Monoclonal antibodies obtained through insect brain homogenates: Tools for cell-specific neuroanatomical studies in the Colorado potato beetle

Immunization of mice with crude or purified homogenates of brain and endocrine organs of the Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata (Say), generated antibodies against specific antigens in the insect tissue. Hybridomas were prepared and screened immunocytochemically for the production of monoclonal antibodies (MAB) that recognized specific cells and that were useful for neuroanatomical studies. A relatively high proportion of MABs recognized one or more cells or tissues in neuronal, neuroendocrine or nonneural compartments of the brain or in fatbody or haemocytes, using standard immunocytochemical procedures. We could make a clear differentiation in subsets of neurons (both normal and peptidergic) and neuron-specific neuroglial cells. A full account of the obtained responses is given. The preparation of the immunogen and the immunization protocol affects the selection of MABs produced. It is argued that not all possibilities have been exploited and that continued experiments would probably increase the number of selective MABs.

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Résumé L'utilisation de techniques immunocytochimiques lors d'études neuro-anatomiques est encore dans l'enfance par suite de l'absence de données sur la chimie de structures spécifiques et, par conséquent, de l'absence d'anticorps spécifiques d'antigènes et de tissus. Nous apportons la preuve que de nombreuses substances réelles d'homogénats bruts de cerveaux sont de bons antigènes et que les souris peuvent être induites à produire des anticorps contre ceux-ci. Nous avons produit et testé de nombreux anticorps monoclonaux qui reconnaissent ces antigènes sur des lames de microscope, en utilisant des techniques immunocytochimiques courantes ou plus élaborées.Les immunogènes ont été préparés de différentes façons pour examiner si le taux de mélange de tissus du cerveau et/ou des ganglions associés et de glandes endocrines, et si les procédés ultérieurs de purification et d'immunisation, influeraient sur la spécificité des anticorps. L'intégralité de l'ensemble cerveau-glandes endocrines a été le plus immunogénique quand l'homogénat a subi le minimum de manipulations. Une grande diversité d'anticorps a été obtenue après des injections répétées chez la souris. Ces anticorps reconnaissent les épitopes dans toutes les catégories de tissus considérés, c'est-à-dire, les tissus spécifiquement nerveux, neuro-endocrines, et non nerveux. La purification progressive et le cross-linking des constituants de l'homogénat réduisent la variabilité des anticorps. Tout en l'espérant, on ne s'attendait pas à ce que les substances jusqu'alors dans des centres peptidergiques indéfinis fussent parmi les structures les plus souvent identifiées. Les chances de produire de tels anticorps spécifiques de peptides ont augmenté quand les tissus endocrines ont servi d'immunogènes.Nous avons résumé les types de tissus et de cellules mis en évidence par cette sélection d'anticorps monoclonaux. Nous soulignons que l'expérimentateur peut difficilement influencer les préférences du système immunologique de la souris, mais les anticorps produits jusqu'ici sont valables pour les études neuroanatomiques et pour la récolte d'antigènes intéressants à partir de procédés biochimiques de séparation. Il reste à explorer la spécificité sensu stricto des anticorps.

     

De l'origine saprophytique,tellurique des dermatophytes; une espèce du genre Aleurisma,saprophyte du sol et agent d'une dermatomycose expérimentale

Résumé Les auteurs ont isolé, par le procédé deVanbreuseghem, des couches superficielles du sol, un champignon appartenant au genreAleurisma Link. Ils ont réussi, bien que difficilement, de l'inoculer à l'homme, chez lequel ce champignon a provoqué un herpès circiné typique. Le rôle pathogène de l'Aleurisma a été confirmé par la rétroculture des vésicules de la lésion expérimentale, rétroculture qui a reproduit exactement le champignon inoculé. Outre les affinités botaniques (présence des aleuries) et pathogéniques (capacité de provoquer des dermatomycoses superficielles), les auteurs ont découvert une certaine parenté antigénique entre les dermatophytes communs et le champignon isolé par eux. Bien plus, leurs propriétés fermentatives étaient aussi semblables. La présence dans le sol de champignons autres que les dermatophytes communs, mais assez proches d'eux, tant du point de vue botanique et fermentatif que du point de vue pathogénique et antigénique, vient, selon les auteurs, à l'appui de la thése, d'après laquelle, les dermatophytes proviennent des champignons saprophytes du sol.

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Summary The authors isolated, from the superficial layers of the soil, a fungus belonging to the genusAleurisma —Link. Although with difficulty, they were able to inoculate this fungus in man. The lesion it provoked, was of herpes circinatus type. The cultures obtained from the vesicles of the experimental lesion reproduced the strain first inoculated. Besides the botanical (presence of aleuries) and pathogenic affinities (capacity of causing superficial mycosis) the authors were able to demonstrate a certain antigenic resemblance between this fungus and the common ringworm agents. Their fermentative properties were also similar.The presence in the soil of fungi related to dermatophytes, their botanical, fermentative, pathogenic and antigenic affinities are considered by the authors as an argument in behalf of the thesis, according which, dermatophytes take their origin from saprophytic fungi of the soil.

     

Etude enzymatique comparée de champignons entomopathogènes des genres Beauveria et Metarhizium

Résumé Les extraits antigéniques de trois champignons entomopathogènes (Beauveria bassiana, Beauveria brongniartii et Metarhizium anisopliae), soumis à l'analyse éléctrophorétique en gel d'agar révèlent au total 23 activités enzymatiques différentes (5 oxydo-réductases et 18 hydrolases), dont 18 ont été retrouvées à l'analyse immunoélectrophorétique. La carte enzymatique de ces germes complète leur analyse immunoélectrophorétique; la comparaison des isoenzymes des divers isolats permet de mettre en évidence des différences interspécifiques et intraspécifiques.Chaque souche cryptogamique se caractérise par des profils enzymatiques particuliers. Ces résultats montrent donc que l'étude des enzymogrammes est un complément utile à l'analyse immunoélectrophorétique appliquée à la caractérisation des hyphomycètes entomopathogènes. Enfin, les souches n 44 et 51 de M. anisopliae paraissent être suffisamment apparentées pour être réunies au sein d'un même biotype.     

