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相似文献
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1.
提取并分离纯化了Ⅱ型胶原,研究了Tb(Ⅲ)与Ⅱ型胶原的相互作用,结果表明Ⅱ型胶原对Tb(Ⅲ)有配位作用,并能极大地增强其荧光强度。用荧光滴定法和Scatchard作图法确定了Ⅱ型胶原与Tb(Ⅲ)的结合常数和结合部位数,结果表明Ⅱ型胶原与Tb(Ⅲ)有两类结合部位,其结合部位数和结合常数分别为0.7;3.1×10^5和1.3;1.0×10^5。  相似文献   

2.
铽(Ⅲ)与人血清脱铁转铁蛋白结合的荧光光谱研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
在pH7.40.1mol/LHepes及室温条件下,使用荧光光谱进行了Tb3+对人血清脱铁转铁蛋白的滴定.结果表明Tb3+与人血清脱铁转铁蛋白结合后,其549nm处的荧光强度增强约105倍.在549nm处Tb3+-脱铁转铁蛋白络合物的摩尔荧光强度是(9.65±0.05)×104mol-1L,Tb3+可占据脱铁转铁蛋白的两个金属离子结合部位,优先占据脱铁转铁蛋白的C端结合部位,条件平衡常数是lgKC=9.96±0.20,lgKN=6.37±0.16.Tb3+与R3+E(RE=Nd、Sm、Eu和Gd)间的线性自由能关系表明稀土离子占据脱铁转铁蛋白的C端结合部位时受离子大小的影响  相似文献   

3.
肝素对成纤维细胞促增殖作用的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
应用核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNORs)染色和抗Ⅲ型胶原以及抗5-溴脱氧尿苷单抗免疫组化技术,观察了肝素对体外培养的NIH/3T3成纤维细胞增殖的影响,发现:(1)肝素能促使成纤维细胞数量增加,如0.1mg/L浓度的肝素在培养第3天成纤维细胞数量相当于对照值的1.3倍;(2)对成纤维细胞AgNORs的合成显示出明显的促进作用,如0.2mg/L浓度的肝素培养第3天,其AgNORs数量为对照值的2.7倍;(3)进一步分析肝素对成纤维细胞DNA和Ⅲ型胶原合成的影响,结果表明,加入0.2mg/L肝素培养第3天,S期成纤维细胞和Ⅲ型胶原阳性细胞数分别为对照值的2.7倍和1.8倍。上述实验结果为探讨肥大细胞分秘的活性介质参与器官纤维化作用的机理进而采取相应的对抗措施提供了依据  相似文献   

4.
[B3-Lys]-胰岛素的研究:受体结合及生物活性   总被引:3,自引:0,他引:3  
本文用125T-[B3-Lys]-胰岛素和125Ⅰ-胰岛素研究了[B3-Lys]-胰岛素和胰岛素与人胎盘细胞膜(HPM)胰岛素受体结合特性并进行了比较。实验结果表明[B3-Lys]-胰岛素与EPM胰岛素受体结合能力比天然猪胰岛素高。由竞争取代曲线得到的[B3-Lys]-胰岛素和猪胰岛素的IC(50)值分别为0.65和1.11nmol/L。经Scatchard分析得出[B3-Lys]-胰岛素与HPM胰岛素受体中高亲和位点和低亲和位点结合的亲和常数分别为1.72×109和2.27×106L/mol,而猪胰岛素分别为1.26×109和1.47×106/mol。促脂肪细胞合成脂肪实验结果表明[B3-Lys]-胰岛素也同样具有比天然猪胰岛素更高的离体生物活力,EC(50)分别为0.175和0.301nmol/L。可见[B3-Lys]-胰岛素的受体结合能力和高体生物活力都为猪胰岛素的1.7倍。  相似文献   

