痛泻要方对肝气乘脾泄泻小鼠肠道微生物活度的影响

目的探讨痛泻要方对肝气乘脾泄泻小鼠肠道微生物活度的影响,为痛泻要方通过调节肠道微生物治疗肝气乘脾泄泻提供实验基础和理论依据。方法将25只SPF级雄性昆明小鼠随机分为正常组10只和模型组15只,造模成功后,随机选取正常组和模型组动物各5只,在无菌环境下提取肠道内容物和肠黏膜,剩余模型动物随机分为自然恢复组和治疗组各5只,治疗成功后处死各组动物提取肠道内容物和肠黏膜。用荧光素二乙酸法测定各样品中微生物活度。结果肝气乘脾泄泻造模小鼠肠道内容物微生物活度高于正常组,与正常组相比差异有统计学意义(P=0.01),而模型组小鼠肠黏膜微生物活度降低,与正常组相比差异有统计学意义(P=0.01)。痛泻要方治疗组和自然恢复组小鼠肠道内容物微生物活度均降低,与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05),治疗组和自然恢复组小鼠的肠黏膜前段和后段均与正常组差异有统计学意义(P=0.001),肠黏膜中段自然恢复组与正常组差异有统计学意义(P=0.043),而治疗组与正常组没有差异。结论肝气乘脾泄泻造模使肠道内容物微生物活度增加,而使肠黏膜微生物活度降低。痛泻要方能够使肝气乘脾泄泻小鼠肠道内容物中微生物活度降低,恢复至正常水平,增加肠黏膜中段微生物活度,对肠黏膜后段微生物活度增加作用更显著。     

痛泻要方对“肝气乘脾”泄泻小鼠肠黏膜及肠内容物消化酶活性的影响

目的探讨痛泻要方对"肝气乘脾"泄泻小鼠肠道酶活性的影响。方法采用"番泻叶-离心管束缚夹尾法"进行"肝气乘脾"泄泻造模,造模成功后以痛泻要方治疗,造模和治疗后分别分析小鼠肠道酶活性。结果造模后,模型组小鼠肠道内容物的淀粉酶活性显著降低(t=4.007,P=0.015),纤维素酶、蛋白酶、蔗糖酶活性下降不显著。模型组小鼠肠黏膜蛋白酶、淀粉酶、蔗糖酶活性显著下降(t_蛋=5.652,P=0.005;Z_淀=-1.964,P=0.050;t_蔗=4.737,P=0.009)。痛泻要方治疗后,中药干预组小鼠肠道内容物蛋白酶、纤维素酶、乳糖酶和蔗糖酶活性变化不显著;自然恢复组的淀粉酶活性显著高于正常组(t=-7.497,P=0.002)。中药干预组小鼠肠道前段黏膜蛋白酶、乳糖酶、淀粉酶、蔗糖酶活性恢复不显著;中药干预组小鼠肠道黏膜中段乳糖酶、蔗糖酶活性显著低于自然恢复组(t_乳=4.074,P=0.013;t_蔗=8.072,P0.001),而蛋白酶、淀粉酶及纤维素酶活性均高于自然恢复组;中药干预组小鼠肠道后段黏膜乳糖酶、蔗糖酶及淀粉酶活性显著高于正常组(t_乳=-7.962,P0.001;t_蔗=-15.921,P0.001;Z_淀=6.489,P=0.034),蛋白酶与纤维素酶活性均有所升高。结论 "肝气乘脾"泄泻肠道内容物及黏膜淀粉酶活性显著降低,痛泻要方对"肝气乘脾"泄泻小鼠肠黏膜乳糖酶、蔗糖酶及淀粉酶活性作用显著。     

