Kawata等 1968)、胚(Maeda 1968,Tamura     

生物弹技术在禾谷类植物基因转移中的应用

近年来植物基因转移,遗传转化技术取得了很大的进展,但将外源基因导入禾谷类植物细胞,获得转基因单株的成功事例很少,这主要是因禾谷类植物细胞的特殊性和现有基因转移技术固有的缺陷所致。由Sanford等发明的生物弹基因转移技术可克服上述不足,成功地将外源基因导入细胞。本文综述了该技术的发明、作用、特点及在禾谷类植物基因转移中的应用,并分析了该技术的优缺点,认为生物弹基因转移技术可望成为实验室常规的基因转移技术。     

谷类植物病害的诊断

美国威尔明顿的Du Pont 生物技术实验室已开发了若干利于人类健康的检测盒,并已选用相似的技术进行植物保护。禾谷类成为第一个受益对象,因为它们构成了最大的市场,并且仅从外观上很难诊断其病害。实际上几种病害可同时存在,它们之中症状的表面程度和损害程度没有直接联系。Du Pont 是第一家销售禾谷类病害诊断盒的公司。领导欧洲作物保护产品市场的法国在1992年已看中了刚出台的抗根腐病的Diagnolab,这种病害在禾谷类的茎秆基部蔓延,并使之倒伏。     

大麦叶肉原生质体的培养和再生细胞的分裂

有效地利用原生质体系统作为作物改良的 技术,已吸引许多研究老致力于禾本科作物原 生质体的培养。近年来,在禾谷类作物上已有 一些报道^[2-7,9],但仍然存在着很大困难;特别是 从禾谷类作物叶片分离的原生质体,更不易进 行有规则的持续分裂。正如一些研究者所指出 的,禾谷类的叶细胞缺少分裂的潜力,或者需要 特殊生长因子^[8]。本文简要报道大麦叶肉原生 质体在马铃薯简化培养基中培养能有规则地进 行分裂的一些结果。     

禾谷类作物体细胞变异的研究（Ⅱ））

二、禾谷类体细胞变异的起源认识体细胞无性系变异的遗传学机制有助于提高这种变异,同时对于控制这种变异也是十分重要的。例如,这种变异什么时候发生?它发生于培养过程中还是存在于外植体中?变异的遗传基础是什么?还有待于解决。     

根癌农杆菌转化禾谷类作物及影响其转化的因素

综述了根癌农杆菌转化禾谷类作物的研究现状,根癌农杆菌与禾谷类作物间的相互作用研究,根癌农杆菌成功转化禾谷类的例子;影响根癌农杆菌转化成功的因素,如菌株类型,感受态细胞的选择,Vir基因的活化,选择合适的转化途径等。这些将为利用根癌农杆菌介导的方法,将外源基因导入禾谷类作物提供有益的帮助。     

沙冬青冬季叶绿体的超微结构特征

沙冬青在冬季的叶肉细胞中有丰富的叶绿体,经常聚集在一起,相互重叠,相互嵌合,有的还相互融合。大部分叶绿体为凸透镜形,多余叶绿体主要为V形、蝶形、连婴形和哑铃形。它们的被膜不光滑,常凹凸不平,甚至出现突起和内陷。类囊体十分发达,质体小球很多,但淀粉粒缺乏。大部分叶绿体形态结构正常,有的还在出芽和分裂。少数叶绿体与此不同,它们已经衰老,其中一些正在解体或已经解体。     

溶酶体在垂体—肾上腺皮质激素分泌调节中的作用

本实验用地塞米松造成大鼠垂体促皮质激素细胞及其靶腺肾上腺皮质束状带细胞分泌抑制,对这两种细胞中的溶酶体及分泌自噬和自体吞噬活动进行了超微结构观察、CMP 酶细胞化学定性和形态计量。实验结果显示,在分泌受抑制状态下,垂体促皮质激素细胞中分泌自噬和自体吞噬作用加强,与此同时,肾上腺皮质细胞中自体吞噬作用也业著加强。这些结果表明,在分泌类固醇激素的细胞中,溶酶体以自体吞噬的方式清除一部分生产激素的细胞器,可能是一种普遍存在的分泌调节机制,正如在分泌蛋白质和肽类激素的细胞中普遍存在着分泌自噬这一调节机制一样。     

