Hib在调理过程中补体成分C_3的外膜蛋白结合位点

Ｈｉｂ在调理过程中补体成分Ｃ_３的外膜蛋白结合位点用从正常人血清（ＮＨＳ）分离出的不同浓度的ＩｇＧ抗体调理Ｉ（１２５）标记的ｂ型流感嗜血杆菌（Ｈｉｂ）菌体,分离纯化出ＩｇＧ－外膜蛋白（ＯＭＰ）复合物。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和放射免疫沉淀试验进行分析,结果...     

科学家鉴定了与晚年发作Alzheimer氏病有关的基因

科学家鉴定了与晚年发作Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ氏病有关的基因Ｄｕｋｅ大学（Ｄｕｒｈａｍ,ＮＣ）的研究人员查明了一种基因,该基因的存在增高了晚年发作Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ氏病（ＡＤ）的危险率。该基因叫作ＡＰＯＥ－４,是在１９号染色体上找到,为ａｐｏＥ－４蛋白编码...     

鸡减蛋综合征病毒（EDSV）主要蛋白的结构分析

鸡减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）中国株ＡＡ－２基因组全长为３２８３８ｂｐ,其编码病毒主要结构蛋白（５２／５５Ｋ、Ⅲａ、五邻体、ｐⅦ、ｐⅥ、六邻体、１００ｋ、ｐⅧ以及纤维蛋白等）的基因依次排列在基因组的中部,Ｅ２区编码ＤＮＡ结合蛋白、ＤＮＡ多聚酶、末端前体蛋白及ＩＶａⅡ的基因也分别排列在ＥＤＳＶ基因的负链上。对这些蛋白的氨基酸序列进行同源性比较后发现,ＥＤＳＶ的主要蛋白与羊腺病毒（ＯＡＶ）同类物存在不同     

人肝癌组织中的一个Lis1基因的阅读框移码突变

将ＧＳＴ融合蛋白表达与蛋白质截短检测法（ＰＴＴ）法相结合,检测Ｌｉｓ１基因在肝癌组织中的阅读框移码突变。即从肝癌组织中通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增的Ｌｉａ１基因克隆人ＧＳＴ融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ０１,并于大肠杆菌ＤＨ５α中进行表达。通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳发现肝癌组织中有截短的ＧＳＴ－Ｌｉｓ１融合蛋白,大小为３３ＫＤ,而全长融合蛋白大小应为７１ＫＤ。经测序验证,发现产生截短蛋白的Ｌｉａ１基因在第１６３位     

甲状旁腺瘤的癌基因——PRAD1

甲状旁腺瘤的癌基因——ＰＲＡＤ１周剑涛（湖北省黄冈市卫生学校,４３６１００）关键词ＰＲＡＤ１细胞周期蛋白Ｄ１研究证明,甲状旁腺瘤的癌基因ＰＲＡＤ１就是细胞周期蛋白Ｄ１（ｃｙｃｌｉｎＤ１）的基因。周期蛋白通过多种途径参与细胞转化及癌变。ｃｙｃｌｉｎＤ１...     

流感嗜血杆菌的分型研究

目的分析同济医院分离的流感嗜血杆菌的生物学分型及荚膜基因分型,了解本地区分离的流感嗜血杆菌的主要流行株。方法2012年1月1日至2012年12月31日从华中科技大学同济医学院附属同济医院分离流感嗜血杆菌100株。根据脲酶、吲哚和鸟氨酸脱羧酶试验对流感嗜血杆菌进行传统的生物学分型,分为Ⅰ～Ⅷ八个生物型。回顾患者病史资料,分析生物学分型和流感嗜血杆菌所引起的疾病之间的关系。用流感嗜血杆菌荚膜编码基因（bexA）和a—f型特异性荚膜基因设计引物,采用PCR技术对流感嗜血杆菌进行荚膜基因检测。通过生物学分型和荚膜基因分型结果的比对,探讨两者之间的关联。结果分离的100株流感嗜血杆菌生物学分型结果如下：Ⅲ型6株,Ⅳ型28株,Ⅴ型1株,Ⅵ型54株,Ⅶ型11株。未分离到Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅷ型。分析患者的临床诊断,发现主要流行株Ⅵ型流感嗜血杆菌主要引起患者肺炎（包括支气管肺炎和新生儿肺炎）和支气管炎（包括毛细支气管炎和喘息性支气管炎）。荚膜基因分型结果显示,未分离到b型和b-型流感嗜血杆菌。共分离到1株f型,其余99株均为无荚膜抗原的不可分型流感嗜血杆菌。生物学分型和荚膜分型之间无明显的相关性。结论该院分离的流感嗜血杆菌主要为生物型Ⅵ型。回顾患者病史,发现Ⅵ型主要引起肺炎和支气管炎。荚膜基因分型显示,本地区分离的流感嗜血杆菌主要为不可分型流感嗜血杆菌。生物学分型和荚膜基因分型之间无明显相关性。     

