昆虫体内胆碱酯酶抑制作用研究的一些进展

<正> 自四十年代起使用DDT防治害虫以来,有机杀虫剂中使用最多的是酯类化合物,如有机磷酸酯、氨基甲酸酯,以及近些年来发展较快的菊酸酯类杀虫剂。这些有机杀虫剂的主要作用是影响昆虫的神经系统,使昆虫中毒致死。一、有机磷酸酯和氨基甲酸酯杀虫剂 对昆虫的中毒作用 杀虫剂,进入昆虫体内一般认为必须经过透入、吸收和转化,再到达作用部位并与其相互作用,以及生理活性反应等三个过程。完成这三个过程,则决定于药物分子的化学结构、分配系数、立体效应、化合物在昆     

神经鞘氨醇-1-磷酸酯裂解酶快速荧光分析技术

经鞘氢醇-1-磷酸酯（S1P）裂解酶（SPL）是催化S1P转化为乙醇胺磷酸酯和十六烷醛的酶，它具有多种生理学和病理功能，因此可以用作疾病标记或药靶。目前用作SPL活性定性的同位素分析法却不尽完美。作者设计出一种用NBD[ω（7-硝基-2，1，3-苯并氧杂二唑-4-）-D-赤红]标记的荧光底物分析技术，     

乙酰胆碱酯酶分子研究进展

乙酰胆碱酯酶是生物体内胆碱能神经传导中的一种关键酶,它能够快速水解神经递质乙酰胆碱,保证神经信号在生物体内正常传递。乙酰胆碱酯酶结构和催化功能研究一直是生命科学的重要课题,可为研制有针对性的新药和杀虫剂提供重要理论依据。我们简要介绍了乙酰胆碱酯酶的三维晶体结构、活性位点、高效催化机制及其应用。     

敌敌畏的性质与应用

敌敌畏是近年来发现的一种速效有机磷杀虫剂,它的化学名称是O,O-二甲基 O-(2,2-二氯乙烯基)磷酸酯(O,O-Dimethyl-O(2,2-Dichloro Vinyl)Pho-sphate,结构式为     

溴氰菊酯对鸡脑突触膜蛋白磷酸化和Ca—ATP酶活性的影响

研究了神经毒性杀虫剂－溴氰菊酯对体内源性蛋白质磷酸化作用的影响。结果表明,浓度为１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ溴氰菊酯明显抑制正常鸡和经三甲基苯基磷酸酯处理的鸡脑突触膜中５５ｋＤ和６０ｋＤ两种蛋白的磷酸化。     

神经毒性酯酶的测定方法

有机磷杀虫剂引起动物迟发性神经毒性问题正日益受到重视。在生产上必须对所使用的农药评价它对人及非靶标生物可能发生的危险及应用后的潜在影响。迟发性神经毒性是其中的一个重要指标。Johnson[1～3]用母鸡鸡脑作材料,研究有机磷化合物的迟发性神经毒性问题,发现只有当鸡脑中水解苯基乙酸苯酯或戊酸苯酯的神经毒性酯酶被抑制时,才出现迟发性神经毒性的综合症状。而在急性或慢性中感时,该酶不受抑制。因此可通过测定神经毒性酯酶是否受抑制来作为有机磷化合物近发性神经毒性的部分测定指标。我们基本上按Johnson的方法[2]并加以改进,…     

钙调神经磷酸酶及其研究进展

钙调神经磷酸酶是蛋白磷酸酶家族中的一个成员，是细胞信号传递中的效应酶和调节酶，尤其在Ｃａ＾２＋信号传递系统中起着举足轻重的作用。同时，ＣａＮ又是典型的Ｃａ＾２＋／ＣａＭ结合酶、调节酶。ＣａＮ参与了多种重要的细胞过程，包括它和学习记忆及老年性痴呆的关系，以及它在Ｔ细胞活化过程中的关键作用和在细胞死亡中的重要作用等。     

