巴西蘑菇原种培养基的筛选

以麦草、稻草、棉籽壳、玉米秸、木屑、麦粒、玉米粒和麦麸为原料 ,从 2 0种培养基中筛选出 2种适合巴西蘑菇菌丝生长的原种培养基。用这 2种培养基生产的菌种 ,菌丝粗壮、洁白、浓密 ,萌发快。     

多孔菌液体发酵的研究

多孔菌Ｐｏｌｙｐｒｏｕｓｅｌｅｇａｎｓ（Ｂｕｌｌ）Ｆｒ。是一种新开发的真菌类中药材资源,经对其几个主要液体发酵培养条件的筛选研究,初步得出多孔菌深层发酵的基础参数：ＰＨ５．６～０．１;温度２４～２８℃;培养基为麦麸２．５％,蔗糖４％,ＮＨ４ＮＯ３０．０５％,ＫＨ：ＰＯ４０．０５％,ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０２５％。另外,摇瓶种子培养条件是：ＰＨ５．６～６．１;温度２８℃;培养基为ＰＤＡ＋ＶＢ１,添加３‰琼脂,时间为９６ｈｒ。     

康宁木霉液体深层发酵生产纤维素酶

以康宁木霉（ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｋｏｎｉｎｇｉｉ） Ｔ２１５为生产菌,在 ３０ｔ气升式发酵罐中进行了液体深层发酵生产纤维素酶的扩大试验。一、二级罐种子培养基由８％麦麸组成,种龄２４ｈ。产酶培养基由６％稻草粉,１％麦麸和１％蛋白胨组成,起始ｐＨ５．０。每罐装２２ｔ培养基,１０％接种量,通气量０．４ｖｖｍ,罐压０．０８ＭＰａ,２９℃±１℃培养 ９６ｈ。连续试验 ５批,平均发酵液酶活力： ＣＭＣ－Ｎａ活力 ７８．３ＩＵ／ｍＬ,脱脂棉活力 １.３ＩＵ／ｍＬ,水杨苷活力１.４ＩＵ／ｍＬ,滤纸活力     

丝孢酵母高甲硫氨酸突变株的选育及营养调控

以丝孢酵母(Trichosporon Behr)ST851为原始菌株,经紫外线诱变,在含乙硫氨酸的双层平板上筛选到多株抗乙硫氨酸突变株。其中ST851-10株抗乙硫氨酸浓度达到350μg/ml,其菌体蛋白质含量由40.5％提高到44.3％,菌体甲硫氨酸含量由20.45mg/g-DCW增加到29.32mg/g-DCW。在以苹果渣为碳源、尿素为氮源、硫酸镁作硫源的最适培养条件下,固态发酵24h后,蛋白质和甲硫氨酸含量较原始菌株分别提高了15.8％和44.9％。培养基中C/N值低有利于甲硫氨酸的合成,C/N值高则适合于菌体生长。在苹果渣固态发酵过程中,适当补加氮源既有利于菌体生长和甲硫氨酸的合成,又可起到调节培养基pH值的作用。     

竹荪生长和基质的关系

竹荪(Dictyophora rubrovalvata)在PDA琼脂培养基上培养,菌丝体生长很慢,若在PDA培养基上分别添加酵母膏、生啤酒、天冬酰胺、核糖核酸,可促进菌丝体的生长,菌落直径生长和菌丝线性生长都加快;添加蛋白胨、椰子汁、硫胺素和肌醇效果不明显。菌丝体生长的pH值在4.4—5.4之间,最适pH值为4.7;pH值在6.7以上,菌丝体不生长。在木屑培养基中分别添加麦芽汁、玉米、高粱和黄豆粉可以增加子实体的鲜重,其中黄豆和玉米粉、黄豆和高梁粉混合使用的效果比单用一种的更好,菇产量比对照增加1—2倍。播种后基质中含水量控制在50—60％,当原基形成时,含水量提高到55—70％,空气相对湿度在95％以上,菌蕾才能发育成子实体。在自然温度条件下栽培竹荪,出菇高峰期出现在八月份,基质内平均温度为22.4℃,子实体生长的最适温度在20—22.5℃之间,在此温度下产菇率占总产值的85％。     