Polygenic regulation of fecundity in autogenous Aedes atropalpus

Genetic regulation of autogenous fecundity was examined in the mosquito Aedes atropalpus. Only one of four subspecies was found to contain all the genetic factors needed to produce, without blood-feeding, an average in excess of 150 eggs/female. This was the type form, A. a. atropalpus, which possessed the gene for autogeny (A) and a genetic background which enhanced fecundity. In contrast, strains of A. a. epactius, A. a. perichares and A. a. nielseni lacked both genetic systems. When the genome of A. a. atropalpus was progressively replaced by repeated crossing to the other subspecies, a stepwise decrease in autogenous fecundity was noted over several generations. However, this trend was stopped and in certain cases reversed by back-crossing to the type form. Thus it appears that in the type-form genome there are several modifier genes which enhance the expression of the gene A.

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Résumé Aedes atropalpus dont l'aire d'extension s'étend du Labrador au Panama présente quatre sous-espèces, dont une seule, la forme-type A. a. atropalpus, est autogène, les trois autres: A. a. epactius, A. a. perichares, A. a. nielseni étant anautogènes. Les femelles anautogènes sont homozygotes pour l'allèle récessif, a.Les hybrides F₁ issus de croisements entre les lignées autogènes et anautogènes sont autogènes, mais leur fécondité est réduite. Des croisements de retour répétés entre ces hybrides et les formes anautogènes aboutissent à une réduction progressive de la fécondité. Cependant cette réduction peut être stoppée et, dans certains cas, inversée par croisement de retour avec la forme-type autogène. Ces faits conduisent à envisager que le génome des femelles de type autogène contient, outre le gène dominant A, un certain nombre de gènes modificateurs qui en renforcent l'expression. Les trois sous-espèces anautogènes manqueraient de certains, sinon de tous ces gènes modificateurs. La réduction progressive de la fécondité chez les hybrides résulterait de la perte successive au cours des croisements de retour, de ces gènes modificateurs.

     

Tératogénie des anomalies axiales induites par un insecticide organophosphoré (le parathion) chez l'embryon d'oiseau

Résumé Chez les embryons de poulet et de caille, issus d'oeufs exposés au parathion au stade non incubé ou au cours des 48 premières heures, les anomalies axiales spécifiques de ce composé apparaissent entre 4 et 5 jours chez le Poulet et après 5 jours d'incubation chez la Caille. Les premières altérations accessibles aux examens morphologiques se traduisent par un tassement de certains myotomes ainsi que par des torsions de la chorde et du tube neural. Les anomalies se développent rapidement chez le Poulet alors que chez la Caille elles se mettent en place progressivement.Chez les deux espèces, les métamérisations primaire et secondaire (provertèbres) s'effectuent normalement. Alors que les premières phases des phénomènes de chondrification sont conformes à la normale, on assiste par la suite à la généralisation de ce processus qui conduit à l'effacement de la métamérie secondaire. Chez la Caille, des soudures vertébrales (ares neuraux et corps vertébraux) affectent des zones non touchées par les plissements.Des traitements au parathion, réalisés à différents stades de l'incubation (2e et 3e tiers de la vie embryonnaire) induisent chez le Poulet et la Caille, des déformations axiales tout à fait comparables, sur le plan morphologique, à celles engendrées par les traidements précoces. Toutefois, il y a lieu de souligner que les soudures vertébrales sont d'autant plus rares que le traitement est plus tardif.Chez l'embryon de Poulet de 16 jours, les scolioses cervicales sont en place 5 heures après l'injection du toxique. L'apparition rapide de cette malformation ainsi que les résultats des études tératogéniques réalisées après des traitements précoces, conduisent à penser que les troubles morphogénétiques ne sont pour l'essentiel qu'une conséquence d'une altération de la physiologie et/ou de la différenciation du tissu musculaire ce qui est en accord avec une hypothèse précédemment émise (Meiniel Lutz-Ostertag et Lutz, 1969).

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Teratogenesis of axial abnormalities induced by an organic phosphorus insecticide (parathion) in the bird embryo

Summary Parathion, administered before incubation or at the beginning of development (48 h) induces specific axial deformities which occur between 4 and 5 days in the chick and after 5 days of incubation in the quail. Morphological studies indicate that the teratogenic effects are first represented by myotome compressions, notochordal and neural tube distortions.The abnormalities develop quickly in the chick embryo but take place gradually in the quail embryo.In the two species, somites and primitive vertebrae undergo a normal differentiation and the perinotochordal cells differentiate into chondroblast like in the normal way. But later, the chondrogenesis extends to the intervertebral clefts and gives rise to the formation of an unsegmented vertebral column. In the quail, vertebral fusions are encountered in regions where no torsion occurs.Cervical malformations can develop in quail and chick embryo, when parathion is injected at late stages (2nd and 3rd thirds of the embryonic life).The axial deformities are morphologically similar to those observed after early treatment. But, vertebral fusions are rarer the later the embryos are treated.In chick embryos of 16 days' incubation, the cervical scoliosis occurs 5 h after the treatment. The rapid occurrence of the malformation and the results obtained after early treatment support the hypothesis advanced earlier that the disturbed morphogenesis is caused — in great part — by an abnormal physiology and/or differentiation of the muscles (Meiniel, Lutz-Ostertag et Lutz, 1969).

     

Sur les réactions histochimiques des radicaux acides forts et notemment phosphate

Résumé L'auteur a étudié la spécificité des réactions considérées spécifiques des radicaux acides sur des modèles obtenus par sulfatation, phosphatation et carboxylation des diverses structures riches en groupes vic-glycols.L'auteur a ainsi démontré que toutes les réactions routinaires pour la visualisation des groupes sulfat sont aspécifiques, étant donné leur positivité aussi envers les radicaux phosphate.L'auteur démontre, au contraire, la spécificité de deux réactions, respectivement pour les radicaux sulfat et phosphate, déjà connues mais oubliées, et en propose des modifications.

