小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的扫描电镜观察

本实验利用扫描电镜观察小鼠腹腔巨噬细胞在体外吞噬鸡红血球过程大致可分为巨噬细胞接触、扑获、包绕鸡红血球和鸡红血球在巨噬细胞中内移等4个阶段。经厌氧小棒状杆菌处理的巨噬细胞呈现激活状态,比未经厌氧小棒状杆菌处理的巨噬细胞表现更大的膜活性,胞体铺展增大,突起多呈叶状或皱褶状,吞噬鸡红血球能力明显增强。经厌氧小棒状杆菌处理的巨噬细胞与U27癌细胞存在着接触,此时U27癌细胞易发生变性、坏死。     

CRMP-1真核表达载体的构建及其突起生长抑制作用

为研究坍塌反应调节蛋白-1(collapsin response mediator protein-1,CRMP-1对神经元突起生长的作用,构建了CRMP-1真核表达载体,以神经生长因子(NGF)诱导的PC12细胞为模型,采用基因转染、突起生长时差成像、突起提取和免疫印迹技术进行观察.结果显示,NGF诱导的PC12细胞具有典型的神经元形态特征,脂质体转染技术可成功地把CRMP-1基因导入细胞.过表达CRMP-1可明显抑制突起生长,促进突起坍塌,首先是细小突起缩短,然后是长突起,细胞突起的长度随CRMP-1蛋白表达时间延长呈逐渐缩短的趋势.突起提取液的测定显示,CRMP-1过表达的细胞较NGF诱导的和转染空载体的细胞突起明显减少(P<0.01.说明CRMP-1具有明显的突起生长抑制作用.     

巨噬细胞源性神经营养因子的纯化和鉴定

应用Sephacryl S-100-HR凝胶层析、高效液相色谱(HPLC)和反相高效液相色谱(R-HPLC)分析,从巨噬细胞条件培养基中纯化了巨噬细胞源性神经营养因子(MΦDNF)。该因子在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现一条单一蛋白带,其分子量为60.5kD,等电点约5.1。其氨基酸组成含有较高比例的天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸和赖氨酸。纯化的MΦDNF能支持体外培养的小脑皮质神经元的存活,增强其活性及促进神经元突起的生长。其最大效应浓度为500—1000ng/ml。     

寄生于褐家鼠的肉孢子虫一新种(孢子纲,真球虫目)

描记于云南省安宁市褐家鼠Rattus norvegicus肌肉内检获肉孢子虫1新种:左氏肉孢子虫Sarcocystis zuoisp.nov..新种肌肉内的包囊乳白色,呈梭形,大小为1 058μm×117μm.包囊壁具有长指状突起,突起大小为10.0μm×2.5μm.透射电镜下,包囊壁突起在基部高度分枝,突起通过分枝的基部相互连接在一起.     

双歧杆菌的完整肽聚糖对巨噬细胞NF-kB的影响

目的从NF-kb角度探索分叉双歧杆菌的完整肽聚糖（WPG）激活巨噬细胞的信号机制.方法首先分离培养SD大鼠腹腔巨噬细胞,然后以不同浓度的WPG刺激巨噬细胞,最后采用凝胶电泳迁移分析技术检测巨噬细胞NF-kb的DNA结合活性.结果分叉双歧杆菌的WPG作用于巨噬细胞后,其NF-kB的DNA结合活性明显高于对照组（P＜0.01）.结论分叉双歧杆菌的WPG能活化巨噬细胞的NF-kb.     

HIV病毒包膜蛋白gp120与卡介苗感染人巨噬细胞的实验研究

目的:比较研究HIV病毒包膜蛋白gp120与卡介苗分别及共同感染人巨噬细胞,对人巨噬细胞的破坏能力及诱导巨噬细胞产生一氧化氮(NO)能力的差异性.方法:gp120与卡介苗(BCG)分别及共同感染人巨噬细胞后,于不同时间点采用MTT法检测巨噬细胞存活率,利用硝酸还原酶法检测细胞培养上清液中NO的含量.结果:gp120与BCG分别及共同感染人巨噬细胞,均可降低巨噬细胞的存活率,但gp120与卡介苗共同感染巨噬细胞,其存活率降低更为显著(P＜0.05);gp120与BCG均可激活人巨噬细胞合成和释放NO,而gp120与BCG共同感染组激活人巨噬细胞合成和释放NO的量明显低于BCG感染组(P＜0.05).结论:gp120感染巨噬细胞可影响巨噬细胞抗微生物的活性,可增强卡介苗对巨噬细胞的破坏作用.     

