山药糖蛋白提纯工艺

用正交试验优化了水浸提-醇沉淀法提取山药糖蛋白的工艺条件,通过DEAE-52离子交换层析柱和Sephadex G-75葡聚糖凝胶对粗提物进行纯化.实验结果表明,较优的提取条件是:提取温度65 ℃,时间2h,浸提次数3次,料水比1∶15.此条件下糖蛋白粗品提取率为1.23%,各因素的影响程度顺序是温度>料水比>时间>浸提次数.粗提物经DEAE-52,SephadexG-75柱层析纯化得到两个糖蛋白组分.     

山茱萸糖蛋白的纯化及部分理化性质研究

α-淀粉酶抑制剂广泛存在于高等植物中,能抑制糖类在消化道内的吸收,是一种潜在的治疗糖尿病、肥胖和高血脂的药物。本文采用D101大孔吸附树脂,从山茱萸干果中提取得到粗提物,再经SP Sepharose和Sephacryl S-300柱层析,得到一种具有抑制α-淀粉酶活性的糖蛋白(CoGP)。Sephacryl S-300柱层析,PAGE电泳均证明该糖蛋白为单一组分;在还原条件下的SDS-PAGE电泳中呈现两条蛋白带,其分子量分别是62．O kD和56．8kD,利用Sephaeryl S-300柱层析测定表观分子量为158,9kD,表明CoGP由两个亚基组成;利用苯酚-硫酸法测得其糖含量约为51％;在α-淀粉酶的抑制实验中,山茱萸糖蛋白表现出反竞争的抑制特性。     

锁阳多糖的提取及纯化工艺

目的:优化锁阳多糖(Cynomorium songaricum polysaccharide,CSP)的提取纯化工艺.方法:回流提取法提取CSP,以CSP得率为评价指标,在单因素试验的基础上,结合正交试验对提取工艺进行优化;以蛋白脱除率和多糖保留率为考察指标,比较Sevage法、TCA法、醋酸铅法及木瓜蛋白酶法对CSP...     

牡蛎中糖蛋白成分的分离纯化及其性质研究

本文以青岛产牡蛎为原料,通过低温水提取工艺得到牡蛎糖蛋白粗提物,然后用凝胶柱层析(Sephacryls-100 HR)进行纯化,最后用高效液相色谱制备得到纯度较高的物质F22.由SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实F22是纯度较高的单一组分;分子量为34.2 kDa;等电聚焦的结果显示等电点为5.5;红外色谱呈现出典型的糖的特征吸收峰;气相色谱分析结果显示F22的中性单糖是由葡萄糖这一种单糖组成的同多糖;β-消去反应表明F22的糖肽键应为N-型糖苷键.     

长白山林蛙输卵管糖蛋白ROGP-Ⅲ的分离纯化及鉴定

通过正交试验确定最佳的粗提工艺,并将林蛙输卵管水提液先后通过盐析,透析,阴离子交换层析、阳离子交换层析和葡聚糖凝胶过滤层析,获得了一种分子量大小约为66 kD的单一蛋白,高碘酸-Schiff试剂法鉴定其为糖蛋白。经HPLC分析,纯度为97.2%,将其命名为ROGP-Ⅲ,经PNGase F糖苷肽酶处理后推测其糖含量约为17%。     

建宁莲子糖蛋白的分离、纯化及清除自由基作用

从红花建莲(Nelumbo nucifera Gacrtn.Fujian)的莲子中提取出具有生物活性的糖蛋白(GLP),并进行清除自由基作用的研究。用60％(NH^4)2SO4饱和溶液沉淀蛋白质,经ConA-Sepharose 4B亲和层析校分离,SephadexG-150凝胶层析校纯化,得到2个组分的糖蛋白,分子量分别为25kD的GLP-I和92．5kD的GLP—E,后者为其主要成分。GLP中蛋白质含量是58．8％,总糖含量是36．4％。TLC和GC分析结果：GLP—I是由L—鼠李糖,D—木糖,D—甘露糖和D—葡萄糖组成。其中性糖摩尔比：1．08：0．92：2．54：4．15。GLP—E是由L—鼠李糖D—木糖,D—甘露糖,L—阿拉伯糖,D—半乳糖,D—葡萄糖和D—葡萄糖醛酸组成,其中性糖摩尔比：1．25：1．03：2．85：0．94：3．1634．65。药理实验表明：两种糖蛋白均有清除自由基的作用,而GLP—Ⅱ清除能力大于GLP—I。     

