嗜酸性乳杆菌细胞壁提取成分对小鼠小肠上皮内淋巴细胞免疫功能的影响

采用机械分离法和Ｐｅｒｃｏｌ非连续密度梯度离心法从鼠小肠提取小肠上皮间淋巴细胞（ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｎｔｒａ－ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ,ｉＩＥＬ）,应用间接免疫荧光染色法进行表面抗原表型测定;同时,应用嗜酸性乳杆菌细胞壁提取物与ｉＩＥＬ细胞共同孵育作用后,检测ｉＩＥＬ细胞的自然杀伤活性和ＩＬ—２产生情况。结果表明：ｉＩＥＬ细胞膜表面抗原的表型７３８％以上为ＣＤ８＋Ｔ细胞,且有４３８％表达ＴＣＲγδ。酸性嗜乳杆菌细胞壁提取物能增加ｉＩＥＬ细胞的自然杀伤活性,并能促进ｉＩＥＬ细胞产生ＩＬ—２。     

双歧杆菌,大肠杆菌菌体多糖iIFL激活作用的对比研究

采用ＰｅｒｃｏⅡ非连续密度梯度离心法从小鼠小肠提取小肠上皮间细胞（ｉｎｔｅａｌｉｎａｌ ｉｎｔｒａｅ」ｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ,ｉＩＥＬ）,应用双抗原标记间接免疫荧光法对其抗原表型进行测定,同时,应用有机溶剂提取的双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖与ｉＩＥＬ细胞共同孵育徨,检测ｉＩＥＬ细胞的自然系伤活性、ＩＦＮγ和ＩＬ－２产生能力。结果表明：ｉＩＥＬ细胞的表型８５．１％ＣＤ３＾＋７３．８Ｃ     

果蝇细胞凋亡核心机制的基因组比较

基因组比较研究是从基因组序列推测调控网络的主要途径。细胞凋亡信号网络是调控网络的一个典型代表。ＥＧＬ１、ＣＥＤ３、ＣＥＤ４和ＣＥＤ９及其同源蛋白质的线虫和哺乳动物构成保守的凋亡核心机制。目前果蝇细胞凋亡核心机制尚不完整,还未找到ＥＧＬ１和ＣＥＤ９类似蛋白质。通过一系列基于生物信息学的基因组比较分析,在果蝇的基因组数据库中发现了两个ＢＣＬ２／ＣＥＤ９和一个ＥＧＬ１的同源蛋白质的编码基因,并重构了果蝇     

HDL受体和肝性脂酶在肝选择性摄取HDL_2－CE中的协同作用

体外重组３Ｈ－ＣＥ－无ＡｐｏＥ－ＨＤＬ２（ｒＨＤＬ２）保持天然ＨＤＬ２生物活性。大鼠肝窦状隙细胞与ｒＨＤＬ２３７℃培养３ｈ（正常组）;细胞内吞ｃｐｍ为９９５±１４７（ｘ±Ｓ．Ｄ．,ｎ＝２）。细胞进一步９７℃培养２ｈ．释放三氯醋酸（ＴＣＡ）沉淀和ＴＣＡ上清液中ｃｐｍ为７８±３２和１２±９。Ｎ－乙酰咪唑修饰组为３３９±６２、１９±１１和９±５。肝素处理组为５４２±７８、３４±１４和９±８。实验结果提示：（１）肝窦状隙细胞通过ＨＤＬ受体内吞ＨＤＬ２摄取ＨＤＬ２－ＣＥ,并通过逆向胞饮将ＨＤＬ３排出体外．（２）肝性脂酶（ＨＬ）直接介导细胞选择性摄取ＨＤＬ２－ＣＥ,导致ＨＤＬ３生成．（３）ＨＬ和ＨＤＬ受体在介导细胞选择性摄取ＨＤＬ２－ＣＥ中具有协同作用。     