提高豆渣固态发酵核黄素产率的研究

在豆渣固态发酵生产核黄素工艺基础上,研究了改变液体种子和固体发酵培养基成分对阿舒假囊酵母菌核黄素产率的影响。结果表明,发酵培养基中添加１０％麦麸或２％小米可使核黄素产率分别提高２５％或１４％,添加２５μｍｏｌ／Ｌ碘乙酸则比对照组核黄素产率提高６．２─１０．４％。正交实验表明,接种量５％,并添加１０％麦麸、２％小米、１％玉米浆和２５μｍｏｌ／ｋｇ碘乙酸可使核黄素的产率最高达到６．１４ｍｇ／ｇ基料,蛋白质含量由１０．２％提高到１５．８％．     

利用酿造糟渣制备饲用复合酶制剂

采用多菌种固态发酵酱油渣、醋槽制备饲用复合酶制剂．所用菌种为木霉、扣囊拟内孢霉和丝孢酵母,培养料配比为酱油渣：醋糟：麦麸：玉米面＝６：２：２：１．按所选各项条件曲盘培养４２ｈ后,物料收率为８２％左右,蛋白含量２４．５％左右;每克干物质中含有纤维素酶活２７５０ｕ,糖化酶活１８００ｕ,蛋白酶活１１００ｕ和３．５×１０^９个细胞．     

利用农业废弃物生产嗜热真菌（T．1anuginosus）耐热木聚糖酶的固体发酵研究

研究了嗜热真菌(Thermomyces lanuginosus CBS288．54-M18)生产木聚糖酶的碳氮源组成、料水比、培养基初始pH值、发酵温度及接种量等的影响。结果表明,以麦麸和玉米芯粉(8：2)作为复合碳源,酵母膏和胰蛋白胨(1：1)作为复合氮源时,菌株所产的木聚糖酶量相比未优化碳氮源的培养基提高幅度高达200％。其最佳产酶的料水比为1：3,培养基初始pH7．0为最适。菌株在50℃条件下发酵5d,能够得到活力高达15023U／g干基碳源的木聚糖酶制剂,且该酶制剂不合纤维素酶和蛋白酶活性。     

均匀设计法对产几丁质酶细菌C4发酵条件的优化

系统研究了碳源,氮源,起始pH值、培养基装量、培养温度和时间等因素对细菌C4产几丁质酶的影响。结果表明,碳、氮源分别以胶体几丁质、KNO和蛋白胨最好;在起始pH值7．6—8．5,培养基装量为三角瓶体积的12％,培养温度28℃,振荡培养(180r／min)5d时最有利于几丁质酶的产生。在此基础上通过均匀设计法优化了发酵培养基配方。优化后的培养基配方为：胶体几丁质1．5％,蛋白胨0．55％,KNO3 0．3％,MgSO4 0．09％,Tween80 0．005％。在该条件下,几丁质酶活力达2．68U／mL,比在原基础培养条件下的酶活力提高90．1％。     

苹果渣发酵生产饲料蛋白的工艺条件

采用经试验所筛选出的菌种组合,通过试验,获得了苹果渣发酵的适宜工艺条件：接种比例为１：５－１：１０,接种量１５－３０％,料水比１０：７－１０：８,ｐＨ值为６－７,发酵时间３－４ｄ,静止发酵料层厚度不超过３０ｍｍ。发酵产物测定结果显示,粗蛋白含量达到２９．３０％,提高到４５．７７％。蛋白质含量达到２７．５６％,提高了８２．８８％,粗纤维含量降低了２３．２７％。     

