区别滞后酶解离和聚合过程的动力学方法

分析了滞后酶解离-聚合的动力学过程,提出了区分解离和聚合机制的动力学方法。这一方法不仅可用于滞后酶本身的研究,确定滞后酶解离态和聚合态的动力学常数,也可以用于判别变性剂引起寡聚酶的失活过程是否由亚基的解离或聚合所致。     

乙内酰脲酶及其在氨基酸手性合成中的应用

乙内酰脲水解酶、氨甲酰化酶和乙内酰脲消旋酶构成的酶系能够以5-取代乙内酰脲类化合物为原料合成天然和非天然D-或L-氨基酸,用于各种手性氧基酸的生产。近来的研究重点在分离新酶或提高原酶的活性,包括定向突变、三维结构解析与结构功能关系研究、酶固定化、蛋白融合和构建完整细胞生物催化剂等。     

共固定化作用——用于发酵工艺学上的新的生物催化剂

共固定化作用(co—immobilizates)就是将完整的活的或死的微生物细胞一起与外加酶加以固定,制得固定化少酶或多酶生物催化剂(immobilized oligo-or multienzyme biocatalysts)。作为共固定化作用的一个例子是:用于酒精发酵的酒精酵母,即酿酒醇母(Saccharomyces cereevisiae)具有很高的发酵率,但不具有乳糖酶(β-半乳糖苷酶)活性。因此,不能利用乳糖作为基质,若将从其它微生物,如米曲霉(Asp. oryzae)来源的乳糖酶与酵母一起加以固定,便能用于发酵乳糖。可将此种生物催化剂装成床式反应器,用于酒精连     

蛋白质的PEG化

蛋白质的ＰＥＧ化吴稷综述卢圣栋校阅（中国医科院基础医学研究所１００００５）蛋白质作为药物,已用于越来越多的疾病治疗。例如,许多由酶的缺乏或异常引起的遗传性或获得性疾病可以通过注射正常的有功能活性的酶予以缓解;许多细胞因子则被证明能用于杀伤肿瘤及调整某些免疫系统的紊乱。但是,临床观察显示,随着给药次数的增多,药效往往难以维持［１］。     

豹蛙酶研究进展

豹蛙酶是一种抗肿瘤药物,属于核糖核酸酶A超家族,它的核糖核酸酶活性低,细胞毒性较强,在体内外对多种肿瘤具有显著杀伤作用,是目前全球正在重点研究的100种新药之一。豹蛙酶用于恶性间皮瘤的治疗目前处于Ⅲ期临床研究阶段,用于非小细胞肺癌和其他固体肿瘤的治疗也处于临床Ⅰ期或Ⅱ期研究阶段。豹蛙酶通过多种机制导致肿瘤细胞凋亡,抗病毒作用是其进一步研究开发的重点。     

核盘菌角质酶的克隆、表达及活性分析

角质酶可降解脂肪族或芳香族聚酯,对聚对苯二甲酸乙二醇酯也具有较好的降解作用,但目前市面上角质酶产品非常稀缺,因此寻求一种高效表达的角质酶用于工程酶的开发非常有必要.本研究从核盘菌中克隆得到8个角质酶基因,利用PCR结合RT-PCR技术筛选出主效基因SsCut-52,利用大肠杆菌Escherichia coli BL21...     

植物超微结构中核酸的细胞化学方法比较研究

随着电子显微镜技术的广泛应用,植物超微结构的研究日益与生理功能密切地结合起来。为了在超微结构水平上对某种特殊的化学成分(如核酸、蛋白质、酶或多糖等)鉴定或定位,发展了诸如酶的细胞化学、核酸的细胞化学等各种细胞化学方法。电镜的细胞化学尚处于初期阶段,对植物组织尤其如此,已用于动物组织方面的许多化学反应不能用于植物材料。核酸的细胞化学方法已有许多报导,但都是以动物组织为材料发     

