生物活性肽——蛋氨酸脑啡肽的免疫

源自肾上腺前脑啡肽原的具有吗啡样生物活性的内源性神经肽蛋氨酸脑啡肽(methionine enkephalin,MENK),由５个氨基酸残基Tyr Gly Gly Phe Met组成,与G蛋白偶联的７次跨膜特异性受体结合后发挥不同的生物学功能。目前,对蛋氨酸脑啡肽的作用及其机制研究已经取得了很大进展。本文就MENK对于免疫系统的调节及其对肿瘤、自身免疫病、艾滋病等免疫系统相关疾病的治疗作用予以综述。     

生物活性肽——蛋氨酸脑啡肽治疗白血病一例报告

蛋氨酸脑啡肽是内源性阿片样物质。它是由5个氨基酸残基组成的多肽,其第5位氨基酸残基为蛋氨酸。通过抽取病人静脉血,分离淋巴细胞,进行体外扩增激活,然后回输患者体内,患者外周血白细胞计数为3．6×10^9／L,血红蛋白122g/L,血小板116×10^9／L,异常淋巴细胞消失,幼粒细胞消失。骨髓象示粒细胞系统、红细胞系统增生活跃,各阶段细胞比值及形态大致正常;淋巴细胞比值减低,形态正常;造血功能恢复。由此可见,蛋氨酸脑啡肽体外激活免疫系统并回输体内作为一种新的治疗白血病的方法,具有广泛的应用前景。     

生物活性肽-蛋氨酸脑啡肽对成骨细胞增殖的影响

蛋氨酸脑啡肽（Methionine Enkephalin,MENK）作为内源性物质,通过与阿片受体结合,发挥阿片样物质的生物学作用。研究表明,MENK在成熟的骨组织和成骨细胞中均有分布,并且在成骨细胞表面发现了阿片受体。实验旨在进一步研究MENK对成骨细胞增殖的影响。体外培养MC3T3-E1成骨细胞,MTT方法检测MENK对成骨细胞增殖的影响。结果表明,10-7、10-8、10-9mol/L的MENK对成骨细胞的增殖具有促进作用（P〈0.05）。提示MENK可在骨缺损疾病中发挥促进骨组织重建的作用。     

蛋氨酸脑啡肽抑制人胃癌细胞BGC823增殖作用及免疫调节机制

采用不同浓度梯度的蛋氨酸脑啡肽(methionine enkephalin,MENK)体外作用于人胃癌细胞BGC823后,探讨对其增殖影响及其作用机制,为胃癌的免疫治疗提供理论依据。体外培养人胃癌细胞株BGC823,PCR检测阿片受体OGFr的表达;用不同浓度(0、1、2、3、4 mg/mL)的MENK体外作用于BGC823细胞24、48、72、96 h后,MTS检测MENK对其增殖影响;流式细胞术和Annexin V-FITC/PI双染法检测4 mg/mL MENK体外处理48、72 h后BGC823细胞凋亡变化。结果显示,人胃癌BGC823细胞有阿片受体OGFr的表达;MENK可抑制BGC823细胞增殖,且随着剂量的增加和时间的延长,其抑制作用逐渐增强(P0.05);4 mg/mL MENK48 h处理组与空白组相比细胞凋亡率增加,72 h处理组与48 h处理组结果一致(P0.05)。结果表明,MENK可抑制BGC823细胞增殖,具有显著的剂量依赖性和时间依赖性,且可通过诱导细胞凋亡抑制BGC823细胞的增殖。     

食源性生物活性肽免疫调节功能的研究

生物活性肽通常用来表示生物进行生命活动过程中起到调控作用的化学物质,它在机体内发挥了一系列作用。肽由相应的蛋白质所组成,在化学上通过电解能够获取蛋白水解物质,对免疫系统具有极大的调节作用。最近,因为其制备的原材料易于获取且其效用都非常显著,科学家们纷纷将调查研究的目光锁定其中。本研究对食源性生物活性肽的吸收机制、常见种类、制备方法以及研究现状进行了综述,并对其发展前景进行了展望。     

生物活性肽的辐射防护作用研究进展

对多种生物活性肽的辐射防护作用的研究进展进行了综述，为天然辐射防护剂的研发及临床应用提供科学依据。     

蛋氨酸脑啡肽—阿片受体激活免疫细胞抗肿瘤活性的研究进展

蛋氨酸脑啡肽(MENK)是人体中的一种神经递质,其阿片受体广泛存在于免疫细胞表面。MENK与阿片受体相结合,通过调节cAMP-PKA信号通路、Ca2+-钙调蛋白、蛋白激酶C等多种物质的表达,参与到免疫细胞的成熟分化。进一步研究提示,适当剂量的MENK通过激活T细胞、NK细胞、LAK细胞等发挥抗肿瘤的作用。此外,MENK-阿片生长因子受体(OGFr)通路的过表达,直接抑制肿瘤发展与血管生长。     

