生物样品的消化及其元素测定的研究

生物样品元素的分析测定之前,必须进行消化处理。一般都需要针对不同样品和测定元素种类及其测定方法,采用不同的消化方法,而不能用同一种消化方法处理。本文报道我们研究的一种简便易行的通用消化方法。用它成功地完成了血、肉、骨、皮、毛、粪便等100多种动、植物及食物样品的消化。并重点介绍本法消化液用于石墨炉原子吸     

不同消化方法对测定生物样品中硒含量的比较研究

本文比较了干法消化、普通湿法消化、高压消化、微波消化对测定富含有机硒的生物样品中硒含量的影响.结果显示,高压及微波消化等密闭消化体系具有显著的优点,适合生物样品中富含有机硒的硒含量的测定.     

生物柴油原料资源高油脂微藻的开发利用

生物柴油作为化石能源的替代燃料已在国际上得到广泛应用。至今生物柴油的原料主要来自油料植物, 但与农作物争地的情况以及较高的原料成本限制了生物柴油的进一步推广。微藻作为高光合生物有其特殊的原料成本优势, 微藻的脂类含量最高可达细胞干重的80%。利用生物技术改良微藻, 获得的高油脂基因工程微藻经规模养殖, 可大大降低生物柴油原料成本。介绍了国内外生物柴油的应用现状, 阐述了微藻作为生物柴油原料的优势, 对基因工程技术调控微藻脂类代谢途径的研究进展, 以及在构建工程微藻中面临的问题和应采取的对策进行了综述和展望。     

高产油小球藻的筛选及其油脂分析

小球藻广泛分布于各种生境,特别是淡水环境中,适应性强。其同化产物主要是淀粉,但在环境胁迫条件下可显著积累中性脂,其脂肪酸类型主要为C16和C18,适合作为生物柴油的原料。我们从中国部分地区水体中分离纯化到若干株小球藻,通过薄层层析比较分析了21株产油小球藻的油脂含量,筛选到一株三酰基甘油含量较高的藻株Chlorella sp.NMX37N。其适宜生长温区为15—35℃,在25℃时生长速率最快,比生长速率为0.53/d,生长的最适光强为250μmol photons/(m2.s)。批量培养实验显示,藻细胞的三酰基甘油含量随培养时间延长而增加,并在培养的稳定期达到最大值,此时培养液中氮基本被耗尽。在批量培养条件下培养Chlorella sp.NMX37N约40d,藻细胞中总脂含量可达到33%左右,与此相比通过两步培养方式,将培养至对数后期(约20d)的藻细胞缺氮处理48h后,得到的总脂产率相当。通过两步培养方式可以大大缩短培养时间,使得该藻细胞快速有效积累油脂。另外,气相色谱分析显示,该藻的总脂和三酰基甘油的脂肪酸均以C16∶0和C18∶2为主,占总脂肪酸的70%以上,且不含C20以上的长链脂肪酸,可以作为优质的生物柴油原料。     

分光光度法测定白僵菌孢子粉的含孢量

研究了用分光光度计法测定白僵菌孢悬液的含孢量。首先用筛选出的适宜稀释液SF1将孢子粉作不同浓度的稀释,使用分光光度计在470nm波长下测出孢悬液的吸光度值（x）,再用血球计数板测出对应合孢量（y）,得到回归方程y＝10^{0.8895x＋6.5869}（r＝0．9678）。经检验,方程回归显著,并且不存在菌株间的差异。孢悬液的适宜稀释浓度范围为1500—2000倍。     

蛋白质组学样品消化条件的优化

随着质谱的飞速发展,基于质谱的"鸟枪法"技术广泛的应用于大规模的蛋白质组学分析。化学反应保护效率过低或者酶切效率过低则会降低鉴定效率,并且在现有的计算方式下会丢失很多肽段信息。因此,蛋白质样品的前处理在现有的蛋白质组学研究中发挥重要作用。本研究对蛋白质的烷基化试剂的反应条件进行优化以提高烷基化效率,同时优化酶解Buffer提高酶切效率以及增加酶量和引入多种酶以提高酶切效率等,最终确定了蛋白质前处理的最优条件,最终使用1μg样品在一次质谱分析鉴定到(2 425±7)个蛋白质,较未优化的方法提高了31%。优化后的蛋白质前处理方法可有效提高现有蛋白质组学的研究效率,可进一步应用于蛋白质的定量及动态分析研究。     

电感耦合等离子体质谱法测定地质样品中16个元素

本方法建立了采用HNO3-H2SO4-HClO4-HF混合酸敞口消解试样,电感耦合等离子质谱仪同时测定地质样品中Ag、La、Ce、Pr、Nd、Sm、Eu、Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Tm、Yb、Lu、U16种元素。讨论了各元素之间的干扰,并建立数学校正方程。通过对国家一级标准物质的测定,其结果表明:该方法的检出限、准确度、精密度均满足DZ/T0130-2006要求。银、铀及稀土元素的测量值与标准值之间的相对标准偏差均小于5%。     

2.5次微分伏安法对生物样品中丙二醛的测定

以0.1mol/L NH₄Cl溶液为介质, 用2.5次微分伏安法测定了丙二醛, 线性范围为1.0×10^-6至1.0×10^-3 mol/L, 检测限达1.0×10^-7 mol/L. 并测定了细胞培养液介质中新生SD大鼠心室肌细胞样品中的丙二醛.     