小鼠腹腔巨噬细胞的分离与培养

目的:建立一种小鼠腹腔巨噬细胞分离的简便方法,为低强度激光照射对巨噬细胞功能的影响研究提供实验细胞.方法:以无血清的RPMI-1640培养液灌洗小鼠腹腔,分离获取小鼠腹腔巨噬细胞,在含10%小牛血清的RPMI-1640培养液中培养.采用倒置显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色计算存活率,瑞氏染色计算纯度.结果:获得高纯度的巨噬细胞,具备巨噬细胞的形态特征.结论:本法是一种简便实用的分离小鼠腹腔巨噬细胞的方法.     

微RNA介导巨噬细胞极化的转录后调控

巨噬细胞极化是根据周围刺激环境做出表型调节的一个过程.一般极化为2个表型,分别为经典激活的M1巨噬细胞和替代激活的M2巨噬细胞.简而言之,M1巨噬细胞的特征是促炎和抗肿瘤;M2巨噬细胞是抗炎和促肿瘤.巨噬细胞极化被认为是人体生理和病理的关键调节器,其发挥作用的有效性依赖于关键因子的协调表达,而这些关键因子的表达在转录后...     

肌动蛋白与纽蛋白在神经干细胞定向分化为神经元过程中的表达

目的研究新生大鼠大脑皮层神经干细胞定向分化为神经元过程中肌动蛋白(actin)的时空表达变化及其与纽蛋白(vinculin)的关系.方法采用神经干细胞培养、免疫细胞化学技术对神经干细胞定向分化为神经元的过程中actin的时空表达进行研究;采用免疫荧光双标术及共聚焦激光扫描显微术对定向分化神经元过程中,actin与vinculin关系进行探讨.结果在神经干细胞向神经元定向分化过程中, actin在胞体与突起中有表达,且与日渐增,核周表达逐渐增强,分化成熟时胞体与突起中可见丝状细胞骨架随着突起伸展而延伸.免疫荧光双标actin、vinculin在CLSM下观察,分化早期,胞体和突起内均有分布,actin明显强于vinculin,而vinculin于核周及一侧突起较强.分化近成熟期,vinculin反应增强,随着细胞突起生长,在突起中两蛋白共存处可见节段状分布的黄色融合光,直达突起的末端.结论本研究揭示在大脑皮层神经干细胞定向分化为神经元过程中,actin表达变化与神经元发育成熟呈正相关,且actin与vinculin共存.     

结核分枝杆菌与巨噬细胞相互作用的研究进展

结核分枝杆菌是一种兼性细胞内寄生菌,感染人体后可在巨噬细胞内长期存活.在这一过程中,该菌与巨噬细胞间存在着一系列复杂的相互作用.一方面,巨噬细胞可通过直接杀伤、分泌细胞因子和向T细胞呈递该菌抗原等方式抵抗感染;另一方面,该菌也能通过一系列机制对巨噬细胞产生影响,逃避巨噬细胞的杀伤.随着研究的深入,人们相继发现了结核分枝杆菌与巨噬细胞间相互作用的一些分子机制,但仍然存在很多的不解.进一步阐明结核分枝杆菌与巨噬细胞间这一相互作用的机制将有助于人们最终战胜结核病.     