四磨汤口服液对脾虚便秘小鼠肠道微生物及酶活性的影响

目的探讨四磨汤对脾虚便秘疗效、肠道微生物和酶活性的影响。方法将18只实验小鼠随机分成模型组、正常对照组和治疗组,每组6只。对模型组和治疗组采用灌胃番泻叶水煎液7 d后控制饮食,饥饱失常8 d,进行小鼠脾虚便秘造模。造模结束后,模型组和正常对照组均用无菌水灌胃,治疗组用四磨汤口服液灌胃,共7 d,然后采集肠道内容物,分析肠道菌群及酶活性。结果模型组自然恢复后,肠道微生物(细菌总数、大肠埃希菌、乳酸菌、双歧杆菌和真菌)、纤维素酶活性、木聚糖酶活性、淀粉酶活性和蛋白酶活性与正常对照组比较差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。治疗组大肠埃希菌数和真菌数与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05),达到正常对照组水平。细菌总数显著增加(P0.01),乳酸菌显著减少(P0.05),双歧杆菌数目显著增加(P0.01),治疗组纤维素酶和木聚糖酶活性极显著低于正常对照组(P0.01),淀粉酶活性极显著高于正常对照组(P0.01),蛋白酶活性与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论四磨汤通过调控肠道菌群平衡,调整肠道酶活性来治疗脾虚便秘。     

新生儿胆汁淤积症患儿肠道菌群与分娩方式及喂养方式的关系

目的分析新生儿胆汁淤积症患儿肠道菌群特征及其与分娩方式、喂养方式的关系。方法选择2018年6月至2019年6月我院收治的40例新生儿胆汁淤积症患儿作为观察组,选择同期入院的120例健康新生儿作为对照组,比较两组对象肠道菌群分布情况。各组对象进一步按不同喂养方式分为母乳喂养组和混合喂养组,按不同分娩方式分为阴道分娩组和剖宫产组,分析各组新生儿肠道菌群与分娩方式、喂养方式的相关性。结果观察组新生儿粪便中双歧杆菌、乳杆菌数量及双歧杆菌/大肠埃希菌值[(7.53±0.57)lg copies/g、(8.12±0.71)lg copies/g、1.06±0.18]明显少于对照组[(9.58±0.64)lg copies/g、(8.64±0.75)lg copies/g、1.39±0.22],大肠埃希菌数量[(7.28±0.85)lg copies/g]明显多于对照组[(6.81±0.63)lg copies/g]。观察组中,阴道分娩与剖宫产分娩患儿粪便中双歧杆菌、乳杆菌、大肠埃希菌数量及双歧杆菌/大肠埃希菌值差异均有统计学意义(P0.05)。观察组中,母乳喂养与混合喂养新生儿粪便中双歧杆菌、乳杆菌、大肠埃希菌数量及双歧杆菌/大肠埃希菌值差异均有统计学意义(P0.05)。结论新生儿胆汁淤积症患儿肠道菌群存在异常,且受到分娩方式和喂养方式的影响。     

葛根芩连汤对肠道湿热证泄泻小鼠肠道微生物的影响

目的探讨葛根芩连汤对肠道湿热证泄泻小鼠肠道微生物的影响。方法造模:10只KM雄性小鼠随机分为正常组5只和模型组5只,采用"高糖高脂+高温高湿+白酒复合灌胃冰水"的方法制备肠道湿热证泄泻小鼠模型。治疗:15只KM雄性小鼠随机分为正常组5只和模型组10只,造模成功后将模型组小鼠分为自愈组和治疗组,治疗组小鼠运用葛根芩连汤进行治疗,分别在造模和治疗后无菌采集小鼠肠道内容物进行微生物培养。结果造模后,小鼠出现懒动、肛温升高、体重增长缓慢、黄褐色稀便、肛门污秽等湿热泄泻症状,肠道乳杆菌数高于正常组,而细菌总数、肠杆菌、双歧杆菌、B/E值降低,其中细菌总数以及双歧杆菌数与正常组相比差异有统计学意义(t=14.182,P0.001;t=2.797,P=0.049)。经葛根芩连汤治疗后,小鼠肠道乳杆菌和双歧杆菌数高于正常组,而细菌总数、肠杆菌数低于正常组,且乳杆菌数和肠杆菌数与正常组相比差异有统计学意义(t=-5.210,P=0.033;t=-11.160,P=0.008),B/E值与正常组差异无统计学意义(t=-1.427,P=0.227)。结论造模使小鼠肠道双歧杆菌数显著降低,B/E值下降;葛根芩连汤可促进肠道湿热证泄泻小鼠肠道乳杆菌和双歧杆菌的增生,提高B/E值。     

