基于CRISPR/Cas的分子诊断传感器在非核酸分子诊断中的应用

CRISPR/Cas不仅是一种重要的基因编辑工具,而且还是一种有效的分子诊断工具。目前基于CRISPR/Cas建立了一系列的分子诊断传感器系统,广泛应用于核酸、非核酸等检测过程中。与应用较广泛的核酸分子诊断传感器系统相比,基于CRISPR/Cas的非核酸检测系统目前尚未见系统性综述,因此本文围绕基于CRISPR/Cas12和CRISPR/Cas13建立的两大类非核酸分子传感器诊断系统的基本特征、工作流程及其检测原理等进行了全面综述,期望能为CRISPR/Cas分子诊断系统在体外诊断中的应用提供依据。     

试剂盒半小时擒获艾滋病毒

上海科华生物工程股份有限公司研发出一种艾滋病诊断试剂盒,只需一滴血加上少量药水,半小时内就能检测出血液中是否有艾滋病病毒。近日,该试剂盒被克林顿基金会确定为其在全球的艾滋病诊断系统四大供应商之一。通过这一渠道,科华公司的艾滋病抗体诊断试剂盒将大批量出口到亚非拉及欧洲部分地区。而在此次人选克林顿基金会的4家诊断系统供应商中,该试剂盒的表现优于美国、以色列和印度公司。     

一种新的基于STR的染色体三体性疾病诊断策略中遗传标记的评估

背景:在此前发表的文章中,我们提出了一种新的基于短串联重复序列(Short Tandem Repeats,STR)的染色体三体性疾病的诊断策略.当应用这种策略来检测特定染色体拷贝数时,需要从人类基因组众多的STR中选择适宜的染色体特异性STR基因座构建一个诊断系统,根据系统中的STR基因座是否检测到三种不同的等位基因产物来判断个体是否为三体患者.目的:本研究拟进一步提出并验证对单个STR基因座及由多个STR基因座构成的诊断系统的评估方法,旨在帮助选择适宜的STR基因座构建一个高效能的诊断系统.方法:我们提出一个新的参数--三等位基因栓出率,并推导出该参数的计算公式,用于定量评估一个STR基因座在这种诊断策略中的效能.在此基础上,推导出另一个数学公式,计算一个非整倍体诊断系统能够在一个三体性患者?哌 检测到三个不同等位基因的概率,根据这个概率的大小来衡量系统诊断效能的高低.最后,我们将所提出的两个公式用于评估我们在先前研究中构建的一个21三体的诊断系统.结果:这个21三体诊断系统由9个21号染色体特异性STR基因座构成.根据我们所提出的两个公式,这些STR基因座的三等位基因检出率在0.203-0.638之间,该系统在21三体患者能够检测到三个不同等位基因的概率大于0.95.结论:我们所提出并验证的公式可以对单个STR基因座和系统的诊断效能进行定量评估,帮助选择适宜的STR遗传标记,并确定一个高效能诊断系统所需的STR基因座的数量,从而为这种诊断策略的广泛应用提供基础.     

无创伤乳房癌检查装置

在佐治亚州的Biofield公司正在研制开发的Biofield诊断系统是一种乳房癌检测装置。它无需施行手术,而是利用特殊的传感器测出乳房组织的电位,并据此鉴别出癌变和非病变组织。设计该系统的目的是为传统的乳房检查方法,诸如乳房摄影和超声扫描等提供一种新的补充手段。 Biofield诊断系统采用了许多现代新技术。它运用一系列一次性使用的具有专利权的传     

基于粗糙集的酥梨病害知识发现系统构建

依据粗糙集理论,采用基于差别矩阵的启发式属性约简算法,获取属性约简集,产生相应的决策表的决策规则.并以此为基础,实现了砀山酥梨病害诊断系统,为酥梨病害诊断提供一个切实可行的诊断工具.     

MRS脑肿瘤分型诊断模型研究

基于对核磁波谱(MR Spectroscopy)的特征变量提取,利用模糊聚类算法来构建脑肿瘤分型诊断模型,实验结果表明该模型能准确对神经胶质细胞瘤分级诊断,为进一步实现更复杂的脑肿瘤诊断系统模型提供方法。     

全自动核酸分子诊断系统的现状与发展

分子诊断是预测诊断的主要方法,广泛用于血液筛查和传染性疾病的诊断中,也用于个体遗传病的诊断和产前诊断。如今,随着各种新发突发传染病频发,以及精准医疗发展的需要,快速、精确、简便的全自动化集成式分子诊断系统越来越受到全世界的关注。对当前国际致力于全自动化集成式分子诊断系统的公司及其产品进行综述,并对全自动化集成式分子诊断系统的未来发展进行了展望。     

