根癌农杆菌转化紫草的研究

紫草 (ＬｉｔｈｏｓｐｅｒｍｕｍｅｒｙｔｈｒｏｒｈｉｚｏｎＳｉｅｂ .ｅｔＺｕｃｃ)是传统中药。其根部含有萘醌类化合物—紫草素及其衍生物 ,具有显著的抗菌、抗炎、抗癌以及促进伤口愈合等生理活性。紫草素同时也是一种名贵化妆品染料。科学家对紫草的研究兴趣是基于其资源的缺乏及紫草植物本身所具有的一些特点 ;如 :紫草素及其衍生物的颜色特性可凭借肉眼观察 ,紫草素及其衍生物只在紫草的根部积累 ,紫草素合成的次生代谢途径受多种酶和外界条件 (光照 ,营养等 )的调节等。紫草细胞培养 (Ｆｕｊｉｔａ等 ,1983;叶和春等 ,1991)可以产…     

假紫草化学成分研究

从假紫草根石油醚提取物中分离、提纯了四个化合物,利用红外光谱、核磁共振谱、高效液相色谱等,鉴定为:去氧紫草素(deoxyshikonin)、乙酰紫草素(acetylshikonin)、紫草素(shikonin)和β-羟基异戊酰紫草素(β-hydroxyisovalerylshikonin)。     

密花滇紫草萘醌成分研究及紫草素含量测定

从密花滇紫草(Onosma confertum W.W.Smith)根的石油醚提取物中分离出四种化合物,根据其理化常数、光谱数据(MS、IR、~4H-NMR、CD)及 HPLC 等鉴定为:去氧紫草素(Ⅰ)、β,β-二甲基丙烯酰紫草素(Ⅱ)、乙酰紫草素(Ⅲ)和紫草素(Ⅳ)。并对紫草素衍生物碱水解所得紫草素总含量进行了测定。     

滇紫草愈伤组织培养的初步研究

滇紫草(Onosma paniculatum)属紫草科滇紫草属植物,其根部皮层富含的紫草素(α—萘醌系列衍生物),可用作治疗外伤与痔疮的药物或高级染料以及化妆品。滇紫草为云南特有,由于人工栽培困难,加之不断采挖,致使这一资源受到严重的破坏,产品供不应求。日本Tabata等对紫草(Lithospermum erythrorhizon)的组织培养进行了一系列的研究,但对滇紫草组织培养以生产紫草素的研究至今未见报道。基于这一现状,我们从1988年开始着手进行滇紫草组织培养的研究,以探讨应用组织培养技术生产紫草素的可能性。     

紫草及其提取物生物学活性研究进展

紫草在我国有悠久的药用历史,其味甘,咸,性寒,归心包络,肝经,有凉血、活血、清热、解毒等功效,中医临床主要用于湿性斑疹、紫癜、血尿、淋浊和血痢、热结便秘、烧伤、湿疹、丹毒、痈疡等病。2005版《中国药典》收录紫草2个品种,分别是紫草科新疆紫草[(Arnebia euchroma(Royle)Johnst]、内蒙紫草(Arnebia gutlata Bunge)的干燥根[1]。已从紫草中分离提取出多种具有生物学的活性成分,其中紫草根中主要含萘醌类成分和脂肪酸成分,萘醌类成分主要有紫草素(Sh ikon in)、乙酰紫草素(Acetylsh ikon in)、去氧紫草素(Deoxysh ikon in)、异丁酰紫…     

硬紫草细胞培养色素形成的动力学研究

紫草为我国传统中药,最早收录于《神农本草经》,根部入药。其有效成分为紫红色的萘醌类衍生物的复合物(紫草色素)。它具有抗菌、消炎、抗肿瘤等作用,是具有药用价值的天然色素,在医药、印染、化妆品及食品工业上有广泛的应用前景。借助细胞培养技术生产紫草色素,是开发紫草资源的新途径。1983年日本已将硬紫草细胞培养工业化生产,1984年便有紫草色素产品投放市场。本文测定了硬紫草细胞培养色素形成过程中细胞生长、产物(色素)形     