感染性心内膜炎与肠道菌群的相关性研究

目的 探讨感染性心内膜炎与肠道乳杆菌、双歧杆菌和大肠埃希菌的临床相关性。方法 选择2008年4月至2016年4月湖州市第一人民医院心内科病房收治的单纯感染性心内膜炎患者67例为观察组,选择同期来院体检结果正常者65例为对照组。分别收集观察组患者治疗前1天、治疗第3天和治疗1周后3个不同时间节点的粪便标本,同时收集对照组的粪便标本,通过FISH实验检测粪便中双歧杆菌和乳杆菌的含量差异,同时通过16SrRNA/DNA荧光定量PCR技术进一步明确观察组患者3个时期肠道双歧杆菌、大肠埃希菌和乳杆菌与对照组的数量差异。结果 观察组患者治疗前1天双歧杆菌值为6.2%±0.56%,治疗第3天为4.3%±0.34%,治疗1周后为8.7%±0.56%,对照组双歧杆菌值为9.4%±0.98%。观察组患者治疗前1天乳杆菌值为5.4%±0.86%,治疗第3天为4.9%±0.24%,治疗1周后为6.1%±0.72%,对照组乳杆菌值为8.3%±0.51%。治疗前1天与治疗1周后,观察组患者双歧杆菌和乳杆菌值与对照组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）。16SrRNA/DNA荧光定量PCR检测表明,观察组患者在3个治疗时期中肠道乳杆菌、双歧杆菌和大肠埃希菌数量的对数值与对照组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。其中观察组患者双歧杆菌和乳杆菌数量在治疗第3天较低,1周后有所回升;大肠埃希菌数量在治疗第3天亦较低, 但1周后没有明显回升。结论 感染性心内膜炎患者肠道菌群数量与健康人相比有所下降,肠道乳杆菌、大肠埃希菌和双歧杆菌失调可能影响其发病和转归。     

超微铁皮石斛对脾虚便秘小鼠肠道微生物及酶活的影响

目的探讨超微铁皮石斛对脾虚便秘小鼠肠道微生物及酶活性的影响。方法采用灌胃番泻叶水煎液7 d后控制饮食,饥饱失常8 d,进行小鼠脾虚便秘造模。设模型组、正常组和治疗组,模型组和正常组灌胃无菌水,治疗组分别灌胃给药铁皮石斛传统汤剂、超微全量汤剂、超微50%量汤剂和超微25%量汤剂,共7 d,然后采集肠道内容物分析肠道菌群及酶活。结果模型组五类可培养微生物（细菌总数、大肠埃希菌、乳酸菌、双歧杆菌和真菌）数量与正常组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）;铁皮石斛传统汤剂组大肠埃希菌数,铁皮石斛超微50%量汤剂组细菌总数、大肠埃希菌和真菌数,超微25%量汤剂组细菌总数和大肠埃希菌数均达到正常组水平（P〉0.05）;铁皮石斛超微全量汤剂组和超微50%量汤剂组对纤维素酶的影响作用相当,均达到正常组水平（P〉0.05）,铁皮石斛三种不同剂量的超微汤剂对木聚糖酶活性的影响作用相当（P〉0.05）,铁皮石斛超微全量汤剂组淀粉酶活性与正常组相当（P〉0.05）。结论铁皮石斛传统汤剂、超微全量汤剂和超微50%量汤剂对脾虚便秘均有很好的疗效,能够调控肠道微生态平衡及肠道酶活性。     

富硒猴头菇对小鼠肠道菌群的调节作用

目的以昆明小鼠为实验对象,观察富硒猴头菇对小鼠肠道菌群的影响。方法设高、中和低3个剂量组和1个普通猴头菇对照组,1个蒸馏水对照组,搜集粪便,用细菌16S rDNA荧光定量PCR法测定3大类肠道菌的数量。结果富硒猴头菇冻干粉灌胃后,中剂量组和高剂量组小鼠肠道中大肠埃希菌明显减少,低、中剂量组双歧杆菌增多,高剂量组乳酸菌增多,差异有统计学意义(P0.05)。且断药3 d后,中剂量组的大肠埃希菌、双歧杆菌数量,高剂量组的大肠埃希菌、乳酸菌数量与正常对照组相比差异仍有统计学意义。结论富硒猴头菇对小鼠肠道菌群有明显调节作用。     

