真菌一氧化氮还原酶细胞色素P—450nor 2 cDNA序列的测定

真菌一氧化氮还原酶细胞色素Ｐ４５０ｎｏｒ２ｃＤＮＡ序列的测定刘德立（华中师范大学生命科学学院武汉４３００７０）ＨｉｒｏｆｕｍｉＳＨＯＵＮ（筑波大学应用生物化学系日本）在真菌的反硝化作用中,一种细胞色素Ｐ４５０起着一氧化氮还原酶的作用,被称为细胞色...     

柱孢菌细胞色素P－450nor2cDNA克隆与表达

在真菌的反硝化作用中,一种独特的细胞色素Ｐ－４５０起着一氧化氮还原酶（Ｐ－４５０ｎｏｒ）的作用。用ｇｔｌｌ构建了柱孢菌（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｏｎｔｏｎｌｅｉｎｅｎｓｅ）ｃＤＮＡ文库。纯化的柱孢菌Ｃ。Ｐ－４５０ｎｏｒ２免疫兔,制备抗体。并用抗体筛选出阳性克隆。回收插入片段（Ｐ－４５０ｎｏｒ２ｃＤＮＡ）克隆到表达载体ｐＹＥＳ２中,并在酵母系统中表达。经Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ分析验证,表达产物能与抗体反应产生特异性杂交带。酶分析结果表明：表达产物具有一氧化氮还原酶细胞包素Ｐ－４５０ｎｏｒ２的活性,能以ＮＡＤＨ或ＮＡＤＰＨ为供体,使ＮＯ还原先成Ｎ２Ｏ。     

柱孢菌细胞色素P—450nor2cDNA克隆与表达

在真菌反硝化作用中,一种独特的细胞色素Ｐ－４５０起着一氧化氮还原酶的作用。用λｇｔｌｌ构建了柱孢菌ｃＤＮＡ文库。纯化的柱孢菌Ｃ．Ｐ－４５０ｎｏｒ２免疫兔,制备抗体。并用４抗体选出阳性克隆。     

棉铃虫的细胞色素P-450单加氧酶系与菊酯类杀虫剂抗药性的关系(英文)

细胞色素Ｐ－４５０单加氧酶系在昆虫抗药性中起重要作用。本文研究了棉铃虫抗性品系与敏感品系间细胞色素Ｐ４５０含量、对－硝基茴香醚Ｏ－脱甲基酶和艾氏剂环氧化酶的差异。结果表明：抗性品系中细胞色素Ｐ－４５０含量、对－硝基茴香醚Ｏ－脱甲基酶活性分别是敏感品系的１．７１倍和２．２１倍,而艾氏剂环氧化酶活性仅为１．３５倍。因此细胞色素Ｐ－４５０含量和对－硝基茴香醚Ｏ－脱甲基酶在棉铃虫抗菊酯品系中起重要作用。进一步讨论了不同抗性品系间抗性机制不同的原因。     

真菌细胞色素P450nor与反硝化作用

阐述了真菌细胞色素P450nor的种类,结构和功能以及反硝化作用的机制,并介绍了真菌反硝化作用研究概况,细胞色P450nor的催化机制及 基因表达调控的研究进展。     

对氨基苯甲酸酯同系物形成细胞色素P450代谢中间体络合物的定…

细胞色素Ｐ４５０（Ｐ４５０,Ｅｃ,１．１４．１４．１）是一种十分重要的催化氧化反应的酶,本文测定了１２个对氨基苯甲酸酯用系物与Ｐ４５０相互作用而形成Ｐ４５０代谢中间体络合物的活性,用半经验分子轨道法ＭＮＤＯ－ＰＭ３计算得到了这些同系物的分子轨道指数,并用逐步多元回归分析法导出了活性与分子轨道指数及正辛醇／水分配系数的对数值之间的定量结构与活性关系。结果表明,对苯氨基苯甲酸脂同系物形成Ｐ４５０代谢中     