棉铃虫抗药性的生理生化机制研究

本文报道了棉铃虫Helicoverpa armigera田间抗性种群对杀虫剂抗药性的生理生化机制。抗性种群(HJ-R)5龄幼虫羧酸酯酶、谷胱甘肽转移酶、多功能氧化酶活力均明显高于相对敏感种群(HD-S)。两种群乙酰胆碱酯酶对杀虫剂敏感性没有显著差异。HJ-R种群的腹神经索对氰戊菊酯表现了2-3倍的神经不敏感性。HJ-R种群对氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性主要是由代谢机制引起,其中多功能氧化酶可能起主导作用;对菊酯的抗性是由多功能氧化酶、酯酶、以及神经不敏感性几个因子综合作用的结果。     

神经病靶标酯酶

某些有机磷酸酯 (ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｅｓｔｅｒｓ ,ＯＰｓ)可使人及其他敏感动物患一种迟发性神经病 ,即有机磷诱导的迟发性多神经病(ｏｒｇａｎｏｐｈｏｐｈｏｒｕｓｅｓｔｅｒ ｉｎｄｕｃｅｄｄｅｌａｙｅｄｐｏｌｙｎｅｕ ｒｏｐａｔｈｙ,ＯＰＩＤＰ) ,这种病以步态失调、下肢麻痹以及脊髓与外周神经轴突变性为基本特征 ,症状出现前一般有 1～ 3周的潜伏期。一般认为 ,ＯＰＩＤＰ是由于神经毒性ＯＰｓ共价修饰神经病靶标酯酶 (ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙｔａｒｇｅｔｅｓｔｅｒａｓｅ ,ＮＴＥ)引起 ,ＮＴＥ的催化活性被抑制和…     

杀虫药剂的神经毒理学研究进展

大多数杀虫药剂都具有较强的神经毒性,它们对神经系统的作用靶标不同。有机磷类杀虫剂不仅抑制乙酰胆碱酯酶活性和乙酰胆碱受体功能,影响乙酰胆碱的释放,而且还具有非胆碱能毒性,有些有机磷杀虫剂还能引发迟发性神经毒性。新烟碱类杀虫剂作为烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）的激动剂,作用于该类受体的α亚基;它对昆虫的毒性比对哺乳动物的毒性大得多,乃是因为它对昆虫和哺乳动物nAChR的作用位点不同。拟除虫菊酯类杀虫剂主要作用于神经细胞钠通道,引起持续开放,导致传导阻滞;该类杀虫剂也可抑制钙通道。另外,这类杀虫剂还干扰谷氨酸递质和多巴胺神经元递质的释放。拟除虫菊酯类杀虫剂对昆虫的选择毒性很可能是因为昆虫神经元的钠通道结构与哺乳动物的不同。阿维菌素类杀虫剂主要作用于γ-氨基丁酸（GABA）受体,它能促进GABA的释放,增强GABA与GABA受体的结合,使氯离子内流增加,导致突触后膜超级化。由于这类杀虫剂难以穿透脊椎动物的血脑屏障而与中枢神经系统的GABA受体结合,故该类杀虫剂对脊椎动物的毒性远低于对昆虫的毒性。多杀菌素类杀虫剂可与中枢神经系统的nAChR作用,引起Ach长时间释放,此外,这类杀虫剂还可作用于昆虫的GABA受体,改变GABA门控氯通道的功能。     

流感病毒神经氨酸酶的表达及其在药物筛选中的应用

A型流感病毒H5N1神经氨酸酶奥司他韦敏感型及耐药突变型基因经优化后,克隆于pcDNA4/TO 表达载体,并转染T-REx293 建立稳定细胞株,经四环素诱导能特异表达神经氨酸酶,其活性被特异性抑制剂奥司他韦所抑制。利用该稳定细胞株制备的神经氨酸酶,对3000多种天然产物和中药提取物进行了筛选,结果显示黄芩甙和黄芩素对奥司他韦敏感型神经氨酸酶和耐药型神经氨酸酶具有相似的抑制作用。该神经氨酸酶制备方法安全、简便、稳定,有利于建立神经氨酸酶抑制剂的高通量筛选方法。A型流感病毒H5N1神经氨酸酶奥司他韦敏感型及耐药突变型基因经优化后,克隆于pcDNA4/TO 表达载体,并转染T-REx293 建立稳定细胞株,经四环素诱导能特异表达神经氨酸酶,其活性被特异性抑制剂奥司他韦所抑制。利用该稳定细胞株制备的神经氨酸酶,对3000多种天然产物和中药提取物进行了筛选,结果显示黄芩甙和黄芩素对奥司他韦敏感型神经氨酸酶和耐药型神经氨酸酶具有相似的抑制作用。该神经氨酸酶制备方法安全、简便、稳定,有利于建立神经氨酸酶抑制剂的高通量筛选方法。     

