共培养的树突状细胞与CIK细胞的体外增殖和杀瘤活性研究

本文观察树突状细胞与同源CIK细胞共培养后培养物的表型、增殖活性变化,及DC对CIK细胞细胞毒活性的影响。提取健康供血者的PBMC,常规诱导出DC与CIK细胞,用A549肺腺癌细胞裂解液抗原冲击DC,并和CIK细胞共培养,动态观察DC-CIK培养物增殖活性和表型变化;定量检测细胞培养上清中的IFN-γ和IL-12;并用MTT法检测共培养细胞杀伤A549肺腺癌细胞和BEL-7404肝癌细胞的活性。结果表明DC与CIK细胞共培养,通过彼此的相互作用诱导出比CIK细胞增殖活性和杀伤活性更强的细胞群体。经A549肺腺癌细胞裂解液抗原冲击的DC活化的CIK,对A549肺腺癌细胞的杀伤活性高于单纯CIK细胞,差异显著(p<0.05)。二者对BEL-7404肝癌细胞的杀伤活性无显著差异。实验证明DC与CIK共培养细胞是一种增殖活性和细胞毒活性高于CIK细胞的免疫活性细胞,经肿瘤抗原冲击的DC能明显提高CIK对肿瘤细胞的杀伤活性,具有更广阔的应用前景。     

百白破混合制剂接种后ADCC和NK细胞活性的变化

<正>自然杀伤细胞(NK细胞)是对某种靶细胞具有细胞损伤活性的正常未致敏淋巴细胞。NK细胞活性与抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)活性不同,是在无特异性抗体的情况下对靶细胞所呈现的活性,因而,它在肿瘤免疫和病毒感染时作为免疫活性细胞参与初期防御作用较之ADCC活性更重要。     

血红素加氧酶／一氧化碳系统在1，6-二磷酸果糖抗IL-1β致胰岛细胞凋亡中的作用

目的：探讨1,6-二磷酸果糖（FDP）对白介素-1β（IL-1β）致胰岛细胞凋亡的保护作用及其机制与血红素加氧酶／一氧化碳（HO-1／CO）系统的关系。方法：应用离体培养乳鼠的胰岛细胞,分别检测IL-1β、FDP作用后细胞形态、细胞活性、细胞凋亡率、细胞HO-1的活性和细胞培养上清液中胰岛素的基础和高糖刺激分泌量以及CO的含量的变化,同时设立正常对照组。结果：正常胰岛细胞HO-1活性较低,CO含量少,凋亡细胞率为4．71±0．62。IL-1β作用20h后,与正常组比较胰岛细胞活性明显降低,基础和高糖刺激胰岛素分泌减少,胰岛细胞凋亡率明显增加（P〈0．01）;细胞HO-1活性有所增加,上清液中CO生成增多（P〈0．05）,损伤后与FDP共同孵育细胞活性显著升高,胰岛素基础和高糖分泌量增多,胰岛凋亡率明显降低,HO-1活性和CO生成显著提高（P〈0．01）,具有统计学意义。结论：FDP能降低IL-1β诱导胰岛细胞的凋亡,改善细胞活性,促进细胞的分泌功能,机制可能与FDP增加HO-1活性,从而CO生成增多有关。     

球等鞭金藻生长抑制物对藻细胞的抑制效应及抗氧化剂对抑制效应的抵制作用

以球等鞭金藻为材料,研究生长抑制物GI对藻细胞生长、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响;同时研究4种抗氧化剂(抗坏血酸、柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠和3-叔丁基-4-羟基-苯甲醚)对GI抑制效应的抵制作用.结果表明,0.10mg/LGI处理组藻细胞密度、SOD和POD活性明显低于对照组,而MDA含量明显高于对照组.且随着GI浓度的继续增大,细胞密度、SOD和POD活性急剧降低,而MDA含量进一步升高.GI浓度为0.30mg/L时,处理组藻细胞密度、SOD和POD活性以及MDA含量分别为对照组藻细胞密度的0.05倍、SOD活性的0.56倍、POD活性的0.59倍和MDA含量的2.2倍.4种抗氧化剂均能有效地抵制GI对藻细胞的抑制效应,使细胞密度、SOD活性和POD活性提高,MDA含量降低.添加抗氧化剂处理组的藻细胞密度为对照组细胞密度的1.38～1.90倍、SOD和POD活性分别为对照组活性的1.49～2.12倍和1.55～2.13倍,而MDA含量比对照组含量降低57.7%～87.9%.生长抑制物的胁迫使球等鞭金藻细胞体内积累了过量的活性氧,而抗氧化剂通过清除藻细胞体内积累的活性氧,减轻了膜脂过氧化伤害,从而抵制了生长抑制物对藻细胞的抑制效应.     