粒径对金纳米粒在生物医药研究和应用中的影响

金纳米粒由于其良好的化学惰性、生物相容性、表面易修饰性和独特的光学性质被广泛用于生物医药领域。综述粒径对金纳米粒 在光学性质、细胞水平、体内环境等方面影响的研究进展，为以金纳米粒为基础的检测、治疗和诊断系统的构建提供参考。     

肝病分类诊断与诊疗路径系统的构建及应用价值分析

肝病分类诊断系统是根据肝脏疾病的病因学、临床症候学、检验学、影像学、病理学和解剖学等特性,通过对肝脏疾病的分类、起病状态、病原学检测、肝功能情况、营养状态、感染情况、肝纤维化及肝硬化程度、肝脏并发症情况、多脏器功能情况、肝癌发生及进展情况和伴随疾病等不同层次、全方位的评价,准确反映肝脏疾病状态及各器官功能情况。肝病分类诊断系统中的每一诊断均对应一个以国内外最新诊疗标准、指南、共识等为依据,以循证医学为基础的诊断、治疗、康复及随访方案,最终根据不同诊断,组合生成全面的个体化综合治疗路径,使诊断、治疗、检查、随访以及生活指导更加标准、科学、规范。     

利用错配碱基产生酶切位点快速检测禽类Mx蛋白基因单核苷酸改变

该方法针对无合适酶切位点的检测位点设计引物,应用于禽类Mx蛋白基因631位氨基酸位点的突变检测,利用错配碱基产生内切酶识别的酶切位点检测SNP,尝试一种操作简便结果可靠的检测单核苷酸多态性并能快速判定631位点氨基酸的方法.实验结果表明,利用这种方法产生的酶切位点能有效地对631位氨基酸位点进行分型,可以快速检测SNP.     

基于虚拟仪器技术的血管壁动态信息无创检测与辅助诊断系统

为了在体外无损地实现对血管壁动态信息、心电和心音信号等医学信息多参数的综合同步检测以及分析和处理,利用虚拟仪器技术设计了血管壁动态信息多参数的无创检测辅助诊断系统．该系统硬件平台由信号输入模块、信号调理模块以及采集卡等三大模块组成。软件系统由开发虚拟仪器的流行软件LabVIEW编写,实现了数据的采集、实时显示、分析处理和存储等。初步的临床检测结果证实了本无创检测系统的可行性和临床应用的前景,为功能性无创辅助诊断与血管壁弹性（硬化）程度有关的血管疾病提供了一种新的方法。     

食品安全检测中微生物检测技术研究

近年来食品安全问题层出不穷且呈多样化趋势,传统的检测方法已无法满足当今食品检测的需求,因此需要从食品安全检测的技术手段入手,采取更加精密的检测技术,来确保食品的质量和安全性,避免产生食品安全问题。微生物检测技术作为现阶段开展食品安全检测工作的重要手段和方法,肩负检测食品安全的重任。文章旨在对食品安全检测中微生物检测技术进行研究,充分挖掘微生物检测技术在食品安全检测中的应用路径,希望能推动我国食品安全检测工作的开展,也能切实为食品安全生产保驾护航。     

前列腺癌生物标记与早期诊断

前列腺癌发病率高,肿瘤晚期难以治愈,这就致使早期诊断变得尤为重要。生物标记应用于诊断和治疗已经有50年的历史了,当今前列腺特异性抗原(PSA)作为唯一应用于临床的标记,一套依赖于PSA的诊断系统已经建立。然而标记本身的缺陷限制了系统的应用。基因组学和蛋白质组学技术的发展大大加速了前列腺癌相关生物分子的研究,为发现前列腺癌的生物标记提供了广阔的前景。以前列腺癌发生的遗传背景为基础,对目前的检测标记以及检测标记的标准作了介绍。     

一株沙雷氏菌的分离及其群体感应现象

从腐败的凡纳滨对虾中分离得到一株具有群体感应的菌株,利用16S rRNA和生理生化试验鉴定其为黏质沙雷氏菌,但不产灵红素,命名为Serratia marcescens AK1。通过生物检测方法对菌株AK1进行群体感应检测,薄层层析法鉴定该菌株的信号分子类型。结合菌株生长规律,测定不同时间段信号分子的含量。结果显示,菌株AK1能诱导紫色杆菌CV026产生紫色杆菌素,诱导根癌农杆菌A136分解X-gal产生蓝色;薄层层析检测结果显示该菌能产生两种群体感应信号分子C6-HSL和3-oxo-C6-HSL,并具有密度依赖性,信号分子含量在生长对数后期达到最大值。     

