2018—2020年平顶山地区非结核分枝杆菌菌种鉴定及耐药性分析

本文旨在观察2018—2020年河南省平顶山地区非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)的菌种分布及耐药情况。收集2018年1月—2020年12月平顶山市传染病医院分离到的326株NTM,采用DNA微阵列芯片鉴定菌种,改良罗氏培养基比例法进行药敏试验。结果显示,从61～80岁患者中分离的NTM菌株最多,其次是41～60岁患者。共鉴定出8个NTM菌种,分别为胞内分枝杆菌(35.28%)、龟/脓肿分枝杆菌(24.85%)、鸟分枝杆菌(18.40%)、偶然分枝杆菌(5.21%)、戈登分枝杆菌(1.23%)、堪萨斯分枝杆菌(12.58%)、浅黄分枝杆菌(1.53%)、瘰疬分枝杆菌(0.92%)。NTM对异烟肼的耐药率最高,为97.85%。除戈登分枝杆菌外,其他NTM菌种对异烟肼的耐药率均＞94%;胞内分枝杆菌对丙硫异烟胺的耐药率(8.70%)相对较低,鸟分枝杆菌对丙硫异烟胺的耐药率为10.00%;龟/脓肿分枝杆菌对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、阿米卡星的耐药率均＞95%;偶然分枝杆菌对左氧氟沙星的耐药率为35.29%,堪萨斯分枝杆菌对左氧氟沙星的耐药率最低(7.32%);戈登分枝杆菌对异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、对氨基水杨酸的耐药率均≥50%;浅黄分枝杆菌对乙胺丁醇、左氧氟沙星、阿米卡星、卡那霉素的耐药率均＜50%;瘰疬分枝杆菌对阿米卡星和丙硫异烟胺的耐药率为0。结果提示,2018—2020年河南省平顶山地区鉴定出的8个NTM菌种中,胞内分枝杆菌占比最高,不同菌种对不同抗结核药物的耐药性差异较大,因此菌种鉴定对临床治疗有重要意义。     

非结核分枝杆菌肺病临床分离株的菌种鉴定及临床特征分析

为探究非结核分枝杆菌（nontuberculous mycobacterium,NTM）肺病临床分离株的菌种分布及临床特征, 对2017年5月―2018年10月就诊于复旦大学附属中山医院的90例NTM肺病患者的样本进行分析。采用快速全自动分枝杆菌培养和药物敏感检测系统（BACTEC MGIT960 System）或改良罗氏培养法对90例患者的采集样本进行培养,利用基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）进行菌种鉴定,并对回顾性分析收集的90例患者的临床资料进行分析。结果NTM菌种鉴定为9种,其中慢速生长分枝杆菌65例,以胞内分枝杆菌（54.4%,49/90）占多数;快速生长分枝杆菌25例,以脓肿分枝杆菌（22.2%,20/90）占多数。90例患者中确诊67例、疑似23例。确诊患者中少见菌种所占比例较低（6.0% vs 26.1%,P = 0.016）。确诊与疑似患者在临床表现方面未见显著差异,但确诊患者有抗NTM治疗史的比例显著高于疑似患者（85.1% vs 4.3%,P < 0.001）。确诊患者中,快速生长NTM肺病患者既往抗结核治疗史的比例显著高于慢速生长组（52.9% vs 24.0%,P = 0.036）。本研究结果为NTM肺病的临床诊治提供了数据参考。     

利用rpoB基因芯片技术进行快速分枝杆菌菌种鉴定

利用rpoB基因芯片技术快速进行分枝杆菌菌种鉴定.以分枝杆菌rpoB基因编码序列为靶基因,用基因芯片技术检测21种分枝杆菌标准株;8种其它细菌标准株;126株临床分离株.分枝杆菌与其它细菌标准株经PCR扩增后,分枝杆菌标准株均扩增出360 bp DNA片段,在其它细菌中,除甲型溶血性链球菌和假白喉棒状杆菌出现同样片段外,其它细菌均未见扩增.21种寡核苷酸探针除海分枝杆菌与偶然分枝杆菌的探针有交叉杂交外,其余均为特异性杂交.对126株临床分离株进行鉴定,89株为结核分枝杆菌,占70.6%(89/126),非结核分枝杆菌(NTM)占9.2%(9/98).应用rpoB基因芯片技术鉴定分枝杆菌菌种,是一种快速、准确的方法,具有较高的临床应用价值.     