5.
报道了缢蛏碱性磷酸酶(简称ALP)经不同浓度盐酸胍处理时酶的分子构象所发生的变化以及酶变化和失活的动力学过程。在胍中酶荧光发射峰强度下降,紫外差光谱在246nm和285nm处出现2个负峰,CD谱中酶的α螺旋度下降,且随浓度增大,变化程度也加大。动力学研究表明,酶在0.5mol/L、1.0mol/L、2.0mol/L3.0mol/L、4.0mol/L盐酸胍中的变性速度常数分别为3.21×10~(-4)s~(-1)、6.38×10~(-4)s~(-1)、2.17×10~(-3)s~(-1)、2.33×10~(-3)s~9-1)、5.17×10~(-3)s~(-1);而酶在相应盐酸胍中的失活速度常数分别为2.33×10~(-4)s~(-1)、3.57×10~(-4)s~(-1)、5.86×10~(-4)s~(-1)、1.14×10~(-3)s~(-1)、3.45×10~(-3)s~(-1);表现为失活与构象伸展变化基本平行。  相似文献   

6.
窄颖仲彬草Kengyilia stenachyra(Keng) J.L. Yang ,Yen et Baum 是分布于我国西部的一种多年生六倍体植物。将其与犬草Elymus caninus(L.) L., 鹅观草Roegneria kamoji Ohwi, 糙毛仲彬草K.hirsuta (Keng) J.L.Yang,Yen et Baum 3 个种进行了杂交。对亲本及杂种F1 代花粉母细胞减数分裂中期I染色体配对行为进行了观察。减数分裂平均构型分别为: E. caninus×K. stenachyra23-79 Ⅰ+ 5-20 Ⅱ+ 0-27Ⅲ; R.kamoji ×K.stenachyra18-23 Ⅰ+ 11-68 Ⅱ+ 0-06 Ⅲ+ 0-06 Ⅳ; K.hirsuta ×K.stenachyra4-83Ⅰ+ 17-31 Ⅱ+ 0-55 Ⅲ+ 0-20 Ⅳ+ 0-02 Ⅴ。根据以上结果, 结合种的形态特征, 窄颖仲彬草应从鹅观草属Roegneria C. Koch 拟冰草组ParagropyronKeng 中组合到仲彬草属Kengyilia Yen et Yang。  相似文献   

7.
肺动脉构形重建(structruralremodeling)是慢性肺心病的重要血管病变,但其发生机制至今未完全明了。病变以血管中膜平滑肌细胞肥大、增生和细胞外基质(包括纤维性与非纤维性成分)增多导致的血管壁增厚、血管腔狭窄为特征。本文用天狼星红-偏振光显微镜观察,真彩色全自动图像分析法,测量10例慢性肺心病尸检肺小动脉中膜厚度及中膜内Ⅰ、Ⅲ两型胶原的含量和所占的百分比。用3H-胸腺嘧院核苷和3H-脯氨酸掺入法,观察缺氧内皮细胞条件培养液(HECCM)对培养的肺动脉平滑肌细胞(PASMCS)DNA及胶原合成的影响。结果:(1)肺心病组437支肌型肺动脉平均中膜厚占血管直径的百分值高于对照组5±1.08%;(2)肺心病组的Ⅰ型和Ⅲ型胶原面积分别占中膜面积的54.62%和519%,而对照组两型胶原占中膜面积小于2%。(3)HECCM组平滑肌细胞的3H-TdR和3H-脯氨酸掺入量(cpm值),均明显高于常氧对照组(NECCM),两组相比,有显著性差异(P<0.01)。(4)细胞周期分析,HECCM组平滑肌细胞的G0/G1期细胞数百分值比NECCM组少28%,G2+M期细胞百分值则比NECCM组高30%。可以认为,缺  相似文献   

