若干蝙蝠葛碱衍生物对人红细胞膜Ca^2＋—Mg^2＋——ATPase活力的影响

本文测定了数种蝙蝠葛碱衍生物对钙调素激活的人红细胞膜Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ和的影响,结果表明,这些化合物对该酶都有不同程度的抑制作用,其机制表现为性抑制,过量的ＣａＭ能完全逆转这些化合物所引起的抑制。当Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ被胰蛋白酶限制性酶解完全活化后,其活力不再受ＣａＭ激活,但仍被这些化合物所抑制。     

咖啡因和茶碱对大鼠皂素蜕膜心肌肌钙蛋白Ca^2＋敏感性和肌浆网Ca^2＋…

在低浓度皂素制备的浆膜蜕变（通透性增高）而肌浆网（ＳＲ）膜无损的蜕膜心肌标本上,以其收缩的幅度作为ＳＲ Ｃａ＾２＋释放的半定量指标;高浓度皂素（５００μｇ／ｍｌ）制备的浆膜和ＳＲ膜均蜕变的蜕膜心肌标本,以其张力－ｐＣａ关系曲线以及产生５０％最大张力所需的Ｃａ＾２＋浓度作为肌钙蛋白Ｃａ＾２＋敏感性的定性和定量指标。结果观察到：（１）在低浓度皂素蜕膜心肌标本上,５和１０ｍｍｏｌ／Ｌ咖啡因分别引起约８９     

平滑肌收缩中Ca^2＋敏感性调节的机理

多种激动剂增加细胞器对Ｃａ＾２＋的敏感性,即Ｃａ＾２＋的敏感性,即Ｃａ＾２＋敏感化作用。激动剂的这种作用可能是通过Ｇ蛋白,经信号分子花生四烯酸和二酰基甘油,反暹号传递到肌球蛋白轻链磷酸酶（ＭＬＣＰ）,增加肌球蛋白磷酸化。细胞内游离Ｃａ＾２＋升高到一定程度,ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ激酶Ⅱ活化,导致ＭＬＣＫ磷酸化,降低了其对Ｃａ＾２＋－ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ亲和力,ＭＬＣＫ对Ｃａ＾２＋敏感性降低,即Ｃａ＾２     

大鼠皂素蜕膜心肌肌钙蛋白Ca^2＋敏感性的实验研究

采用５００μｇ／ｍｌ皂素溶液浸浴大鼠右室乳头肌３０ｍｉｎ制备蜕膜心肌纤维标本。经撤除ＭｇＡＴＰ法检验,肌膜通透性明显增高。用含不同浓度Ｃａ￣(２＋)（以Ｃａ￣(２＋)浓度负对数ｐＣａ表示）的激活液进行顺序激活,记录Ｃａ￣(２＋)激活张力,其张力－ｐＣａ关系曲线描述了肌钙蛋白（ＴＮ）对Ｃａ￣(２＋)的亲和特性;曲线中位值ｐＣａ＿(５０)（即产生５０％最大张力所对应的ｐＣａ）是反映ＴＮＣａ￣(２＋)敏感性的定量指标。本实验观察到大鼠右室乳头肌张力－ｐＣａ关系曲线呈Ｓ形,测得ｐＣａ＿(５０)为５．７２７±０．０８６（ｎ＝１６）;撤除激活液中磷酸肌酸和磷酸肌酸激酶,张力－ｐＣａ曲线左移位,ｐＣａ＿(５０)增高至６．１９４±０．１２１（Ｐ＜０．０１）。     

孕酮诱发豚鼠精子顶体反应过程中的Ca^2＋内流通道

在体外,孕酮和γ－氨基丁酸可明显地引起豚鼠精子顶体反应,并且两者合并使用,对顶体瓜在的诱发有协同作用,这种反应不依赖于细胞外Ｃｌ＾－,在含Ｃｌ＾－培养液中,ＧＡＢＡＡ受体拮抗剂ｐｉｃｒｏｔｏｘｉｎ和ｂｏｃｕｃｕｌｌｉｎｅ不抑制孕酮诱发的顶体反应,而抑制ＧＡＢＡ诱发的顶体反应。相反在缺Ｃｌ＾－培养液中,ｐｉｃｒｏｔｏｘｉｎ则可明显地抑制孕酮和ＧＡＢＡ诱发的顶体反应。孕酮和ＧＡＢＡ诱发的顶体反应均可被     