白色念珠菌羊毛甾醇14α—去甲基化酶三维结构分子？…

基于四种原核细胞色素Ｐ４５０晶体蛋白Ｐ４５０ＢＭ３、Ｐ４５０ｃａｍ、Ｐ４５０ｔｅｒｐ、４５０ｅｒｙＦ模建白色念珠菌羊毛甾醇１４α－去甲基化酶三维结构。序列匹配采用四种晶体结构比较结果基础之上提出的细胞色素Ｐ４５０超家族蛋白基于结构知识的序列匹配方法。以Ｐ４５０ＢＭ３晶体结构坐标模建目标蛋白结构保守区主链结构,结构保守区侧链构象来源于四种晶体蛋白与模建蛋白对应残基同源性得分最高残基构象。建模结果用分     

细胞色素P450的多样性

细胞色素Ｐ４５０的多样性＊邱星辉冷欣夫（中国科学院动物研究所,北京１０００８０）关键词细胞色素Ｐ４５０多样性细胞色素Ｐ４５０是一类以还原态与ＣＯ结合后在波长４５０ｎｍ处有吸收峰的含血红素的单链蛋白质［１～３］。它于１９５８年被发现以来,就引起了人们的...     

艾氏剂环氧化酶及细胞色素P－450对小菜蛾抗药性发展的影响

本文对室内长期饲养的小菜蛾（Ｐｌｕｔｅｌｌａ　ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ　Ｌ．）敏感品系和田间采集的抗性种群体内的艾氏剂平氧化酶及细胞色素Ｐ－４５０进行了比较研究。结果证明,艾氏剂环氧化酶在感性和抗性小菜蛾间存在着量及质的差异。抗性种群的艾氏剂环氧化酶的Ｖｍａｘ和Ｋｍ值分别为感性品系的５．４％和６．５倍。抗性种群的细胞色素Ｐ－４５０的含量是感性品系的１．１—１．３倍。艾氏剂环氧化酶在量上及质上的差异及细胞色素Ｐ－４５０含量的提高是导致小菜蛾抗药性发生与发展的重要机制之一。而且质的差异较之量的差异可能起着更为重要的作用．     

4－氨基二苯醚对体内外肝微粒体混合功能氧化酶催化活性的影响

小鼠每天腹腔注射４－氨公－２’,４’－二氯二苯醚（２’,４’－ｄｉｃｌ）及４－氨基－４’－甲基二苯醚（４’－ＣＨ３）４天,于末次给药２４ｈ后实验,发现：（１）以小鼠戊巴比妥睡眠时间作为体内Ｐ４５０活性指标,４’－ＣＨ３组Ｐ４５０活性高于生理盐水组,而２’,４’－ｄｉＣｌ组小鼠体内Ｐ４５０活性低于生理盐水组。（２）两处理组小鼠体外测得肝微粒体Ｐ４５０含量均显著高于生理盐水组（Ｐ＜０．０５）,低于苯巴比妥组。（３）２’,４’－ｄｉＣｌ组小鼠由ｚｏｘａｚｏｌａｍｉｎｅ引起的瘫痪时间显著高于生理盐水组（Ｐ＜０．０１）,提示该化合物对体内Ｐ４４８活性亦有抑制作用。体外实验也发现,两者对ＢＮＦ诱导的大鼠肝微粒体Ｐ４４８的活性均有不同程度的抑制。     

对氨基苯甲酸酯同系物形成细胞色素P_（450）代谢中间体络合物的定量结构与活性关系

细胞色素Ｐ４５０（Ｐ４５０,Ｅｃ１．１４．１４．１）是一种十分重要的催化氧化反应的酶。本文测定了１２个对氨基苯甲酸酯同系物与Ｐ４５０相互作用而形成Ｐ４５０代谢中间体络合物的活性,用半经验分子轨道法ＭＮＤＯ－ＰＭ３计算得到了这些同系物的分子轨道指数,并用逐步多元回归分析法导出了活性与分子轨道指数及正辛醇／水分配系数的对数值（ＬｏｇＰ）之间的定量结构与活性关系（ＱＳＡＲ）。结果表明：对氨基苯甲酸脂同系物形成Ｐ４５０代谢中间体络合物的活性与原子净电荷的绝对值之和（∑Ｑ）和ＬｏｇＰ均具有很好的抛物线型相务性,同时,ＬｏｇＰ与∑Ｑ之间也存在相当好的相关性。     