甘露醇对小麦细胞IAA氧化酶、过氧化物酶及GST活性的影响

研究了16 g/L甘露醇处理对小麦细胞再分化、细胞IAA氧化酶、IAA过氧化物酶、 谷胱甘肽转移酶和过氧化物酶活性的影响。结果表明,甘露醇处理使小麦细胞再生能力明显降低,引起细胞蛋白质含量、IAA过氧化物酶和GST活性明显降低;但使细胞IAA氧化酶和POD活性明显增高。     

应用流式细胞术检测毕赤酵母的细胞活性

选取两种细胞活性染色试剂二乙酸荧光素(fluoresceindiacetate,FDA)和碘化丙锭(propidiumiodide,PI),应用流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测毕赤酵母细胞活性。比较FDA/PI双染色与PI单染色的FCM图谱,后者能够很好地将死活细胞区分开来并得到正确的比例。利用PI单染色检测发酵过程细胞活性的变化,甘油补料阶段几乎没有细胞死亡,进入甲醇补料阶段后,随着细胞密度的增加,细胞的活性不断降低,发酵88h时细胞活性仅为73.8%。     

甘露醇对小麦细胞IAA氧化酶过氧化物酶及GST活性的影响

研究了16g/L甘露醇处理对小麦细胞再分化,细胞IAA氧化酶,IAA过氧化酶,谷胱甘肽转移酶和过氧化物酶活性的影响,结果表明,甘露醇处理使小麦细胞再生能力明显降低,引起细胞蛋白质含量,IAA过氧化物酶和GSP活性明显降低,但使细胞IAA氧化格格不入产POD活性明显增高。     

生物学效应分析——心理性应激和躯体性应激对鼠脾杀伤细胞影响的异同

阐明心理性应激和躯体性应激对鼠脾杀伤细胞影响的异同。应用Communication box系统分别使小鼠连续负荷心理性应激和躯体性应激3 d后,以51Cr释放法检测鼠脾NK、LAK、CTL细胞杀伤活性。负荷心理性应激和躯体性应激后,可导致鼠脾NK细胞、LAK细胞杀伤活性降低（P〈0.05,P〈0.01）;两者均可明显降低C57BL/6小鼠脾CTL细胞活性（P〈0.01）,躯体性应激比心理性应激对CTL细胞活性有较强的抑制作用。心理性应激和躯体性应激均可降低脾NK、LAK、CTL细胞杀伤活性。     

大蒜素及其前药对食管癌细胞生长的影响

通过大蒜素及大蒜素前药处理食管癌Eca9706细胞,观察细胞形态,测定乳酸脱氢酶(LDH)活性和DNA降解。结果表明,癌细胞变圆、变小,活细胞数目减少,脱壁细胞和细胞碎片增多。DNA-Ladder试验结果显示,出现了DNA梯状条带,表明DNA分子发生降解。大蒜素及其前药处理的Eca9706细胞LDH活性显著高于对照组,随处理浓度增加和时间延长,LDH活性依次升高,表现出时间和剂量的依赖性。大蒜素前药处理Eca9706细胞的LDH活性明显高于大蒜素,表明大蒜素前药对细胞膜的损伤程度较大。     

鲤、青鱼肠粘膜内分泌细胞的免疫组织化学鉴别和定位

使用过氧化物酶——抗过氧化物酶(PAP)的免疫组织化学染色技术,用10种哺乳动物激素培育出的抗血清对鲤、青鱼肠道粘膜中内分泌细胞的鉴別表明,它们的肠道粘膜上皮中存在有胃泌素、P物质、牛胰多肽、亮氨酸脑啡肽、胰高血糖素样免疫反应物、抑胃多肽等6种免疫活性內分泌细胞;而五羟色胺、胆囊收缩素和神经降压素没有免疫活性反应。在鲤的肠粘膜中存在生长抑素免疫活性内分泌细胞;青鱼中则未见到这种细胞。两种鱼的各种免疫活性內分泌细胞多数在前肠的分布密度较大;但青鱼肠粘膜中P物质和亮氨酸脑啡肽两种免疫活性内分泌细胞却在直肠中分布最多;胰高血糖素样免疫活性内分泌细胞在中肠分布最多。P物质和胃泌素免疫活性內分泌细胞大多数分布于肠褶顶部;其他各种免疫活性內分泌细胞则主要分布于肠褶的中、底部。本文比较了鲤、青鱼的肠内分泌细胞在各肠段中的分布密度,并对其形态学及分布特点进行描述和讨论。     

