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制备电泳的连续洗脱与切下目的蛋白谱带洗脱是从聚丙烯酰胺凝胶回收蛋白质常用的两种方法。切带回收蛋白可采用浸泡提取,化学解聚凝胶及电泳洗脱多种途径。相对比较,电泳洗脱蛋白回收率较前二者高些,因此人们多采用此法。但是,目前广泛使用 相似文献
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大豆种子富含脂肪氧化酶(lipoxygenase,简称LOX),约占其蛋白含量的1%。大豆LOX至少以三种同工酶存在,定名为L1、L2、L3a和L3b,后两种性质类似统归一种。大豆LOX能催化破碎种子中的不饱和脂肪酸(如亚油酸)氧化生成具有豆腥味的醛、醇类物质,从而大大降低大豆产品的品质与风味, 相似文献
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电泳滴定曲线法是运用第一向等电聚焦,再进行第二向电泳,反映各pH下,各蛋白质组分之间在迁移率上的差异.该法在选择蛋白质分离纯化的最佳条件、离于交换剂的类型等方面已表现出广阔的应用前景.作者制备了小牛血清白蛋白和羊抗兔IgG血清的电泳滴定曲线,取得满意结果. 相似文献
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噬菌斑平板计数是微生物学理论研究与实际应用中常用的方法之一。但由于平板上噬菌斑与背景反差小,而且往往出现几个噬菌斑相连,计算机识别时出现较大的误差,因此噬菌斑计数目前仍为人工方法。本文以λ噬菌体为材料,感染E.coli宿主细胞,获得噬菌斑。然后将噬菌斑制成电子图像。抽取图像中有代表性的区域,利用分水岭算法对图像进行分割处理,将相连的噬菌斑分割成单独的噬菌斑,然后利用基于区域生长法进行计数,结果与人工计数完全相同,表明我们建立的新方法可以用于噬菌斑计算机自动计数。 相似文献
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SDS—PAGE电泳对小分子多肽的分析 总被引:25,自引:2,他引:25
对一些小分子多肽进行电泳分析时,在固定,染色,脱色过程中极易扩散丢失;即使用常规尿素-SDS-PAGE系统测定寡肽分子量,银染色后小于8KDa的标准品也无着色带显示。 相似文献
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cDNA-SCOT基因差异表达两种电泳方法的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
应用cDNA-SCOT研究了低温胁迫下不同抗寒性甘蔗品种的基因差异表达,比较了两种PCR产物电泳方法。结果表明,采用琼脂糖凝胶电泳成本较低,操作简单,省时,其凝胶图像条带亮白,背景为黑色,主带明显,副带较模糊;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳成本较高,操作复杂,耗时,其凝胶电泳图像条带呈黑褐色,背景为浅黄色,主带和弱带清晰易读,但部分引物泳道背景深,影响差异基因鉴别效果。根据两种电泳方法的优缺点,提出应用cDNA-SCOT进行基因差异表达研究时的相关建议。 相似文献
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介绍两类从普通琼脂糖电泳凝胶中回收DNA的简便,快捷,高效且廉价的方法,第一类为电泳洗脱法,方法a.利用1.5mL微量离心管,1mL吸头,尼龙网膜和透析膜做成的一个小装置,快速有效回DNA,最终回收率为70%左右,方法b:不用DEAE-纤维素膜,而用透析膜在凝胶中作出横隔挡在DNA条带前,最终回收率为50%左右,第二类为冰冻融解法,最终回收率也在50%左右,如果联合使用冰冻融解法和电泳洗脱法,回收 相似文献
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一种新的测定蛋白激酶活性的方法:毛细管电泳测定蛋… 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了以毛细管电泳为基础的测定蛋白激酶A活性的新方法,可作为激酶测活的通用方法。此法基于底物及其磷酸化产物很容易在毛细管电泳中分开,且酶活力可用积分值计算。同时又发发展了连续井样技术,能在一次电泳中同时进行10个以上的酶活性测定。新方法操作简单,灵敏度和精确性均优于常规的同位素法。 相似文献
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化石照片是鉴定或研究古生物最重要的资料之一,一张清晰、逼真的化石照片所起的作用不亚于精采的文字描述。因此,化石照片质量的好坏与研究成果的质量有一定的直接关系。以往,习惯用胶片拍摄低倍化石薄片。由于胶片的感光度比放大纸高,所需的曝光时间很短,在拍摄时难以对薄片厚薄不均匀的部分进行遮挡,在一定程度上,影响照片的质量。 相似文献