简便快速纯化人血清α1-酸性糖蛋白的方法

本文采用(NH₄)₂SO₄和CCl₃COOH沉淀,及Cibacron blue F3G-A-SephadexG-100凝胶柱层析,经二步提纯了人血清α₁-酸性糖蛋白。PAGE鉴定,在阳极端仅显示一条蛋白带。Schiff氏试剂染色阳性,证实为糖蛋白。SDS-PAGE测得其分子量为45000。免疫电泳结果表明,纯化的α₁-酸性糖蛋白与兔抗人全血清及免抗人α₁-酸性糖蛋白均呈现单一沉淀弧。氨基酸组成测定亦与文献报告的结果基本一致。本方法简便、省时。     

小球藻糖蛋白的分离、纯化和结构分析

采用柱层析分离纯化小球藻糖蛋白,并对其进行结构分析。结果表明,小球藻糖蛋白为白色粉末,产率为鲜藻的0．28％,易溶于水,分子量约为65,000Da,属O-连接方式,蛋白质含量为12．01％,糖链部分含有岩藻糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖。     

蚯蚓GSH-Px提取与纯化的研究

以蚯蚓为原材料提取纯化了GSH-Px,通过比较超声波提取法、组织匀浆法和闪式提取法,得出闪式提取法提取效果最佳.通过正交实验优选得到蚯蚓GSH-Px的最佳闪式提取条件为:料液比1:6(m/V)、提取液pH值8.0、提取时间1min.在最佳条件下锝到的粗提液经硫酸铵沉淀、选择性酸碱变性、DEAE-cellulose和Sephadex-G100柱层析,最终得到纯化的GSH-Px,比活达到157.08 U/mg,活性回收率达到12.32％.产物在SDS-PAGE上为单一条带,其亚基分子量约为26 kD.     

黄姜皂素提取工艺研究

以黄姜为原料,研究皂素提取的生产工艺。通过对几种工艺的比较,确定一种先分离黄姜中纤维素及淀粉,再经过酸水解、中和提取皂素的方法。该法黄姜皂素的平均得率为传统方法的86.56%,用酸量仅为传统方法的9.62%,同时分离得到46.44%的纤维素和32.75%的淀粉。该法资源综合利用率明显提高,并大幅度减少废水的生成,减少环境污染,节约原料、能源,生产周期也明显缩短。     

山药中的致痒物质及致痒机制研究

山药是一种传统中药,对人体有许多益处,如抗腹泻、抗炎、抗糖尿病、低胆固醇血症、抗氧化、抗肿瘤和免疫调节.山药黏液接触皮肤,常引起严重瘙痒.而山药中存在的致痒物质成分尚不清楚.我们采用乙醇提取、膜过滤、离子交换色谱、悬浮液滴法从新鲜山药中提取尿囊素晶体.从河南焦作山药中提取的尿囊素含量约为3.567 mg/g.活性实验结果表明,尿囊素引起的小鼠抓挠反应次数显著地高于对照组.尿囊素直接激活背根神经节神经元,诱导钙流入,还可以诱导神经元内向电流产生.我们首次在细胞水平证明尿囊素能够激活神经细胞,诱导痒觉信号传导.     

山药品种间氨基酸含量的差异性研究

采用盐酸水解法分析了福建省建阳主栽的7个山药品种的氨基酸含量及组成。得出供试材料中都含有17种氨基酸,总氨基酸质量分数在2.86~6.64%,平均4.95%,其中以JY-4品种总氨基酸质量分数最高,JY-2最低;各种氨基酸质量分数高低顺序基本相似,以精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸居前三位,胱氨酸质量分数最低,必需氨基酸质量分数的高低依次是亮氨酸>苯丙氨酸>赖氨酸>缬氨酸>异亮氨酸>苏氨酸>蛋氨酸;鲜味氨基酸在各品种间的差异显著,以JY-4最高,达3.41%,依次是JY-3、JY-6、JY-1、JY-5、JY-7、JY-2。再运用聚类分析方法从氨基酸的组成及含量角度对7个品种进行分类可分为三类;相关分析表明:山药总氨基酸含量愈高,必需氨基酸和鲜味氨基酸含量亦愈高。     

紫山药色素的提取工艺及抗氧化性能研究

研究紫山药色素的最佳提取工艺及其抗氧化性能。在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验法,以pH示差法测定花色苷得率为考察指标,优化了溶剂提取法提取紫山药色素的工艺参数。通过DPPH体系测定该色素清除自由基能力。试验结果表明:紫山药色素属于花色苷类物质,优化的紫山药色素提取条件为:提取温度60℃,提取时间80 min,料液比1∶30,提取溶剂为0.5%盐酸乙醇溶液,提取液花色苷含量可达2.075mg/鲜紫山药g。紫山药色素提取液清除DPPH自由基的IC50为98.14μg/mL。紫山药具有开发功能性色素的潜力。     