酶与帕金森氏症

帕金森氏症(Parkinson disease)是一种重要神经性疾病。据报道这种疾病与3种酶有关系。一是缺口β-酪氨酸酶,则不能把酪氨酸转化为多巴或多巴胺[参见本刊2004,20(6)];二是与组织型纤溶酶原(tPA)的不“合作”。这种tPA系统,尽管它与心脑血管病息息相关,但它间接地影响脑源性神经营养因素,起了决定性作用。我国香港中大学留美博十彭慧在实验研究中发现tPA与脑源性神经营养因素的这种特殊关系,     

江浙蝮蛇血清中天然神经解毒因子的分离纯化及性质鉴定

江浙蝮蛇（ＡｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｈａｌｙｓＰａｌａｓ）是属于蝮科蝮属的有毒蛇。蝮蛇毒成份比较复杂，但其中所含的蝮蛇神经毒素（ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ，ＡＴＸ），是主要的神经毒性成分，它具有磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活性，是一种阻碍神经肌肉接头传递的...     

植物神经酸研究进展

神经酸是一种超长链单不饱和脂肪酸,最初发现于哺乳动物神经组织中,是脑部神经组织和神经细胞的天然核心成分,具有修复受损神经纤维、帮助神经细胞再生的功能。神经酸的来源由动物到植物的转变极大地促进了神经酸的研究。近年来,国内外科学家尝试通过转基因技术进行高神经酸植物的遗传改良。含神经酸的油菜在神经酸植物来源中脱颖而出,有望解决神经酸短缺的现状。综述了植物中神经酸的生理功能和来源,介绍了植物中神经酸的生物合成途径和从植物中提取神经酸的工艺,以期为植物神经酸相关研究和油菜创新育种提供理论参考。     

链球菌神经氨酸酶的作用机制及酶活性的测定技术

神经氨酸酶不仅存在于流感病毒,在细菌中也有分布。细菌的神经氨酸酶可裂解宿主体内糖结合物末端的神经氨酸残基,有助于细菌实现在宿主体内的定殖、穿透和扩散,是细菌重要的毒力因子之一。链球菌是自然界广泛存在的人畜共患的病原菌,在多种链球菌中均可检测出神经氨酸酶。肺炎链球菌的神经氨酸酶研究最为透彻,该菌可产生3种神经氨酸酶(NanA,NanB,NanC),NanA不但可以发挥酶的催化作用,分解唾液酸残基,暴露细菌的黏附受体,还能不依赖酶活基团,辅助细菌感染宿主细胞;NanB催化后产物可作为细菌的碳源;NanC可辅助细菌入侵脑部。在无乳链球菌和猪链球菌中,神经氨酸酶的活性一直未得到确切的验证,可能是由于它们的荚膜均含有神经氨酸,所以其神经氨酸酶的活性逐渐在进化中丧失。另外一些链球菌,例如化脓链球菌和C、G、L群链球菌,其神经氨酸酶的底物偏好相近,均对唾液类黏蛋白的催化活性较强,利于链球菌在含唾液类黏蛋白的组织中扩散。在口腔链球菌和血链球菌中,神经氨酸酶破坏血液成分中的神经氨酸链。由此可见,神经氨酸酶的特异性催化作用与链球菌在宿主体内的定植部位密切相关。此外,随着科技的发展,对神经氨酸酶的活性检测,也由早期的硫代巴比妥法,转为现在的荧光值和吸光度的测定,更为便捷和敏感。本文旨在对链球菌的神经氨酸酶的作用机制、与毒力关系及酶活测定方法等研究进展作一综述,为从事相关研究的科学工作者提供参考。     