血管活性肠肽的免疫调节作用

血管活性肠肽作为神经和内分泌系统中一种多功能的神经递质和神经调节因子,在上述两个生理系统中发挥重要的调节作用;同时也对机体免疫系统起着重要的作用,尤其是在局部黏膜免疫中起着一定的调节作用。血管活性肠肽通过它的两个受体VPAC1和VPAC2发挥生物效应。     

蛋氨酸脑啡肽质量标准研究

建立了蛋氨酸脑啡肽的质量标准。采用液相色谱-质谱联用仪检测蛋氨酸脑啡肽分子量和鉴别蛋氨酸脑啡肽的各氨基酸组成,反相高效液相色谱测定蛋氨酸脑啡肽含量。蛋氨酸脑啡肽分子量为573.7,氨基酸组成为Tyr-Gly-Gly-Phe-Met。蛋氨酸脑啡肽质量浓度在7~280 mg/L(r=0.999 8)内线性关系良好,平均回收率为98.54%,RSD为0.89%。所建立的方法科学,可靠,重复性好。可准确地对蛋氨酸脑啡肽进行定性定量检测。     

细胞生物活性肽-蛋氨酸脑啡肽对小鼠CD4~+T细胞mRNA的影响

从基因水平探讨蛋氨酸脑啡肽对小鼠CD4'T细胞mRNA转录的影响。6～8周龄BALB/c雌性小鼠体内、外不同浓度MEK刺激。采用RT-PCR技术检测mRNA,所得不同浓度MEK刺激的CD4+T细胞mRNA和β-actin条带密度比值作为相对表达强度,所得数据采用SPSS11.5软件进行统计分析。4mg/mLMEK体内刺激及10-9～10-12mol/mL的MEK体外刺激促进小鼠CD4'T细胞mRNA转录;10-1～10-8mol/mL的MEK抑制小鼠CD4+T细胞mRNA的转录。10-13～10-14mol/mL的MEK对小鼠CD4'T细胞mRNA的转录无明显变化。适量浓度的MEK体内、外刺激能促进小鼠CD4+T细胞mRNA转录的高效表达。     

蛋氨酸脑啡肽对免疫系统恢复作用的研究

采用固相合成法合成蛋氨酸脑啡肽,制备成注射液。对经放化疗后免疫系统受到伤害的晚期肿瘤志愿者进行治疗,经静脉滴注15 d。患者免疫系统指标全面迅速恢复,淋巴细胞亚群间比例趋于合理,证明蛋氨酸脑啡肽可以用于癌症患者的免疫系统的恢复治疗。     

线粒体损伤相关模式分子与宿主免疫调节

线粒体是真核细胞至关重要的细胞器,参与机体细胞能量代谢和细胞凋亡等多种生物学过程。线粒体还参与机体的天然免疫反应的调节。线粒体不仅可以作为病毒免疫反应的载体,还可以通过产生ROS参与抗菌反应。线粒体受到损伤、刺激后,可释放mtDNA,TFAM,ROS,ATP,心磷脂和甲酰肽等内容物。这些分子可以作为损伤相关模式分子(damage associated molecular patterns, DAMPs)被模式识别受体识别,从而参与宿主的免疫调节。研究表明,线粒体已成为内源性DAMPs的重要来源,在先天性免疫应答以及疾病进展过程中发挥着重要的作用。本文就线粒体来源的损伤相关模式分子在机体免疫调节中的作用进行综述。     

高压静电场对雏鸡细胞免疫功能及其调节的影响

应用细胞培养技术和四甲基偶氮唑盐（MTT）测定法对高压静电场照射雏鸡血液和免疫器官的T细胞对刀豆蛋白（ConA）的增殖反应及其白细胞介素-2（IL-2）诱生活性的动态变化进行了较全面系统的研究.结果发现,高压正静电场照射雏鸡血液和免疫器官的T细胞增殖功能及其IL-2诱生活性均明显高于高压负静电场照射雏鸡和对照雏鸡;而高压负静电场照射雏鸡血液和免疫器官的上述各项被检指标均不同程度的低于对照雏鸡.表明高压正静电场照射对雏鸡血液和免疫器官的细胞免疫功能及其调节具有促进作用,而高压负静电场照射可使雏鸡血液和免疫器官的细胞免疫功能及其调节减弱或降低.     

外泌体在免疫调控及肿瘤发生中的功能

已知细胞间的信息交流不仅可以通过直接接触,或释放信号分子等方式,同时还存在另一种细胞通讯方式即释放外泌体。外泌体是由细胞分泌,直径为30～100 nm的囊泡结构。外泌体含有蛋白质、脂质、mRNAs和miRNAs等成分,并且能够靶向运输到其他细胞或组织中,从而在细胞间的信息交流、物质传递方面发挥重要作用。本文对外泌体的基本特征、形成过程、功能以及在疾病诊断与治疗中的应用等方面进行简要综述,重点介绍外泌体在免疫调控和肿瘤发生方面的功能。外泌体作为一种广泛存在的亚细胞成分,虽然体积小,组成成分简单,然而,其复杂功能具有重要的研究价值。对外泌体功能的深入了解将为肿瘤等疾病的预防和治疗提供更多的诊断标志物、疫苗以及治疗思路与手段。     