烟草细胞乙醇分解代谢能力的离体调控(英文)

报告了一些重要因子对培养在含有乙醇的培养基上的烟草细胞的乙醇分解代谢能力（ＥＣＡ）的调控效果。在供试的５种生长素和２种细胞分裂素中,ＩＢＡ４ｍｇ／Ｌ和Ｋｔ０．０５ｍｇ／Ｌ最有利于促进ＥＣＡ,而ＮＡＡ２ｍｇ／Ｌ和Ｋｔ０．０２５ｍｇ／Ｌ则最有利于支持处在乙醇胁迫下的细胞的增殖。实验中还发现提高维生素浓度有利于细胞的ＥＣＡ。通过将细胞从低乙醇浓度的培养基转移到较高乙醇浓度的培养基中,能够诱导细胞耐受更高浓度的乙醇并增强细胞的ＥＣＡ。研究结果可以应用于制备适合分离乙醇分解代谢途径中的酶的烟草细胞材料。     

小鼠2—细胞期经电融合后的早期胚胎发育

小鼠２－细胞期经电融合后的早期胚胎发育小鼠,电融合,细胞数,核型,四倍体胚胎小鼠２细胞期经电融合后的早期胚胎发育ＥＡＲＬＹＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＯＦＭＯＵＳＥＥＭＢＲＹＯＳＰＲＯＤＵＣＥＤＢＹＥＬＥＣＴＲＯＦＵＳＩＯＮＡＴ２ＣＥＬＬＳＴＡＧＥ关键...     

生长抑素对羟自由基损伤的人胃粘膜上皮细胞系GES—1的影响

目的和方法：采用人胃粘膜上皮细胞系ＧＥＳ１细胞传代培养技术,利用Ｆｅ２＋与Ｈ２Ｏ２反应生成的羟自由基（ｈｙｄｒｏｘｙｌｒａｄｉｃａｌ,ＯＨ·）建立细胞损伤模型,探讨ＯＨ·损伤人胃粘膜细胞的机制,观察生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ,ＳＳ）对ＧＥＳ１细胞抗ＯＨ·损伤的影响。结果：（１）ＯＨ·可直接损伤ＧＥＳ１细胞,表现为细胞存活率下降而细胞乳酸脱氢酶（ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ,ＬＤＨ）漏出量增多;预先在细胞培养液中加入ＯＨ·特异性清除剂二甲基亚砜（５ｍｍｏｌ／Ｌ）,可预防该损伤。预先加入ＳＳ（０．０１ｍｇ／Ｌ,０．１ｍｇ／Ｌ,１．０ｍｇ／Ｌ,１０ｍｇ／Ｌ）对细胞存活率和细胞ＬＤＨ漏出量无影响;（２）加入ＯＨ·后,细胞丙二醛（ＭＤＡ）、氧化型谷胱甘肽（ＧＳＳＧ）含量上升而还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量下降。以ＳＳ０．１ｍｇ／Ｌ,１．０ｍｇ／Ｌ,１０ｍｇ／Ｌ预处理,可部分减轻上述改变。结论：ＯＨ·可直接损伤ＧＥＳ１细胞,其机制与破坏细胞的巯基稳态及加重细胞的脂质过氧化程度有关;ＳＳ可通过维持细胞的巯基稳态,部分减轻ＯＨ·所致的ＧＥＳ１细胞脂质过氧化程度。     

烟草细胞乙醇分解代谢能力的离体调控

报告了一些重要因子对培养在含有乙醇的培养基上的烟草细胞的乙醇分解代谢能力（ＥＣＡ）的调控效果。在供试的５种生长毒和２种细胞分裂素中,ＩＢＡ ４ｍｇ／Ｌ和Ｋｔ０．０５ｍｇ／Ｌ最有地促进ＥＣＡ,而ＮＡＡ２ｍｇ／Ｌ和Ｋｔ０．０２５ｍｇ／Ｌ则最有利于支持处在乙醇胁迫下的细胞的增殖。实验中还发现提高维生素浓度有利于细胞的ＥＣＡ。通过将细胞从低乙醇浓度的培养基转移到较高乙醇浓度的培养基中,能够诱导细胞耐受更高     

