微核形成与细胞周期关系的初步研究Ⅰ.人体全血辐射处理后不同放置和培养时间对微核率的影响

本报告应用γ-射线诱发微核、放射性自显影等技术分析细胞周期,研究淋巴细胞微核形成与细胞周期间的定量关系。主要结果如下:(1)经400rad照射的静脉血,在室温下放置1.5小时,或在37℃下放置5小时,此时淋巴细胞属G_0期。和照射前相比,两组微核率均显著增加(P<0.01)。(2)照射静脉血经pHA刺激培养23—24小时收获细胞,此时转化淋巴细胞应属G_1期,分别计数转化和未转化(G_0期)淋巴细胞微核,与照射前未培养淋巴细胞相比有显著增加(P<0.01)。(3)400rad照射静脉血培养72小时后,淋巴细胞微核较培养前增加14.5倍。根据放射性自显影等细胞周期分析结果表明,微核在细胞周期各阶段均可形成。     

用胞质分裂阻断法建立淋巴细胞微核率的剂量效应曲线

本文采用胞质分裂阻断微核法建立~(60)Coγ线照射离体人血诱发微核的剂量效应关系曲线,结果在0.1—5.0Gy范围内呈良好的剂量效应关系。对回归方程式的同归系数和曲线拟合度进行了显著性检验,表明微核细胞率和微核率皆适于拟合二次多项式(Y=a+bD+cD~2),同时对加Cyt-B的浓度和时间以及终止培养时间进行了讨论。     

用胞质分裂阻断法建立淋巴细胞微核率的剂量效应曲线

本文采用胞质分裂阻断微核法建立。⁶⁰Co γ线照射离体人血诱发微核的剂量效应关系曲线,结果在0.1-5.OGy范围内呈良好的剂量效应关系。对回归方程式的回归系数和曲线拟合度进行了显袭性检验,表明微核细胞率和微核率昏适于拟合二次多项式（Y=a十bD＋cD²）,同时对加Cyt-B的浓度和时间以及终止培养时间进行了讨论。     

SO2对蚕豆根尖和叶尖细胞遗传损伤作用的研究

采用微核实验技术,研究大气污染物SO2对蚕豆根尖和叶尖细胞的遗传损伤效应。结果表明2.80和28 mg.m-3的SO2熏气可以诱发蚕豆根尖和叶尖细胞损伤,导致根尖细胞有丝分裂指数下降,根尖和叶尖间期细胞微核率增高,并具有时间效应和浓度效应。经水恢复培养后,根尖分裂细胞数增多,微核率降低,说明恢复培养能够缓解高浓度SO2对根尖细胞的遗传损伤。用石蜡层隔断SO2在根部水中的溶解后,根尖细胞微核率低于叶尖细胞微核率,而在非隔断组中则相反,说明SO2在水中的溶解是产生毒性效应的重要原因。高浓度SO2熏气对蚕豆根尖和叶尖细胞具有遗传学毒性,由于根尖分生区具有较高的分裂指数和微核率,对环境SO2毒性的反应更灵敏,蚕豆根尖微核实验更适于对环境SO2的监测。     

体外辐射对淋巴细胞微核出现率的稳定性研究

在辐射损伤、药物筛选、肿瘤防治等有关题课研究领域内,应用微核率观察其效应,已经受到了研究工作者的广泛重视。我们在人外周血细胞体外经受(80)~Coγ-线不同剂量照射、不同培养时相观察的微核出现率效应的研     

除草剂丁草胺对蟾蜍红细胞微核及核异常的影响

本文研究除卓剂丁革胺对蟾蜍红细胞核的诱变效应。采用体内红细胞微核测定法,观察蟾蜍在不同浓度和不同的染毒时间红细胞微核及核异常的变化。结果表明,在一定的范围内,丁草胺可引起蟾蜍微核细胞率和核异常细胞率等遗传指标发乍明显变化,随着丁草胺浓度的增加和作用时间的延长,蟾蜍红细胞微核和核异常率呈现先上升后下降的规律性变化。丁草胺的作用具有双向性。一定利量的除草剂丁草胺对蟾蜍红细胞具有明显的遗传毒性,除草剂对水体的污染不容忽视。     

胞质分裂阻滞细胞的微核检测及方法学初步研究

培养人体外周血淋巴细胞的微核检测,是近年来常用的体外短期检测方法之一,可用来评价被检理化因子对人体细胞的遗传毒性,及监测环境、职业接触等有害因子对人类的潜在致癌作用。为了进一步提高该方法的敏感性,根据微核起源于染色体断片与落后染色体的观     

培养法与直接法外周血淋巴细胞微核率的比较研究

用⁶⁰Co r线1.0-5.0Gy照射狗,比较照后12小时培养法和直接法外周血淋巴细胞微核率,结果微核率随剂量增加而增加,培养法增加的速度和幅度明显高于直接法,经统计学分析二者存在一定的相关性。     