Glycosylation-Dependent Regulation of Opiate (Enkephalin) Receptors in Neurotumor Cells

Abstract: Electron inactivation analysis revealed that the opiate (enkephalin) binding site in neurotumor cell lines NG108-15 and NCB-20 had an apparent target size of 200,000 daltons. Expression of functional opiate receptors in neurotumor cells appeared to require glycosylation, as treatment of such cells with tunicamycin (TM; under conditions where de novo glycosylation of asparagine residues in protein was reduced by 80%, but overall protein and DNA synthesis were inhibited by <10%) resulted in the loss of 50% of the opiate binding sites. The loss of binding sites could not be prevented by addition of protease inhibitors to cell cultures, but binding sites were partially restored 48–60 h after removal of the TM. In addition, the number of enkephalin binding sites in TM-treated cells was also restored to near-normal levels by addition of physiological concentrations (1-10 mM) of manganese ions to the in vitro receptor binding incubation mixture. TM treatment resulted in receptor supersensitivity to manganese ions for both opiate agonists and antagonists, no change in the sodium effect for either agonists or antagonists, and subsensitivity to GTP for both agonists and antagonists. However, opiate binding to cell membranes was not substantially inhibited by either neuraminidase treatment or short-term incubation with lectins such as wheat germ agglutinin, ricin, or concanavalin A. Thus, the data suggest that oligosaccharide units are not directly involved in opiate receptor-ligand interactions, but protein glycosylation is required for functional expression of receptors.     

玉竹生物活性成分C对小鼠免疫功能的影响

研究玉竹生物活性成分C对小鼠细胞免疫功能的影响,并探讨其作用机制.采用MTT比色法和CFSE检测小鼠淋巴细胞转化情况,流式细胞术检测对αβT和γδT细胞增殖及CD4+ αβT细胞/CD8+αβT细胞比值的影响,ELISA法检测脾细胞培养上清中Th1细胞因子IFN-γ和Th2细胞因子IL-4的分泌水平.结果显示,玉竹生物活性成分C在一定浓度范围内可促进小鼠脾αβT细胞增殖,其中以1 000μg/mL的浓度作用最强.1 000 μg/mL浓度的玉竹生物活性成分C具有降低CD4+ αβT细胞与CD8+ αβT细胞比值,提高CD8+αβT细胞教量的作用.1 000 μg/mL浓度的玉竹生物活性成分C能有效刺激小鼠脾淋巴细胞释放细胞因子IFN-γ,而对IL-4的产生没有明显的影响.本研究为开发玉竹生物活性成分C提供实验依据.     

蛋氨酸脑啡肽（MEK）抗B型流感病毒感染作用的研究

研究MEK抗B型流感病毒感染的作用。采用MDCK细胞和9～10日龄鸡胚,按不同的顺序加入不同剂量MEK和B型流感病毒,共培养72 h后做血凝实验。所有加入B型流感病毒的MDCK细胞均培养出病毒,HA滴度为1：64。在鸡胚尿囊腔中,先注入MEK孵育24 h后,再注入B型流感病毒的鸡胚也培养出病毒,HA滴度为1：6.8,与病毒对照组比较P〈0.01,有统计学意义。实验结果未见MEK直接抗B型流感病毒感染MDCK细胞株的作用,但可见MEK抗B型流感病毒感染鸡胚的作用。     

病毒miRNA与免疫逃逸

微小RNA（microRNA,miRNA）是一种非编码的小分子RNA,长度一般在22 nt左右,通过与mRNA 3＇UTR的特异性结合介导转录后调控过程。现已鉴定出的miRNA涵盖了从植物到人类的多个物种,并参与了调节生长、免疫、凋亡等多种生命活动。最近发现,DNA病毒感染宿主时也能编码产生miRNA,并在病毒免疫逃逸中扮演着重要角色。病毒感染是一个复杂的过程,病毒需要逃脱免疫系统才能对宿主产生持续性感染,而病毒miRNA能调控宿主和自身基因表达,帮助病毒感染宿主,且因其本身没有免疫原性,而成为病毒逃避免疫应答的重要工具,但其中的分子机制尚不十分清楚。该文就病毒miRNA如何调控病毒自身与宿主基因进行免疫逃逸的近期研究作一综述。     

细胞自噬在病毒感染与免疫调节中的作用机制

细胞自噬(autophagy)是一种主要由溶酶体介导的降解通路,作为细胞维持内环境稳态的一种保护性机制,不仅通过将长寿命蛋白和衰老细胞器降解为小肽或氨基酸为细胞提供再生资源,而且也可作为防御机制抵抗病原微生物感染和寄生. 自噬缺失与许多疾病如癌症、心血管疾病等的发生关系密切,在机体生理、病理过程中发挥重要作用. 本文拟就细胞自噬与病毒感染、机体免疫的关系加以综述,以期为研究细胞自噬的发生、参与机体免疫、发挥抗病毒感染作用及其分子机制提供参考,也为进一步研究抗病毒治疗的靶标提供新思路.