牛型纯化蛋白衍生物皮内变态反应试验阳性牛中分枝杆菌的分离与鉴定

为评价牛分枝杆菌纯化蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)单纯颈部皮内变态反应试验(single intradermal cervical tuberculin,SICT)在奶牛结核病检测中的特异性,采集54头SICT阳性牛的118份组织样品进行病原分离和鉴定。结果显示,14头SICT阳性牛样品中分离到抗酸阳性菌,占SICT阳性牛总数的25.9%(14/54)。其中,10头阳性牛样品中分离到分枝杆菌,占18.5%(10/54);1头阳性牛样品中分离到牛分枝杆菌,占1.9%(1/54)。从118份组织样品中分离到16株抗酸阳性菌,其中12株为分枝杆菌,分枝杆菌分离率为10.2%(12/118)。12株分枝杆菌中,1株为牛分枝杆菌,其余11株为禽分枝杆菌、土地分枝杆菌等非结核分枝杆菌。牛分枝杆菌与非结核分枝杆菌分别占分枝杆菌分离株的8.3%(1/12)和91.7%(11/12)。病原分离和鉴定结果表明,SICT阳性牛的牛分枝杆菌分离率较低,为确保检测结果的准确性,有必要采用其他检测方法进行验证。同时,可将分枝杆菌快速分离培养及菌种鉴定检测技术引入对皮内变态反应试验阳性牛的实验室诊断,进一步提高牛结核病检测的特异性。     

利用rpoB基因芯片技术进行快速分枝杆菌菌种鉴定

利用rpoB基因芯片技术快速进行分枝杆菌菌种鉴定。以分枝杆菌rpoB基因编码序列为靶基因, 用基因芯片技术检测21种分枝杆菌标准株;8种其它细菌标准株;126株临床分离株。分枝杆菌与其它细菌标准株经PCR扩增后, 分枝杆菌标准株均扩增出360 bp DNA片段, 在其它细菌中, 除甲型溶血性链球菌和假白喉棒状杆菌出现同样片段外, 其它细菌均未见扩增。21种寡核苷酸探针除海分枝杆菌与偶然分枝杆菌的探针有交叉杂交外, 其余均为特异性杂交。对126株临床分离株进行鉴定, 89株为结核分枝杆菌, 占70.6％(89/126), 非结核分枝杆菌(NTM)占9.2％(9/98)。应用rpoB基因芯片技术鉴定分枝杆菌菌种, 是一种快速、准确的方法, 具有较高的临床应用价值。     

用于结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌鉴定的4种方法效能比较

比较硝基苯甲酸/噻吩−2−羧酸肼（PNB/TCH）生长试验、胶体金法、荧光PCR法和基因芯片法用于结核分枝杆菌（MTB）和非结核分枝杆菌（NTM）鉴定的效能,从而为临床选择鉴别MTB和NTM的实验室方法提供参考依据。

收集2021—2022年疑似肺结核患者痰液和肺泡灌洗液样本,选择经BACTEC MGIT 960全自动快速分枝杆菌培养鉴定药敏仪液体培养阳性的440份标本,分别采用PNB/TCH生长试验、胶体金法、荧光PCR法和基因芯片法鉴定MTB和NTM。以16S rRNA基因测序法为金标准,比较4种方法的效能。

440份分枝杆菌阳性标本,16S rRNA基因测序法鉴定出MTB和NTM分别为316株和124株。PNB/TCH生长试验、胶体金法、荧光PCR法和基因芯片法鉴定MTB的敏感度分别为96.5%、97.8%、100.0%和99.7%,差异具有统计学意义（χ² = 17.261,P = 0.012）;特异度分别为90.3%、100.0%、100.0%和98.4%,差异具有统计学意义（χ² = 29.110,P＜0.001）;符合率分别为94.8%、98.4%、100.0%和99.3%,κ值分别为0.87、0.96、1.00和0.98。