微核形成与细胞周期关系的初步研究 Ⅲ.丝裂霉素c诱发人淋巴细胞染色体畸变与不同周期阶段的微核形成

为了研究染色体畸变与微核形成的关系,本实验用不同浓度的丝裂霉素C(MMC,0.025—0.4μg/ml),处理人外周血淋巴细胞,观察中期染色体畸变与不同细胞周期形成的微核间的关系。获得如下主要结果:(1)MMC诱发的染色体畸变细胞率(ACF),未经培养的G_0期淋巴细胞的微核细胞率(NC-MNCF)以及培养的淋巴细胞的微核细胞率(C-MNCF),在一定剂量范围内均呈剂量依赖性增加,并可用幂回归方程描述;(2)微核形成与染色体畸变全然无关的NC-MNCF,和C-MNCF一样,与ACF呈良好的正相关;(3)用胞质分裂阻滞(CB)法,检测MMC诱发的CB-MNCF,较C-MNCF无显著提高,MNCF/ACF的比值较小,并随着MMC剂量增加从0.15左右降到0.03。所有上述结果表明,不能简单理解微核形成与染色体畸变间的关系,在分裂的细胞群体中,中期染色体畸变可能仅是微核形成的一种来源。     

N_1N''''—二甲基甲酰胺对小鼠骨髓多染性红细胞微核出现率的效应

本研究采用微核测定方法来评价N,N′—二甲基甲酰胺(N,N′—Dimethyl formamide简称DMF)对小鼠骨髓多染性红细胞微核出现率的致突变效应。处理结果表明:单次注射不同剂量的DMF,其中1.0mg/kg(体重)剂量组的多染性红细胞微核出现率有明显的上升趋势(4.077‰),当剂量增加到6.0mg/kg时,多染性红细胞微核出现最高峰,微核率为4.374‰,表明该剂量使微核显著增高;随着剂量的继续增加微核出现率反而随之下降。 多次连续注射(每隔24小时注射一次)DMF1.0mg/kg微核出现率为5.204‰,比单次注射相同剂量的微核率高,说明药物有积累的遗传毒理作用。     

三氧化二砷对黄鳝毒理学效应

以黄鳝为实验动物,研究了不同剂量的三氧化二砷对黄鳝的毒理学效应。采用鱼类致突变实验、鱼类红、白血球计数等方法,测定外周血白细胞数、红细胞微核和核异常以及肝脏过氧化氢酶（CAT）活性。结果发现：在低剂量范围内,随着三氧化二砷剂量的增加红细胞的微核率及核异常率逐渐增加、CAT活性升高,白细胞数则下降;至0．50mg／kg剂量时红细胞的微核率、核异常率,TLCAT活性均达最大值,而白细胞数达最低值;随着剂量的进一步增加红细胞的微核率、核异常率以及CAT活性均反而下降,白细胞数则上升。结果表明一定剂量三氧化二砷能明显影响黄鳝外周血细胞及肝脏CAT活性。     

培养法与直接法外周血淋巴细胞微核率的比较研究

用⁶⁰Co r线1.0-5.0Gy照射狗，比较照后12小时培养法和直接法外周血淋巴细胞微核率，结果微核率随剂量增加而增加，培养法增加的速度和幅度明显高于直接法，经统计学分析二者存在一定的相关性。     

蚕豆根尖细胞不同剂量率的微核效应研究

本研究采用同一剂量、不同剂量率的~(60)Co-γ射线辐照蚕豆干种子,观察根尖细胞的微核效应。试验结果表明,在0—7.33戈瑞/分处理中,微核细胞率随剂量率的增加略有升高。然而,各处理间的差异显著性不同。此外,在2.03戈瑞/分处理中,能诱发各种类型的微核突变,尤其是出现较多的分裂期微核细胞。本文根据一些分裂期微核细胞所出现的染色体畸变类型,提出辐射诱发的微核既可能是一次击中的产物,也可能是二次击中的产物。同时,微核在细胞遗传工程方面具有可利用的价值。     

金黄滴虫细胞核微丝系统的初步观察

金黄滴虫细胞核内经常存在着许多直径约为7nm的微丝。这些徽丝大多组合成走向不定的徽丝束,微丝束交织而成遍布核内的网架。核被下面微丝束较多,它们的存在常使核被外凸而成隆脊。核内微丝与核内结构如核仁、染色质等似乎都是相连的。有些微丝横跨核被,一端位于核内,另一端位于核周腔中,并靠近叶绿体。核周腔和内质网腔中也存在着微丝和另一种纤维,印管状纤维。用细胞松弛素B处理后,细胞核、核周腔和内质网腔中的微丝均消失,细胞核的形态也发生变化,似乎微丝网架有支持细胞核的作用。核内微丝可能是在内质网中组装,然后经核周腔进入核内的。     