EGFR反义脱氧寡核苷酸及其硫代修饰片段抑制人肝癌细胞系BEL…

本文旨在研究针对ＥＧＦＲ ｍＲＮＡ的反义寡核苷酸片段对ＢＥＬ－７４０４细胞ＥＧＦＲ基因表达及其对细胞生长的影响。合成了互补于ＥＧＦＲ基因５’起始编码区的２１聚脱氧寡核苷酸（ＯＤＮｓ）。实验结果显示,３．２ｕｍｏｌ／Ｌ ＯＤＮｓ明显抑制ＢＥＬ－７４０４细胞生长,「３Ｈ」Ｔｄｒ掺入抑制试验显示其对细胞ＤＮＡ合成的抑制作用表现剂量依赖性;密度扫描分析显示ＯＤＮｓ处理６、２４ｈ后,肝癌细胞ＥＧＦＲ ｍＲＮ     

高分化及低分化鼻咽癌细胞株中Epstein－Barr病毒潜伏感染膜蛋白（LMP1）基因的原位杂交与克隆及序列分析

应用染色体原位杂交、ＰＣＲ扩增、克隆及核苷酸序列分析等方法,分析了ＣＮＥ１和ＣＮＥ３细胞株中的潜伏感染膜蛋白（ＬＭＰ１）基因。ＣＮＥ１是来自我国东北的高分化鼻咽癌细胞株,ＣＮＥ３是来自广西的低分化鼻咽癌细胞株。染色体原位杂交结果表明,ＣＮＥ１细胞中ＬＭＰ１基因存在于细胞核内,整合在第一号染色体上,ＣＮＥ３中ＬＭＰ１基因则随机存在于细胞核内及多条染色体上。用ＰＣＲ方法分别从ＣＮＥ１及ＣＮＥ３中扩增得到了ＬＭＰ１基因片段（外显子３）,核苷酸序列分析证明,来自ＣＮＥ１的ＬＭＰ１与来自Ｂ９５－８细胞的ＬＭＰ１核苷酸序列同源性极高,达９９．５％,而ＣＮＥ３的ＬＭＰ１基因与Ｂ９５－８的ＬＭＰ１基因同源性为９３％。     

稀土元素镧在植物细胞生理研究中应用的进展

稀土元素镧在植物细胞生理研究中应用的进展刘敏,周世恭（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＡＤＶＡＮＣＥＳＩＮＴＨＥＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＲＡＲＥＥＡＲＴＨＥＬＥＭＥＮＴ──ＬＡＮＴＨＡＮＵＭＴＯＰＬＡＮＴＣＥＬＬＰＨＹＳＩＯＬＯＧＩＣＡＬＲ...     

FEN—1基因反义阻断细胞株（FL—FEN—1^—）的建立

ＦＥＮ－１是一咱结构特异性核酸酶,它在ＤＮＡ复制和修复过程中都起着重要的作用。将ＦＥＮ－１基因的ＮｃｏＩ－ＢａｍＨＩ片段反向克隆到哺乳动物细胞重组表达质粒ｐＭＡＭｎｅｏＡｍｐ＾－中,得到ＦＥＮ－１反义表达质粒ｐＭＡＭｎｅｏＡｍｐ＾－ＦＮＢ＾－,并转染ＦＬ细胞,经Ｇ４１８筛选后,获得ＦＥＮ－１基因表达被阻断的哺乳动物细胞ＦＬ－ＦＥＮ－１＾－。对细胞生长曲线的测定发现,ＦＬ－ＦＥＮ－１＾－在地塞米松的     