增效醚（PBO）对棉铃虫细胞色素P450的抑制作用及对拟除虫菊酯的？…

在增效醚（ＰＢＯ）对棉铃虫Ｊｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ａｒｍｉｇｅｒａ３龄细虫处理后的不同时段,细胞色素Ｐ４５０的含量受到不同程度的抑制,在处理后１ｈ,细胞色素Ｐ４５０的含量仅为对照的４３．９％,至处理后１２ｈ,细胞色素Ｐ４５０的含量下降到最低点,仅为对照的２３．４％,而处理后１８～２４ｈ,细胞色素Ｐ４５０被抑制的程度有所减弱,其含量分别为对照的８５．８％和７０．０％。生物测定结果表明,ＰＢＯ对所测定     

设施栽培下土壤中硝化、反硝化作用的研究

利用温室、大棚等园艺设施栽种蔬菜,是当今蔬菜生产的有效措施之一,但由于温室,大棚是一个特殊的环境,加上连作,致使温度室、大棚的土壤逐渐产生障碍,导致作物产量逐渐下降,本文着重从温室、大棚土壤中硝化、反硝化作用进行深入一步探讨,其结果为：温室、大棚中有强烈的硝化作用和较多的ＮＯ２＾－、ＮＯ３＾－盐积累,这是温室、大棚作物产量下降的重要原因之一;温室,大棚中反硝化作用强度与土壤中的ＮＯ３＾－盐含量有关     

r－干扰素对喉癌细胞系HEP－2HLA－DR抗原和增殖细胞核抗原表达的影响

本实验用人重组ｒ－干扰素（ｒｈｕ－ＩＦＮ）作用ＨＥＰ－２细胞后ＨＬＡ－ＤＲ抗原和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的检测来探讨ｒ－干扰素对ＨＥＰ－２细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达诱导作用及体外抗增殖活性。用单克隆抗体ＣＲ３／４３（抗ＨＬＡ－ＤＲ）和Ｋｉ－６７（抗ＰＣＮＡ）。以链霉素一生物素技术（ＬＳＡＢ）检测ＨＥＰ－２细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原和ＰＣＮＡ表达,结果显示：ｒ－ＩＥＮ诱导ＨＬＡ－ＤＲ抗原和抑制ＰＣＮＡ表达其强弱与ｒ－ＩＦＮ剂量有关。资料提示：ｒ－ＩＦＮ不仅对ＨＥＰ－２细胞有细胞毒作用,同时能调节其细胞膜特性,因而在喉癌的治疗中是有效的。     

4—氨基二苯醚对体内外肝微粒体混合功能氧化酶催化活性的影响

小鼠每天腹腔注射４－氨基－２’,４’－二氯二苯醚（２’,４’－ｄｉＣｌ）及４－氨基－４’－甲基二苯醚（４’－ＣＨ３）４天,于末次给药２４ｈ后实验,发现：（１）以小鼠戊巴比妥睡眠时间作为体内Ｐ４５０活性指标,４’－ＣＨ３组Ｐ４５０活性高于生理盐水组,而２’,４’－ｄｉＣｌ组小鼠体内Ｐ４５０活性低于生理盐水组。（２）两处理组小鼠体外测得肝微粒体Ｐ４５０含量均显著高于生理盐小组（Ｐ＜０．０５）,低于苯巴     