慢性缺氧对大鼠左右心室功能,心肌肌原纤维Ca^2＋,Mg^2＋—A…

模ｍ中度缺氧时,大鼠右室功能显著加强,而左室功能加强不显著;左右主室肌原纤维Ｃａ＾２＋,ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性下降,肌球蛋白同功酶Ｖ２和Ｖ３百分含量增加,Ｖ１百分含量减少。８０００ｍ重度缺氧时,右室功能减弱,但无统计学意义,左室功能减弱有显著性;ＡＴＰ酶活性和同功酶的变化超过５０００ｍ组。此外,右室ＡＴＰ酶活性与ＰＡＰ呈反比且有显著性,左室ＡＴＰ酶活性与ＣＡＳＰ虽也呈反比但无显著性;右室同功酶Ｖ     

压力超负荷心肌肥大晚期和心衰大鼠心肌力学及Ca^2＋反？…

目的：观测比较肥大心肌和衰竭心肌在基础力学性能、「Ｃａ＾２＋」。正性变力作用和Ｃａ＾２＋通道阻滞剂负性变力作用三方面的变化和差别。方法：大鼠升主动脉缩窄法建立左心室肥大（ＬＶＨ）和充血性心衰（ＣＨＦ）模型,记录离体灌流乳头肌的和长度－张力曲线,比较基础状态和ｎｉｒｉｄｉｐｉｎｅ处理后「Ｃａ＾２＋」。与峰张力的量效关系。结果：①ＣＨＦ组长度－张力曲线料ＬＶＨ组和假手术对照组（Ｓｈａｍ）明显下移;基础     

离子选择性微电极及其在生物医学中的应用

离子选择性微电极技术及其在生物医学中的应用研究是当前多学科协同攻关的热门课题。本文择要介绍了离子选择性微电极的发展简史。研究现况与发展趋势。并概述了离子选择性微电极在神经生理与电生理研究中所显示出的独特功能。     

青藤碱对人外周血CD4^＋T淋巴细胞增殖和细胞内Ca^2＋浓度影响的体外研究

目的探讨青藤碱（SIN）对人外周血CD4^＋T淋巴细胞增殖和细胞内Ca^2＋浓度的体外影响及其效应机制。方法建立体外人外周血CD4^＋T淋巴细胞模型,分别作以下处理：（1）空白对照组;（2）环孢素（CsA）组（50ng／m1）;（3）低浓度SIN组（10μmol／1）;（4）中浓度SIN组（200μmol／1）;（5）高浓度SIN组（1000μmol／1）。分别用MTT比色法和流式细胞术（FCM）检测CD4^＋细胞增殖和细胞内Ca^2＋荧光强度。采用方差分析比较各组间差异的统计学意义。结果（1）高浓度SIN组、中浓度SIN组与其他各组细胞增殖抑制率存在差异（F=1444．228,P=0．000）;（2）FCM检测细胞内Ca^2＋浓度结果：中浓度SIN组、高浓度SIN组与其他各组差异有统计学意义（F=479．055,P=0．000）;（3）经SIN处理后,人外周血CD4^＋T淋巴细胞增殖抑制率和细胞内Ca^2＋浓度之间存在负相关r=-0．836,P=0．005）。结论SIN能浓度依赖性地抑制人外周血CD4^＋T淋巴细胞增殖和细胞内Ca^2＋浓度升高,人外周血CD4^＋T淋巴细胞增殖抑制率和细胞内Ca^2＋浓度之间存在显著性负相关。     

氧化脂质及对大鼠心肌肌质网Ca^2＋—ATPase磷酸化微…

用ＴＡＢ法测定了三尖杉酯碱的膜脂氧化效应;用纳秒荧光偏振技术研究了氧化膜脂对ＤＰＨ标记大鼠心肌肌质网膜脂、ＡＮＭ标记心肌肌质网Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａ功能及磷酸化微区运动状态的影响。随膜脂中氧化磷脂的增加,肌质网膜脂双层的微粘度增加,磷脂分子摆动角减小;ＤＰＨ的荧光强度减弱,荧光寿命缩短。Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ的ＡＴＰ水解活性降低。ＡＮＭ标记Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ磷酸化微区的ｒ（ｔ）曲线半衰期减至     