两种福寿螺与中国圆田螺齿舌的形态学特征比较

齿舌作为软体动物独特的摄食器官,是软体动物门重要的分类特征。利用扫描电镜对入侵物种福寿螺Pomacea canaliculata、P.maculata和本地物种中国圆田螺(Cipangopaludina chinensis)的齿舌形态进行了比较观察。两种福寿螺和中国圆田螺齿式均为2·1·1·1·2。两种福寿螺齿舌的差异主要体现在中央齿的第一突起,P.canaliculata中央齿第一突起宽而短,不如P.maculata锋利。P.canaliculata与P.maculata第一突起长与中央齿宽以及第一突起宽与中央齿宽的比值均具有显著差异。两种福寿螺与中国圆田螺齿舌的中央齿、侧齿、缘齿,不论是从形态还是数量上都明显不同。两种福寿螺中央齿第一突起大而尖,呈倒三角形,两侧对称排列3个小齿;中国圆田螺的中央齿第一突起短而宽,呈方形,两侧对称排列4个小齿。两种福寿螺的侧齿大突起内侧有1个小而尖的小齿,大突起外侧另有2个小齿;中国圆田螺侧齿上缘中间大突起外侧有3个小齿,呈锯齿状。两种福寿螺的内缘齿和外缘齿相似,缘齿上缘的中间尖齿尖锐,旁边再形成一小齿;中国圆田螺内缘齿上缘的中间尖齿突出,外缘齿基部细长,上缘有小的尖齿8~10个,呈梳状。两种福寿螺与中国圆田螺的第一突起宽与中央齿宽之比、第一突起长与中央齿宽之比、第二突起宽与中央齿宽之比、第二突起长与中央齿宽之比均差异显著。食性不同可能是造成种间齿舌结构差异的原因之一。     

槲皮素减轻紫杉醇致神经病理性大鼠疼痛的作用与机制

为探究槲皮素对紫杉醇致神经病理学疼痛大鼠的改善作用。实验采用给予雄性SD大鼠腹腔注射4 mg/kg紫杉醇一周来诱导神经痛模型,并给予30、50、100 mg/kg槲皮素连续灌胃7天进行治疗,通过Von Frey测试评价机械性异常疼痛,检测巨噬细胞在大鼠背根神经节(DRG)上的迁移效应,将DRG细胞与紫杉醇和槲皮素共同孵育后观察神经突起的生长,通过Western blotting评价Wnt/β-catenin信号通路变化,结果显示槲皮素能够以剂量依赖的方式的显著升高神经痛大鼠的缩抓阈值,降低巨噬细胞的迁移及由紫杉醇处理引起的大鼠脊髓中炎症因子TNF-α及IL-1β的水平的升高,并可以剂量依赖的方式抑制由紫杉醇引起的大鼠背部神经节神经元突起退化和Wnt信号通路的关键分子Wnt3α和β-catenin蛋白的水平,提示槲皮素可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路,影响脊髓中炎症因子的水平并降低炎症细胞的迁移对紫杉醇致神经病理学疼痛大鼠的发挥改善效应。     

中国长头象蜡蝉属一新种记述(半翅目:蜡蝉总科:象蜡蝉科)

记述中国长头象蜡蝉属Doryphorina 1新种:多刺突长头象蜡蝉D.multifurcella Zheng&Chen sp.nov..该新种与团簇长头象蜡蝉D.conglobatus Zheng,Yang&Chen相似,与后者的区别主要在:新种阳茎基端部具有2对膜质突起,背突起细长,端部和基部具有长刺;后者背突起细...     

巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞及吞噬诱导巨噬细胞死亡的实时动态观察

巨噬细胞有效地吞噬清除凋亡的中性粒细胞,对急性炎症的消退、恢复机体的稳态至关重要.但目前对巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞的动态过程以及巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞后的命运转归还知之甚少.本研究动态观察了巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞的全过程,发现巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞过程也可分为识别黏附、内吞、消化和残体外排等阶段,同时观察记录了吞噬凋亡中性粒细胞后巨噬细胞被诱导激活死亡的动态过程.通过透射电子显微镜、激光共聚焦扫描显微镜以及特殊染色法显示,吞噬凋亡中性粒细胞诱导巨噬细胞死亡的方式有自噬、凋亡和胀亡等,其中自噬率为(8.00±2.00)%、凋亡率为(12.33±2.08)%、胀亡率为(3.66±1.50)%.这些结果表明,巨噬细胞吞噬凋亡中性粒细胞后自身也经历自噬和凋亡过程,可能是巨噬细胞参与免疫反应的新机制.     