8.
周洁  黄大有  刘鼎新 《生理学报》1994,46(5):488-494
本研究应用[3H]cortisol和[3H]dexamethasone(DEX)两种配基,观察到大鼠肝细胞膜上存在一类糖皮质激素(GC)特异结合位点。这些位点与GC的结合具有饱和性、高亲和力及低容量。其平衡解离常数(Kd)分别为12.84±6.58nmol/L和40.27±23.44nmol/L;最大结合容量(Bmax)分别为2.57±1.84pmol/mg蛋白质与0.64±0.18pmol/mg蛋白质(cortisol,n=4;DEX,n=3;±SE)。动力学实验数据所得的Kd值与Scatchard分析所得的Kd值结果基本一致。[3H]cortisol和[3H]DEX饱和结合实验数据用Scatchard作图分析,均显示为直线。Hill系数则分别为0.9880和0.9990.竞争抑制实验结果表明,cortisol对[3H]cortisol的结合位点有高度特异性竞争,比其它几种类固醇(强的松、黄体酮、RU486、DEX)的竞争力至少强40倍以上.用放射自显影技术进行研究,也提供了[3H]cortisol特异结合银粒位于大鼠肝细胞膜上的依据。  相似文献   

9.
本文报道了[B1~Ala,B2-Ala]-胰岛素与人胎盘细胞膜胰岛素受体结合的特性和体外生物活力,并与胰岛素进行比较。在37℃和杆菌肽存在下,125I-[B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素和125I-胰岛素与人胎盘细胞膜作用依赖于反应时间,反应6分钟到达平衡,此时,[B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素和胰岛素与胰岛素受体的最大结合分别为每毫克膜蛋白结合6.44fmol和3.47fmol:达到平衡一半所需时间(T1/2)分别为19秒和25秒。用125I-[B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素作为放射配体进行竞争性结合研究,从IC(50)得[B1-Ala,B2-Ala]胰岛素的受体结合活力为胰岛素的139.6%。Scatohard分析求得;[B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素与高亲和和低亲和结合位点的结合常数在4℃时分别为5.88×108L/mol和7.63×105L/mol,而胰岛素分别为4.83×108L/mol和3.39×105L/mol。促脂肪细胞生成脂的实验表明:[B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素的活力为胰岛素的130%。  相似文献   

10.
为了阐明肾综合征出血热纯化疫苗(I型)中糖蛋白(GP)、核蛋白(NP)在免疫保护中的作用,采用脾细胞转输法,分别将GP、NP、GP+ NP免疫小鼠后的脾细胞与未经免疫的小鼠正常脾细胞(3.5×105 个)经腹腔转输给乳鼠,2 h 后以100 LD50的汉滩(HTN)病毒(LR1 株)进行脑腔攻击。结果表明,其乳鼠的保护率分别达77.0% ,38.5% 和92.3% ,而未经免疫的小鼠正常脾细胞则不能提供保护(0% ),揭示了GP+ NP在抗HTN 病毒感染中具有免疫协同作用。  相似文献   

11.
马铃薯HMGR基因的克隆,序列分析及其表达特征   总被引:8,自引:0,他引:8  
采用RT-PCR技术,从马铃薯(Solanum tuberosum L.)幼叶中克隆了一个约1.0kb的cDNA片段,序列分析结果表明,该cDNA与忆报道的马铃薯HMGR基因家族的三种类型基因具有较高核酸序列同源性,与HMGRⅠ基因同源性为77.0%,HMGRⅡ基因为93.2%,HMGRⅢ基因为77.1%。其中3’端非翻译区序列与HMGRⅠ、HMGRⅡ、HMGRⅢ三种基因同源性分别为50.2%,8  相似文献   

12.
硒对培养人胚肝细胞Ⅲ型前胶原,羟脯氨酸合成的影响   总被引:7,自引:0,他引:7  
原代培养人胚肝细胞经1.156×10 ̄(-7)mol/L硒预处理4h,加入20mmol/L四氟化碳作用20h,观察硒对其Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和羟脯氨酸(Hyp)生成的影响。结果培养液中PCⅢ水平、细胞内Hyp含量及细胞内外丙二醛(MDA)水平均降低,与未加硒对照组比较差别有显著性(P<0.01)。而硒谷腕甘肽过氧化物酶(Se-GSH-PX)活性则较对照组显著增高(P<0.001),且PCⅢ水平与Se-GSH-P_X/MDA比值呈负相关(r=-0.9156,P<0.01)。提示硒可提高Se-GSH-P_X/MDA比值,抑制脂质过氧化激发的肝细胞胶原合成。  相似文献   