咖啡摄入量对小鼠肠道微生物及酶活性的影响

目的 研究摄入不同咖啡浓度对小鼠酶活性、肠道微生物、体重的影响,从分析肠道四种微生物变化和四种酶的活性变化来讨论摄入咖啡对健康的影响。方法 SPF级昆明小鼠随机分为4组,即低、中、高咖啡浓度组和正常对照组,所有实验组小鼠日常给予蒸馏水饮用,实验低、中、高浓度组每天2次分别灌胃给予0.0045 g/mL、0.0090 g/mL、0.0180 g/mL的咖啡溶液0.4 mL/（只•次）,对照组给予蒸馏水灌胃,实验时间为1个月,测小鼠体重、肠道微生物和酶活性等指标并进行分析。结果 与对照组相比,低浓度咖啡摄入组乳杆菌、双歧杆菌、大肠埃希菌数显著增加（P＜0.01或P＜0.05）,需氧和厌氧细菌数显著降低（P＜0.01）;中浓度咖啡摄入组乳杆菌、双歧杆菌数显著低于对照组和低浓度组（P＜0.01）,大肠埃希菌显著高于对照组（P＜0.05）;高浓度咖啡摄入组乳杆菌和大肠埃希菌总数显著低于对照组（P＜0.01或P＜0.05）;低浓度摄入组的木聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶的活性均显著高于（Ps＜0.01）对照组和中浓度咖啡摄入组;各组小鼠体重差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 适当摄入咖啡小鼠肠道双歧杆菌和乳杆菌等益生菌数量增加显著,小鼠肠道中具有代表性的淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶、木聚糖酶的活性均显著增加,但咖啡摄入对小鼠体重影响不显著。     

益气健脾中药颗粒剂对早期断奶仔猪肠道菌群的影响

目的研究中药复方颗粒剂对断奶仔猪肠道微生态的影响。方法实验选用人工感染大肠埃希菌引起腹泻的28日龄断奶仔猪54头,随机平均分为3组,每组3个重复,Ⅰ组抗生素治疗组、Ⅱ组中药复方颗粒剂治疗组、Ⅲ组不用任何药物治疗的空白对照组。分别于用药后第14天时,每组随机抽取1头屠宰,无菌采集空肠,回肠和盲肠内容物,利用平板计数法测定各肠段大肠埃希菌、双歧杆菌和乳酸杆菌数量。结果 Ⅰ组双歧杆菌、乳酸杆菌及大肠埃希菌的数量均显著小于Ⅲ组（P〈0.05）;Ⅱ组双歧杆菌和乳酸杆菌的数量显著大于Ⅲ组（P〈0.05）,大肠埃希菌数量显著小于Ⅲ组（P〈0.05）; n组双歧杆菌和乳酸杆菌的数量极显著大于Ⅰ组（P〈0.01）,Ⅱ组与Ⅰ组大肠埃希菌数量差异无统计学意义（P〉0.05）。结论该中药复方颗粒剂具有显著增加断奶仔猪肠道中双歧杆菌和乳酸杆菌的数量,降低大肠埃希菌数量,减少腹泻频率的作用。     

急性呼吸窘迫综合征新生儿肠道菌群特征及其对免疫功能的影响

研究急性呼吸窘迫综合征(ARDS)新生儿肠道菌群特征及其对免疫功能的影响。

采用前瞻性研究方法, 以我院2017年1月至2021年1月诊断的新生儿急性呼吸窘迫综合征患儿120例作为研究对象, 其中轻度患儿39例, 中度患儿45例, 重度患儿36例, 另选取同期出生的健康新生儿120例作为对照组, 收集患儿的粪便样本并保存于厌氧菌稀释液, 使用MRS琼脂培养基、KF琼脂培养基、马丁培养基检测肠道双歧杆菌、肠球菌、乳杆菌以及真杆菌的数量, 比较各类患儿肠道菌群、免疫指标的差异。