鳕鱼成分的实时荧光PCR检测方法

研究建立了鳕鱼成分的实时荧光PCR检测方法。依据鳕鱼的16S rRNA基因序列设计一对PCR引物及探针,对12种鳕鱼样品和71种非鳕鱼动植物样品进行实时荧光PCR检测,结果显示,只有12种鳕鱼样品产生荧光信号,其他非鳕鱼样品均不产生荧光信号,实验表明此方法具有特异性,其检测限为0.01 ng/μl鳕鱼DNA和0.01%鳕鱼肉粉。对市售的鳕鱼样品进行实际样品检测,均能很好地检出鳕鱼成分。此法特异性强,灵敏度高,可作为鳕鱼成分鉴定的检测方法。     

华癸根瘤菌中自体诱导物的初步研究

群体感应 (Quorumsensing)是细菌通过产生可扩散的小分子量自体诱导物信号分子感知细胞群体密度变化 ,进行基因表达调控的生理行为。将根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)构建为超量表达群体感应调节蛋白TraR的检测菌株JZA1,试验证明该检测菌株能检测纳摩尔浓度的自体诱导物 ,利用该菌株对 3株不同华癸根瘤菌(Mesorhizobiumhuakuii)进行自体诱导物活性检测 ,发现该 3株华癸根瘤菌均能产生自体诱导物 ,其表达量与菌体密度成正相关 ,但 3株菌在相同培养条件下自体诱导物的表达量存在差异 ,结果表明自体诱导物在种内水平上存在一定的多样性 ;同时发现高pH条件能大大降低自体诱导物的稳定性 ,为进一步研究群体感应调节在共生固氮上的作用提供理论及实践依据     

过氧化氢与口腔菌斑微生态学研究进展

1　产生 H2 O2 菌斑微生物192 3年 ,Mclead和 Gorden首先报道肺炎链球菌能产生H2 O2 ,后来学者们又相继发现 β溶血性链球菌和乳杆菌也能产生 H2 O2 [1 ]。尽管口腔菌斑细菌种类多 ,数量大 ,但目前发现能产生 H2 O2 的微生物主要局限于 α-溶血性链球菌。最后一项研究利用超细胞生物化学的方法在龈上菌斑和牙周病变部位的龈下菌斑中观察到一些产生 H2 O2 细菌 ,发现H2 O2 主要存在于细菌的胞膜和胞质中 [2 ]。由于培养条件 ,外源性糖的种类及浓度和采用检测方法不同 ,有关口腔能产生H2 O2 细菌种类的报道存在差异 ,但就产生 H2 O2 …     

青海弧菌Q67自体诱导物的检测及其对菌体发光的影响

青海弧菌Q67是一种我国新近确定的淡水发光细菌,其发光强度随毒物浓度改变的特性使其可作为水质检测的指示菌株。利用生物检测菌株快速检测、C18反相薄层层析和β-半乳糖苷酶含量测定,证实了该菌存在LuxI-LuxR型群体感应系统,并产生N-酰基高丝氨酸内酯类自诱导物。进一步的实验表明,该信号分子活性随生长阶段有较大变化,其粗提物不仅能调控菌体的生物发光,对菌体生长繁殖也产生较大影响。     

新型DNA疫苗的构建及其对小鼠保护作用的研究

目的：构建新型单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗,检测其激发小鼠产生免疫反应的能力。方法：RT-PCR鉴定单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA疫苗在COS-7细胞中的表达,ELISA检测血清中中和抗体水平,病毒攻击检测其保护效应。结果：DNA疫苗候选株pVAX-gD能在COS-7细胞中表达,激发小鼠产生高滴度中和抗体,有效保护小鼠免受致死量病毒的攻击。结论：构建的新型单纯疱疹DNA疫苗是一株很有希望的人用生殖器疱疹疫苗。     

CAS平板覆盖法检测氢氧化细菌铁载体

【目的】用CAS平板覆盖法检测氢氧化细菌铁载体,解决通用CAS琼脂平板法中十六烷基三甲基溴化铵对真菌和某些细菌的生长抑制问题。【方法】将改良的CAS检测培养基覆盖在长满菌落的无铁培养基上,生长抑制问题因微生物未与十六烷基三甲基溴化铵直接接触而解决。【结果】3株氢氧化细菌SDW-5、SDW-9和AaP-13均能产生单菌落,加入CAS检测培养基1 h后,菌落周围产生明显的铁载体晕圈。【结论】本方法成功解决了生长抑制问题,可以作为检测微生物铁载体的通用方法。