美味猕猴桃原生质体再生植株细胞遗传学研究 Ⅰ．体细胞染色体数目的变化

研究了美味猕猴桃叶愈伤组织原生质体再生植株和母株（ＡｃｔｉｎｉｄｉａｄｅｌｉｃｉｏｓａｌｉｎｅＮｏ．２６）茎尖体细胞染色体数目。结果表明：母株２ｎ＝６ｘ＝１７４。所测２９株再生植株的茎尖体细胞染色体数目差异显著,多为非整倍体类型,占所测植株的７２．４％左右;体细胞染色体数目介于１４２－３１０条之间,其中２ｎ＝６ｘ＝１７４约占２０．７％,少于１７４条染色体的植株约占３１．０％,超过１７４条染色体的植株则占４８．３％左右。个别单株部分茎尖体细胞在有丝分裂后期出现染色体桥、断片和落后染色体等异常现象。并对以上现象进行了扼要的讨论。     

毛花猕猴桃原生质体再生植株根尖染色体数目变异与细胞多核现象

对18株毛花猕猴桃(Actinidia eriantha Benth.)原生质体再生植株的体细胞染色体数做了观察,其中12株为整倍体:二倍体(2n=58)和四倍体(2n=116)各6株;另外6株为混倍体,其染色体数目变化在59～203之间。还发现原生质体再生植株有丝分裂间期细胞存在多核现象,有多核细胞的共10株,细胞核数目以双核和三核较常见,最多的有7个核。对照植株为2n=2x=58,未发现多核细胞。     

美味猕猴桃原生质体再生植株细胞遗传学研究 Ⅱ.性别性状变异和小孢子发生及其发育命运

对美味猕猴桃同一雌株叶原生质体再生植株进行了形态学、细胞学以及育性特性的比较研究,确认该体细胞无性系性别性状发生变异。其中60％雄性再生植株退化的雌蕊仍保留不同程度的雌性化特征,但雌性全不育;小孢子则能发育成有功能的雄配子体,但有一定的功能缺陷。再生雌株中P1组群性状特征与母株相似;P2组群花发育畸形,导致雌性不育或育性极差。细胞学研究表明,小孢子母细胞减数分裂时染色体异常行为对小孢子发生的影响不能决定其性别类型;雌株类型小孢子败育过程有受基因调控的细胞学特征。认为雌株和雄株小孢子的发育受控于不同的基因体系,具性别的特异性。再生植株性别性状发生变异可能是性别控制基因或染色体发生结构性变异所致。母株染色体上累积的结构性变异与该遗传基础具易变性密切有关。     

美味猕猴桃原生质体再生植株细胞遗传学研究 Ⅱ.性别性状变异和小孢子发生及其发育命运

对美味猕猴桃同一雌株叶原生质体再生植株进行了形态学、细胞学以及育性特性的比较研究,确认该体细胞无性系性别性状发生变异。其中６０％雄性再生植株退化的雌蕊仍保留不同程度的雌性化特征,但雌性全不育;小孢则能发育成有功能的雄配子体,但有一定的功能缺陷,再生雌株中Ｐ１组群性状特征与母株相似;Ｐ２线群花发育畸形,导致雌性不育或育性极差。细胞学研究表明,小孢子母细胞减数分裂时染色体异常行为对小孢子发生的影响不能     

美味猕猴桃原生质体再生植株细胞遗传学研究 Ⅲ.母株减数分裂前期Ⅰ染色体配对的光镜观察

首次报道在光镜下观察美味猕猴桃（品种：Ｎｏ．２６原生质体植株的母株）花粉母细胞（ＰＭＣ）染色体在减数分裂前期的配对,发现其配对和凝缩有明显不同步性。不同细胞间染色体配对形式变化较大,一般以二价联合为主,其次由其它多种配对方式（包括有复合配对,重复配对,着丝点或端粒处联合和多价联会）形成多价体,还有少数未配对或发生内配对（偶见）的单价体和几条二阶体之间的次级配对,粗线期观察到少数染色体有缺失（或重复     

美味猕猴桃原生质体再生植株细胞遗传学研究 Ⅲ .母株减数分裂前期Ⅰ染色体配对的光镜观察

首次报道在光镜下观察美味猕猴桃 (品种 :No.2 6原生质体植株的母株 )花粉母细胞( PMC)染色体在减数分裂前期的配对 ,发现其配对和凝缩有明显不同步性。不同细胞间染色体配对形式变化较大 ,一般以二价联会为主 ,其次由其它多种配对方式 (包括有复合配对、重复配对、着丝点或端粒处联合和多价联会 )形成多价体 ,还有少数未配对或发生内配对 (偶见 )的单价体和几条二价体之间的次级配对。粗线期观察到少数染色体有缺失 (或重复 )、倒位、易位和疏松配对等结构性改变。表明该植株是一个复杂的区段异源六位体 ,少数染色体在结构上累积有变异。还认为该植株是研究减数分裂染色体配对和联会机制的好材料。     

毛花猕猴桃原生质体再生植株

从毛花猕猴桃（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ ｅｒｉａｎｔｈａ Ｂｅｎｔｈ．）试管培养的实生苗新展开叶片分离的原生质体,培养在液体ＭＳ（除去ＮＨ４ＮＯ３）附加２,４－Ｄ １．０ ｍ ｇ／Ｌ和葡萄糖０．４ ｍ ｏｌ／Ｌ的培养基上。培养３周后植板率达到１９．４％ 。在未添加新鲜培养基的情况下,原生质体再生的细胞可持续分裂,并于３个月时长成２ ｍ ｍ 大小的愈伤组织。将该愈伤组织转移到附加玉米素０．５ ｍ ｇ／Ｌ和ＩＡＡ ０．１ ｍ ｇ／Ｌ的固体ＭＳ培养基上,分化出苗。试管苗经诱导生根,长成完整小植株     