恶疫霉有性杂交后代的竞争能力研究*

５株杂交个体（携带对甲霜灵和地茂散的抗性标记）的游动孢子分别与其野生型亲本ＡＰ １４和ＰＫ９（对甲霜灵和地茂散均敏感）按１：１、１：９和１：４９比例混合涂布在１０％Ｖ６培养基平板上或接种在苹果片上生长４～５ｄ,并诱导产生孢子囊和释放游动孢子,经单孢分离建立单孢无性系,在含甲霜灵或地茂散的培养基上检测杂交个体的单孢后代所占的百分率。结果是,在Ｖ６培养基平板上混合生长的３０个组合中,仅３个组合杂交个体的单孢后代在其单孢无性系群体中所占的比例显著低于野生型亲本,其余组合均符合其各自的期望值;在苹果片上混合接种的３０个组合,杂交个体与野生型亲本的单孢后代所占比例均符合其各自的期望值。进一步测定２个杂交个体（ＡＰＫ－９和ＡＰＫ－２４）分别与其野生型亲本以１：１的比例混合后在Ｖ６培养基平板上和苹果片上连续３个产孢循环过程中两者比例的变化,结果是,在杂交个体与野生型亲本ＡＰ１４的组合中,杂交个体的后代所占的百分率由第一个产孢循环的４９．１％～５４．２％至第三个产孢循环下降为１．８％～６．２％：而在与另一野生型亲本ＰＫ９的组合中,杂交个体的后代所占的百分率从第一个产孢循环的４４．４％～５４．２％至第３个产孢循环上升为７２．１     

纤维素酶水解糠醛渣生产酵母I．纤维素酶的形成和酶解糠醛渣

本实验研究了康氏术霉AS．3．4290(白色突变株)纤维素酶产生和糠醛渣酶解的适宜条件。在稻草粉固体培养基上,纤维素酶产生的最适条件是：稻草粉细度为0．35厘米筛孔的筛下物;培养基含水量67％左右;pH 6.0—6.5;添加氪源是必要的,其中以磷酸氢二铵(4％)和硫酸铵(2％)为佳;培养温度28℃;时间为3天;葡萄糖在浓度低时,对纤维素酶产生有好处,而浓度过高时(大于6％),反而对酶形成有抑制作用。上述培养物直接用于糠醛渣的酶水解,其酶作用的最适条件是：pH5．0,温度50℃,作用时间48小时。葡萄糖和单宁对纤维素酶有抑制作用。     

纤维素酶水解糠醛渣生产酵母II．糠醛渣酶解液培养酵母

从82株不同种属酵母中选得3株酵母,它们能较好地利用纤维素酶水解糠醛渣所产生的糖液。其菌名和编号是假丝酵母(Candida sp.)As 2．121,热带假丝酵母(Candida tropicalis)培养基糖浓度以1．5％或2．0%较好,这与原始酶解液的糖浓度及其中糠醛等有毒物质有关。最好将原始酶解液稀释一倍以上使用。另外补加相当于含糖量7．5％的(NH4),SO4,5％的KH2PO4和2．5％的尿素。起始pH以5较好。三株菌的最适生长温度略有差异, AS2.121为28—32℃,AS 2.637为2 8—37℃,AS 2.1180为30—35℃,但最适生长温度范围均较广,在 生产上较易控制。在250毫升三角瓶中装培养基50毫升,接种酵母后在旋转摇床(170转／AS 2.121 菌株之菌体产率高且稳定,常达50％;AS 2．637菌株较耐高温,菌体产率亦可高达50％左右;AS 2．1180菌株在摇瓶培养条件下菌体产率较低,为40—45％,且较不稳定,可能和培养基pH值的控制有关。     

黑曲霉HG-1发酵苹果渣生产果胶酶的工艺优化及部分酶学性质

目的：采用价格低廉的农业废弃物苹果渣为主要原料生产果胶酶,优化其生产工艺,并对果胶酶的部分酶学性质进行研究。方法：以黑曲霉HG-1为生产菌种,采用单因子实验和正交试验进行固态发酵。结果：最适培养基为苹果渣10g、棉粕10g、（NH4）2SO40.2g、K2HPO40.06g、初始水分含量60%;最适发酵条件为装料量为20g干料/250ml三角瓶,30℃恒温培养48h,果胶酶酶活力可达22248U/g。果胶酶酶促反应最适温度为45℃,最适pH为5.0;在50℃以下,pH3.0～6.0时稳定性良好;Ca^2＋、Mg^2＋、Fe^2＋对该酶有激活作用,而Ba^2＋、Mn^2＋、Zn^2＋有抑制作用。结论：以苹果渣代替麸皮作为黑曲霉HG-1固态发酵生产果胶酶的主要原料在技术上具有可行性,可大幅度降低生产成本;同时还可以部分解决苹果渣的综合利用问题。     