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On the histochemical reactions of strong acid radicals with special reference to phosphate groups

Summary The specificity of the reactions which are presumed to be specific for acid radicals have been tested in model experiments by means of sulphatation, phosphorylation and carboxylation of structures being rich in vic-glycol groups. The non-specifity of all routine reactions for sulphate groups is proved because they are positive also for phosphate groups. Two other reactions were modified resulting in specifity for sulphate and phosphate groups, respectively.

     

Immunological characterization of the entomopathogenic hyphomycetes Beauveria and Metarhizium

Immunological comparison among Beauveria species and Metarhizium strains isolated from insect larvae were made using immunoelectrophoresis. Antigens consisted of somatic or metabolic buffer-soluble proteins. Antisera were produced in rabbits against each of the 6 fungal strains. Each antigen was tested against the homologous antiserum non-adsorbed or cross-adsorbed with one other antigen and against the heterologous antisera. The immunoelectrophoresis slides were analyzed in terms of the number of precipitin arcs obtained with cross-reacting and reference antigens, with any one antiserum. Immunoelectrophoregrams were also considered.These tests revealed numerous antigenic similarities between different isolates. Moreover, results indicate that distinct and reproducible differences exist, both between two species of Beauveria and between four strains of M. anisopliae. The groupings of strains obtained from immunoelectrophoretic data correspond well with those based on spore morphology. Some methodological aspects are discussed. The present results are in agreement with our preliminary studies. They confirm that immunoelectrophoresis proves to be a very useful aid for the characterization of the Hyphomycetes candidates for biological control of insect pests.

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Résumé Beauveria bassiana et B. brongnianii d'une part et 4 souches de Metarhizium anisopliae d'autre part, ont été analysés par immunoélectrophorèse de leurs protéines cellulaires ou métaboliques. Chaque antigène a été éprouvé contre le sérum homologue non adsorbé ou adsorbé avec un antigène hétérologue et contre les sérums hétérologues. Les parentés et les différences entre les 2 Beauveria et entre les 4 Metarhizium ont été définies quantitativement par le nombre d'arcs de précipitation communs ou specifiques. Nous avons aussi considéré les immunoelectrophorégrammes des divers isolats.Les résultats des réactions croisées montrent d'importantes communautés antigéniques entre les pathotypes étudiés, toutefois l'utilisation de l'immunoadsorption a permis de mettre en évidence les fractions spécifiques aussi bien entre les 2 Beauveria qu'entre les 4 souches de l'espèce M. anisopliae. Les distinctions établies sur les données sérologiques correspondent aux différences morphologiques sporales entre isolats. Ces résultats précisent et confirment nos études préliminaires en démontrant l'intérêt de la caractérisation immunoélectrophorétique des Hyphomycètes candidats à la lutte biologique contre les insectes nuisibles.

     

Pathogenic bacteria associated withLates calcarifer andAmbassis commersoni

Summary The estuarine fishesLates calcarifer andAmbassis commersoni are most commonly afflicted with fin rot and skin ulcer diseases, particularly during summer. Water and sediment samples, skin and gill of healthy fish, and skin, gill, liver, spleen, kidney and blood of diseased fish were screened for their quantitative and qualitative bacterial load. No direct relationship was found between the bacterial load of the environment and bacterial infection in fish.Micrococcus,Corynebacterium, Bacillus, Pseudomonas, Vibrio, Aeromonas andFlavobacterium-Cytophaga were encountered in both environmental samples and skin and gill of healthy fishes.Vibrio constituted the highest percentage in the skin and gill samples of diseased fishes, whilePseudomonas, Aeromonas andBacillus were observed only in smaller percentages.Vibrio alone was seen in the internal organs and blood of diseased fishes. Predominance ofVibrio over the other microflora, invasion of the fish tissues by theVibrio and the various factors which promote infection of fish by these pathogenic bacteria are discussed.

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Bactéries pathogènes associées avec Lates calcarifer et Ambassis commersoni

Résumé Les poissons d'estuaireLates calcarifer etAmbassis commersoni sont très fréquemment atteints de maladies de pourriture des nageoires et d'ulcères de la peau, particulièrement durant l'été. On a criblé l'eau, des échantillons de sédiments, la peau et les branchies de poissons sains, la peau, les branchies, le foie, la rate, le rein et le sang de poissons malades pour leur charge quantitative et qualitative en bactéries. On n'a trouvé aucune relation directe entre la charge bactérienne environnementale et l'infection bactérienne chez le poisson. On a trouvéMicrococcus, Corynebacterium, Bacillus, Pseudomonas, Vibrio, Aeromonas etFlavobacterium-Cytophaga tant dans les échantillons environnementaux que dans la peau et les branchies de poissons sains. LesVibrio constituaient le pourcentage le plus élevé de bactéries dans la peau et les branchies chez les poissons malades tandis que l'on observaitPseudomonas, Aeromonas, etBacillus en moindre pourcentage. On ne voyait que desVibrio dans les organes internes et le sang des poissons malades. On discute la prédominance deVibrio sur les autres microflores, l'invasion des tissus chez les poissons parVibrio et les différents facteurs qui favorisent l'infection chez les poissons par ces bactéries pathogènes.