观察组患儿肠道双歧杆菌(t=16.217, P < 0.001)、肠球菌(t=10.677, P < 0.001)、乳杆菌(t=8.326, P < 0.001)以及真杆菌(t=12.455, P < 0.001)数量显著低于对照组。轻度组、中度组以及重度组患儿肠道双歧杆菌(F=13.069, P < 0.001)、肠球菌(F=10.269, P < 0.001)、乳杆菌(F=12.036, P < 0.001)以及真杆菌(F=10.698, P < 0.001)数量之间的差异有统计学意义。患儿出生后第10天肠道乳杆菌[(8.37±0.53)lg CFU/g]、双歧杆菌[(9.89±1.61)lg CFU/g]、肠球菌[(7.903±2.12)lg CFU/g]以及真杆菌[(7.12±1.29)lg CFU/g]数量显著低于出生后第20天时的肠道乳杆菌[(8.99±0.31)lg CFU/g]、双歧杆菌[(10.62±2.64)lg CFU/g]、肠球菌[(8.51±2.28)lg CFU/g]以及真杆菌[(7.91±1.01)lg CFU/g]数量(均P < 0.05)。观察组患儿血清补体C3(t=14.183, P < 0.001)、补体C4(t=9.002, P < 0.001)、IgM(t=11.904, P < 0.001)、IgG(t=147.674, P < 0.001)水平显著低于对照组, 而IgA(t=13.874, P < 0.001)水平显著高于对照组。轻度组、中度组以及重度组患儿血清补体C3(F=11.369, P < 0.001)、补体C4(F=10.396, P < 0.001)、IgM(F=11.003, P < 0.001)、IgG(F=9.663, P < 0.001)、IgA(F=9.245, P < 0.001)之间的差异均有统计学意义。C3、C4、IgM、IgG水平从高到低依次为轻度组、中度组以及重度组。IgA水平从高到低依次为重度组、中度组以及轻度组。肠道双歧杆菌、肠球菌、乳杆菌以及真杆菌与C3、C4、IgM、IgG水平呈正相关, 与IgA水平呈负相关。

ARDS新生儿肠道菌群与免疫功能具有显著相关性, 未来可作为临床治疗的重要靶点之一。

     

甜味剂对七味白术散治疗抗生素相关性腹泻小鼠肠道微生物及酶活性的影响

探讨4种常用甜味剂对七味白术散治疗抗生素相关性腹泻的影响,为药剂辅料的选用对药效的影响及临床治疗指导患者服药提供实验依据。

选择42只SPF级昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、七味白术散组、蔗糖组、糖精钠组、山梨醇组和木糖醇组,每组6只。造模阶段正常组灌胃无菌水,模型组和治疗组采用抗生素混合液（庆大霉素+头孢拉定）建立小鼠抗生素相关性腹泻模型。治疗阶段对正常组和模型组小鼠灌胃无菌水,5个治疗组小鼠分别灌胃七味白术散、蔗糖+七味白术散、糖精钠+七味白术散、木糖醇+七味白术散及山梨醇+七味白术散。治疗结束后,分别收集各组小鼠脾脏、胸腺以及肠道内容物,进行脏器指数、肠道微生物数量及肠道酶活性分析。

与模型组相比,七味白术散组和山梨醇组小鼠的脾脏指数增加,但差异无统计学意义（均P＞0.050）;各组小鼠的胸腺指数差异无统计学意义（P＞0.050）。与七味白术散组相比,添加甜味剂组别的腹泻小鼠肠道内容物中的细菌数和大肠埃希菌数均有一定程度的增加,其中山梨醇组的大肠埃希菌数量变化最小（P = 0.002）;蔗糖组和山梨醇组腹泻小鼠肠道内容物中的双歧杆菌数量（P＜0.001、P＞0.050）和乳杆菌数量（P = 0.001、P＜0.001）均有所增加。与七味白术散组相比,添加甜味剂组别的小鼠均在不同程度上提高了酶活性,其中木糖醇组酶活性最高,山梨醇组和蔗糖组次之,糖精钠组酶活性最低。

甜味剂的添加对七味白术散治疗抗生素相关性腹泻疗效有一定影响,山梨醇作为甜味剂在药物制剂领域中的应用十分具有前景,但其是否能够替代传统甜味剂蔗糖在未来中药制剂中作为矫味剂被选用仍需进一步进行探究。

     