重组人肿瘤坏死因子α和白细胞介素6融合基因的构建和表达

本文利用ＰＣＲ技术和基因定位突变技术,将编码人肿瘤坏死因子α（ｈＴＮＦα）和白细胞介素６（ｈＩＬ－６）成熟肽的基因通过中间接头连接成编码单一蛋白的基因,构建了融合蛋白表达载体ｐＢＩＴ,并在大肠杆菌中得到了表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的电泳胶薄层扫描显示,融合蛋白的表达量是菌体总蛋白量的２０％,其分子量约为３７ｋＤ。活性检测证实,融合蛋白既有ＴＮＦ活性,又有ＩＬ－６活性。     

DnaJ—like基因在不同环境胁迫下的表达研究

ＰｖＳＲ６（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ ｓｔｒｅｓｓ－ｒｅｌａｔｅｄ）基因编码一种菜豆ＤｎａＪ－ｌｉｋｅ蛋白。Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ ｂｌｏｔ结果表明：ＰｖＳＲ６基因在未处理的菜豆叶片中表达较少,重金属（Ｈｇ＾２＋和Ｃｄ＾２＋）、机械损伤、ＵＶ、高温和水杨酸等环境胁迫能强烈地促进其基因的转录,推测ＤｎａＪ－ｌｉｋｅ蛋白在保护细胞膜和酶蛋白的结构和功能及提高植物的抗逆性方面有重要作用。     

人α－肿瘤坏死因子基因的高效表达

用人工合成的α－肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）基因构建了五个不同的表达质粒,它们不同之处是ＳＤ序列与起始密码子ＡＴＧ间距离（Ｄ）各异。计算机模拟计算出翻译起始区域（ＴＩＲ）中二级结构的最小生成自由能,以（Ｄ）为６个核苷酸时最小（绝对值）。它的表达效率也最高,产物ＴＮＦ－α可达菌体总蛋白的６０％。密码子的选用对表达效率有很大的影响,故人工合成ＴＮＦ－α基因（选用大肠杆菌偏爱的密码子）的表达效率高于ｓｃ－     

人肿瘤坏死因子受体I死亡域融合蛋白基因的克隆与表达

通过设计４个引物进行重叠ＰＣＲ,由此克服了人肿瘤坏死因子受体Ｉ死亡域与氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）的融合蛋白基因（ＤｄＬｃａｔ）。该融合蛋白基因经测序,证明与设计的序列相同。构建成的重组表达质粒ｐＬＴ１０ＤｄＬｃａｔ转化大肠杆菌后发酵,ＩＰＴＧ诱导２ｈ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定ＤｄＬｃａｔ蛋白质的分子量为３９ｋＤ。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹实验进一步作了鉴定。表达产物大部分为包涵体。ＤｄＬｃａｔ经Ｑ－Ｓｅｐｈａ     