固定化微生物细胞的研究和应用

固定化酶的最大特点是它可以反复或连续使用,因而人们对它进行了十分广泛的研究。1965年以来,有关研究报告一直成指数关系迅速增加,专门性著作也相继问世。但迄今为止,实际用于工业生产的固定化酶仍屈指可数,主要原因是成本不易过关,酶的多次使用所带来的经济利益未能抵消并且超过由于     

黄曲酰化酶拆分酰化-DL-氨基酸及D型氨基酸的制备

<正> 酶是生物细胞合成的具有高效专一催化活力的一类特殊蛋白质。利用酶族中酰化酶拆分化学法合成或消旋的D L-氨基酸。可以得到纯的L型和D型的氨基酸。通常用于工业生产的酰化酶有猪肾酰化酶。淀粉酰化酶、黄曲酰化酶等。在拆分D L型甲硫氨酸、亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、色氨酸、苄基丝氨酸等几十种氨基酸中,L型氨基酸产率为50～     

免疫亲和层析法纯化T_4RNA连接酶

本文描述了一种新的、简化了的纯化T_4RNA连接酶的方法——免疫亲和层析法.利用这种纯化方法得到的酶,经SDS-凝胶电泳,得到一条主带。将此酶与~(32)pCp及CpGpGpA(或tRNA)一起进行连接反应,未见到RNase杂酶的降解作用。用此方法制备的酶,可用于确定顺序的核酸的合成。     

酶联免疫吸附试验技术方法的进展

<正>酶联免疫吸附试验(Enzgme—Linked immunosorbentassay.ELISA)是由Engvall和Peylman)及Vanweemen和Schuttys)于1971年首先提出的一种用酶标记抗体或抗原的方法,该方法将抗原抗体的免疫反应和酶的催化作用结合起来,可敏感地检测体液中微量的抗原或抗体,用于多种疾病的诊断和血清流行病学调查,近10余年来,国内外许多学者为了进一步提高它的敏感性和特异性,在技术方     

抗病毒酶的抗体可能作为艾滋病发作的标志

一种用于预测带艾滋病毒患者何时发病的有潜力的标志可能已被发现。纽约医院-康乃尔医疗中心(纽约)的研究人员说,在感染了艾滋病毒的患者呈现艾滋或与艾滋病有关的综合症状(ARC)之前的6～12个月,患者体内的抗逆转录酶消失了(逆转录酶是一种用于催化艾滋病毒复制的酶)。该研究小组研究了16名带有这种病毒但无临床症状的患者、12名出现艾滋病或 ARC 的患者和8名血清阴性对照者。其结果是:8名对照者中没有一人出现抗逆转录酶抗体。而12名艾滋病/ARC 患者中的2名和16名无症状的血清阳性者中的10名,出观了抗逆转录酶抗体。     

抗生素

<正> 853697 白霉素Ⅰ.白霉素δ_1和δ_2脱铁型的酶解[英]/Benz,G.…∥Ann.Chem.-1984,8.-1399～1407[译自 DBA,1984,3(22),84-10548]研究了用于半合成抗生素合成的白霉素衍生物制备,采用了23种酶或酶混合物对白     

植物组织中ATP、ADP、AMP量的测定及能荷指标

用萤火虫发光器中的萤光素-萤光素酶测定腺三磷是最专一而灵敏的方法。常用来作细胞(花粉、精子)和以毫克计的组织或细胞器中的ATP含量的分析。萤光素-萤光素酶不仅可用于ATP的专一测定,如借助特     

一株产多种β-内酰胺类抗生素酰化酶菌株的筛选

为了从大量的候选菌株中快速筛选头孢菌素酰化酶产生菌,设计并合成了一系列头孢菌素酰化酶的底物类似物。这些酰胺类的底物类似物由二部分组成,一部分为与头孢菌素相同或相似的侧链,另外一部分为发色基团或便于检测的基团。它们被酰化酶水解酰胺键以后可以方便快速的检测,因此用于对大量菌株进行快速筛选。采用这些化合物筛选到6株酰化酶阳性菌株。其中菌株ZH0650能够同时水解GL7ACA和多个底物类似物。进一步研究表明,该菌至少产生3种酰化酶,ADNABA酰化酶,青霉素G酰化酶和头孢菌素C酰化酶。我们初步纯化了ADNABA酰化酶和青霉素G酰化酶,并对头孢菌素C酰化酶的活力进行了鉴定。这是首次报道的可以产生青霉素G酰化酶和头孢菌素酰化酶等多种酰化酶的菌株,具有良好的应用前景。     