驼乳源益生菌对db/db鼠肠道菌群的调节作用

目的 探究驼乳来源复合益生菌对db/db鼠血糖及肠道菌群的调节作用。方法 将60只db/db鼠随机分为5组,每组12只,分别为模型组、二甲双胍组、利拉鲁肽组、低剂量复合益生菌组和高剂量复合益生菌组,12只C57BL/Ks小鼠为正常对照组。阳性药组分别灌胃0.3 mg/g二甲双胍及皮下注射0.2 μg/g利拉鲁肽,低剂量复合益生菌组灌胃乳酸菌1.0×108 CFU/d和酵母菌1.0×106 CFU/d,高剂量复合益生菌组灌胃乳酸菌1.0×1010 CFU/d和酵母菌1.0×108 CFU/d,其他组灌胃生理盐水。血糖仪检测空腹血糖（FBG）及不同时间段血糖水平。ELISA法检测糖化血红蛋白（HbA1c）含量。实时荧光定量PCR检测粪便菌群含量。结果 与模型组相比,低、高剂量复合益生菌组FBG水平明显减少,改善葡萄糖耐受（OGTT）能力,降低HbA1c含量。与模型组相比,低、高剂量复合益生菌组显著降低厚壁菌门、放线菌门和大肠埃希菌属水平,增加拟杆菌门、乳杆菌属和双歧杆菌属水平,但对总菌与梭杆菌属无影响。结论 驼乳来源复合益生菌可通过调节肠道菌群降低db/db鼠血糖含量。     

七味白术散对菌群失调腹泻小鼠肠道细菌多样性的影响

【背景】肠道微生物与人体多项生理功能密切相关,我们课题组前期研究表明七味白术散对菌群失调腹泻有较好的疗效。【目的】探讨与七味白术散疗效相关肠道微生物,比较传统中药饮片与超微中药饮片的疗效,进一步明确七味白术散治疗菌群失调腹泻的机理,为临床应用提供科学依据。【方法】应用抗生素建立菌群失调小鼠腹泻模型,分别灌胃给药七味白术散传统汤剂和超微50%量七味白术散汤剂。治疗结束后,提取肠道内容物微生物宏基因组DNA,建立16S rRNA基因文库进行测序。【结果】肠道微生物中的群落由乳酸菌(Lactobacillus spp.)、屎肠球菌(Enterococcus feacium)、梭状芽孢杆菌(Clostridium spp.)、黏液真杆菌(Blautia producta)、毛螺旋菌(Anaerostipes spp.)、腐生性葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)和不能培养的细菌组成,其中乳酸菌为优势菌,占全部细菌DNA克隆数的61.90%。经抗生素造模后Lactobacillus spp.数量明显减少,Enterococcus feacium成为优势菌种,Clostridium spp.、Blautia product、Anaerostipes spp.和Staphylococcus saprophyticus等在数量上开始有增长的趋势,而治疗结束后,传统七味白术散治疗组和超微50%量七味白术散治疗组的Lactobacillus spp.比例均有所恢复,且超微50%量七味白术散治疗组的乳酸菌比例与正常组最接近;通过建立聚类树和计算各组中各菌群的多样性(H)、丰富度(S)、均匀度(E)及优势度指数(D)可知,超微50%量七味白术散治疗组可与正常组聚为一类,且超微50%量七味白术散治疗组各项指数与正常组最为接近,说明超微50%量七味白术散治疗组肠道微生物的基因文库及多样性与正常组最接近,超微50%量七味白术散汤剂的治疗效果优于七味白术散传统汤剂。【结论】应用16S rRNA基因克隆文库技术进一步明确了正常小鼠肠道中细菌群落的组成,以及七味白术散对菌群失调腹泻小鼠肠道细菌群落的恢复效果,超微50%量七味白术散汤剂的治疗效果优于七味白术散传统汤剂。     