     

Le rein du triton crêté (Triturus cristatus carnifex. Laur.) étude morphologique,cytologique et cytochimique

Résumé Les auteurs ont étudié le rein de Triturus cristatus carnifex (Laur.) au point de vue anatomique, cytologique et cytochimique. Venant confirmer des données d'auteurs précédents, ils ont signalé la présence dans le rein de cet Urodèle de deux régions, rein génital et rein pelvien, lesquelles diffèrent quant à leur aspect, à la disposition des néphrons et aux rapports que la première de ces région entretient, chez le mâle, avec la gonade. Ils soulignent les différences qui caractérisent les néphrons du rein génital chez les deux sexes.Ce recherches confirment la présence dans le néphron du Triton de cinq segments qui se suivent dans l'ordre ci-après: collet cilié, segment à bordure en brosse que l'on peut diviser en deux tronçons P₁ et P₂, segment intermédiaire cilié, segment à bâtonnets, segment d'union. De nombreux néphrostomes constituent autant de communications entre les néphrons et le coelome. De ces néphrostomes part un canal néphrostomial souvent assez long, canal qui, après un parcours ondulé, débouche dans un collet. Dans le rein génital du mâle, les néphrostomes font défaut.La position des différents segments du néphron dans le rein correspond à celle observée par d'autres auteurs chez des Urodèles d'espèces différentes: les glomérules, les segment à bâtonnets et les néphrostomes sont situés dans la région ventrale; dans les régions dorsale et dorso-latérale, on trouve au contraire les segments à bordure en brosse; les collets et les segments intérmédiaires sont situés entre ces deux régions.Le diamètre du néphron est variable; il atteint son minimum au niveau du collet et du segment intermédiaire.Dans la région apicale des cellules du collet on a observé des granulations P.A.S. positives qui font défaut dans les autres segments ciliés du néphron (canal néphrostomial et segment intermédiaire). Parmi les activités enzymatiques étudiées, seule la 5-nucléotidase est présente dans le collet.La distribution différente des substances P.A.S. positives et du pigment permet de diviser le segment à bordure en brosse en deux tronçons P₁ et P₂ qui passent progressivement l'un dans l'autre. Dans P₁ le matériel P.A.S. positif est formé de fines granulations presque toujours situées au dessus du noyau — granulations qui sont aussi Hale et F.P. positives — et d'amas irréguliers situés à la base de la cellule et le long des limites cellulaires. Dans P₂ les substances P.A.S. positives sont formées par contre de granulations de dimension variable; généralement d'une certaine dimension, ces granulations sont situées en position paranucléaire; elles sont Hale, F.P. positives et nettement acidophiles.Tout le matériel P.A.S. positif mentionné ci-dessus ne semble guère être de nature mucopolysaccharide acide ni de nature glycogénique.Dans P₂ on observe des gouttes de pigment jaune-brun, faiblement F.P. positif, pigment qui constitue le caractère le plus typique de ce segment.Dans tout le segment à bordure en brosse les cellules revèlent une faible pyroninophylie cytoplasmatique qui semble légèrement plus accentuée dans P₂. Dans P₂, et plus particuliérement dans sa moitié distale, on observe de fréquentes images difficiles à préciser au microscope optique; ces images pourraient être attribuées aussi bien à des phénomènes de sécrétion que d'absorption.Le segment à bordure en brosse est le le segment où l'on peut démontrer histochimiquement le plus grand nombre d'activités enzymatiques. On a pu confirmer en effet la présence et la localisation de l'activité phosphatasique alcaline non spécifique aussi bien que de celle acide et décrire la localisation de celles lipasique, glucose 6-phosphatasique et 5-nucléotidasique. L'activité succinodéshydrogénasique et celle ATPasique, au niveau du chondriome, sont très faibles.Le segment intermédiaire cilié est caractérisé par l'absence de substances P.A.S. positives dans ses cellules.Le caractère le plus évident du segment à bâtonnets est fourni par sa richesse en chondriome, par la présence de matériel bleu alcian positif dans quelques-unes de ses cellules, et par l'intensité des réactions ATPasique et succino-déshydrogénasique. Dans le tiers distal de ce segment on peut mettre en évidence une faible activité lipasique.Lors de la discussion, les auteurs insistent tout particulièrement sur les données histochimiques obtenues, notamment en ce qui concerne le comportement des systèmes enzymatiques et le caractère spécifique des réactions obtenues dans le cadre des conditions tecniques adoptées.Recherche conduite et publiée avec une contribution du Consiglio Nazionale delle Ricerche.     

Inter- and intraspecific responses to sex pheromones in laboratory bioassays by females of three species of tephritid fruit flies from Northern Australia

Intra- and interspecific pheromone responses by virgin females of three species of Dacinae were examined using a laboratory bioassay. Females of Dacus opiliae Drew & Hardy responded to the pheromone from males of the sibling species, D. dorsalis Hendel, as intensely as to their own but did not respond to the secretion from males of other less closely related species. D. aquilonis (May) and D. jarvisi (Tryon), however, displayed no specificity of pheromone response in the same bioassay situation. Interspecific responses were neither an artefact of laboratory-cultured females not were they restricted only to the pheromone secretion from laboratory-reared males. It is concluded that laboratory bioassays of pheromone responses are not reliable indicators of generic relationships among dacine species. Short range interspecific responses may reflect only the operation of a sex recognition or excitation component of the pheromone; species specificity may depend on components which operate over longer distances.

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Résumé Les réponses inter- et intraspécifiques aux phéromones ont été étudiées au laboratoire chez des femelles vierges de trois espèces de Dacinae. Les femelles de Dacus opiliae répondent aussi bien à la phéromone de leurs propres males qu'à celle émise par des mâles de l'espèce jumelle D. dorsalis Hendel, mais ne répondent pas aux émissions des mâles d'autres espèces moins proches. On ne trouve pas de spécificité aux résponses de D. aquilonis May et D. jarvisi Tryon testées dans les mêmes conditions. Ces réponses interspécifiques ne sont pas une anomalie de femelles élevées au laboratoire et ne se limitent pas aux phéromones émises par des mâles obtenus au laboratoire.On en conclut que les essais en laboratoire ne fournissent pas d'indications suffisantes sur les relations génériques des espèces de Dacinae. Des réponses interspécifique à courte distance pourraient en effet n'être que le résultat d'une opération de mise en alerte de l'autre sexe ou le produit d'une composante excitante de la phéromone, la spécificité dépendant de fractions opérant à plus longue distance.