熊猫等动物犬瘟热病毒附着蛋白基因的遗传多样性

为了研究犬瘟热病毒（ｃａｎｉｎｅ ｄｉｓｔｅｍｐｅｒ ｖｉｒｕｓ,ＣＤＶ）大熊猫株、小熊猫株和长春犬株附着蛋白（Ｈ）基因的遗传这异,对Ｈ基因进行了序列测定。上述３个ＣＤＶ毒株的Ｈ基因全长均为１９４６ｂｐ,开放阅读框架（ＯＲＦ）始于２１－２３位的ＡＴＧ,终止于１８４２－１８４４位的ＴＧＡ,编码６０７个氨基酸。与ＧｅｎＢａｎｋ中１５个ＣＤＶ株推导的Ｈ蛋白氨基酸序列比较发现,１６个野毒株潜在的Ｈ－联糖基     

水稻10kDa富硫醇溶蛋白基因家族中一个假基因拷贝的核苷酸序列分析

本研究以中花１０号水稻为材料,利用ＰＣＲ技术扩增并克隆１０ｋＤａ富硫醇溶蛋白基因的成熟肽编码区。对扩增产物的核苷酸序列分析表明：本扩增产物长３８０ｂｐ;与Ｍａｓｕｍｕｒａ等人［１］发表的序列相比,有９４．５％的同源性,与我们以前发表的中花１０号水稻１０ｋＤａ富硫醇溶蛋白基因的序列相比,有９９．５％的同源性。本扩增片段第１５０位与１５１位间的单碱基（Ｔ）插入导致了该片段编码区的移码突变,并在其后的第１６２至１６４位处形成了一琥珀终止子（ＴＡＧ）。这表明水稻１０ｋＤａ富硫酸蛋白基因家族中确实存在不正常的假基因拷贝。     

p16抑癌基因和肿瘤

ｐ１６基因（又名ＭＴＳ１,多肿瘤抑制基因）所编码的蛋白是细胞周期蛋白Ｄ／ＣＤＫ激酶的抑制蛋白,在细胞周期的调控中起着重要作用,能和ＣＤＫ４结合,抑制ＣＤＫ４／ｃｙｃｌｉｎＤ复合物的催化活性。当ｐ１６基因发生突变和缺失,就会丧失对细胞分裂的调控,导致细胞的异常增殖,最终形成肿瘤。研究表明：ｐ１６基因的突变和缺失,和许多肿瘤的发生有关。ｐ１６基因是一种新的肿瘤抑制基因。     

减蛋综合征病毒100K蛋白基因的克隆与序列分析

用常规方法提取减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）中国分离株（ＡＡ２株）病毒ＤＮＡ,分别构建了限制性内切酶ＨｉｎｄⅢ、ＳｐｈⅠ、ＰｓｔⅠ水解片段的全基因文库,并对其中１００Ｋ蛋白基因的序列进行了分析。ＥＤＳＶ１００Ｋ蛋白基因位于减蛋综合征病毒基因组５５．７～６４．８物理图谱单位（ｍ．ｕ）,共２０９１个核苷酸（ｎｔ）,其编码产物由６９６个氨基酸（ａａ）组成,推测其分子量为７７．７ｋＤ。编码蛋白氨基酸同源性分析表明,ＥＤＳＶ１００Ｋ蛋白与人腺病毒（Ａｄ２、Ａｄ５、Ａｄ１２、Ａｄ４１）、Ⅰ群禽腺病毒（ＣＥＬＯ和ＦＡＶ１０）的同源性为３２．３～３４．４％之间,而与羊腺病毒（ＯＡＶ）的同源性达到５６．４％。     

紫外线辐射对菜豆幼苗某些胁迫响应基因表达的影响

报道了ＵＶ－Ｃ辐射对菜豆（ＰｈａｓｅｏｌｕｓｖｕｌｇａｒｉｓＬ．）ＰＲＰ、ｄｅｈｙｄｒｉｎ、ＰＲ蛋白、ｐｏｌｙｕｂｉｑｕｉｔｉｎ和ＤａｎＪ－ｌｉｋｅ蛋白等胁迫响应基因表达的影响。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交结果表明：ＵＶ辐射能强烈地诱导ＰＲ蛋白基因的表达,并能促进ＰＲＰ、ｐｏｌｙｕｂｉｑｕｉｔｉｎ和ＤａｎＪ－ｌｉｋｅ蛋白等基因的转录,而对ｄｅｈｙｄｒｉｎ基因的转录有抑制作用,这些防御蛋白共同作用可能对于保护细胞免受ＵＶ伤害和维持细胞的正常代谢有重要作用。     