SO2对蚕豆根尖和叶尖细胞遗传损伤作用的研究

采用微核实验技术,研究大气污染物SO₂对蚕豆根尖和叶尖细胞的遗传损伤效应。结果表明2.80和28 mg·m^-3的SO₂熏气可以诱发蚕豆根尖和叶尖细胞损伤,导致根尖细胞有丝分裂指数下降,根尖和叶尖间期细胞微核率增高,并具有时间效应和浓度效应。经水恢复培养后,根尖分裂细胞数增多,微核率降低,说明恢复培养能够缓解高浓度SO₂对根尖细胞的遗传损伤。用石蜡层隔断SO₂在根部水中的溶解后,根尖细胞微核率低于叶尖细胞微核率,而在非隔断组中则相反,说明SO₂在水中的溶解是产生毒性效应的重要原因。高浓度SO₂熏气对蚕豆根尖和叶尖细胞具有遗传学毒性,由于根尖分生区具有较高的分裂指数和微核率,对环境SO₂毒性的反应更灵敏,蚕豆根尖微核实验更适于对环境SO₂的监测。     

四种除草剂对中华大蟾蜍蝌蚪红细胞微核及核异常的影响

研究了除草剂精克草星、苯磺隆、使它隆和乙草胺单独及联合作用时对中华大蟾蝌蚪红细胞微核及核异常的影响。结果表明,处理２４小时时,单独作用的除草剂均可不同程度地引起微核率及核异常细胞率等遗传指标的上升。而且,在一定的浓度下各指标分别有高峰期,其中微核率与对照组差异极显著（Ｐ〈０．０１）或显著（Ｐ〈０．０５）。微核率与除草剂浓度之间无显著相关,不表现出剂量－效应关系。四种除草剂联合作用的微核率等指标反而     

用单个花粉粒的体外授粉及其培养

把DNA转入完整植物细胞的新方法有:微注射法、激光微穿孔法和微弹轰击法。用这类方法转化的单个花粉粒对于植物育种具有重要价值。采用这些个体花粉粒通过体外授粉把外源遗传物质转入植物中,或者是通过体外培养产生转化的单倍体植株。 Calgene公司的H.Hauptli和Williams采用玉米穗段的体外培养物发展了一种单个花粉粒传粉、受精和正常核发育的方法。他们获得的单个花粉粒使受精频率最高可达75％,平均为23％。这是使用完整植株或培养穗轴段的其它单个花粉粒授粉速度的两     

培养人淋巴细胞分裂阻滞与常规微核测试法的比较研究 Ⅱ.丝裂霉素C的遗传毒性效应

为了确定胞质分裂阻滞微核测试法(CB-MNT)的实用价值,本研究用0.025-0.4μg/mL的丝裂霉素C(MMC)处理培养的人体外周血淋巴细胞,比较CB-与常规(C)-MNT检测遗传毒性的敏感性,结果表明:(1)在整个剂量范围内,两法测得的微核率(MNF)均有良好的剂量效应关系,但CB法测得MNF低于常规法,随剂量增加而加著;CB法测知的最低浓度为0.1μg/ml,常规法为0.025μg/ml,可见常规法的敏感性优于CB法;(2)我们首次比较了CB法与常规法所检测微核的平均体积,发现CB法检测微核的体积接近常规法的3倍,并提出由于微核形成前后,微核间及微核与主核间的融合,导致了微核体积的增大和数量的减少,进而引起了MNF的下降;(3)CB法检测健康人自发MNF明显高于常规法,这可能是CB法检测低剂量诱变剂效应,较常规法不够敏感的重要原因之一。最后作者结合文献讨论了CB-与C-MNT的实用价值。     

微核形成与细胞周期关系的初步研究Ⅱ.微核形成的放射性自显影和显微形态学研究

本报告应用γ-射线处理、PHA刺激,放射性自显影等方法研究了微核在人淋巴细胞各周期阶段形成的形态学证据。结果表明,经体外照射的人体外周血,在其间期淋巴细胞各阶段:G_0、G_1、S和G_2期,均可有微核形成,并观察到微核形成的中间过程,核变形,核物质膨出并延伸,中间连丝断裂或在细胞质中消失,与主核完全脱离后微核形成。在有丝分裂中,后期细胞也观察到无着丝点染色体断片和落后染色体,它们有可能形成微核。这样看来,细胞周期各阶段均可能形成微核。作者还观察到胞外微核的形成,并认为它的增多可能是一种病理现象。     

食管癌病人放射治疗时外周淋巴细胞微核率的变化以及和染色体畸变率的关系

在辐射诱发的染色体畸变中,除了倒位和相互易位外,几乎都伴有断片的产生。在间期细胞中,这种染色体断片呈现为大小不等的圆形或椭圆形结构,称为微核。观察微核率的变化,称为微核测定。近年来,由于微核测定具有方法简便、观察迅速、鉴别比较容易等一系列特点,在辐射损伤的诊断、辐射防护药的筛选、辐射的细胞遗传学效应研究等