     

Mycologie medicale dans l'ouest de la France: Contribution du service de Parasitologie de l'Universite de NANTES (1963–1973)

Résumé Le service de Parasitologie de l'Université de NANTES s'est intéressé aux problèmes de Mycologie hospitalière, d'épidémiologie des mycoses ainsi que d'expérimentation sur les affinités fongiques, à l'échelon régional, et de 1963 à 1973.La contribution clinique a porté essentiellement sur les levuroses étudiées soit au niveau des cavités buccales irradiées, soit chez les malades des services de Réanimation où l'interprétation du rôle pathogène de Candida parapsilosis nécessite des épreuves immunologiques.Nous avons décrit une forme de Blastomycose chéloïdienne à Aureobasidium pullulans.Nos études morphologiques ont surtout porté sur l'observation au microscope électronique à balayage des ultrasculptures présentées par les champignons kératinophiles, ce qui nous a permis de distinguer les différentes espèces du complexe Microsporum gypseum. Il ne semble pourtant pas que cette technique d'observation permette de résoudre tous les problèmes. La conservation des Dermatophytes en eaudistillée par la méthode de Castellani s'est révélée particulièrement remarquable: une souche de M. gypseum a été récupérée après 6 ans de conservation par ce procédé.Notons, en matière d'épidémiologie la prédominance de Trichophyton rubrum sur T. mentagrophytes, survenue récemment: la recrudescence passagère d'Epidermophyton floccosum; la présence d'Arthroderma simii sur une plage. Une étude des champignons kératinophiles telluriques du massif armoricain a porté sur près de 3000 échantillons de terre, ce qui a permis de retrouver, assez rarement d'ailleurs, Arthroderma benhamiae.Nos expérimentations ont porté sur les réponses sérologiques et histologiques de lapins à une imprégnation aspergillaire par instillation intra-trachéale: les résultats obtenus ont été comparés aux examens sérologiques obtenus chez l'homme atteint d'aspergillose. Enfin, nous avons remarqué que le contact levures-cellules sarcomateuses opéré in vitro permet aux levures d'acquérir un pouvoir immunisant antitumoral par emprunt antigénique. La création d'un service de Parasitologie, Mycologie et Immunologie Parasitaire à l'Unité d'Enseignement et de Recherche des Techniques Médicales de NANTES nous a permis non seulement d'aborder les problèmes du diagnostic biologique des mycoses humaines, mais aussi d'entreprendre des enquêtes épidémiologiques dans la région nantaise ainsi que des expériences sur les affinités fongiques.

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Production and partial characterization of monoclonal antibodies for detection of entomopoxvirus from Melanoplus sanguinipes

Entomopoxviruses (EPV) are currently being considered as candidate grasshopper (Orthoptera: Acrididae) microbial control agents. Classical techniques for diagnosing infections in grasshoppers are laborious, time consuming, and sometimes inaccurate. Specific murine monoclonal antibodies were developed against an EPV from Melanoplus sanguinipes (Fab) for use in a nitrocellulose-based enzyme-linked immunoassay (dot-blot). An IgG_2b monoclonal antibody was used to diagnose infections in grasshoppers 13 days following injection with virions. Of 25 grasshoppers that had patent infections microscopically, 22 produced positive results on the dot-blot. In a second test, 39 patently infected grasshoppers all produced positive results. Seven additional grasshoppers in the first test and 2 in the second test gave positive reactions in the dot-blot method but virus was not detected upon microscopic examination. The monoclonal antibody did not cross-react with other commonly occurring grasshopper pathogens. The dot-blot method detected as few as 2.5×10⁶ purified EPV virions. The improvement over existing detection techniques should facilitate evaluation of EPV for field use.

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Prodution et caractérisation partielle d'anticorps monoclonaux pour la détection d'entomopoxyvirus de Melanoplus sanguinipes

Résumé Les criquets sont très nuisibles aux pâturages de l'Ouest des USA et du Canada. Les méthodes classiques de protection sont basées sur les traitements chimiques lors des pullulations. Un entomopoxvirus (EPV) extrait de M. sanguinipes est généralement considéré comme un outil, pour le contrôle des populations sur une longue période, en vue de la suppression des criquets. Les méthodes actuelles d'isolement de EPV sont longues, pénibles et peu fiables. Les tests d'adsorption des antigènes sur l'anticorps fixé et le dosage per l'anticorps enzymatiquement marqué sont efficaces, sûrs et donnent à temps des résultats pour déceler des entomopathogènes. Nous avons produit des anticorps monoclonaux de souris contre EPV de M. sanguinipes, et les avons utilisés dans des dosages immunoenzymatiques d'extraits protéiques adsorbés sur nitrocellulose. Les EPV sont recherchés sur des criquets injectés de virions 13 jours avant. Sur 25 criquets qui présentaient des infections nettes lors d'examens microscopiques, 22 ont donné des résultats positifs par sérologie. Dans un second test, sur 38 criquets nettement contaminés, tous ont donné des résultats positifs; 7 criquets suppl'ementaires mentaires dans le premier test et 2 dans le second test ont donné des résultats positifs en sérologie alors que l'examen microsopique n]avait pas test ont donné des résultats positifs en sérologie alors que l'examen microsopique n'avait pas révélé de virus. Ceci montre que ce type de détection est plus sûr que la méthode ordinaire. Les anticorps monoclonaux ne donnent pas de réactions avec les autres pathogènes courants des criquets. La méthode sérologique a permis de détecter même une concentration de 2,5×10⁶ virions EPV.

