α-溶血性链球菌在健康人群口咽部分布及生物拮抗作用

目的 通过采集健康人群口咽部分泌物,分析上呼吸道中α-溶血性链球菌的分布状况,并对革兰阳性化脓性球菌进行生物拮抗试验,为进一步研究上呼吸道益生菌提供理论基础。方法 随机自愿原则,用无菌咽拭子采集沈阳市年龄在3～75岁的300名健康人群咽后壁分泌物,对α-溶血性链球菌进行鉴定和定量分析。对致病菌的生物拮抗试验采用小缸杯法。结果 定量分析显示不同年龄人群咽后壁的α-溶血性链球菌检出率均较高。在咽后壁菌群中α-溶血性链球菌构成比最多的是幼儿组,达到60.3%。其中唾液链球菌群在幼儿组所占比重最大;老年组人群格氏链球菌占比较大;儿童、青年、成人以缓症链球菌和口腔链球菌为主。对革兰阳性化脓性球菌的生物拮抗试验显示,1株婴儿链球菌婴儿亚种能够拮抗8株致病菌;4株分离菌只能拮抗1株病原菌,提示不同的菌株拮抗病原菌的能力差异较大。结论 α-溶血性链球菌在人群中分布广,数量多,不同年龄人群的菌群构成存在差异。并且某些菌株显示出对致病菌较强的生物拮抗作用,推测这些菌株在呼吸道黏膜保护中起到重要作用,可作为上呼吸道益生菌的备选菌株。     

益生菌防治龋病的研究进展

随着人们生活水平日益提高,口腔健康越来越受到关注。近年来,益生菌对口腔菌群和宿主健康的调节作用已成为广泛研究的话题。已有证据表明,益生菌可以竞争性地抑制口腔中致病细菌的黏附和定植,分泌抗菌物质以减少病原菌。本文综述了相关益生菌对变形链球菌这一公认的龋齿病原菌的作用,包括:(1)生物表面活性剂、细菌素、胞外多糖等益生菌代谢产物对变形链球菌牙菌生物膜的抑制作用;(2)刺激宿主免疫反应,调节口腔菌群组成;(3)下调或阻断变形链球菌细胞中与黏附在牙齿表面形成生物膜相关的基因表达。     

口腔乳酸杆菌的分离及其益生特性

[目的]从口腔环境中筛选具有潜在益生特性的乳酸杆菌,用于防治口腔疾病的益生菌疗法.[方法]利用选择性培养基从健康志愿者的唾液和牙菌斑样品中筛选得到乳酸杆菌,然后验证他们对龋齿致病菌变异链球菌生长的抑制作用.同时考察分离得到的微生物是否具有可以定植或在口腔环境中生存的特性.[结果]本研究从牙菌斑样品中分离得到一株发酵乳杆菌Y29.该菌能够抑制变异链球菌的生长,并有自聚集和与其他口腔微生物共聚集形成生物膜的能力.此外,发酵乳杆菌Y29可耐受1.0 mg/mL溶菌酶和140μg/g过氧化氢,有利于其在可能含有多种抑菌物质的口腔动态环境中生存.[结论]发酵乳杆菌Y29在防治龋齿和保证口腔健康方面具有潜在的益生特性.     

基于培养组学的健康人口腔细菌分离鉴定初探CSCD

目的 通过对口腔的不同部位进行细菌分离,扩展对口腔微生物多样性的认识,以期为后续的口腔菌群研究提供参考。方法 通过培养组学方法分离口腔不同部位的细菌,采集2个健康人扁桃体、唾液、牙菌斑3个部位的样本,使用13种培养基并于需氧和厌氧条件下进行培养,采用16S rRNA基因全长测序分析。结果 总计获得144株菌,分属36个种,10个科,3个门。其中,链球菌属细菌种类最多。基于16S rRNA基因全长相似度98.65%的阈值判定,获得5种潜在全新细菌。3个部位中,扁桃体分离的细菌种类多样性最丰富。结论 13种培养基中,BHI培养基获得的口腔细菌多样性最好;BAB培养基与TSA培养基更适合口腔链球菌生长,链球菌的比例更高;LBB培养基上只有较单一的口腔细菌生长,不适于广谱分离口腔细菌。     

不同牙周状态下分离的血链球菌和口腔链球菌H2O2产生能力的比较

目的：比较研究不同牙周状态下分离的血链球菌和口腔链球菌过氧化氢（H2O2）生产能力。方法：随机选出不同牙周状态下分离的血链球菌和口腔链球菌各30株,采用酚红还原-微量板法测定厌氧条件下两种细菌H2O2的产量。结果：血链球菌各组和口腔链球菌各组H2O2的产量差异未见显著性;口腔链球菌产生H2O2的能力强于血链球菌。结论：提示牙周病变部位与健康部位的血链球菌和口腔链球菌产生H2O2的能力基本相似,是否存在基因型的差异尚待进一步研究。     

筛选鸡嗉囊降解胆固醇的内源益生菌

目的:益生菌具有降低胆固醇作用,从鸡嗉囊内利用选择性培养基筛选和复选具有降低胆固醇作用的内源益生菌.方法:利用MRS培养基和以胆固醇为碳源的复选培养基分别进行好氧、兼性、厌氧培养,逐层倒平板划线分离,最终分离和筛选出纯的益生菌,观察描述其菌落形态特征和油镜下观察菌株的特征,并进行一系列生化实验,结合伯杰氏细菌鉴定手册初步确定益生菌种类.结果:筛选分离出1株好氧菌、1株兼性菌、1株厌氧菌,分别命名为DG-1、DG-2、DG-3;初步鉴定为乳酸菌属、乳杆菌属、消化链球菌属.结论:该试验方法简单易行,能够有效地从鸡嗉囊中筛选出生长良好的益生菌,为进一步研究内源益生菌降解胆固醇的特性及机理提供帮助.     