13.
葡萄果实发育过程中脱落酸结合蛋白动力学特性的变化   总被引:2,自引:0,他引:2  
联系葡萄果实发育不同阶段生长动态、果肉组织中糖、酸和ABA 含量变化的测定, 利用微量放射配基结合法,通过Scatchard 作图,分析了巨峰葡萄(Vitisvinifera×V. labrusca)果实生长发育第Ⅰ期、第Ⅱ期、始熟期和第Ⅲ期膜联系的ABA 结合蛋白的动力学特性参数,其解离常数(Kd) 依次分别为17.5、50.0、6.3、13.3 nm ol/L;最大结合容量依次分别为98.6、523.0、41.6、85.4 pm ol/g 蛋白。这4 个时期的Scatchard 图都是一条直线, 说明在同一发育时期,果实微粒体上可能存在一种相同的或若干种不同的但动力学特性相同或相似的高亲和力的ABA 结合位点。ABA 结合蛋白与ABA 的亲和力在始熟期高于其它时期,特别是从第Ⅱ期到始熟期,亲和力提高了将近10 倍,而其浓度却在始熟期降到最低。始熟期果实组织中低浓度的ABA 启动成熟的原因可能是由于ABA 结合蛋白与ABA 亲和力的提高。讨论了ABA 结合蛋白在果实发育不同时期的功能,推测这种(些)蛋白可能是ABA 作用的受体或载体  相似文献   

14.
用10μg/gLa ̄(3+)、1.0%Vc、10μg/gLa ̄(3+)+1·0%Vc、蒸馏水四种处理,喷施正处在衰老过程中的黄瓜叶片,一周后提取PSⅡ颗粒,通过SDS-PAGE、薄层扫描和Clark测氧等测试技术,发现处理与对照的PSⅡ颗粒在与放氧活性密切相关的33、23、17kD三肽的相对总含量上有变化,10μg/gLa ̄(3+)处理比对照减少28.9%,而1.0%Vc和10μg/gLa ̄(3+)+1.0%Vc处理的与对照接近。前者的放氧活性降低37.3%,后者的放氧活性增加62.4%,是对照的1.6倍,共同处理的结果与对照相近。可见,在光合放氧中,1.0%Vc与10μg/gLa ̄(3+)拮抗。而且,33、23、17kD三肽总量的相对减少与放氧活性的高低呈正相关。  相似文献   

15.
用Aedans标记肌动蛋白单体G-Actin上Cys374残基作为探针,研究了稀土离子Ce~(3+)与G-Actin的结合及引起的微构象变化。Ce~(3+)在低浓度(Ce~(3+)/Actin摩尔比<1)和Ca~(2+)竞争G-Actin上二价离子的高亲合位点。Ce~(3+)取代Ca~(2+)引起Aedans荧光强度增强与Mg~(2+)取代Ca~(2+)的结果相同。Ce~(3+)/Actin>l则导致Aedans荧光强度下降。说明Ce~(3+)在高低两种浓度条件下结合的位点及对Cvs374的微构象的影响不同。时间分辩测得的Aedans荧光寿命也支持这一结论。CD谱结果表明Ce~(3+)/Actin<0.4,Actin的二级结构增加,大于0.4又导致其失去。Ce~(3+)-Actin在有/无游离ATP时用聚合液诱导的聚合结果表明,无游离ATP时,极低浓度Ce~(3+)促进聚合,高浓度虽有促进但有所减弱;有游离ATP时,Ce~(3+)/Actin在实验范围内促进聚合。  相似文献   