     

Etude enzymologique comparee de souches de aspergillius fumigatus et de a. Fischeri d'origine saprophytique ou isolees de lesions humaines ou animales. Repercussions pratiques d'ordre diagnostique

Resume 14 activités enzymatiques (3 deshydrogénases et 11 hydrolases) ont été recherchées systématiquement sur les électrophorégrammes en gel d'agar des extraits de 2 souches de Aspergillus fischeri et de 14 souches de A. fumigatus (8 isolées de lésions humaines ou animales intitulées souches pathogènes, et 6 souches d'origine saprophytique). La composition enzymatique de A. fumigatus est apparue très polymorphe et sans rapport avec l'origine des souches.D'autre part, l'analyse immunoélectrophorétique de ces extraits antigéniques, par des sérums de lapins hyperimmuns et des sérums de malades atteints d'aspergillose, a montré que l'activité chymotrypsique de type II, supportée par l'arc C, est caractérisée de manière plus fréquente et plus intense lorsque les antigènes provenant de souches pathogènes sont opposés à des sérums de malade.De plus, si cette activité chymotrypsique est révélée avec la même fréquence par une souche saprophyte et une souche pathogène, le nombre de précipitines mises en évidence est apparu significativement plus élevé avec cette dernière.Les antigènes utilisés pour le diagnostic de précipitation en gel devraient donc être, de préférence, extraits de souches pathogènes et leur qualité évaluée par des sérums de malades atteints d'aspergillose.     

Réponses des adultes de Lasiomma melania,ravageur des cônes de Larix decidua, à des pièges colorés de différents types

La réponse visuelle des adultes de Lasiomma melania Ackl. (Diptera, Anthomyiidae) à des carrés englués de diverses couleurs ou combinaisons de couleurs a été étudiée durant 5 années consécutives dans plusieurs mélèzins (Larix decidua) des Hautes-Alpes. Une préférence pour le jaune et le jaune à bandes pourpres a été mise en évidence chez ce ravageur dont la femelle pond sur les cônes de mélèze. L'attractivité de chaque type de piège est fonction à la fois du sexe et du stade de maturation sexuelle des individus. La couleur jaune attire en majorité des insectes émergents immatures. Elle semble représenter, selon le plan dans lequel elle est située, un signal nutritionnel de type fleur (plan horizontal) ou un signal de reconnaissance du feuillage de mélèze (plan vertical). Les individus mûrs sexuellement, recherchant les arbres produisant des cônes, sont en revanche capturés essentiellement sur les pièges verticaux jaunes à bandes pourpres. Ceux-ci miment, en l'amplifiant, le contraste de réflectance existant entre le feuillage des mélèzes et les cônes. Ce contraste paraît correspondre à un signal permettant la reconnaisance des arbres possédant des cônes. La ponte est cependant limitée à un stade particulier de développment de ces derniers alors que le contraste est à peu près stable dans le temps. D'autres signaux émis par les cônes, vraisemblablement d'ordre olfactif, doivent guider le vol d'approche et l'atterrissage des femelles.     

Le comportement de la cellule végétale en présence de toxiques additionnés de substances tensio-actives

Résumé Le présent travail expose quelles sont les réactions de la cellule végétale lorsque cette dernière est soumise à l'association d'un toxique et d'un « mouillant » (Netzmittel).Les variables sont: la nature de la cellule végétale, celle du toxique et celle du mouillant.Alors que les mouillants cationiques, eux-mêmes toxiques, exercent une simple action additive, les mouillants anioniques révèlent dans de nombreux cas une synergie de toxicité. Celle-ci se manifeste surtout avec les champignons et les bactéries Gram+, les végétaux supérieurs se montrant indifférents. Cette synergie varie également avec la structure moléculaire du mouillant.Les mouillants non ioniques peuvent au contraire exercer une action antagoniste, c'est-à-dire diminuer la toxicité.Ce dernier phénomène se produit dans certains cas à la suite d'une réaction chimique entre le mouillant et le toxique; la nature de la cellule est alors indifférente. Dans d'autres cas, il y a absence de réaction chimique et le phénomène ne se produit qu'avec certains types de cellules (champignons surtout).La nature chimique du toxique joue, dans la synergie, un rôle moins important que dans l'antagonisme.Des hypothèses sont formulées pour tenter d'élucider le mécanisme des cas de synergie et d'antagonisme.     

Diel patterns of feeding and vertical migration in daphnids and diaptomids during the clear water phase in Lake Geneva (France)

In lacustrine environments, little attention has been paid to small-scale interactions between zooplankton diel vertical migration (DVM) and feeding rhythms. Moreover, most of the information on in situ diel feeding and migratory rhythms is based on low sampling frequencies. The kinetics and the degree of coupling of these processes are thus only roughly known. Here, we present a study conducted on a diel cycle in Lake Geneva to establish the temporal and spatial relationships between DVM and grazing activity of the dominant planktonic crustaceans. Our methodological approach is based on reliable and frequent (every 30 minutes) sampling, and on gut fullness analysis. We test the hypothesis of temporal and spatial segregation in DVM and feeding activity of sympatric taxa to counteract resource competition. We also evaluate the variation in DVM and feeding activity between taxa, size and sexes. In Lake Geneva, the Daphnia complex of different species and size (D. hyalina × galeata) and the diaptomid (Eudiaptomus gracilis) have distinct DVM and diel feeding patterns which lead to temporal and spatial segregation. Differences arise from the amplitude and kinetics of DVM and diel feeding rhythms. A strong day/night contrast in depth distribution and feeding activity was observed for the large daphnids while the small daphnids and the diaptomids had lower amplitudes of DVM and weaker diel changes in feeding activity. Large Daphnia exhibited a bimodal feeding pattern coupled with dynamic interchange of individuals between the epi- and hypolimnetic layers at dusk and dawn. In contrast, little coupling between DVM and feeding patterns was found for the diaptomid. These distinct behaviours can be viewed as specific adaptive strategies developed by calanids and daphnids to limit interspecific competition and to compromise between avoidance of starvation in deep waters and avoidance of visual predators in surface layers. Our study supports the hypothesis of exogenous control of Daphnia DVM by the relative change in light intensity at dusk and dawn, but also suggests that small Daphnia (not large ones), are controlled by absolute light variations when this major stimulus is lacking. Our results also support the hypothesis that selective predation by fish is responsible for the observed differences in DVM and diel feeding patterns of sized-daphnids and diaptomids. Other factors explaining the coupling of DVM and feeding patterns are hunger, vertical temperature gradient and for daphnids, size. Thus, ecological plasticity in crustacean DVM and feeding patterns results from the interactive effect of multiple abiotic and biotic driving forces. Finally, our study also shows that large Daphnia have a marked contribution to the acceleration of downward nutrient fluxes in Lake Geneva, via their diurnal rhythm in feeding and vertical migration. Ecological implications of the study for lake management and sampling design of zooplankton grazing studies are also presented.