用无血清培养基在填充床生物反应器生产 rHuEPO

在填充床生物反应器用含５％ＦＢＳ的ＤＭＥＭ：Ｆ１２培养基培养产重组人促红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）的细胞Ｃ_２８～１０ｄ后,使用自制的无血清生产培养基（ＳＦＭｐ）生产ｒＨｕＥＰＯ。ＳＦＭｐ培养基既能维持细胞生长,又能生产ＥＰＯ,也便于纯化分离ｒＨｕＥＰＯ。使用填充床生物反应器培养细胞,能维持培养２０～２５ｄ,ｒＨｕＥＰＯ表达水平达１２～２８.４ｍｇ／Ｌ之间,反应器的产率达到７１.０ｍｇ／Ｌ／ｄ,比滚瓶的产率增加１２～１４倍。葡萄糖最高消耗量达到２１ｇ／Ｌ／ｄ,细胞培养密度最高达到３.０×１０^７／ｍｌ以上,每次可收无血清培养上清８０～８７Ｌ。由于细胞被固定在聚酯片上,培养上清中脱落细胞很少。观察了反应器的乳酸和氨的含量,其结果表明乳酸和氨含量分别低于３.５ｇ／Ｌ和５ｍｍｏｌ／Ｌ,不影响产物的表达。经过多批培养和生长ｒＨｕＥＰＯ的结果表明,自行配制的ＳＦＭｐ培养基在该反应器能有效地维持细胞生长和生产ｒＨｕＥＰＯ。     

极低频率（ELF）磁场对细胞生长周期分布谱的影响及其机理的计算机模拟分析

测定在各种温度条件下和在ＥＬＦ（极低频率）磁场作用下细胞生长周期分布谱的变化。实验结果表明温度不仅能使周期分布谱的离散性发生改变,而且也能使谱的峰值产生位移,而ＥＬＦ磁场只能使周期分布谱的离散性发生变化,对谱的峰值没有显著影响。这一差异是由于温度和ＥＬＦ磁场对细胞生长产生影响的机理不同。用计算机模拟不同机理对细胞生长周期分布谱的影响与我们早先提出的机理相吻合,即温度影响细胞内各种生长因子、生物离子的活性,而ＥＬＦ磁场则可能通过对细胞膜的影响使细胞内的细胞生长必不可少的生物离子的浓度发生变化。     

EB病毒转化Hu－TLC－SCID小鼠脾细胞的实验研究

利用ＥＢ病毒转化可产生较高水平人ＩｇＧ和特异性抗２型登革病毒人抗体的Ｈｕ－ＴＬＣ－ＳＣＩＤ小鼠脾细胞,通过免疫组化、免疫荧光和ＰＣＲ法检测转化细胞的人Ｂ细胞表面标志、ＥＢ病毒抗原和ＥＢ病毒基因。结果表明,被转化的Ｈｕ－ＴＬＣ－ＳＣＩＤ小鼠脾细胞能继续产生抗２型登革病毒的特异性人抗体,并具有人Ｂ细胞的、ＳｍＩｇＧ标志及ＥＢ病毒潜伏膜蛋白－１（ＬＭＰ－１）基因,可表达ＬＭＰ－１和ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ）。     

LIF基因转染的ES细胞生长与分化特性的研究

我们将人Ｄ型ＬＩＦｃＤＮＡ以正反两种方向分别克隆到载体ＰＫＣＲ３,并引入ｎｅｏ基因,构建成ｐＳＶＬＤ和ＰＳＶＬＤ质粒,按磷酸钙沉淀法分别转染ＥＳ－５胚胎干细胞,,经Ｇ４１８和没浓度ＬＩＥ条件培液共同筛选,,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析以及ＥＳ－５细胞集落分化抑制能力测定,建立了过度表达分泌ＬＩＦ的ＥＳＬ（＋）细胞株和表达外源反义ＬＩＦＲＮＡ的ＥＳＬ（－）细胞株。我们发现,我们发现,ＥＳＬ     