16.
观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对心肌肌浆网Ca2+,Mg2+-ATPase基因(SERCA2a)转录调节的影响,评价DMP811对此效应的干预作用.6周龄雄性SD大鼠随机分为3组,每组6只.组1:生理盐水输注;组2:AngⅡ输注+DMP811管饲(3mg·d-1·kg-1);组3:AngⅡ输注(200ng·min-1·kg-1.1周后称其体重,取心脏并称重,提取心脏总RNA后采用Northernblot的方法检测SER-CA2a的转录水平,采用RT-PCR检测AngⅡ1型受体(AT1)mRNA水平.实验后,组3心重(CW)、心重/体重(C/B)、AT1受体转录水平均高于组1(分别增加4.7±0.4%,4.9±0.9%和24.7±3.5%;P<0.01),而SERCA2a基因转录水平显著低于组1(降低20.1±3.0%,P<0.01),并且SERCA2amRNA水平与AT1受体mRNA水平呈负相关(r=-0.74,P<0.01).AngⅡ导致的上述改变能被DMP811完全阻断.AngⅡ通过其Ⅰ型受体的介导,诱导了SERCA2a的转录下调  相似文献   

17.
从CHO工程细胞培养上清初步纯化的uPA免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体细胞株,取其中一株38-1-7株作高密度大量培养,细胞密度达13.2×106/mL时,抗体滴度为1∶61.44×104。用自制的uPA-Sepharose4B柱纯化抗体。抗体滴度提高243倍。纯化后的抗体与活化的Sepharose4B珠交联,制成IgG-Sepharose4B亲和层析抗体柱,亲和力常数:1.28×109(mol/L)-1,交联率:83.5%。直接从培养上清纯化uPA,纯度为96.3%,回收率:81.6%±19,纯化倍数:50倍左右,比活1.11±0.29×105。试验结果表明该法效果好,方法简单、操作方便、值得进一步研究和应用。  相似文献   

18.
大鳞副泥鳅mtDNA经11种限制性内切酶(BamHI,BglI,BglⅡ,EcoRI,HpaI,KpnI,PstI,SacI,SalI,XbaI和XhoI)单酶完全酶解获得23个酶切位点,这些酶酶切位点数依次分别是:2、7、0、3、3、0、3、1、1、2和1。通过琼脂糖凝胶电泳测定大鳞副泥鳅mtDNA平均分子量为10.33±0.22×106u(原子质量);其分子长约16720±350碱基对(bp)。采用双酶完全酶解法构建了大鳞副泥鳅mtDNA限制性内切酶酶切图谱。  相似文献   

19.
极大螺旋藻多糖IPⅡA、IPⅡB的理化特性及抗肿瘤活性研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
极大螺旋藻(Spirulinamaxima)经碱性热水抽提,酶解和Sevag法结合脱蛋白,醇沉淀得胞内多糖IPⅠ.IPⅠ经DE-52和DEAE-SephadexA-25柱层析得到组分多糖IPⅡA和IPⅡB,糖含量分别为74.9%和68.4%,IPⅡA分子量为1.3×106,IPⅡB分子量为5.0×105.以完全酸水解、薄层层析、气相层析、红外光谱、核磁共振氢谱对二者进行化学结构分析,证明均为酸性杂多糖;IPⅡA糖苷键为α型,IPⅡB中同时存在α和β型糖苷键.离体条件下,IPⅠ与血癌细胞HL60和U937分别共同培养,半固体琼脂培养法检测,结果表明,IPⅠ对二者的作用具有选择性,同时IPⅠ的促进和抑制作用均表现出一般药物所具有的剂量效应.  相似文献   

20.
胡子鲇mtDNA多态性及限制性酶切图谱   总被引:7,自引:1,他引:6  
用8种限制性内切酶对胡子鲇(ClariasfuscusLacepede)肝脏线粒体DNA(MitochondrialDNA,mtDNA)进行了分析。XhoⅠ、EcoRⅠ、PstⅠ、BamHⅠ、XbaⅠ、HindⅢ在mtDNA分子上分别有2、3、1、1、3和5个切点。胡子鲇种内存在mtDNA酶切片段长度多态性(Restrictionfragmentlengthpolymorphisms,RFLP)。经BglⅠ、BglⅡ酶解,mtDNA都出现两种酶切类型,Ⅰ型各具2个片段,Ⅱ型各具1个片段。mtDNA分子量为10.242×106u,长度约为16.68kb。用双酶解法建立了胡子鲇mtDNA的限制性酶切图谱,并对RFLP现象进行了分析。  相似文献   

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