甜菜坏死黄脉病毒内蒙分离物RNA3序列分析及编码25kD蛋白基因在大肠杆菌中的表达

以甜菜坏死黄脉病毒（ＢＮＹＶＶ）内蒙分离物的总ＲＮＡ为模板,通过反转录－ＰＣＲ扩增获得ＢＮＹＶＶＲＮＡ３全长ｃＤＮＡ。将其克隆到ｐＧＥＭ－７Ｚｆ（＋）上,得到重组质粒ｐＧＢＹ５６。序列分析结果表明,内蒙分离物ＲＮＡ３基因组全长为１７７５ｎｔ,其中包含３个开放阅读框架,分别编码２５ｋＤ蛋白、４．６ｋＤ蛋白和一种由５９个氨基酸组成的Ｎ蛋白。与法国Ｆ２分离物、德国Ｇ１分离物和日本Ｓ分离物相比,其核苷酸序列的同源性分别为９６．４％、９６．８％和９７．３％。将２５ｋＤ蛋白编码基因克隆到ｐＪＷ２上,构建了该基因的原核表达载体。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析结果表明,２５ｋＤ蛋白基因在Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中经温度（４２℃）诱导后,可特异地表达２５ｋＤ蛋白     

紫云英根瘤菌159中两个结构和功能不同的nodD基因

紫云英根瘤菌１５９含２个拷贝的ｎｏｄＤ基因。核苷酸序列测定表明由ｎｏｄＤ１和ｎｏｄＤ２基因所推定编码的ＮｏｄＤ１和ＮｏｄＤ２蛋白其氨基酸顺序同源性为６９％。功能分析显示,在紫云英根瘤菌中ｎｏｄＤ１和ｎｏｄＤ２基因均能自主表达。由ｎｏｄ１推定的ＮｏｄＤ１能与紫云英种子浸出液（诱导物）共同激活ｎｏｄ基因的表达,而由ｎｏｄＤ２Ｒ推定的Ｎｏｄ２则无此功能。     

Duchenne肌营养不良的基因治疗进展

Ｄｕｃｈｅｎｎｅ肌营养不良（ＤＭＤ）基因治疗的目的是补充骨骼肌和心肌内已经缺失的抗肌萎缩蛋白，本文对ＤＭＤ基因治疗中目的基因的选择，基因靶向，载体的选择，目的基因的运送途径等方面作一综述。     

水稻矮缩病毒最外层外壳蛋白基因（S2）cDNA克隆,序列分析及其在大？…

从水稻矮缩病毒（Ｒｉｃｅｄｗａｒｆｖｉｒｕｓ,ＲＤＶ）中国福建分离物中克隆分离了最外层外壳蛋白基因（Ｓ２）全长ｃＤＮＡ并对其进行序列分析,结果表明ＲＤＶＳ２ｃＤＮＡ全长３５１２ｂｐ,仅含一个３３４８ｂｐ的阅读框架,编码一人含有１１１６个氨基酸的蛋白（Ｐ２）。与基因库中已知基因序列比较,发现它与日本ＲＤＶＨ株系相应片段的核苷酸和氨基酸同源率分别为９４．６％和９５．４％与轮状病毒ＶＰ２氨基酸序列有一定     

丙型肝炎病毒非结构区NS4b基因片段的克隆和表达

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术和ＤＮＡ体外重组方法,克隆出５７９ｂｐ的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ４ｂ基因片段,插入到原核高效表达载体ｐＥＴ－２８ａ中,构建重组质粒ｐＥＴ／ＮＳ４ｂ,转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）菌株,经ＩＰＴＧ诱导培养后,获得了目的蛋白的高效表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示在３０ｋＤ处有一条表达的目的蛋白区带。通过固定化金属配体亲和层析（ＩＭＡＣ）纯化目的的蛋白,ＥＬＥＳＡ检测结果表