L-苹果酸产生菌F-871变株合成延胡索酸酶的研究

温特曲霉Aspergillus wentii F-871是高效转化延胡索酸为L-苹果酸的变株,通过对其合成延胡索酸酶的因素进行研究,筛选了培养基主要营养元素有L-精氨酸、酪氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、苏氨酸、赖氨酸及相应含量丰富的酵母粉、黄豆饼粉和玉米浆。该变株生长阶段条件为：pH6．0,温度2830℃,培养时间为24h,酶合成阶段最适条件：接种量15％,初始pH6．8,培养温度2830℃,装量8090ml／500ml,酶合成周期40h。在优化的培养条件下,F-871变株延胡索酸酶合成水平可达156．33u／g,100ml发酵液中的酶可将延胡索酸转化为L-苹果酸32．06g,比国内一步发酵法产酸88．5％提高约4倍,转化率由85％提高到106．87％,发酵周期由90h缩短至57h。     

嗜热毛壳菌(Chaetomium thermophile)液体发酵产生纤维素酶及酶学性质的研究

探讨了嗜热真菌Chaetomium thermophile产生纤维素酶的液体发酵条件及滤纸酶(FPA)的特性。采用液体发酵培养法,通过对碳源、氮源、培养时间、培养基的起始pH值及产酶过程中pH值和蛋白质含量变化的研究发现：在2％纤维素、1％可溶性淀粉为碳源;2．0％KNO3 0．2％酵母粉为氮源;起始pH值为6．5,50℃下培养9d后,各种酶活最高。发酵过程中,pH值和蛋白质的含量均在前3d下降,后升高。FPA的反应最适温度和pH值分别为60℃和5．5～6．0;且具有较高的热稳定性和DH稳定性。     

西藏野生食用菌卵状鬼伞的人工驯化研究

在西藏拉萨进行了卵状鬼伞（Coprinus ovatus)俗称嘎夏蘑菇的生长温度、培养基酸碱度、培养料成分、栽培方法比较试验和中试。根据各项数据和当地资源情况,确定以青稞桔杆和牛粪为主要原料,pH值为6．5－7．5,每年5－11年间在当地用熟料分两个阶段栽培嘎夏蘑菇,并筛选了高产优质菌株。该野生品种人工驯化成功,可在西藏地区推广生产。     

草酸青霉BZH-2002产果胶酶特性研究

对草酸青霉菌（Penixillium oxalicum）BZH-2002菌株固体发酵果胶酶的特性及浸提条件进行了研究,确定其最佳产酶时期为72—92h,利用干物质量最快的时期为24—72h发酵产酶期间培养基介质中pH值呈“V”字形变化。该菌株以甜菜渣、葵花盘为碳源,以（NH）2SO4为氮源时产酶率最高,分别高达4．33万和4．56万U／g干物质,（NH4）2SO4最佳用量0．9g/10g甜菜渣。此外,浸提方法对果胶酶产率也有一定影响,1％NaCl作为浸提液的效果最好,最佳浸提时间1h,浸提温度25—40℃。     

利用粉丝废液固定化红曲发酵生产红曲色素的研究

对以粉丝生产废液为主要培养基,以聚乙烯醇海藻酸钠双载体固定红曲Monascus purpureus,采用气升式生物反应器重复发酵生产红曲色素进行了考察研究．试验结果表明：粉丝生产废液经适当补加营养盐可作为发酵生产红曲色素的良好培养基,其最佳发酵条件为：发酵培养基初始pH值为5—6;发酵温度为30℃;固定化细胞粒子接入量为20％,通气量为0．35vvm,发酵周期为50h左右。     

高产大豆异黄酮糖苷水解酶菌株的发酵工艺研究*

Absidia sp．R是从酒曲中分离出的一株产大豆异黄酮糖苷水解酶活性较高的菌株。该菌最佳产酶条件为：2．5％的麦麸为碳源,1％的硝酸钠为氮源,培养基起始pH为7．0,瓶装量为40mL/250mL,接种量8％,培养温度为30℃,转数为160r／min,培养时间为84h,其酶活力可达到82U／mL。除Cu^2 对该菌产酶有较强的抑制作用外,金属离子对产酶影响不大。