人外周血单核巨噬细胞诱导、培养及鉴定

在重组人粒.巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)作用下体外诱导培养人外周血单核巨噬细胞,并进行鉴定和功能检测.Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMc),含10%胎牛血清的RPMll640培养基和rhGM-CSF培养7d.光镜、扫描电镜及透射电镜观察细胞形态,鸡红细胞吞噬试验检测吞噬功能,流式细胞术检测单核巨噬细胞表面特征性标志CDl4等生物学技术鉴定贴壁细胞性质.获得的贴壁细胞具备巨噬细胞的形态学特征及免疫表型.有吞噬功能,纯度较高.人外周血单核细胞在rhGM-CSF诱导下向巨噬细胞分化,具有生物学活性,纯度较高.是一种简单易行的体外诱导培养巨噬细胞的方法.     

甘薯提取物体外促进PC12和SK-N-SH细胞增殖及突起生长作用研究

观察甘薯提取物促进体外培养的PC12和SK-N-SH细胞的增值和突起生长作用.采用体外培养PC12和SK-N-SH细胞,以MTT法检测PC12和SK-N-SH细胞的活性率,以细胞突起长度超过2倍胞体或突起数目3个以上者为阳性细胞计算阳性细胞率来评价甘薯提取物对体外培养PC12和SK-N-SH细胞的增值和突起生长的促进作...     

巨噬细胞凋亡及其调控

巨噬细胞通过介导和调控自身及其他细胞凋亡而实现其免疫调节和效应细胞功能.引起巨噬细胞凋亡的原因有生物、化学、病理、自身等因素.不仅巨噬细胞自身凋亡和凋亡调控有其特点,更为有趣的是,巨噬细胞可根据需要：介导或抑制自身凋亡;介导或抑制其他细胞凋亡;抑制自身凋亡,介导其他细胞凋亡.这可能是巨噬细胞在免疫调节,特别是肿瘤免疫中发挥重要作用的基础.     

血液系统恶性疾病中巨噬细胞的研究进展

巨噬细胞是微环境中重要成员,其表型、功能具有很强的异质性;近年的研究不仅揭示了稳态条件下不同亚群的形态、表型及功能特点,而且逐步阐明疾病状态下巨噬细胞的变化及作用机制.肿瘤微环境中的巨噬细胞称为肿瘤相关巨噬细胞(T A M s),参与肿瘤增殖、血管生成、浸润、转移及化疗抵抗.在血液系统恶性疾病中,巨噬细胞广泛浸润到淋巴瘤、骨髓瘤、白血病等恶性细胞累及的组织中,被恶性微环境异常活化,获得了特异的活化表型,并参与疾病进展.在淋巴瘤、骨髓瘤中习惯沿用T A M s的名称;在白血病中其名称引申为白血病相关巨噬细胞、急性白血病相关巨噬细胞或者"保姆样细胞".本文综述了血液系统恶性疾病中巨噬细胞的研究进展.     

弱激光通过激活Src增强巨噬细胞吞噬功能

巨噬细胞对病原菌的吞噬以及随后的降解在机体免疫防御中起重要作用.近年来,对增强巨噬细胞吞噬能力的研究越来越被重视.弱激光具有独特的生物组织学作用特征,从而调节机体多种功能.本文重点探讨了He-Ne激光(632.8 nm)照射对巨噬细胞吞噬功能的影响及分子信号调控机理.实验结果表明,弱激光能够通过激活巨噬细胞内Sre激酶...     

肝X受体α在泡沫细胞胆固醇流出中的调控作用

以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,观察肝X受体α(LXRα)在THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出中的调控作用.结果发现,22(R)-羟基胆固醇剂量依赖性增加THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出, 而DIDS剂量依赖性减少THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出.逆转录聚合酶链反应显示, 22(R)-羟基胆固醇可增加THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞LXRα mRNA的表达, DIDS可抑制THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞LXRα mRNA的表达.结果提示,LXRα在巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出中起着重要的调控作用,这为开发和寻找抗动脉粥样硬化药物提供了新的思路.