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微电泳多巴胺对大鼠黑质—尾壳复合体单位放电的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
形态学证实:脑内存在黑质-新纹状体多巴胺能系统。但对该系统在新纹状体内的作用迄今仍有争议。York等用细胞外记录的方法证明:发自黑质的多巴胺能系统对尾壳复合体的单位放电主要起抑制性调节作用。但Kitai等用细胞内的记录方法观察到该系统对尾壳复 相似文献
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目的:分析最新近红外荧光标记(NIRF)电泳迁移率变动分析(EMSA)技术的优缺点,在此基础上对NIRF-EMSA技术进行实验方法的改进。方法:设计了3种NIRF-EMSA实验方法,即扫胶法、染胶法和扫膜法,通过实验比较了3种方法的实验程序复杂性、优缺点及检测成本,并将3种方法与化学发光EMSA进行了比较。结果:采用3种方法都可以取得良好的EMSA检测效果,但比较而言,间接扫膜法不仅效果良好,而且实验成本最低。结论:间接扫膜法是值得推广应用的最经济便捷的基于Odyssey红外荧光成像系统的近红外荧光EMSA实验方法。 相似文献
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从琼脂糖电泳凝胶中回收DNA的几种简便方法 总被引:4,自引:0,他引:4
介绍两类从普通琼脂糖电泳凝胶中回收DNA的简便、快捷、高效且廉价的方法.第一类为电泳洗脱法.方法a:利用1.5mL微量离心管、lmL吸头、尼龙网膜和透析膜做成的一个小装置,快速有效回DNA,最终回收率为70%左右.方法b:不用DEAE-纤维素膜,而用透析膜在凝胶中作出横隔挡在DNA条带前,最终回收率为50%左右;第二类为冰冻融解法,最终回收率也在50%左右.如果联合使用冰冻融解法和电泳洗脱法,回收率可进一步提高至90%. 相似文献
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武廷章 《生物化学与生物物理进展》1992,19(3):239-239
在薄层凝胶等电聚焦电泳技术中,制胶可谓是关键的一步。如果制胶失败,将造成时间上的浪费和经济上的损失(凝胶中所用的两性电解质载体——安福林的价格较昂贵)。如果制成的凝胶薄厚不匀或无支撑物,将会直接影响实验结果或给实验操作带来麻烦。我们针对这种情况,结合实验教学,摸索出一种快速、简便而效果较好的制胶方法。现简要介绍如下 相似文献
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目前在等电聚焦电泳技术中,应用最多的是聚丙烯酰胺凝胶平板薄层等电聚焦。该法具有分辨率高的优点,但需采用高纯度试剂,价格昂贵,而且超薄层制板(≤0.5mm)技术要求也较高,这些条件限制了它的推广应用。利用醋酸纤维素膜进行等电聚焦,则可弥补上述缺点。但众所周知,醋酸纤维素膜存在较强 相似文献
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近来,一种新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引发的COVID-19突发疫情,给全球公众健康和社会经济构成严重威胁。SARS-CoV-2成为继人冠状病毒229E(Human coronavirus 229E,HCoV-229E)、人冠状病毒OC43(Human coronavirus OC43,HCoV-OC43)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)、人冠状病毒NL63(Human coronavirus NL63,HCoV-NL63)、人冠状病毒HKU1(Human coronavirus HKU1,HCoV-HKU1)和中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)后第七种感染人类的冠状病毒。本研究以高分辨毛细管电泳技术为基础,针对七种人冠状病毒基因保守区分别设计特异性引物对,经常规PCR扩增后,通过具备单碱基差异分辨率的毛细管电泳分析,实现快速检测七种人冠状病毒的目标。通过构建基于毛细管电泳的人冠状病毒分子靶标,实现同时快速精准鉴定七种人冠状病毒的目的。本研究建立的人冠状病毒毛细管电泳快速检测技术方法具有极高灵敏性和精确性,分辨率高而且特异性好,操作简便成本低廉,为人冠状病毒的临床诊断、口岸快速检测等提供了新的技术支持。 相似文献
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建立了以毛细管电泳为基础的测定蛋白激酶A活性的新方法,可作为激酶测活的通用方法.此法基于底物及其磷酸化产物很容易在毛细管电泳中分开,且酶活力可用积分值计算,同时又发展了连续进样技术,能在一次电泳中同时进行10个以上的酶活性测定,新方法操作简单,灵敏度和精确性均优于常规的同位素法. 相似文献