一株产多种β-内酰胺类抗生素酰化酶菌株的筛选

为了从大量的候选菌株中快速筛选头孢菌素酰化酶产生菌,设计并合成了一系列头孢菌素酰化酶的底物类似物。这些酰胺类的底物类似物由二部分组成,一部分为与头孢菌素相同或相似的侧链,另外一部分为发色基团或便于检测的基团。它们被酰化酶水解酰胺键以后可以方便快速的检测,因此用于对大量菌株进行快速筛选。采用这些化合物筛选到6株酰化酶阳性菌株。其中菌株ZH0650能够同时水解GL-7ACA和多个底物类似物。进一步研究表明,该菌至少产生3种酰化酶,AD-NABA酰化酶,青霉素G酰化酶和头孢菌素C酰化酶。我们初步纯化了AD-NABA酰化酶和青霉素G酰化酶,并对头孢菌素C酰化酶的活力进行了鉴定。这是首次报道的可以产生青霉素G酰化酶和头孢菌素酰化酶等多种酰化酶的菌株,具有良好的应用前景。     

SIS聚合物在生物技术中的应用

ＳＩＳ聚合物可随环境参数的变化发生可逆转化,因此可被用于酶与蛋白质的亲和沉淀或可逆固定化,这对于简化蛋白质的分离纯化程序、提高分离纯化的效率和提高固定化酶的利用率有重要的意义。本文就近十年来在这一领域的研究作一综述报道。     

共固定化生物催化剂的制备及其应用

固定化酶和固定化细胞业已用于工业、化学分析、环境保护等领域。近年来建立的酶与微生物细胞(或二种微生物细胞)共固定化技术,进一步扩大了固定化生物催化剂的应用范围。本文就共固定化生物催化剂的制备方法及其在食品发酵工业中的应用作一概要介绍。     

SIS聚合物在生物技术中的应用

ＳＩＳ聚合物可随环境参数的变化发生可逆转化，因此可被用于酶与蛋白质的亲和沉淀或逆固定化，这对于简化蛋白南的分离纯化程度、和提高固定化酶的利用率有重要的意义。本文就近十年来在这一领域的研究作一综述报道。     

研究报告：金抗体替代ELISA中的天然抗体用于溶菌酶检测

目的酶联免疫吸附测定(ELISA)被广泛用于抗体或抗原的检测,并被视为临床实践中的金标准,可提供相对可靠、灵敏和特异的检测结果。ELISA的本质是抗原与相应抗体之间的特异性相互作用。然而,天然抗体固有的不稳定性是ELISA的一个难以克服的弱点,并可能导致检测结果的重现性差甚至错误的诊断结果。本课题组先前应用构象工程方法开发了一种基于金纳米粒子的人工抗体(简称金抗体)。金抗体可以像天然抗体一样特异性地与抗原相互作用,并且具备远优于天然抗体的稳定性。出色的稳定性使金抗体可能成为天然抗体更好的替代物,用于ELISA中。方法经过必要的优化并与辣根过氧化物酶(HRP)耦联后,制得酶标金抗体10HRP-(Au-400P1),然后用酶标金抗体代替天然酶标抗体用于ELISA检测中。结果通过一系列的实验证明,抗溶菌酶金抗体可用于ELISA特异性检测1～16 mg/L范围内的鸡蛋清溶菌酶(HEWL)样品。结论金抗体可以替代天然抗体用于ELISA检测,并具有优于传统ELISA法的检测准确性和一致性。