PNB/TCH生长试验、胶体金法、荧光PCR法和基因芯片法均可用于MTB和NTM鉴定。胶体金法和荧光PCR法鉴定MTB时效性较好,但胶体金法经济、便捷,更适合于基层临床实验室MTB快速鉴定;基因芯片法对软、硬件均有一定要求、检测成本较高,在一定程度上限制了临床的普及应用。

     

应用光敏生物素标记核酸探针鉴定分枝杆菌的研究

用光敏生物素标记非结核分枝杆菌临床分离株及标准分枝杆菌全染色体ＤＮＡ制成探针,与已知标准牛分枝杆菌（ＢＣＧ株）及不同种的非结核分枝杆菌ＤＮＡ杂交,可快速将分支杆菌鉴定到种,同时以大肠埃希氏菌做阴性对照,显示良好的特异性和准确性。此种方法具有鉴定速度快、操作简便、稳定性好及对人体无害等特点,适用于结核杆菌和非结核分枝杆菌的菌种鉴定。     

儿科重症监护病房感染病原菌分布及耐药性分析

目的明确儿科重症监护病房感染病原菌的分布及耐药性,指导临床合理应用抗菌药物。方法对浙江大学医学院附属儿童医院内科ICU 2005年1月至2009年12月各类感染标本所分离的病原菌及其耐药状况进行回顾性分析。结果 5年间送检标本13 785份,共分离出病原菌1 989株。感染优势菌为肺炎克雷伯菌（312株占15.7%）,鲍曼醋酸钙不动杆菌（300株占15.1%）,表皮葡萄球菌（221株占11.1%）,真菌（180株占9.0%）,铜绿假单胞菌（119株占6.0%）及大肠埃希菌（89株占4.5%）。革兰阴性菌占58.6%,革兰阳性菌株占32.4%,真菌占9.0%。鲍曼醋酸钙不动杆菌的感染率及耐药率呈逐年上升趋势。革兰阳性球菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主,药敏试验结果显示除万古霉素、利奈唑烷外,葡萄球菌对于其他抗菌药物的耐药程度非常高。结论 ICU细菌耐药形势严峻,监测病区感染及细菌耐药状况,依据病原学及耐药性资料合理选择抗菌药物非常重要。 更多还原     

ICU机械通气并发下呼吸道医院感染病原菌的调查分析

目的：分析ICU机械通气并发下呼吸道医院感染病原学构成及耐药情况。为临床防治提供依据。方法：对我院1996年6月-1999年6月3间ICU收住的98例机械通气合并下呼吸道医院感染患者的致病菌及药敏结果进行回顾性调查。结果：共检出致病毒128株,其中革兰阴性细菌（G^-菌）占66.4%（85株）,革兰阳性细菌（G^ 菌）占25.8%(33株）,真菌占7.8%(10株）;前四位致病菌分别为铜绿假单胞菌（24株）,革兰阳性细菌（G^ 菌）占25.8%(33株）,真菌占7.8%(10株）;前四位致病菌分别为铜绿假单胞菌（24株）,金黄色葡萄球菌（22株）,不动杆菌属（21株）,肠杆菌属（18株）,药敏结果显示这类菌株多重耐药现象严重。结论：ICU机械通气并发下呼吸道医院感染病原体构成以G^-菌为主,其药敏试验呈多重耐药,临床应重视病原学检查,开展细菌耐药性监测,合理使用抗菌药物。     

医院内鲍曼不动杆菌感染调查及泛耐药情况分析

目的 了解义乌市妇幼保健院近3年来医院内鲍曼不动杆菌感染现状,及泛耐药情况.方法 对医院2009年至2011年分离的鲍曼不动杆菌分布及耐药情况进行回顾性分析.细菌鉴定采用美国德灵细菌鉴定仪.结果 3年间共分离到鲍曼不动杆菌305株,其中2009年72株,2010年91株,2011年142株,泛耐药菌株感染率呈现出逐年上升趋势,2009年5株(占6.94％),2010年9株(占9.89％),2011年有19株(占13.38％).结论 鲍曼不动杆菌感染呈逐年上升趋势,其泛耐药菌株感染率呈上升趋势.应加强抗生素的合理使用,控制鲍曼不动杆菌在医院内的定值和播散,重视泛耐药鲍曼不动杆菌监测.