唾液乳杆菌电转化效率优化研究

唾液乳杆菌对人体健康有重要意义,作为一株可食用益生菌有着极大的应用潜力,但较低的电转化效率限制了唾液乳杆菌的遗传操作.本研究从细菌培养状态、甘氨酸浓度、蔗糖浓度、电压和复苏时间等因素着手对唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius AR612)的电转化条件进行优化.结果表明,唾液乳杆菌AR612的最佳...     

铍对口腔链球菌生长及粘附性能的影响

目的 研究铍离子(Be2+)对口腔链球菌的生长及粘附性能的影响,探讨口腔修复治疗后牙周损伤的微生物机制.方法 含有不同浓度Be2+(5、10、20和40 mg/L)的培养液厌氧培养口腔链球菌24h.检测不同浓 度Be2作用后细菌形态和菌落形成单位(CFU),以及口腔链球菌在唾液包被羟基磷灰石微粒表面的粘附抑制率.结果 铍离子作用后口腔链球菌长链缩短,菌体出现集结趋势.20 mg/L时,菌体表面出现“触角样”变化.随Be2+浓度增加,CFU值减小(P＜0.05),口腔链球菌生长抑制.各实验组口腔链球菌粘附抑制率高于阳性对照组(P＜0.05),但各Be2+浓度组之间粘附抑制率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 铍离子抑制口腔链球菌的生长和在牙面的粘附,可能会导致修复体周围正常微生态环境失衡,引起牙周疾病.提示临床应尽量选用理化性能稳定的修复材料.     

口腔链球菌摄取生物素与口内白色念珠菌生长的关系

为了探讨口腔细菌生态平衡机制,本文体外检测了４株口腔链球菌（Ｓ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ,Ｓ．ｓａｎｇｕｉｓ,Ｓ．ｍｕｔａｎｓ和Ｓ．ｍｉｔｉｏｒ）和白色念珠菌生长对生物素的依赖性。结果显示白色念珠菌和口腔链球菌的生长绝对依赖生物素,前者最大半数生长需要生物素约１０ｐＭｏｌ／Ｌ,其最大生长率所需生物素约为１００ｐＭｏｌ／Ｌ;而后者最大半数生长需生物素为５２５ｐＭｏｌ／Ｌ。正常人血清和唾液中生物素的含量约为２１２２９４ｐＭｏｌ／Ｌ。生物素饥饿状态下的白色念珠菌和口腔链球菌,以及唾液离心沉淀物（绝大多数为细菌）摄取生物素具温度依赖性,而代谢抑制剂（叠氮化合物、氰化物和醋酸碘）和某些抗生素（杆菌肽、短杆菌肽、万古霉素和二性霉素）具选择性抑制效应,提示生物素的摄取和跨膜转运是一依赖能量的主动过程。用唾液沉淀物和口腔链球菌吸收培养基中的生物素或与白色念珠菌共同培养,显著抑制白色念珠菌的生长。本文首次提供实验证据显示口腔优势菌可能通过竞争生物素等营养成份,抑制白色念珠菌生长,以维持口腔微生物之生态平衡。     

唾液乳杆菌ZM06对变形链球菌生物膜形成的抑制作用

变形链球菌是导致龋齿发生最主要的细菌。本实验采用带transwell小室的细胞培养板,从九株不同种属的益生菌中,筛选能有效抑制变形链球菌生物膜形成的菌株。通过筛选获得一株唾液乳杆菌ZM06,并探究其可能的作用机制。实验表明,菌株ZM06并不能直接杀死变形链球菌,但却能抑制变形链球菌生物膜形成。通过生物膜形成实验,扫描电镜观察以及相对定量与生物膜形成直接相关的基因(包括gtf B,gtf C,ftf,gbp B,gbp C)表达证实了这一点。更重要的是,菌株ZM06降低了变形链球菌调控生物膜形成的5条信号通路中关键基因的表达。荧光定量PCR表明,菌株ZM06不仅下调了之前报道的种间群体感应系统中调控生物膜形成的lux S基因的表达,而且还对其他4条调控这些基因的信号通路中的关键基因TCS-1(vic K,vic R),TCS-2(cia H,cia R),TCS-11(hk11,rr11),TCS-13(com D,com E)表达下调。之前还没有报道称益生菌可通过这4条信号通路影响变形链球菌生物膜的形成。本研究为益生菌预防龋齿的潜能提供了理论依据。