湄洲湾夏季生物有机碳的研究

湄洲弯夏季浮游植物有机碳的调查结果表明,活体有机碳「（ＰＯＣ（Ｂ）」含量为４２．５０－１８５．０μｇ／ｄｍｄｍ＾３,平均值为７７．５ｇ／ｄｍ＾３ＰＯＣ（Ｂ）和叶绿素（Ｃｈｌａ）的转移系数为６２．４;由三磷酸腺苷（ＡＴＰ）计算所得ＰＯＣ（Ｂ）要比由光合作用速率（ＰＲ）所计算的结果大,同时,同化系数（ＰＩ）的变化为０．７８－２．２２ｈ＾－１,它的垂直变化与ＰＯＣ（Ｂ）分布有关。氮是湄洲湾初级生产力的限     

内分泌细胞中溶酶体对激素分泌调节的作用

本实验用外源性雄激素引起垂体促性腺激素细胞和睾丸间质细胞分泌抑制,对这两种细胞中的溶酶体及分泌吞噬和自体吞噬活动进行了超微结构形态观察和半定量分析。实验中应用了CMP酶细胞化学技术和免疫胶体金技术。研究结果显示,在分泌受抑制状态下,垂体促性腺激素细胞中溶酶体增多,分泌吞噬活动加强;与此同时,睾丸间质细胞也表现溶酶体增多、自体吞噬活动加强。这些结果不仅再次证明在分泌蛋白质激素细胞中溶酶体以分泌吞噬的方式参与了激素分泌调节,更重要的是初步证明在分泌类固醇激素细胞的分泌调节中,也有溶酶体的参与,其形式是自体吞噬作用。细胞通过自体吞噬作用得以在短时间内清除一部分合成激素的细胞器和其中的激素,这可能是分泌类固醇激素的细胞及时有效地调整激素分泌量的一项重要机制,与分泌蛋白质激素细胞的分泌吞噬有着相同的意义。     

钙调素对细胞周期的调节

RC3细胞是一种用真核表达载体1~(CaM)转染NIH 3T3细胞建成的可调钙凋素(Calmodulin,CaM)高表达细胞模型。通过分子杂交及蛋白免疫印迹方法证实在地塞米松(Dexamethasome,DXM)作用下,RC3细胞可高表达CaM。CaM的过表达使G_1期细胞减少,S期细胞增加;CaM拮抗剂三氟拉嗪(trifluoperazine,TFP)则使G_1期细胞增加,S期细胞减少。高表达CaM使细胞分裂指数提高,G_2期细胞减少,有丝分裂前期细胞增加,M中期细胞比例下降。而TFP处理则使分裂指数下降,G_2期细胞增加,M前期细胞减少,M中期细胞增加。实验结果表明CaM在G_1/S、G_2/M和M中期/M后期3个位点上对细胞周期进行调控;通过加速G_1至S期,G_2至M期和M中期至M后期的进程,使细胞倍增时间缩短,促进细胞增殖。本工作表明,RC3细胞作为CaM表达可调细胞模型,是研究细胞周期调控的有力工具。     

小鼠对天花粉蛋白体内及体外免疫应答的基本特点

C 57 BL/6 J小鼠在应用弗氏全佐剂或铝矾为佐剂结合天花粉蛋白免疫后都能引起抗原特异的IgE类抗体的反应以及其它Ig类抗体的反应;IgE的滴度和总的抗天花粉蛋白抗体的滴度的动态变化趋势基本一致,但并不完全同步。IgE类上升得较IgG等类抗体为慢,但上升的速度要快。脾和肠系膜淋巴结细胞分泌抗体的动态变化也和血清并不完全一致。天花粉蛋白在一定浓度下能抑制小鼠T淋巴细胞在体外的抗原特异的增殖反应和ConA反应。这抑制并不限于增殖过程的启动。补充外源性的IL-2也不能消除这抑制作用。天花粉蛋白加热变性后丧失了对小鼠淋巴细胞的毒性,并能引起经未变性天花粉蛋白体内致敏的小鼠的T淋巴细胞在体外的明显增殖。应用微量的天花粉蛋白为抗原,以及少量的无凝集素的conA条件培液等能在体外诱发致敏的B淋巴细胞产生二次抗体应答。     