心肌细胞核Ca^2＋库特点及其调节的离体研究

To investigate the regulation of Ca2+ in the isolated cardiac nuclei from rats which may illuminated the mechanism of nuclear calcium transport system. Elocity and isopyknic gradient centrifugation were employed to fractionate rat cardiac nuclei. Then fluo-4 confocal microscopy techniques was used to verify the changes of nuclear Ca2+. There are calcium-dependent Ca2+ uptake in the cardiac nuclear obtained from normal rats. The accumulation Ca2+ of cardiac nuclei in vitro from the incubating medium were not consistent with free [Ca2+] in incubating medium. The nuclear envelope was initially loaded with Ca2+ (1 mmol/L ATP and approximately 100 nmol/L Ca2+), Adequate Ca2+ loading was next confirmed by imaging the nuclear envelope and nucleoplasm. Exposure of Ca2+ -loaded nuclei to IP3, ryanodine or ryanodine + thapsigargin, respectively, resulted in a rapid and transient elevation of nucleoplasmic Ca2+ free concentration, this effects were abolished by pretreatment of cardiac nuclei with Ca2+ -ATPase inhibitor thapsigargin. Thapsigargin and IP3 receptor antagonist heparin induced nucleoplasmic Ca2+ free concentration decrease. Fluorescence experiments indicated that both ryanodine receptors and Ca2+ -ATPase were distributed in the outer layer of nuclear envelope, and inositol 1,4,5-trisphosphate receptors mainly dispersively localized at inner layer of nuclear envelope. The present study demonstrates that nuclear calcium were regulated by free Ca2+, IP3 and ryanodine. The results suggested calcium transport system might be present in the myocardial nuclei, the myocardial nuclei might served as one of calcium pools in myocardial cell.     

选择性微电极在植物生理学研究中的应用

选择性微电极技术是一种不仅能直接测定活的生物细胞或细胞器内的离子或分子活度,而且能对活的生物相邻的位置、功能和代谢速率可能不同的特定微区细胞表面的离子或分子流（flux）分别测定的电生理方法。具有操作简便、实时、非损伤性（测定离子或分子流）、灵敏度高（可达10^-12moles cm^-2s^-1）等优点。因为它是用微型化（尖端直径为0.5-5μm）的离子或分子选择性电极直接对准样品测定,不同于其他化学测定需取样品,所以能连续测定和自动监测,具有广阔的应用前景。该文阐述了选择性微电极测定原理,总结了选择性微电极技术在植物生理学研究中的应用进展,并展望了其发展前景。     

Ca^2＋在细胞凋亡中的作用

本文探讨了Ca2＋在细胞凋亡中的作用。许多证据表明细胞内Ca2＋浓度的升高或下降都有可能引起细胞凋亡。Ca2＋通过对一些酶和基因的调控来传递死亡信号。细胞核中的Ca2＋一方面能使染色质DNA舒展开来便于核酸内切酶能靠近活动,另一方面Ca2＋依赖的核酸内切酶参与了将DNA降解为DNA片段的过程,从而使细胞呈现细胞凋亡的特征。     

小鼠卵受精和人工激活过程中胞质游离Ca^2＋变化及其在卵激活中的作用

休止于第二次成熟分裂中期（ＭＩ）的小鼠卵母细胞分别乙醇,钙离子载体Ａ２３１８７、电刺激或精子激活并用Ｃａ＾２＋特异荧光探针－Ｆｕｒａ２／ＡＭ测定细胞内游离Ｃａ＾２＋的变化。结果表明,受精诱导ＭⅡ卵内游离Ｃａ＾２＋浓度多次跃升（ｏｓｃｉｌｌａｔｉｏｎ）乙醇,钙离子载体及１次电刺激仅诱导胞内Ｃａ＾２＋１次升高,人工诱导激活的卵可象正常受精卵一样卵裂并发育至囊胚,用ＥＧＴＡ阻止受精和人工激活过程中卵内游     

PA28γ及其胞浆定位突变体在HepG2中的表达

本研究采用RT-PCR法从293T细胞中克隆得到PA28γcDNA全长序列,并将该片段亚克隆到pMD-18T载体中,利用定点突变获得核定位序列缺失突变的PA28γ突变体,分别将野生型(WT)和突变型(MT)PA28γ基因克隆到真核表达载体pDsRed1-C3中,脂质体法转染293T细胞,荧光显微镜观察发现,在293T细胞中,PA28γWT定位在胞核中,而PA28γMT定位在胞浆中;再将野生型和突变型PA28γ基因分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)Flag中,用脂质体法將其转染HepG2細胞.Western印迹检测结果表明,PA28γWT和PA28γMT蛋白在HepG2细胞中获得了高效表达,建立了高表达PA28γWT和PA28γMT蛋白的HepG2细胞系.这些结果的获得,为进一步研究人类PA28γ基因的功能奠定了基础.