防风悬浮细胞的原生质体再生植株

防风(Saposhnikovia divaricata(Turcz.)Schischk)试管苗的根尖,下胚轴或叶柄切段在含有1mg/l 2,4-D 的 MS 固体培养基上,形成含有胚性细胞团的愈伤组织。愈伤组织经液体振荡培养,形成含有大量胚性细胞团的悬浮培养物。用含有 Onozuka R-10 1.5%、Mace-rozyme R-10 0.3%、蜗牛酶0.5%、CaCl_2 5mmol/l 和甘露醇0.6 mol/l(pH=5.8)的酶液从胚性细胞团游离得到原生质体。原生质体在培养的第4天出现第一次分裂,50天左右形成的细胞团大小为1—2mm。这些细胞团在含有0.5 mg/l 2,4-D 的 MS 固体培养基上形成愈伤组织。在含有0.1 mg/l 6-BA 或0.1 mg/l 2,4-D+0.5mg/l 6-BA 的 MS 固体培养基上,原生质体再生的愈伤组织分化出胚状体。胚状体在不含任何生长调节剂的 MS 固体培养基上发育成完整的原生质体再生植株。     

柑桔种间原生质体融合植株再生及染色体数目变异的研究

为了获得具有抗病、优质丰产等优良性状的柑桔体细胞杂种,本研究应用当前推广良种朋娜脐橙胚性细胞原生质体和抗裂皮病、耐盐碱的红桔叶肉细胞原生质体作为亲本进行体细胞杂交研究。通过对原生质体分离,融合和培养过程中培养基调控等环节的研究,建立起原生质体融合及其后的胚状体再生系统,并从融合处理后的原生质体培养中获得了大最的胚状体,进而获得个别体细胞杂种植株。同时对融合后再生的胚状体染色体数目和同工酶分析,还揭示了在柑桔原生质体融合再生中,胚状体水平上存在淹广泛的遗传变异。其中有14.1%的胚状体为四倍体,近20%为超倍体的非整倍体,并讨论了变异发生及由胚状体再生植株困难的原因。     

党参原生质体再生植株

党参下胚轴愈伤组织原生质体在附加１．２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ,０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ,０．２ｍｇ／Ｌ ＢＡＰ和０．１ｍｇ／Ｌ ＺＴ的ＭＳ,Ｃ８１Ｖ,ＤＰＤ及ＫＭ８ｐ培养基中进行液体体层培养。在ＫＭ８ｐ中获得了最高的分裂频率。葡萄糖作渗透剂优于甘露醇,两结合使用效果更好。在合适的条件下,原生质体培养３天出现第１次分裂,４周内形成大细胞团,培养６周后形成０．５－１．０ｍｍ大小的小愈伤组织。在附加２％蔗糖     

不定胚再生植株的染色体数目变异

本实验以甜瓜“小麦瓜”和“青皮绿肉”品种为试材,经不定胚诱导再生植株。分别调查了不同继代培养时间后形成再生植株的染色体数目,并将之与对照染色体数目相比较,发现通过诱导不定胚所得到的再生植株中存在着一定的变异,而且经过不同继代培养时间后,所得到的不定胚再生植株的变异程度不同,随着时间的增加,染色体数目的变异率从3.3%增加到30%,变异幅度也从2n=23~24增加到2n=13~48。从而得出结论：不定胚再生植株染色体数目变异程度随着培养时间的增加而增加;培养时间在1~2个月内所得到的不定胚再生植株的变异较少。此外,不定胚再生植株的染色体数目变异程度也因品种而异。 Abstract:Chromosomal number of different of somatic embryos regenerated plants were investigated in melon variety “xiaomaigua” and “Qingpilurou”.Certain variations of chromosomal number were found among the regenerated plants compared with normal sample,and range of variation covered from 2n=23～24 to 2n=13～48 with the increase of generation,the rate from 3.3% to 30%.The results indicated that degree of variation in chromosomal number of somatic embryos regenerated melon plants increased with the time of culture,and those cultured in one to two months had the least variation.It was also found that degree of chromosomal number variations varied with melon varieties.     

叶肉细胞原生质体培养再生植株变异的研究

为了满足社会对经济作物在数量及质量上不断提高的要求,寻找克服远缘杂交不亲和性及定向改变植物遗传性状的新途径,以培育出适合要求的优良品种,一直是生物学工作者努力的一个重要方面。近来年的研究结果表明,熟练地掌握植物原生质体培养的技术和方法,对于利用原生质...     

沙打旺原生质体培养再生植株

用1%半纤维素酶,0.4%纤维素酶,0.1%果胶离析酶,CPW9M酶液分离沙打旺无菌苗下胚轴和子叶原生质体。K8P原生质体培养基悬滴培养。下胚轴原生质体形成小细胞团后用琼脂糖包埋培养,形成小块愈伤组织后转入增殖培养基M1、M2(改良MS培养基)上形成大块愈伤组织。经过两次诱导分化,在分化培养基M3(MS 0.7mg/L BA 0.2mg/L NAA),M4(MS 0.5mg/L BA 0.5mg/L KT 0.5mg/L ZT 0.2mg/L NAA)和M6(MS 3mg/L ZT 0.2mg/L IAA)上分化出苗,再生植株。由子叶分离的原生质体未能形成愈伤组织。