家兔胚泡ICM在体外培养系统中的行为

一、用显微外科方法从兔早期胚泡分离来的ICM在所用的体外培养系统中的行为,因ICM的生长状态而不同。呈带状生长的ICM从近端向远处延伸,而细胞的分化则从远端逐渐向近端进行,它具有明显的极性。细胞的分化秩序井然,层次分明。因此呈带状生长的ICM适用于进行细胞分化和细胞谱系的研究。二、呈团块状生长的ICM,没有明显的极性,细胞分化开始于团块的外表面,逐渐向中央进行。细胞分化开始稍晚一些,速度也较慢,这种生长状态的ICM适用于分离胚胎干细胞。三、兔子胚外内胚层从ICM分化来,它经历了二次分化的过程。第一次发生于培养后第三天(相当于交配后第七天),形成第一胚外内胚层-胚外体壁内胚层,它向远处迁移,远离原始外胚层。培养后四天(相当于交配后第八天),形成第二种胚外内胚层-胚外脏壁内胚层,它尾随体壁内胚层向远处迁移,其后缘的部分细胞向原始外胚层附近的滋胚层下面侵润。四、胚外体壁内胚层和脏壁内胚层的细胞是由少数决定了的和离开ICM的细胞分化和增殖而来。五、文中讨论了早期胚胎细胞分化的谱系问题。     

粉防己碱对豚鼠链霉素性肾损伤的干预作用

研究粉防己碱(Tetrandrine,Tet)对链霉素(Streptomycin,SM)所致的急性肾损伤的干预作用及其保护机制。将双耳ABR阈值≤5dB健康白色红目豚鼠分为(1)正常对照组、(2)Tet组、(3)SM组、(4)SM Tet组,于第11天留取尿标本和肾组织,用浊度法测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性,用光镜、电镜观察肾组织学改变。形态学检测显示SM Tet组肾脏病理变化比SM组小,凋亡细胞也明显少于SM组。SM Tet组NAG活性比SM组低(P<0.01)。上述结果表明粉防己碱对链霉素所致的急性肾毒性效应有明显的拮抗作用,在药物性器官损伤防护中具有潜在的应用前景。     

冬眠周期长短不同的蒙古黄鼠(Citellus dauricus)松果腺细胞的形态研究

电镜观察和统计结果表明:1.不冬眠组蒙古黄鼠松果腺细胞相对冬眠组的来说具有较大截面积的细胞和核,较长且较窄的高尔基器,每个高尔基器所具有的囊数较多,但空泡的截面积小,脂肪粒少,透明小泡少;2.冬眠周期长短不同的黄鼠的松果腺细胞和核截面积大小无差异、高尔基器的大小也无差异,有差异的超微结构特征只有空泡的截面积大小,且它们三组之间的差异显著。冬眠周期越长,空泡的截面积越大。这提示蒙古黄鼠的冬眠周期长短可能与松果腺细胞的总代谢活力无关;空泡可能在维持冬眠周期长短中起重要作用。     

钙调素抑制剂——三氟拉嗪对肿瘤细胞增殖和微管组装的影响

本文用钙调素抑制剂——三氟拉嗪处理人胃癌MGC-803细胞,用免疫荧光细胞化学方法,放射免疫法和速流荧光分析等方法研究了钙调素对细胞增殖,环核苷酸代谢及微管组装,有丝分裂等细胞功能的调节作用。实验结果表明,TFP明显地抑制了人胃癌细胞的增殖,这种抑制增殖的作用,具有剂量和时间依赖关系,细胞群体中G_1期细胞增多,S期细胞下降,DNA合成明显地受到抑制。TFP处理的胃癌细胞仅在短时间内(5'-30')cAMP含量升高,cGMP浓度降低,cAMP/ ??cGMP比值比对照组高4.4倍,但此后环核苷酸含量又很快恢复到对照组水平。本实验还观察到TFP处理后的MGC-803细胞胞质铺展,细胞形态的改变与胞质微管的分布有密切联系,实验结果表明TFP加强了人胃癌细胞MTOC对微管的组装能力,使微管分布得到恢复,微管纤维呈放射状延伸到细胞边缘,充满胞浆,使细胞呈现出展平的多边形,趋向于正常上皮细胞形态的变化,本实验结果表明TFP抑制癌细胞增殖及使微管组装加强可能是通过对CaM活性的抑制作用。此结果有助于说明转化细胞内钙调素的变化,可能是与转化细胞增殖失控和胞质微管消退有关。