双歧杆菌对母婴分离大鼠成年后肠道敏感性及结肠脑源性神经营养因子表达的影响

摘要 目的：探讨双歧杆菌对母婴分离大鼠成年后肠道敏感性及结肠脑源性神经营养因子表达的影响。方法：将60只新生期SD大鼠随机分为NS组（正常组）、MS组（模型组）、MS+Bif组（双歧杆菌干预）,每组20只大鼠,应用避水应激模型(chronic water avoidance stress,WAS)避水实验构建大鼠应激波形,通过兴盛时期母婴分离建立大鼠的肠道高敏感模型,新生鼠在断奶之后对溶剂组与双歧杆菌组分别进行灌胃干预,取大鼠的新鲜粪便进行选择性培养基平皿技术方法检测大鼠粪便的菌群代表性菌种数量。到大鼠8 w成年之后应用阶梯体积直肠求精扩张对三组大鼠肠道敏感性进行评价。结果：与对照组相比,模型组大鼠的大肠杆菌和类杆菌数量明显增多,且通过双歧杆菌干预之后大肠杆菌和类杆菌数量下降,三组大鼠大肠杆菌和类杆菌数量差异显著（P＜0.05）,三组大鼠的双歧杆菌和乳酸菌对比无明显差异（P＞0.05）;对比大鼠成年时利用阶梯体积为0 mL、0.4 mL、0.8 mL和1.2 mL直肠球囊扩张评价三组大鼠的肠道敏感性发现,NS组与MS组在0 mL和0.4 mL体积球囊出现扩张的时候血管运动反应性(vascular motor reactivity,VMR)对比无明显差异（P＞0.05）,从0.4 mL到1.2 mL两组大鼠显著提高,且对比出现显著差异（P＜0.05）,MS组与MS+Bif组,在0 mL到0.4 mL体积球囊出现扩张的时候VMR对比无明显差异（P＞0.05）,在0.4 mL到1.2 mL之后VMR差异显著（P＜0.05）;对比大鼠血清中的促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin releasing factor,CRF)发现,三组ACTH和CRF表达差异显著（P＜0.05）;对比大鼠结肠中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)发现,三组大鼠的BDNF表达与SP（P物质）表达对比出现显著差异（P＜0.05）。结论：母婴分离大鼠成年之后会出现肠道高敏感性现象,应用双歧杆菌干预之后能够调节肠道菌群,稳定结肠脑源性神经因子表达,改善肠道敏感性现象。     

慢性阻塞性肺疾病急性发作期患者肠道菌群特征及血清同型半胱氨酸、白介素-6对其肠道菌群失调的预测效能

分析慢性阻塞性肺疾病急性发作期（AECOPD）患者肠道菌群特征及血清同型半胱氨酸（Hcy）、白介素-6（IL-6）对患者肠道菌群失调的预测效能。

将2020年1月至2022年1月我院收治的96例AECOPD患者纳入研究组,另选同期健康体检者88例作为对照组。所有纳入对象入院后均采集血液、粪便样本检测血清Hcy、IL-6水平及肠道菌群。比较两组对象血清Hcy、IL-6水平及肠道菌群数量差异。采用受试者工作特性曲线（ROC）分析血清Hcy、IL-6对AECOPD患者肠道菌群失调的预测效能,同时采用单因素、多因素Logistic回归分析探讨影响AECOPD患者肠道菌群失调的相关因素。

研究组患者肠道双歧杆菌、乳杆菌数量均显著低于对照组（t = −10.167、−4.045,均P＜0.001）,大肠埃希菌、肠球菌数量均显著高于对照组（t = 8.493、8.440,均P＜0.001）。96例AECOPD患者肠道菌群失调发生率为36.45%（35/96）。与对照组血清Hcy[（10.76±3.23）μmol/L]、IL-6[（0.86±0.35）mg/L]水平相比较,肠道菌群失调组AECOPD患者血清Hcy[（38.65±5.41）μmol/L]、IL-6[（132.55±25.62）mg/L]水平和肠道菌群正常组患者血清Hcy[（20.22±4.18）μmol/L]、IL-6[（40.58±6.69）mg/L]水平均显著升高（t = 28.543、30.408、14.865、46.327,均P＜0.001）,且肠道菌群失调组AECOPD患者血清Hcy、IL-6水平均显著高于肠道菌群正常组（t = 18.641、25.664,均P＜0.001）。ROC曲线显示,血清Hcy预测AECOPD患者肠道菌群失调的曲线下面积为0.771,截断值为29.50 μmol/L,灵敏度、特异度分别为92.62%、58.62%;IL-6预测AECOPD患者肠道菌群失调的曲线下面积为0.752,截断值为88.69 mg/L,灵敏度、特异度分别为92.62%、65.34%;血清Hcy联合IL-6预测AECOPD患者肠道菌群失调的曲线下面积为0.901,灵敏度、特异度分别为86.04%、87.65%。多因素Logistic回归分析显示,血清Hcy[OR（95% CI） = 3.904（2.049～7.440）]、IL-6[OR（95% CI） = 3.414（1.926～6.052）]及急性加重次数≥2次/年[OR（95% CI） = 3.404（1.936～5.986）]均为影响AECOPD患者肠道菌群失调的相关因素。