提取纯化大黄素的工艺研究

目的:为虎杖中大黄素的提取纯化工艺提供实验依据。方法:以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数等条件为因素,分别设计了三个水平,对大黄素的提取工艺进行正交试验。结果:大黄素的最佳提取工艺为虎杖药材加85%的乙醇回流提取3次,每次8倍量的溶剂提取1.5 h。结论:应用该提取工艺得到的大黄素的质量分数不低于10%     

山药对环江香猪营养物质消化代谢的影响

为了探讨山药对环江香猪营养物质消化代谢的影响,本研究选用体重为4.55±0.63 kg的环江香猪10头,随机分为2组,每组5头,单笼饲养,分别饲喂山药日粮和基础日粮,试验期为7 d。试验开始和结束时分别称取试验猪体重,记录日采食量;试验第5～7 d收集粪样,用TiO2指示剂法测定常规营养成分的消化率;试验第7 d采血分离血浆,分别用全自动生化分析仪和氨基酸分析仪测定生化指标和氨基酸浓度。结果表明,与对照组相比,试验组平均日增重、粗蛋白、粗脂肪和干物质消化率均有所提高(P>0.05);血浆尿素氮和血氨浓度均显著降低、总蛋白浓度显著升高(P<0.05),白蛋白和葡萄糖浓度及碱性磷酸酶活性均有所升高(P>0.05);血浆丙氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苏氨酸和总氨基酸浓度均显著升高(P<0.05)。上述结果提示,山药可改善环江香猪的消化代谢功能,这为开发环江香猪的绿色环保饲料提供了一定的科学依据。     

铜藻岩藻黄素提取及纯化工艺研究

为了对岩藻黄素的提取、纯化进行系统研究,进而为高纯度岩藻黄素的工业化生产提供研究基础,筛选了适用于提取铜藻（Sargassum horneri）鲜藻中岩藻黄素的有机溶剂,并通过单因素实验和正交实验确定了最佳的提取溶剂浓度、提取温度、提取时间、料液比等工艺参数。随后采用硅胶柱层析法进行纯化,并通过单因素实验确定了最佳的硅胶柱床高度、上样量和洗脱流速。最后采用制备液相法对经层析纯化的岩藻黄素进一步纯化。结果表明,有机溶剂萃取的最佳工艺条件为：甲醇浓度90%,提取温度50 ℃,提取时间1 h,料液比1∶10,此条件下岩藻黄素提取率达到(0.258 9±0.003 6) mg·g-1鲜重（FW）［(1.078 8±0.015 0) mg·g-1干重（DW）］。硅胶柱层析的最佳工艺条件为：硅胶柱床高度10 cm,上样量6 g,洗脱流速10 mL·min-1,此条件下岩藻黄素得率为0.176 5 mg·g-1FW（0.735 3 mg·g-1 DW）,纯度为87.01%±0.88%。经制备液相进一步纯化后,岩藻黄素得率为0.127 1 mg·g-1 FW（0.529 4 mg·g-1 DW）,纯度为99.27%±0.22%。研究所用工艺简单,岩藻黄素得率高,为高纯度岩藻黄素的制备提供了实验基础。     

腺苷甲硫氨酸合成酶的提取纯化研究

腺苷蛋氨酸具有转甲基、转硫和转氨丙基等重要生理作用,已成为治疗疾病的重要药物。目的：为腺苷蛋氨酸合酶的基因克隆做准备。方法：研究了腺苷甲硫氨酸合成酶的提取和纯化。腺苷蛋氨酸合酶为胞内酶,其提取需先进行细胞破碎,然后进行盐析和离子交换层析等方法来纯化。酵母的破壁试验考察了研磨、加入有机溶剂和超声波等不同的破碎方法。结果：超声波破碎法最好,得到粗酶液的酶活力为0．934U／ml;经过硫酸铵盐析后,利用离子交换层析法纯化腺苷甲硫氨酸合成酶,作出了腺苷甲硫氨酸合成酶的穿透曲线和洗脱曲线。     

超声波法优选苦豆子中总黄酮的提取工艺研究

目的:超声波法优选苦豆子中总黄酮的提取工艺。方法:以超声波为提取方法,以总黄酮提取率为考察指标,选取乙醇浓度(体积分数)、加溶剂倍量和超声时间为考察因素,采用均匀实验和正交实验,优选苦豆子中总黄酮的提取工艺。结果:影响总黄酮提取率各因素主次为:ACB,确定最佳提取工艺为A2B3C3,即70%乙醇,加溶剂40倍量,超声提取75 min。结论:采用该工艺提取苦豆子中总黄酮,提取率较高且稳定,说明该工艺合理可行。