新疆紫草细胞培养物的化学成分研究

从新疆紫草[Arnebia euchroma(Royle)Johnst.]的细胞培养物分离到5个萘醌类化合物,据其理化性质和光谱数据,分别鉴定为去氧紫草素(deoxyshikonin,Ⅰ)、β,β-二甲基丙烯酰紫草素(β,β-dimethylacrylshikonin,Ⅱ)、乙酰紫草素(acetylshikonin,Ⅲ)、2,3-二甲基戊烯酰紫草素(teracrylshikonin,Ⅳ)和β-羟基异戊酰紫草素(β-hydroxyisovaleryl-shikonin,Ⅴ)。细胞培养物不含从新疆紫草根中分得的紫草素(shikonin);各成分在细胞培养物中的含量与在新疆紫草根中的含量有很大差异。     

离体培养的新疆紫草萘醌色素的诱导形成

紫草(Lithospermum erythrorhizon)细胞的大规模培养,生产有应用价值的代谢物质并用于医药、食品及化妆品,在日本早有报道。但迄今为止,对我国新疆地区的新疆紫草尚未见研究报道。新疆紫草属假紫草属,野生资源贪乏,引种栽培至今未获成功。卢馥荪等曾对新疆     

紫草素抑制破骨细胞分化及改善去卵巢诱导的小鼠骨质疏松

目的:研究紫草素对破骨细胞体外分化的影响,并探讨其对去卵巢(ovariectomized,OVX)诱导的骨质疏松模型小鼠的骨保护作用。方法:体外细胞生物学实验,采用CCK-8法检测不同浓度紫草素对C57BL/6J小鼠骨髓源性单核巨噬细胞的毒性;采用RANKL和M-CSF诱导单核巨噬细胞破骨分化模型,给予不同浓度的紫草素干预后,经TRAP染色对破骨细胞进行形态学观察,并通过Real-Time PCR技术检测破骨细胞特异性基因TRAP、c-Fos和NFATc1的表达。动物体内实验,随机将15只小鼠平均分为假手术组、OVX组、治疗组。造模成功后治疗组给予紫草素干预,假手术组和OVX组以等体积生理盐水处理。连续处理30天后取胫骨,用Micro CT扫描重建观察胫骨近端骨丢失状况。结果:(1)高于250 nmol/L的紫草素显著抑制小鼠单核巨噬细胞生长(P0.01)。(2)不同浓度的紫草素干预能显著抑制体外破骨细胞形成(P0.01)。(3)不同浓度的紫草素干预能显著抑制TRAP,c-Fos和NFATc1等参与破骨细胞分化的重要基因表达(P0.01)。(4)紫草素干预能显著改善去卵巢诱导的骨质疏松模型小鼠的骨丢失(P0.05)。结论:紫草素能在体外抑制破骨细胞分化并在体内改善去卵巢诱导的小鼠骨质疏松。     