棉铃虫中肠几种酶的组织化学研究

采用酶组织化学方法研究了棉铃虫中肠三磷酸腺苷酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的分布和活性。结果显示三种酶在棉铃虫中肠均有分布,但分布部位各不相同,其中,三磷酸腺苷酶在肠壁分泌细胞、肠壁细胞、环肌和纵肌均有分布,以肠壁分泌细胞活性较高;碱性磷酸酶主要分布于肠壁分泌细胞,在肠壁分泌细胞做绒毛处活性最高;酸性磷酸酶分布于肠壁细胞、环肌和纵肌,在肠壁细胞底膜处活性最高。这些酶可以作为棉铃虫中肠不同条件下的生理指标。     

RARβ在胃癌细胞生长调节中的作用

为探讨 RARβ受体介导全反式视黄酸 ( ATRA)抑制胃癌细胞生长的作用机理 ,用 Northern印迹测定 RARβ m RNA表达水平 ,脂质体介导的转染方法将含有 RARβ基因的表达载体转染MKN- 45细胞并稳定表达 ,MTT和软琼脂集落形成等实验测定细胞生长速率和生长状态 ,氯霉素乙酰转移酶活性 ( CAT)测定视黄酸应答元件βRARE的转录活性以及 AP- 1 ( activator protein- 1 )活性 .RARβ在 ATRA敏感细胞株 MGC80 - 3、BGC- 82 3和 SGC- 790 1中表达 ,而在 ATRA抗性细胞株 MKN- 45中不表达 .当 RARβ基因转染 MKN- 45细胞时 ,细胞变为 ATRA敏感 ,由此导致ATRA抑制 MKN- 45细胞生长和软琼脂集落形成 .ATRA可以加强诱导 MGC80 - 3、BGC- 82 3和SGC- 790 1细胞βRARE的转录活性 ,但对 MKN- 45细胞影响不大 ,不能抑制细胞 AP- 1活性 .当RARβ基因转染 MKN- 45细胞后 ,ATRA则能够诱导细胞 βRARE的转录活性 ,并抑制细胞的 AP-1活性 .RARβ表达与 ATRA抑制胃癌细胞生长密切相关 .ATRA诱导 βRARE转录活性和抑制AP- 1活性可能是其调控胃癌细胞生长的机制之一 .     

乳腺癌细胞中人血小板衍生生长因子受体β启动子的基础活性研究

目的:探讨低迁移表型的乳腺癌细胞MCF-7和高迁移表型的乳腺癌细胞MDA-MB-231中血小板衍生生长因子β启动子的基础活性及转录调控差异。方法:Real-Time PCR,Weastern blot等技术检测PDGFRβ在2株细胞中的转录和表达差异。双荧光报告系统检测PDGFRβ启动子各缺失突变片段在2株细胞中的活性,筛选差异片段。生物信息学预测启动子区可能存在的转录因子。凝胶迁移实验研究转录因子在两株乳腺癌细胞中对PDGFRβ启动子的调节活性。结果:两株细胞中都有PDGFRβ的内源性表达,且在MDA-MB-231中表达较高。在2株细胞中找到了人PDGFRB 启动子的重要活性调节区,(+539bp,+1457bp)在2株细胞中均呈负调控,(+54bp,+539bp)在两株细胞中均呈正调控,(-983bp,+54bp)在MDA-MB-231中呈显著正调控,在MCF-7中没有活性。转录因子AP1的转录活性和与DNA的结合活性在MDA-MB-231中均高于MCF-7。结论:不同迁移表型的乳腺癌细胞中PDGFRβ存在不同的表达调控机制,PDGFRβ启动子活性片段(-983bp,+54bp)在两株细胞中存在显著活性差异。转录因子AP-1在两株细胞中有表达水平和结合活性差异。     

植物细胞分裂素的糖苷物生物活性分析

用附加细胞分裂素及其糖苷物的MS培养基,垂直培养拟南芥并测定根的伸长,以此分析细胞分裂素及其糖苷物的生物学活性的结果表明,细胞分裂素的N-糖苷物几乎完全失去细胞分裂素活性,而D-糖苷仍具有细胞分裂素活性。推测两类糖苷物对植物体内细胞分裂素活性可能有不同的调控作用。     