超声波辅助下脂肪酶催化高酸值废油脂制备生物柴油

探讨了超声波辅助条件下脂肪酶催化高酸值废油脂转化为生物柴油的反应。来源于Aspergillus oryzae和Candida antarctica的固定化脂肪酶,在超声波辅助下,对高酸值废油脂转化为生物柴油具有高的催化活性。以来自于C.antarctica的固定化脂肪酶Novozym435为催化剂,以酸价为157mg KOH/g的高酸值废油脂为原料在超声波辅助下与丙醇反应,在脂肪酶用量为油质量的8%、初始醇油摩尔比为3∶1、反应温度控制在40~45℃、超声波频率和功率分别采用28kHz和100W的条件下,反应50min转化率达到94.86%。在此条件下,不同碳原子数(C1~C5)的直链和支链醇均有较高的转化率,在短链醇的选择上具有宽广的适应性。超声波还减少了反应产物和反应体系中其他黏性杂质在固定化脂肪酶表面的吸附,回收的Novozym435相较单纯机械搅拌条件下回收的外观干净、分散良好无结块现象、易于洗涤和再次利用,具有良好的操作稳定性。     

植物样品含氟量的测定

在人为或自然因素影响下,当环境中,特别是大气中氟化物含量较高时,由于植物吸收过多氟化物,常产生急性伤害,使园林绿化植物、果树、蔬菜、农作物遭受危害;或在植物未出现可见症状情况下,由于氟化物在体内的积累,通过牧草、饲料、桑叶、蔬菜、粮食等载体,过多地进入牲畜、家蚕     

生物样品制备的冷冻技术

在分子水平上探讨生物组成,用电子显微镜(EM)与生物化学和X线衍射等方法有着根本的差异。采用电子显微镜可以探讨活细胞及活组织是以怎样的形式存在并起作用的。如何便样品保存得近于活体状态,并能放     

转拟南芥AtKup1基因高含钾量烟草获得

提取拟南芥幼根总RNA,进行RTPCR逆转录,产物测序,将其构建到含Km(带内含子)筛选标记的植物双元表达载体上,根癌农杆菌介导法将AtKup1基因导入烟草,对转化子进行PCR扩增、GUS染色、Southern杂交和AtKup1基因mRNA荧光定量PCR分析,并进行烟叶内在成分化验分析。PCR获得2100bp左右扩增产物,测序结果证实扩增产物序列与拟南芥AtKup1基因(GenbankNo:AF029876)一致;得到GUS染色阳性的AtKup1基因转化烟草材料29株。经PCR扩增、分子杂交检测证实AtKup1基因已整合到转基因烟草的基因组,荧光定量PCR分析可以在幼根中检测到AtKup1基因的mRNA转录。烟叶含钾量化验结果表明导入的AtKup1基因在转化材料中成功表达,使烟叶含钾量提高约45%。     

电镜上的生物样品制备技术

电子显微镜为我们提供了很高的分辨本领,使我们能观察到生物样品的超微结构,丰富了人们对微观世界的认识,推动了生物学从细胞水平发展到分子水平。生物超微结构研究的新成就,是跟样品制备技术的不断提高和逐步完善分不开的。但目前已有的样品制备技术还远不能充分利用电镜本身的巨大发展,例如,目前用超薄切片法只能     

多胺检测技术及其在生物样品分析中的应用

人体内常见的多胺(polyamines,PAs)主要包括腐胺(putrescine,Put)、亚精胺(spermidine,Spd)、精胺(spermine,Spm)和乙酰化多胺(acetylpolyamines,Ac-PAs)。多胺水平的失调与多种癌症的发生和发展紧密相关,因此多胺被认为是多种癌症的潜在生物标志物,同时多胺的合成、分解途径也成为癌症治疗的重要靶点。随着多种检测技术被应用于生物样品中多胺的分析,进一步验证了多胺在癌症筛查和临床诊断中的应用价值。本文简要综述了多胺检测技术及其在生物样品分析中的应用,主要包括气相色谱、气相色谱-质谱、液相色谱以及液相色谱-质谱等,此外,还简单介绍了新兴的多胺检测技术。同时,本文指出了生物样品中多胺的检测分析过程中存在的问题并给出了解决策略,并指明了多胺检测技术发展的方向,以期为多胺检测技术的研究和在癌症的早期筛查和临床诊断中的应用提供一定的参考。     