紫草素对白色念珠菌的抑制作用机制

【目的】研究紫草素抑制白色念珠菌的作用机制。【方法】通过微量稀释法测定紫草素对白色念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC);紫外分光光度法测定紫草素对白色念珠菌细胞膜渗透性的影响;扫描电镜观察紫草素对菌体形态的影响;激光共聚焦显微镜测定紫草素对白色念珠菌细胞内钙离子浓度的影响;卵黄平板培养基法检测紫草素对白色念珠菌的细胞膜磷脂酶活性的影响;RT-PCR检测紫草素对白色念珠菌PLB1和PLB2基因表达量的影响。【结果】紫草素对白色念珠菌有较强的抑制作用,其对白色念珠菌的MIC和MFC分别为16μg/m L和32μg/mL。紫草素能破坏白色念珠菌细胞膜的完整性,使细胞膜的通透性增加,导致细胞内DNA和RNA等大分子物质的泄漏和细胞内钙离子的流失。其中MIC的紫草素作用菌体16 h后,上清液中的DNA和RNA等大分子含量与对照组相比增加了117.32%(P0.01);细胞内的[Ca~(2+)]降低了72.02%(P0.01)。扫描电镜结果也证明了紫草素对白色念珠菌细胞膜的破坏作用。紫草素也能抑制白色念珠菌分泌磷脂酶,且呈浓度剂量依赖。其中,与对照组相比,MIC的紫草素能使白色念珠菌分泌磷脂酶的量下降56.3%(P0.01)。RT-PCR结果显示,紫草素能抑制编码磷脂酶B的基因PLB1和PLB2的表达量,其中1/2 MIC的紫草素作用白色念珠菌16 h后,与对照组相比,PLB1和PLB2基因的相对表达量分别降低了56.4%和61.4%(P0.01)。【结论】紫草素对白色念珠菌有较强的抑杀作用,其作用机制是通过破坏白色念珠菌细胞膜的完整性,增加菌体细胞膜的通透性,导致细胞内DNA和RNA等大分子的泄漏和细胞内[Ca~(2+)]的流失,最终引起菌体的死亡。而紫草素对白色念珠菌磷脂酶分泌的抑制作用,致使其不能及时维护和修复由紫草素造成的细胞膜的破坏和损伤,也是导致菌体死亡的原因。     

紫草素与依布硒啉对金黄色葡萄球菌的协同作用

[目的]探讨紫草素(shikonin,SKN)协同依布硒啉(ebselen,EbSe)抗金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的作用及机制.[方法]分光光度法测定紫草素-依布硒啉抗金黄色葡萄球菌活性;碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色检测紫草素-依布硒啉杀菌效...     

紫草菌的栽培和应用

紫草菌是贵州省著名的野生食用菌之一,可与闻名的鸡(土从)菌[Collybia albuminosa(Berk.)Petch]、鸡油菌(Cantharellus ciarius Fr.)、羊肚菌[Morchella esculenta(L.)Pers.]等比美,历来深受广大群众喜爱。我们从1975年开始进行人工栽培试验,证明紫草菌不仅栽培易活,而且紫草菌发酵液对某些细菌有明显的抑制作用。因此,该菌是一     

紫草对心房颤动模型大鼠的影响

目的:探讨紫草对房颤模型大鼠的心房颤动的发生及发展的作用及相关机制。方法:大鼠通过尾静脉连续给乙酰胆碱-氯化钙(Ach-CaCl_2)造模。第6天开始,紫草组予紫草汤药灌胃,胺碘酮组予胺碘酮溶液灌胃,空白组和模型组予生理盐水灌胃。于第14天进行心电图检查并记录房颤的诱发时间及持续时间,之后,超声心电图检查以记录左房面积(LA area)、射血分数(EF%)、左室舒张末径(LVDD)、左室收缩末径(LVDS),以评估紫草对模型大鼠的心脏重构和功能的影响。结果:1.紫草降低心房颤动大鼠的心房颤动诱发率并缩短了心房颤动的持续时间;2.紫草使心房颤动大鼠的心房重构改善,表现为左房面积和左室内径的减小,但对EF值无明显影响。     

新疆紫草细胞大量培养的研究

新疆紫草(Arnebia euchroma)为多年生草本植物,其根中含有多种萘醌类化合物(即紫草宁及其衍生物),为我国传统的中草药,监床用于抗菌、消炎,如治疗皮肤烧伤、烫伤及溃疡久治不愈、妇科炎症等。此外还具有抗促性腺激素及抗肿瘤活性。除药用外,紫草宁衍生物还是理想的天然色素和染料,可用于食品、化妆品的添加剂。     