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Résumé Dans les écosystèmes lacustres, les interactions à fine échelle temporelle entre les patrons diurnes de migration verticale et de broutage du zooplancton sont peu étudiées. En outre, jusq'à présent, les études ont généralement été réalisées selon des chroniques temporelles assez lâches. La cinétique et le degré d'interaction entre les patrons journaliers de migration verticale et de broutage sont donc encore mal connus. La présente étude, conduite au Lac Léman (Lac de Genéve) au cours d'un cycle nycthéméral, tente de préciser les liaisons spatiales et temporelles existant entre les migrations journalières et la consommation de phytoplancton chez les taxons de Crustacés les mieux représentés. Notre approche méthodologique repose sur une maille temporelle d'échantillonnage fine et sur l'analyse de la fluorescence du contenu stomacal. Nous testons l'hypothèse d'une ségrégation spatio-temporelle visant à réduire la compétition entre les taxons sympatriques et reposant sur des différences entre les patrons journaliers respectifs de migration et d'alimentation. Nous évaluons pour ces rhythmes d'activité les différences entre les espèces, les classes de tailles et les sexes. Au lac Léman, le complexe de différentes espèces et tailles de daphnies (Daphnia hyalina × galeata) et le diaptomide (Eudiaptomus gracilis) présentent des patrons journaliers de migration et d'alimentation distincts, assurant une ségrégation spatio-temporelle. Les différences proviennent de variations dans la cinétique et l'amplitude des migrations et dans les niveaux d'alimentation. Les grandes daphnies affichent un fort contraste jour/nuit dans leur répartition verticale et leur état de réplétion, tandis que les petites daphnies et les diaptomides présentent une faible amplitude de migration et de variations circadiennes de réplétion. Les grandes daphnies ont un rythme alimentaire bimodal couplé avec un relais dynamique des organismes entre l'épilimnion et l'hypolimnion au crépuscule et à l'aube. Chez le diaptomide, les interactions sont au contraire faibles entre les patrons de migration verticale et de réplétion. Ces différents comportements peuvent être perçus comme des stratégies adaptives spécifiques développées par les daphnies et les diaptomides pour limiter la compétition interspécifique et aboutir à un compromis satisfaisant entre l'évitement de la famine en eaux profondes et de la prédation par les poissons dans les eaux superficielles. Notre étude conforte l'hypothèse d'un contrôle exogène de la migration verticale de Daphnia par les changements relatifs de la lumière au crépuscule et à l'aube. En l'absence de ce stimulus, la répartition verticale des petites daphnies semble par contre contrôlée par les variations absolues de lumière. Nos observations confortent également l'hypothèse que la prédation sélective par les poissons est responsable des différences observées dans les patrons de migration des grandes daphnies et ceux des petites daphnies et des diaptomides. Les autres facteurs pouvant influencer les patrons de migration et d'alimentation des crustacés du Lac Léman sont la famine, le gradient thermique vertical et, chez les daphnies, la taille. En définitive, la plasticité écologique des patrons journaliers de migration et d'alimentation résulte des effets interactifs de daphnies ont un rôle très important dans le transfert des nutriments dans les couches profondes durant l'été, via leurs migrations verticales et les variations circadiennes d'activité alimentaire. Les implications écologiques pour l'aménagement lacustre et la planification des études portant sur le broutage du zooplancton sont aussi présentées.

     

Comparative responses of two sympatric parasitoid cynipids to the genetic and epigenetic variations of the larvae of their host, Drosophila melanogaster

Infestation of larvae of Drosophila melanogaster by both Leptopilina boulardi and L. heterotoma (Hymenoptera, Cynipidae: Eucoilidae) varies according to within-population genetic variations in the hosts. L. heterotoma larvae thrive better than L. boulardi and developmental success of both parasitoids varies according to the host's genotype. Crowding in hosts improves success rate of both species, that of L. boulardi then being equal to that of L. heterotoma.

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Résumé Les résultats de l'infestation des larves de D. melanogaster par les Cynipides Leptopilina boulardi et L. heterotoma varient selon le génotype des hôtes et leur état nutritionnel. L'analyse génétique de la population hôte par la méthode des lignées isofemelles montre que le degré d'infestation (pourcentage de larves effectivement parasitées dans des tests standidardisés) varie significativement entre lignées. Le taux de succès du développement parasitaire (pourcentage d'hôtes parasités fournissant un parasite adulte) est plus élevé chez L. heterotoma que chez L. boulardi et varie fortement entre lignées d'hôtes. Les variations chez les deux parasites sont corrélées.La sous-alimentation des larves parasitées augmente le succès du développement des deux parasites et celui de L. boulardi devient alors égal à celui de L. heterotoma.La réponse à l'infestation par les deux Cynipides n'est pas uniforme au sein de la population hôte et varie en fonction de l'abondance des ressources nutritionnelles de ce dernier.