不同食性甲虫的含能值,含不量及其变动规律研究

以干旱地区的肉食性步甲科和植食性拟步甲科昆虫成体为材料，测定鞘翅目甲虫的偏嗵值和含水量，分析其含能值和含水量的相互关系及其变动规律。结果表明，肉食性步甲科昆虫的含能值显著高于植食性拟步甲科昆虫，相反，前者的含水量却显著地低于后者。步甲科和拟步甲科昆虫的含能值都与其含８水量成显著负相关。     

不稳定生物样品的前处理

本文综述了几种不稳定生物样品的前处理方法,如易被酶解的蛋白变性或加入抑制剂使酶失活,易被氧化的加入抗氧剂或衍生化掩蔽不稳定基团,光不稳定的避光操作,易受pH值和温度影响的选择合适条件等,最大程度保证测定结果的准确性。     

太子参及其种植土壤中16种元素的测定

目的:建立电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定太子参及其种植土壤中16种元素含量的方法.方法:采用微波消解处理样品,并考察了不同元素间相互干扰,采用ICP-AES同时测定16种元素.结果:对所测定元素的相时标准偏差(RSD)均小于4%,回收率在95%～104%之间,结果可信度高.结论:本研究所建立的方法具有简便、快速、准确、灵敏度高的优点.     

N-甲酰溶肉瘤素在生物样品中的测定及其体内命运

本文报告用分光光度计,采用三波长法在生物样品(血、尿、组织、胆汁及粪等)中测定N-甲酰溶肉瘤素(简称 N-甲)的方法;并用此法观察了 N-甲在动物及人体内的吸收、分布及排泄。本法特异性高,灵敏度为0.10 O.D.相当于样品中含 N-甲11.5微克。大鼠口服 N-甲200毫克/公斤后5小时,由胃肠道内容物可回收剂量的7.9%,而在所排出的粪中并无可测定的药物存在。体外实验证明 N-甲在胃肠道内容物的代谢很快。可见,药物由胃肠道消失的速度并不能反映其自胃肠道吸收的情况。静脉注射后,N-甲在大鼠及家兔的血中消失很快。其在血中的生物半衰期大鼠为12分钟,家兔为15分钟。给正常或肿瘤大鼠静脉注射 N-甲100毫克/公斤后1小时,药物含量以肾脏最高,肝次之,脾、肺、心等组织仅含痕迹量。肿瘤组织的药物含量亦很低。大鼠静脉注射 N-甲100毫克/公斤后5小时,由尿可回收剂量的23.8%,其中96.3%为前两小时所排出。由胆汁亦可回收剂量的12.4%。家兔静脉注射 N-甲50毫克/公斤后,12小时内可自尿排出剂量的12.5%,其中92.6%为前两小时所排出。成年男性肿瘤患者一次口服 N-甲300毫克后5小时内,血中的药物浓度很低,但给药后12小时内可自尿排出剂量的7.1%,其中82.6%为前两小时所排出。用纸层离法证明,大鼠及肿瘤病人口服 N-甲后尿中的代谢物主要为羟基水解产物     

地黄自毒物质提取及其生物指标测定

连作障碍在药用植物地黄(Rehmannia glutinosa L.)栽培中尤其明显,同一地块上种植一茬地黄后,须经8-10a后方可再种。从怀地黄主产区河南省焦作地区采集种植1a地黄的茬后土壤,采用不同溶剂提取地黄土壤自毒物质并利用生物测试确定抑制率最强的土壤提取液作温室栽培实验以确定对植物生理指标的影响。利用高效液相色谱法(HPLC)对土壤提取液和根系分泌物进行比较,并利用高效液相色谱、傅立叶转换红外光谱(FTIR)和电喷雾离子阱质谱(ESI-MS)技术鉴定地黄连作自毒物质的化学成分。生物测试结果表明水和甲醇提取的地黄茬后土壤自毒物质对地黄生长具有最强的抑制作用;在培养器中加入浓度0.5g/mL的水和甲醇提取液对地黄胚根的抑制率分别达17%和26%,当浓度增至5.0g/mL时,抑制率增加到70%以上。盆栽结果显示甲醇提取的自毒物质导致地黄地上部叶绿素含量减少,根系活力下降,明显抑制了地黄体内超氧化物歧化酶、过氧化物歧化酶、过氧化物酶的活性,加剧了地黄膜质过氧化,以及引起地黄植体内生长素类激素含量下降。高效液相色谱法显示土壤提取液和根系分泌物具有相似图谱。电喷雾离子阱质谱分析共检测到6个特征物质:香草酸、D-甘露醇、二十六烷酸苯羟基乙酯、毛蕊花糖苷、β-谷甾醇和胡萝卜苷。