AECOPD患者存在肠道菌群失调,且主要表现为双歧杆菌、乳杆菌减少及大肠埃希菌、肠球菌增多,其发生与血清Hcy、IL-6水平密切相关,血清Hcy、IL-6水平的升高可作为预测AECOPD患者肠道菌群失调的有效指标。

     

海参多糖对小鼠肠道菌群紊乱的恢复作用

目的 探究海参多糖对抗生素所致小鼠肠道菌群失衡的调整作用。方法 超声浸提法提取海参多糖,硫酸‒苯酚法测定多糖含量;通过抗生素连续灌胃1周,构建小鼠肠道紊乱模型;将18只昆明种小鼠随机分为正常对照、自然恢复和海参多糖干预组（每组6只）,定期留取粪便,采用PCR-DGGE技术获得肠道菌群分子指纹图谱,进行相似性、多样性及主要差异条带序列的分析。结果 提取海参多糖的浓度为1.92 mg/mL;正常对照组小鼠肠道菌群以有益菌,即乳杆菌属和梭菌属占主导地位;而在抗生素干预后,这两种菌的含量明显下降,并伴随检测出致病性卟啉单胞菌属;经海参多糖处理后,有益菌含量有所恢复,有害菌含量降低。结论 海参多糖对抗生素所致实验小鼠肠道菌群紊乱有一定的恢复作用。     

口服益生菌对慢性阻塞性肺病患者肠道菌群和肺功能及预后的影响

目的 探讨口服益生菌对慢性阻塞性肺病(COPD)患者肠道菌群、肺功能及预后等的影响。 方法 选取我科收治的90例COPD稳定期患者,分为研究组及对照组,各45例。其中研究组在常规治疗基础上联合口服双歧杆菌乳杆菌三联活菌片治疗,对照组采用常规治疗,检测两组治疗前、后肠道菌群失调率、肺功能指标水平、血清炎性指标水平和生活质量情况,比较两组患者临床疗效。 结果 治疗后,研究组患者的肠道菌群失调率为22.2%,较对照组的53.3%明显下降(P结论 口服双歧杆菌乳杆菌三联活菌片可显著提高COPD患者的治疗效果,改善其肠道菌群失调情况和肺功能,降低机体的炎性反应程度,改善预后,值得临床推广应用。     

Predominant genera of fecal microbiota in children with atopic dermatitis are not altered by intake of probiotic bacteria Lactobacillus acidophilus NCFM and Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bi-07

The effect of probiotic bacteria Lactobacillus acidophilus NCFM and Bifidobacterium lactis Bi-07 on the composition of the Lactobacillus group, Bifidobacterium and the total bacterial population in feces from young children with atopic dermatitis was investigated. The study included 50 children randomized to intake of one of the probiotic strain or placebo. Microbial composition was characterized by denaturing gradient gel electrophoresis, quantitative PCR and, in a subset of subjects, by pyrosequencing of the 16S rRNA gene. The core population of the Lactobacillus group was identified as Lactobacillus gasseri, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus oris, Leuconostoc mesenteroides, while the bifidobacterial community included Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum and Bifidobacterium catenulatum. The fecal numbers of L. acidophilus and B. lactis increased significantly after intervention, indicating survival of the ingested bacteria. The levels of Bifidobacterium correlated positively (P=0.03), while the levels of the Lactobacillus group negatively (P=0.01) with improvement of atopic eczema evaluated by the Severity Scoring of Atopic Dermatitis index. This correlation was observed across the whole study cohort and not attributed to the probiotic intake. The main conclusion of the study is that administration of L. acidophilus NCFM and B. lactis Bi-07 does not affect the composition and diversity of the main bacterial populations in feces.