     

Nutrition of plant-sucking insects on chemically defined diets

With the advent of suitable techniques for rearing plant-sucking insects, especially aphids, on chemically defined diets, knowledge of their nutrition has evolved considerably over the past 7 years. Thus, contrary to some earlier beliefs, the nutritional requirements of plantsucking insects have been found to be, with minor exceptions, generally similar to those of other insects, and it is now possible to sustain aphid colonies on artificial diets for two or more generations, and in some cases, for an almost indefinite period of time.A discussion is presented on the comparative requirements of aphids and other Hemiptera for the main classes of nutrients and for individual compounds, both on a qualitative and quantitative basis, and on the relative importance of symbiotes in the nutrition and metabolism of these insects. Some nutritional and related factors that may influence feeding behaviour will be examined, such as the influence of the pH of the medium, the light, the quality of the diet and the concentration of certain nutrients on feeding preferences by aphids. Correlations will be attempted on the significance of these findings in relation to parasite-hostplant relationships.The main subject of the entire paper will be centered on the nutrition of about half a dozen species of aphids, but some examples will be given using other plant-sucking insects.

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Résumé Les besoins nutritifs des insectes suceurs de sève, et tout particulièrement des aphides, ont été étudiés à l'aide de régimes de composition chimique connue. Ces besoins se sont avérés comparables à ceux des insectes en général, et on a pu jusqu'à présent maintenir indéfiniment des cultures d'au moins deux espèces d'aphides sur de tels régimes. II semble que ces insectes soient parmi les premiers Métazoaires à être gardés vivants indéfiniment sur des régimes chimiques définis. Les composés nutritifs essentiels aux aphides comprennent des acides aminés, des vitamines hydrosolubles, dont l'acide ascorbique, des sels minéraux, et du sucrose. Dans certains cas, les microorganismes symbiotiques procurent à leurs hôtes aphidiens quelques substances nutritives, dont des acides aminés, des vitamines et du stérol. De plus, les propriétés phagostimulantes du sucrose et de certains composés aminés ont été démontrées expérimentalement, de même que l'influence du pH et de la qualité de la lumière sur la prise de nourriture. Les résultats des tests de choix multiples, dans lesquels différents régimes nutritifs étaient accessibles aux aphidiens, ont démontré clairement que ces insectes peuvent choisir entre les régimes et préférer ceux qui sont de valeur nutritive supérieure, c'est-à-dire ceux sur lesquels leur croissance, leur reproduction et leur survivance sont maxi-males. Ces résultats confirment l'hypothèse par laquelle, chez les insectes, le choix d'un aliment peut être influencé considérablement par sa valeur nutritive. II apparaît évident que dans les conditions naturelles, le choix de la plante-hôte, et, plus particulièrement, le choix de l'endroit précis de la plante pour la prise de nourriture, et éventuellement, la pullulation de l'insecte, seront influencés, entre autres, par le métabolisme et les qualités nutritives de l'hôte. Finalement, il semble que des différences qualitatives et quantitatives observées entre les besoins nutritifs des différents insectes suceurs de sève se révèleront être en relation de plus en plus étroite avec leurs habitudes oligophages ou polyphages, et avec le pouvoir de synthèse de leurs symbiotes.

     

Influence du type de sol et de ces composantes physicochimiques sur les relations entre une variété de blé (Triticum aestivum L. var. Rescler) et deux souches,agressive et hypoagressive deGaeumannomyces graminis (Sacc.) von Arx et Olivier var.tritici Walker

Résumé 58 échantillons de sol sont collectés dans des parcelles cultivées en blé du Centre et de l'Ouest de la France. Ces sols sont répartis en pots, infestés ou non par une souche agressive ou hypoagressive deGaeumannomyces graminis var.tritici et cultivés en blé pendant 3 mois. Les plantes sont alors arrachées pour appréciation du niveau de maladie et mesure du volume de racines développées dans chaque sol. L'analyse en composantes principales réalisée sur ces variables biologiques et les caractéristiques physicochimiques des sols montre que le niveau de la maladie observé est corrélée négativement avec le niveau potassique et la teneur en sable, corrélé positivement avec la teneur en limon. Dans certains sols il a pu être constaté un développement plus important du système racinaire à la suite de l'infestation par l'un ou l'autre des champignons et l'analyse révèle que ce phénomène est en étroite relation avec la teneur en manganèse échangeable.     

Réponses électroantennographiques de deux parasitoïdes Ichneumonidés,Diadromus pulchellus et D. collaris,aux odeurs de végétaux,du phytophage-hôte Acrolepiopsis assectella et du partenaire sexuel

Résumé Chez Diadromus pulchellus WSM et D. collaris Gr., Hyménoptères Ichneumonidés parasitoïdes spécialistes des nymphes d'A. assectella lépidoptère inféodé aux Allium, des EAG sont enregistrés en réponse à l'odeur du poireau sain ou attaqué par les larves du phytophage, odeurs actives par ailleurs sur leur comportement locomoteur (cinèses). Le thiosulfinate de dipropyle (Ti-P₂) très spécifique et abondant dans les Allium, et instable, est le mieux perçu par les deux parasitoïdes mais n'a aucun effet locomoteur chez D. pulchellus contrairement aux disulfures et thiosulfonates, plus stables et moins spécifiques. Les propriétés de l'acétate d'éthyle, actif sur l'antenne des deux parasitoïdes, et sur la locomotion de D. pulchellus expliqueraient en partie les activités biologiques du poireau attaqué sur ces parasitoïdes. Des EAG sont aussi obtenus chez les deux espèces avec l'odeur du chou et de composés soufrés plus ou moins spécifiques des Crucifères. Le thiocyanate de méthyle (TCN-M), le plus actif sur l'antenne et seul efficace sur le comportement locomoteur (de D. pulchellus), expliquerait en partie l'installation reconnue de D. collaris sur Plutella maculipennis spécialiste des Crucifères et rend celle de D. pulchelles vraisemblable.L'odeur des larves de dernier stade d'A. assectella est seule efficace sur l'antenne et la locomotion des femelles de D. pulchellus. Les mâles de ce dernier réagissent (EAG, locomotion) à des odeurs de cocons de l'hôte et particulièrement à ceux occupés par une femelle de leur espèce.