白色念珠菌羊毛甾醇14α-去甲基化酶三维结构分子模型研究

基于四种原核细胞色素Ｐ４５０晶体蛋白Ｐ４５０ＢＭ３、Ｐ４５０ｃａｍ、Ｐ４５０ｔｅｒｐ、Ｐ４５０ｅｒｙＦ模建白色念珠菌羊毛甾醇１４α－去甲基化酶三维结构。序列匹配采用四种晶体结构比较结果基础之上提出的细胞色素Ｐ４５０超家族蛋白基于结构知识的序列匹配方法。以Ｐ４５０ＢＭ３晶体结构坐标模建目标蛋白结构保守区主链结构,结构保守区侧链构象来源于四种晶体蛋白与模建蛋白对应残基同源性得分最高残基构象。模建结果用分子力学和分子动力学进行结构优化,模建结果蛋白采用Ｐｒｏｆｉｌｅ－３Ｄ图、Ｒａｍａｃｈａｎｄｒａｎ图和疏水图分析确证结构的合理性。并根据模型推测与血红素辅基相互作用的残基、与氧化还原偶联蛋白作用和参与电子传递的残基、底物进出通道和活性位点的残基。这些研究结果为定点突变研究、抗多肽抗体结合实验等提供理论依据,为高效低毒抗真菌药物合理设计提供靶标。     

S－美芬妥英羟化酶的分子生物学进展

Ｓ－美芬妥英羟化酶的分子生物学进展万捷,谢红光,周宏灏（湖南医科大学药理教研室,长沙４１０００８）关键词美芬妥英,细胞色素Ｐ４５０,羟化代谢美芬妥英（Ｍｅｐｈｅｎｙｔｏｉｎ,ＭＰ）是由Ｒ－和Ｓ－两种对映体组成的乙内酰脲类抗癫痫药。Ｓ－ＭＰ进入人体后主...     

细胞色素P450与肿瘤

本文综棕了细胞色素Ｐ４５０同工酶与致癌物代谢、与抗癌药的相互作用以及化的关系,并对调控Ｐ４５０同工酶以防治肿瘤的策略进行了论述。由于Ｐ４５０同工酶具有多态性、工物特异性及可诱导性的特点,在调控Ｐ４５０同工酶以防治肿瘤的问题上,针对不同人群、不同疾病状况及不同用药方案可能需采取抑制或诱导的不同策略。     

长白山北坡不同土壤N2O和CH4排放的初步研究

用箱法技术原位测定了长白山北坡不同土壤（苔原土、生草森林土、棕色针叶林土和暗棕色森林土）６—８月间的Ｎ２Ｏ和ＣＨ４排放．结果表明,这些土壤既是Ｎ２Ｏ的源,又同时是ＣＨ４的汇．Ｎ２Ｏ通量变化于６．１７—１２．３３μｇ·ｍ－２·ｈ－３之间（平均９．３７μｇ·ｍ－２·ｈ－１）,ＣＨ４通量为－８５．６３—－７．５８μｇ·ｍ－２·ｈ－１（平均－４１．４５μｇ·ｍ－３·ｈ－１）,并观察到在Ｎ２Ｏ排放和ＣＨ４吸收之间有着相互消长关系．实验室培养实验表明,最大反硝化作用活性存在于土壤上层（０—６ｃｍ）;不同土壤的反硝化作用活性明显不同．山地暗棕色森林土的ＣＨ４吸收作用也主要发生在土壤的上层（０—１２ｃｍ）．     

细胞色素P450超家族蛋白质基于结构知识的序列联配

应用计算机程序对细胞色素Ｐ４５０蛋白２０个家族的代表序列进行初步多序列联配后,利用结构知识对匹配结果加以调整,调整的依据是Ｐ４５０蛋白二级结构特征和某些超二级结构特征的保守性,三维结构空间配置的保守性,在结构与功能重要残基的保守性,亲水和疏水片段的保守性。大量定点突变实验、选择性化学修饰实验、抗多肽抗体结合实验等能很好地确证该联配结果的正确性。联配结果对真核Ｐ４５０蛋白膜结合方式、活性位点残基分布、与氧化还原偶联蛋白有相互作用的残基的分布等作出了合理的推断。细胞色素Ｐ４５０超家族蛋白基于结构知识的序列联配的尝试对Ｐ４５０蛋白结构与功能关系研究提供了参考