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非常规酵母基因工程表达系统 总被引:4,自引:2,他引:4
非常规酵母系指除了酿酒酵母与粟裂殖酵母之外的酵母曹。非常规酵母可利用其自主复制序列构建载体,但整合载体是进行外源基因导入的主要方式。非常规酵母的转化有一定的宿主范围,可采用与酿酒酵母相同的方法,最常用的仍为化学法。高效表达元件可利用酿酒酵母的强启动子,也可以根据非常规酵母菌的代谢特点寻找强启动子.本文综述了近年来应用非常规酵母基因表达系统表达外源基因的一些实例。 相似文献
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酵母表达体系及其在抗体工程中的应用 总被引:6,自引:0,他引:6
酵母是最简单的真核生物,以其为宿主表达异源蛋白具有很大的优越性,近十几年来,各种各样的酵母表达体系陆续发展起来,本文介绍了两种酵母表达系统,并对现有的主要表达体系进行了比较,另外,本文还涉及到酵母在表达抗体或其片段方面的成功应用。 相似文献
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毕赤酵母表达系统在外源蛋白表达中的研究及应用 总被引:9,自引:1,他引:9
巴斯得毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统作为一个日臻完善的外源蛋白真核表达系统由于它所具有的一些其它表达系统不可比拟的优势而得到越来越广泛的应用。分别从该表达系统的优点、外源基因整合及调控机理、表达蛋白糖基化及翻译后修饰等方面综述了其在外源蛋白表达中的研究进展及应用。 相似文献
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巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)表达体系是近年发展起来的最为成功的真核表达体系。对巴斯德毕赤酵母表达系统及影响外源基因在巴斯德毕赤酵母中表达的因素进行了简要综述。 相似文献
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酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用 总被引:18,自引:0,他引:18
蛋白质组学是后基因组时代出现的一个新兴的研究领域,它的主要任务是识别鉴定细胞,组织或机体的全部蛋白质,并分析蛋白质的功能及其模式。因此,揭示蛋白质组中蛋白质间的相互作用关系也是蛋白质组学的重要内容之一。酵母双杂交技术是用来检测蛋白质间是否相互作用的一个非常有效的手段,该技术在酵母蛋白质组研究中的初步成功应用,表明它有望在人类蛋白质且研究中发挥重要作用。 相似文献
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逆向酵母双杂交系统的应用 总被引:3,自引:0,他引:3
198 9年Fields等提出了酵母双杂交系统来研究真核细胞的蛋白质之间的相互作用。这一崭新手段迅速发展成为一种常规的分子生物学技术 ,并得到了广泛的应用。近来 ,国外学者为拓宽传统的双杂交系统的应用范围 ,在原有的酵母双杂交的基础上发展了大量衍生系统 ,包括用于研究蛋白质与DNA之间相互作用的单杂交系统 (one hybridsys tem) [1] ;研究两个蛋白质与第三个成分间相互作用的三杂交系统 (three hybridsystem) [2 ] ,第三个成分可以是蛋白质、RNA或小分子药物等[3 ] 。另外 ,在通过双杂交体系… 相似文献
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酵母单杂交的原理与应用实例 总被引:3,自引:0,他引:3
许多诱导型基因的表达,都受特定的转录因子和顺式元件调控。要阐明各种信号传递途径与基因表达调控的机理,克隆和鉴定转录因子是关键。近年来酵母单杂交方法被广泛应用于克隆和鉴定各种动植物的转录因子,本文以拟南芥DREB转录因子的克隆为例,介绍酵母单杂交方法的原理和具体应用 。 相似文献
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Construction of a Gal1-Regulated Yeast Cdna Expression Library and Its Application to the Identification of Genes Whose Overexpression Causes Lethality in Yeast 总被引:23,自引:0,他引:23 下载免费PDF全文
We have constructed a galactose-inducible expression library by cloning yeast cDNAs unidirectionally under control of the GAL1 promoter in a centromeric shuttle vector. Eleven independent libraries were made each with an average size of about 1 x 10(6) clones, about 50 times larger than the reported mRNA population in a yeast cell. From this library, LEU2 and HIS3 cDNAs were recovered at a frequency of about 1 in 10(4) and in 12 out of 13 cases these were expressed in a galactose-dependent manner. Sequence analysis of leu2 and his3 complementing cDNAs indicates that they contain all the coding sequence and much of the 5' untranslated region. To test the utility of the library for the identification of genes whose overexpression confers a specific phenotype, we screened 25,000 yeast transformants for lethality on galactose. Among 15 clones that showed galactose inducible lethality were cDNAs encoding structural proteins, including ACT1 (actin), TUB2 (beta-tubulin) and ABP1 (actin-binding protein 1), and genes in signal transduction pathways, including TPK1 (a cAMP-dependent protein kinase) and GLC7 (type 1 protein phosphatase). cDNAs overexpressing NHPB (nonhistone protein B) and NSR1 (nuclear sequence recognition protein) were also found to be lethal. Among these, ACT1 was isolated four times, and NSR1 three times. The useful features of this library for cDNA cloning in yeast by complementation, and for the identification of genes whose over-expression confers specific phenotypes, are discussed. 相似文献
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