HPLC测定不同产地硬萼软紫草根中4种萘醌类成分的含量

采用HPLC测定10个产地硬萼软紫草根中4种萘醌类成分含量,比较其差异。以乙酰紫草素、去氧紫草素、异丁酰紫草素、(2-甲基正丁酰基)紫草素为对照品,采用Agilent-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05%甲酸水溶液(70∶30)为流动相,1 m L/min,检测波长275 nm,柱温30℃。4种成分分离良好,线性、重复性以及回收率均符合要求。不同产地的样品中4种化学成分含量存在差异,可能与植物的生境及采收时间有关,活性成分乙酰紫草素、(2-甲基正丁酰基)紫草素在各样品中含量较高,推断其可作为天然抗肿瘤成分及其衍生物的备选资源,为其资源开发利用提供参考依据。     

米曲霉激发子促进紫草色素合成中细胞内Ca^2＋和cAMP的变化（简报）

米曲霉激发子促进滇紫草细胞合成紫草色素,这种作用与细胞内Ca(2 )相对浓度下降相关。离子载体A23187有抑制激发子的作用,Ca(2 )通道阻断剂Verapamil可部分模拟采曲霉激发子的作用,促进紫草色素合成。激发子处理后,胞内cAMP浓度快速上升。     

软紫草和黄花软紫草的核型研究

紫草科软紫草属(Arnebia Forsk.)植物约有22种,我国约产6种,其中软紫草(A. euchroma Johnst.),又名新疆紫草,是中药软紫草的主要原植物,黄花软紫草(A. guttata. Bunge),又名内蒙紫草,在内蒙古地区亦作紫草入药。在分类学上,软紫草属与紫草属(Lithospermum L.)“属间的界限不十分清楚,各家的认识不一致,种的划分也存在一些问题”,朱格麟对两个属的花、果特征进行了比较,认为两个属可以独立存在。据报道,紫草属植物的染     

滇紫草愈伤组织中的紫草色素

滇紫草(Onosma paniculatum Bur.et Franch)的幼嫩根茎经二步法诱导产生的愈伤组织.含有较原植物较高的紫草色素。经薄层层析鉴定,此种紫草色素由6种单体组成,其 Rf 值与原植物中的紫草色素各类衍生物非常近似。进一步采用硅胶 H 柱层析进行分离,最后得到4种单体。经结构分析证明它们是:去氧紫色素(deoxyshikonin)、β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁(β,β-dimethylacrylalkannin)、乙酰阿卡宁(acetylakannin)和β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁(β-acetoxyisovalerylalkannin)。     

滇紫草愈伤组织培养与紫草素产生

浓度为10~(-5)Smol/1和10~(-6)mol/l的2,4-D和NAA分别与10~(-5)mol/l的KT组合,能明显抑制滇紫草(Onosma paniculatum Bur. et Fr.)愈伤组织中紫草素的产生,但几乎不受天然生长素IAA和KT组合的影响。葡萄糖较蔗糖能更有效地促进紫草素的产生,它们的最适浓度均为6％。LH和CH能抑制紫草素的产生,CH浓度大于0.02％时能抑制愈伤组织的生长,LH对生长无明显影响。椰乳浓度为10％时,能明显地促进紫草素的产生,紫草素的含量是对照的24倍。     

紫草素对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制及诱导凋亡作用

目的:观察紫草素抑制人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡诱导的作用。方法:用不同浓度的紫草素处理HepG2细胞,MTT检测紫草素对HepG2细胞生长增殖的抑制作用;比色法测定Caspase-3酶活性;Western blot法检测磷酸化Akt蛋白(pAkt)的表达。结果:紫草素能够抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,并呈浓度、时间依赖性,紫草素与HepG2细胞作用24小时后Caspase-3酶活性显著增强,显示紫草素诱导的调亡作用随时间的延长而增加;同时,紫草素处理HepG2细胞后,随着药物浓度的增加,磷酸化Akt蛋白表达下降。结论:紫草素可抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,诱导HepG2细胞凋亡,凋亡机制可能与紫草素抑制PI3K/Akt信号途径有关。