脑啡肽对小鼠神经母细胞瘤细胞脂褐素影响的实验研究

本文应用小鼠神经母细胞瘤细胞Ａ２（ＮＢ－Ａ２）无血清培养建立的神经细胞老化实验研究模型,以显微荧光分光光度术测定单个细胞内脂褐素荧光值作为细胞老化指标,观察了脑啡肽（ＬＥ）对ＮＢＡ２细胞内脂褐素荧光值的影响。结果表明ＬＥ可显著降低细胞内的脂褐素荧光值（Ｐ〈０．０１）。提示ＬＥ可延缓ＮＢＡ２细胞的老化进程。     

EB病毒转化Hu—TLC—SCID小鼠脾细胞的实验研究

利用ＥＢ病毒转化可产生较高水平人ＩｇＧ和特异性抗２型登革病毒人抗体的Ｈｕ－ＴＬＣ－ＳＣＩＤ小鼠脾细胞,通过免疫组化、免疫荧光和ＰＣＲ法检测转化细胞的人Ｂ细胞表面标志、ＥＢ病毒抗原和ＥＢ病毒基因。结果表明,被团体的Ｈｕ－ＴＬＣ－ＳＣＩＤ小鼠脾细胞能继续产生抗２型登革病毒的特异性人抗体,并具有人Ｂ细胞的ＣＤ２０＾＋、ＳｍＩｇＧ标志及ＥＢ病毒潜伏膜蛋白－１（ＬＭＰ－１）基因,可表达ＬＭＰ－１和ＥＢ病毒核     

人血树突状细胞培养后的形态及抗肿瘤活性

观察新鲜分离和经体外培养３６小时的人外周血树突状细胞ＤＣ。和ＤＣ３６的形态学及其对淋巴因子与植物血凝素激活的杀伤细胞（ＬＰＡＫ细胞）体外诱导人肝癌细胞株ＢＥＬ┐７４０２的促进作用。形成学观察用免疫细胞化学法。抗肿瘤实验分为三大组：（１）Ｌ组（ＢＥＬ┐７４０２＋ＬＰＡＫ）,（２）ＬＤ３６组（ＢＥＬ┐７４０２＋ＬＰＡＫ＋ＤＣ３６）,（３）ＬＤ０组（ＢＥＬ┐７４０２＋ＬＰＡＫ＋ＤＣ０）。各组均采用ＬＰＡＫ与ＢＥＬ┐７４０２为５∶１和１０∶１两种效靶比。培养４８小时后用中性红摄入比色法检测ＬＰＡＫ细胞的杀伤活性。结果显示,ＤＣ３６的形态以具有细长突起者为多,与ＤＣ０主要为园形或具有短而钝突起的形态有明显差别。各组的细胞毒活性依次为：ＬＤ３６组＞ＬＤ０组＞Ｌ组（Ｐ＜０．０１）,并随效靶比增高而相应增强。这表明新鲜分离的人外周血ＤＣ在体外经３６ｈ培养后,不仅在形态上成熟,而且抗肿瘤活性也明显增强     

羟基脲促进HFL细胞分化机制的研究

以往研究表明,用羟基脲诱导人红白血病细胞（ＨＥＬｃｅｌｌ）后,能促进成年型β－珠蛋白基因表达,使ＨＥＬ细胞趋向终末分化,本文试图进一步揭示羟基脲诱导ＨＥＬ细胞分化的分子机制,ＧＭＳＡ与Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析结果显示,随着羟基脲诱导ＨＥＬ细胞时间延长,细胞核内的ＧＡＴＡ－１转录因子的含量增加,它与β－珠蛋白基因５旁侧ＤＮＡ序列内一个正调控序列（ＰＣＲ：－２２３～－１９４ｂｐ）以及人工合成的ＧＡＴＡ／