高Fe2+ 对水稻离体根边缘细胞的影响

以水稻"汕优10号"为试验材料,悬空气培法获得根边缘细胞,研究水稻边缘细胞的数量、活性和脱离根冠后对高Fe2 的响应过程.结果显示,水稻根长为1 mm时,就形成了205个边缘细胞,随着根的伸长数目不断增加,根长25 mm时,边缘细胞数目最大;根长20 mm时边缘细胞活性最大;根长2 mm时,根冠果胶甲基酯酶(Pectin methyl esterase, PME)活性最高,水稻边缘细胞的形成与根冠PME活性相关.高Fe2 对离体边缘细胞有毒害效应,用浓度为200 μmol·L-1的Fe2 溶液处理48 h后,细胞活性比对照下降了72.70%, 但用400 μmol·L-1 Fe2 溶液处理时,细胞活性有所回升,这可能是边缘细胞耐铁毒的一种应激性反应;根冠PME活性随着Fe2 浓度的增加先上升后下降,表明根冠PME活性与植物铁毒有关.     

拮抗菌株抑菌活性的保藏试验研究

研究不同保藏介质、温度和时间的综合因素对B-298菌株活性的影响。为生产和研究提供能保持该菌株抑菌活性的适宜保藏方法。试验结果表明：介质、温度、时间的交互作用对菌株细胞存活率和代谢产物拮抗效应的影响都存在显著性差异;细胞存活率和拮抗效应与保藏时间呈反比;菌株保藏680 d,应用甘油超低温保藏法,菌株细胞存活率和抑菌活性最高,而采用斜面常温保藏,细胞存活率和抑菌活性最低。     

躯体性应激和心理性应激对鼠脾NK细胞受体表达的影响

阐明躯体性应激和心理性应激降低NK细胞杀伤活性的机制及异同。应用Communication box系统分别使小鼠连续负荷躯体性应激和心理性应激后,以~(51)Cr释放法检测鼠脾NK、LAK细胞的杀伤活性;以流式细胞术检测鼠脾细胞、LAK细胞中NK细胞受体的表达水平。结果表明,躯体性应激和心理性应激均可降低鼠脾NK、LAK细胞的杀伤活性,但对脾细胞、LAK细胞中NK细胞受体表达的影响却不同,提示躯体性应激和心理性应激影响NK细胞功能的机制不同。     

CD3AK细胞抗肿瘤作用的研究进展

抗ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞ＣＤ３ＡＫ是一种新型抗肿瘤免疫活性细胞,具有体外扩增能力强,细胞毒活性高,体内抗肿瘤效果好,低依赖ＩＬ－２等特点。本文综述了ＣＤ３ＡＫ细胞的诱导和扩增、形态学和免疫学特性、体内外抗肿瘤作用和ＣＤ３ＡＫ细胞的活性增强物质,并讨论了ＣＤ３ＡＫ细胞的作用机制     

番茄根边缘细胞生物学特性及铝对其活性的影响

以番茄为试材,采用悬空气法,探讨番茄根边缘细胞的生物学特性及铝对其活性的影响。结果表明,第1个番茄边缘细胞几乎与初生根同时出现,当根长到10 mm时,番茄边缘细胞达最大值(893个)。边缘细胞的活性(成活率)一直维持在93%以上。PME活性随着根的伸长有所降低。铝对番茄边缘细胞产生明显毒害,随着铝浓度和处理时间的增加,边缘细胞的活性显著降低。     

人lambda1和epsilon干扰素基因在WI-38细胞中的表达及其活性比较

研究新型干扰素hIFN-λ1和hIFN-ε基因在WI-38细胞中的表达及其生物学活性,并进行对比分析。构建His重组融合表达载体pcDNA3.1A-hIFN-λ1-His和pcDNA3.1A-hIFN-ε-His,脂质体法分别转染WI-38人胚肺细胞。采用微量细胞病变抑制试验研究和比较rhIFN-λ1-His和rhIFN-ε-His的抗病毒活性;MTT法检测其对肿瘤细胞生长的影响; RT-PCR相对定量法检测其诱导WI-38和SHG-44细胞产生人MxA抗病毒蛋白的活性。结果表明rhIFN-λ1-His抗病毒活性、抗肿瘤细胞增殖活性和诱导产生MxA蛋白活性要强于rhIFN-ε-His。hIFN-λ1和hIFN-ε干扰素的抗病毒效应的分子机理均与诱导细胞产生MxA抗病毒蛋白相关。为进一步探讨和比较hIFN-λ1和hIFN-ε的生物学活性及其作用机制奠定了一定的基础。