三甲基苯基磷酸酯对神经毒性酯酶的抑制及其酶促动力学分析

以可使人和敏感动物产生迟发性神经毒性的有机磷化合物三甲基苯基磷酸酯（ＴＯＣＰ）为测试药物,研究其在体外对成年产卵来航母鸡不同神经组织神经毒性酯酶（ＮＴＥ）活性抑制敏感性及其抑制的动力学,结果表明,外周神经ＮＴＥ对于ＴＯＣＰ的抑制比中枢神经ＮＴＥ敏感得多,ＴＯＣＰ对鸡脑、脊髓和坐骨神经中ＮＴＥ抑制的Ｉ５０值分别为：１．９３２３、２．３９５０和０．００３５ｍｍｏｌ／Ｌ、ＮＴＥ酶促动力学研究显示,鸡脑Ｎ     

pIRES2-GDNF-NT-3真核表达载体的构建与鉴定

目的：采用一种简便和高效的方法构建双基因共表达载体pIRES2-GDNF-NT-3。方法：人胶质细胞源性神经营养因子和神经营养素3是采用PCR的方法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取,将人胶质细胞源性神经营养因子的cDNA片段插入到pIRES2-EGFP多克隆位点构建成为pIRES2-GDNF-EGFP．神经营养素3cDNA片段通过替换EGFP的方式插入到pIRES2-GDNF-EGFP中构建成为pIRES2-GDNF-NT-3双基因共表达栽体。结果：人胶质细胞源性神经营养因子和神经营养素3被克隆,通过测序和酶切鉴定的得知与基因库报道序列一致。结论：人神经生长因子和神经营养素3双基因真核表达载体成功构建,它提供了一个新的表达系统,为进一步研究双基因的功能奠定了基础。     

pIRES2-GDNF-NT-3真核表达载体的构建与鉴定(英文)

目的:采用一种简便和高效的方法构建双基因共表达载体pIRES2-GDNF-NT-3。方法:人胶质细胞源性神经营养因子和神经营养素3是采用PCR的方法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取,将人胶质细胞源性神经营养因子的cDNA片段插入到pIRES2-EGFP多克隆位点构建成为pIRES2-GDNF-EGFP.神经营养素3 cDNA片段通过替换EGFP的方式插入到pIRES2-GDNF-EGFP中构建成为pIRES2-GDNF-NT-3双基因共表达载体。结果:人胶质细胞源性神经营养因子和神经营养素3被克隆,通过测序和酶切鉴定的得知与基因库报道序列一致。结论:人神经生长因子和神经营养素3双基因真核表达载体成功构建,它提供了一个新的表达系统,为进一步研究双基因的功能奠定了基础。     

上海科学家另辟蹊径探究脑科学取得重要突破

一粒简单的皮肤细胞，能够在科学家的手中通过克隆等多种技术还原成为胚胎干细胞进而生长发育；而作为人体内最复杂的系统——大脑，其充满活力的神经干细胞是否也能够通过人为干预发育成新的神经元从而达到修复脑损伤的目的呢？今天，上海科学家们对这一困扰世界脑科学界多年的核心问题提出了自己的见解，由上海复旦大学脑科学研究院杨振纲博士领衔的课题组，成功发现了神经干细胞在神经再生中的独特行为方式，为人工干预下通过神经干细胞迁移和移植治疗多种脑损伤疾病打开了新思路，     

害虫抗药性的生化机理

害虫的抗药性是与杀虫剂穿透昆虫表皮速率降低,解毒作用增强和靶标部位敏感性降低有关。昆虫体内多功能氧化酶、磷酸酯酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽－Ｓ－转酶和脱氯化氢酶活力的增加是害虫抗性的主要生化机理。抗性昆虫体内乙酰胆碱酯酶对杀虫剂敏感性降低,中枢神经组织敏感性降低和“抗击倒基因”（Ｋｄｒ）的存在是拟除虫菊酯类杀虫剂的主要抗性机制。